• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    維生素C對(duì)龍睛金魚親魚繁殖性能、免疫及后代仔魚質(zhì)量的影響

    2022-11-17 02:30:42李鐵梁邢薇徐冠玲馬志宏姜娜郁歡歡羅琳
    關(guān)鍵詞:仔魚親魚金魚

    李鐵梁,邢薇,徐冠玲,馬志宏,姜娜,郁歡歡,羅琳

    (北京市農(nóng)林科學(xué)院 水產(chǎn)科學(xué)研究所,北京 100068)

    金魚是中國(guó)特有的名貴觀賞魚類,具有久遠(yuǎn)的養(yǎng)殖歷史,并因其絢麗的色彩、優(yōu)美的體態(tài)及典雅的游姿深受人們喜愛,享有中國(guó)“國(guó)魚”的美譽(yù)。金魚上市前要通過(guò)多輪的淘汰優(yōu)選,出品率極低[1],以龍睛金魚Carassiusauratus為例,生產(chǎn)中多數(shù)仔魚因身體或顏色上的畸形、殘缺而被淘汰,能作為成品魚上市的比例不足10%。因此,在人工育苗過(guò)程中提高親魚繁殖性能及仔魚質(zhì)量成為金魚養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)中亟待解決的問題。魚類在繁殖階段需要大量營(yíng)養(yǎng),該階段營(yíng)養(yǎng)失衡或缺乏會(huì)引起親魚性腺發(fā)育不良,配子質(zhì)量低下,進(jìn)而導(dǎo)致親魚繁殖性能及仔魚質(zhì)量降低[2]。因此,滿足親魚營(yíng)養(yǎng)需求是提升親魚繁殖性能與仔魚質(zhì)量的重要保障。但有關(guān)金魚親魚的營(yíng)養(yǎng)需求研究目前幾乎還是空白。

    維生素C(vitamin C,VC)是維持動(dòng)物生長(zhǎng)和正常生理功能所必需的微量營(yíng)養(yǎng)元素[3-4]。近年來(lái),對(duì)食用魚的研究發(fā)現(xiàn),VC可通過(guò)促進(jìn)親魚性腺發(fā)育[8],改善精卵質(zhì)量,進(jìn)而影響親魚的繁殖性能[9-10]和后代仔魚質(zhì)量[9]。目前,有關(guān)VC對(duì)觀賞魚生長(zhǎng)[5]、免疫、抗應(yīng)激反應(yīng)[6]和總色素穩(wěn)定性[7]的研究已有一些報(bào)道,但有關(guān)金魚親魚對(duì)VC營(yíng)養(yǎng)需求的研究鮮見報(bào)道。

    本研究中,以龍睛金魚為研究對(duì)象,開展了VC對(duì)龍睛金魚親魚繁殖性能及仔魚質(zhì)量的影響研究,探究VC在龍睛金魚親魚性腺成熟、產(chǎn)卵和仔魚階段的作用,以期為開發(fā)觀賞魚親魚營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化飼料提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    試驗(yàn)用魚為人工養(yǎng)殖的龍睛金魚親魚,由北京鑫淼觀賞魚養(yǎng)殖中心提供,并在該公司養(yǎng)殖車間進(jìn)行試驗(yàn)。

    1.2 方法

    1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼料制作 試驗(yàn)用魚為當(dāng)年繁殖的3月齡龍睛金魚,初始體質(zhì)量為(6.60±0.12)g,選取體質(zhì)健康、攝食活躍的龍睛金魚作為試驗(yàn)用魚。試驗(yàn)開始時(shí),隨機(jī)分配供試魚至4個(gè)試驗(yàn)組,每個(gè)試驗(yàn)組設(shè)置3個(gè)平行,共用12個(gè)養(yǎng)殖池(1.5 m×1.5 m×0.6 m)進(jìn)行養(yǎng)殖,投喂試驗(yàn)飼料至7月齡(當(dāng)年12月初)時(shí),按雌、雄比為1∶2,每個(gè)池隨機(jī)留下10尾雌魚和20尾雄魚越冬培養(yǎng),待第2年水溫達(dá)到20 ℃、出現(xiàn)雄魚追逐雌魚時(shí)(4月中旬),開始繁殖試驗(yàn)。

    試驗(yàn)飼料以魚粉、豆粕為主要蛋白源,以魚油、豆油為主要脂肪源,VC添加劑為35%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))的L-抗壞血酸-2-磷酸酯(購(gòu)于河北天寅生物技術(shù)有限公司),采用內(nèi)添加的方式將L-抗壞血酸-2-磷酸酯添加在飼料原料中,與原料一起過(guò) 245 μm孔徑的篩,用攪拌機(jī)混勻后制成直徑為 2.0 mm的顆粒飼料(膨化飼料),于-20 ℃下保存?zhèn)溆谩T囼?yàn)飼料由北京友誼恒遠(yuǎn)科技有限公司加工,以該公司鯽飼料中L-抗壞血酸-2-磷酸酯的添加量0.05%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))作為參考,設(shè)計(jì)試驗(yàn)飼料中L-抗壞血酸-2-磷酸酯的等比添加量分別為0.05%(對(duì)照)0.25%、0.50%和1.00%(均為質(zhì)量分?jǐn)?shù)),對(duì)應(yīng)各組飼料中VC含量的計(jì)算值分別為0.175、0.875、1.75、3.50 mg/g。試驗(yàn)飼料的組成及營(yíng)養(yǎng)成分見表1和表2。

    表1 試驗(yàn)飼料的組成成分Tab.1 Ingredient of the experimental diets w/%

    表2 試驗(yàn)飼料的一般營(yíng)養(yǎng)成分

    1.2.2 親魚管理 親魚池保持水深為30~50 cm,越冬時(shí)維持在80 cm,采用循環(huán)水、充氣養(yǎng)殖,每24 h換水量為池水體的1/10。溶解氧保持在6 mg/L以上,氨氮質(zhì)量濃度<0.2 mg/L,亞硝酸鹽質(zhì)量濃度<0.05 mg/L。養(yǎng)殖車間頂部采用透明陽(yáng)光板,日照充足。高溫季節(jié)每天飽食投喂3次,每周停食1 d,越冬時(shí)停止投喂。養(yǎng)殖過(guò)程中,每半月抽樣檢測(cè)魚病及健康狀況。

    1.2.3 受精卵和出膜4 d內(nèi)仔魚培育 親魚培育期結(jié)束后,為了同步試驗(yàn)條件,挑選具備催產(chǎn)條件的試驗(yàn)魚(雌魚,手握感覺腹部后端柔軟,生殖孔發(fā)紅且有外翻跡象,腹棱(線)較平整;雄魚,手觸感覺鰓蓋追星明顯,生殖孔發(fā)紅且輕觸有少量濃稠精液流出),注射復(fù)方鮭促性腺釋放激素類似物(購(gòu)于寧波第二激素廠),從胸鰭基部注射,雌魚注劑量為2 U/100 g,雄魚注射劑量為1 U/100 g;24 h后人工擠卵,并測(cè)定每尾產(chǎn)卵親魚的產(chǎn)卵量。采用半干法進(jìn)行人工授精,受精卵采用靜水培育,將一定數(shù)量的受精卵黏附在白色瓷片上,置于凈水容器中,晝夜水溫保持在19~24 ℃,pH 7.5,溶解氧>6 mg/L,光照充足。4~5 d仔魚出膜后適當(dāng)充氣,光照度控制在500 lx之內(nèi),每24 h換水1/3。

    1.2.4 樣品采集與處理 人工授精前,從每個(gè)平行隨機(jī)取3尾雌、雄親魚稱重,并采集部分精、卵,從尾靜脈采集親魚血液,制備血清后于-20 ℃下保存,用于非特異免疫指標(biāo)和激素指標(biāo)的測(cè)定;采血后的親魚解剖取其性腺組織稱重,并取其腦組織,各組織樣品均用液氮速凍后于-80 ℃超低溫冰箱中保存?zhèn)溆?。雄魚精液置于4 ℃下保存,用于測(cè)定雄魚精子活力和密度。

    1.2.5 仔魚質(zhì)量評(píng)價(jià) 將一定數(shù)量的受精卵黏附在白色瓷片上,靜水培養(yǎng),用來(lái)統(tǒng)計(jì)受精率、發(fā)眼率、出膜率和仔魚4 d時(shí)的成活率。

    1.2.6 指標(biāo)的測(cè)定與計(jì)算

    1)精子活力。取4 ℃下保存的各試驗(yàn)組精子樣品,快速用養(yǎng)殖池水稀釋20倍后,滴加在精子分析儀上,利用精子分析系統(tǒng)MX 7.5檢測(cè)精子存活率和精子密度。

    2)繁殖性能及仔魚質(zhì)量(kg)。相關(guān)計(jì)算公式為

    相對(duì)懷卵量=可擠出成熟卵數(shù)量/魚體質(zhì)量,

    受精率=受精卵數(shù)量/總卵數(shù)×100%,

    發(fā)眼率=發(fā)眼卵數(shù)量/受精卵數(shù)量×100%,

    出膜率=出膜仔魚數(shù)量/發(fā)眼卵數(shù)量×100%,

    4 d仔魚成活率=96 h時(shí)仔魚數(shù)量/出膜魚

    數(shù)量×100%。

    3)血清中雌二醇(Estradiol,E2)和睪酮(Testosterone,T)水平,采用北京北方生物技術(shù)研究所有限公司生產(chǎn)的試劑盒檢測(cè)血清中E2和T水平,具體測(cè)定方法參照試劑盒說(shuō)明書。

    4)非特異免疫指標(biāo)水平。采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒檢測(cè)超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、溶菌酶(LZM)活力及丙二醛(MDA)含量;采用浙江維益生物科技有限公司生產(chǎn)的試劑盒檢測(cè)補(bǔ)體C3水平。

    1.2.7 雌二醇受體(Erα)、睪酮受體(AR)、PPAR抗氧化受體(PPARγ、PPAR α)和芳香化酶(CYP19a1a)基因表達(dá)水平的測(cè)定 采用Trizol法提取卵巢與精巢組織中的總RNA。使用反轉(zhuǎn)錄酶FastQuant RT Kit (with gDNAase,TIANGEN)進(jìn)行cDNA反轉(zhuǎn)錄。以18S rRNA為內(nèi)參,采用qRT-PCR檢測(cè)CYP19a1a、Erα、PPARγ、PPARα和AR基因的相對(duì)表達(dá)水平,qRT-PCR的特異性引物設(shè)計(jì)序列見表3,具體操作參照習(xí)丙文等[11]的方法。

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±S.D.)表示。采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA),采用Duncan法進(jìn)行組間多重比較,顯著性水平設(shè)為0.05。

    表3 RT-PCR引物序列Tab.3 Real-time PCR primer sequence

    2 結(jié)果與分析

    2.1 VC對(duì)親魚繁殖性能及后代仔魚質(zhì)量的影響

    從表4可見:各組龍睛金魚親魚的相對(duì)懷卵量有顯著性差異(P<0.05),其中1.75 mg/g VC添加組的相對(duì)懷卵量最高,且顯著高于3.50、 0.175 mg/g VC添加組;各試驗(yàn)組間精子存活率和受精率無(wú)顯著性差異(P>0.05),均為1.75 mg/g VC添加組最高,精子存活率和受精率最高分別為94.65%和91.50%;飼料中VC水平對(duì)親魚的精子密度有顯著性影響(P<0.05),0.875、1.75 mg/g VC添加組的雄魚精子密度顯著高于其他兩組(P<0.05)。

    從表4還可見:飼料中VC水平對(duì)龍睛金魚的發(fā)眼率、出膜率和4 d仔魚成活率存在顯著性影響(P<0.05);1.75 mg/g VC添加組這3項(xiàng)指標(biāo)均為最高,且顯著高于其他各組(P<0.05),各試驗(yàn)組4 d仔魚成活率均在80%以上。

    從表5可見:雌性親魚血清E2水平隨飼料中VC含量變化發(fā)生顯著性變化(P<0.05),其中以1.75 mg/g VC添加組E2水平最高,且與 3.50 mg/g VC添加組存在顯著性差異(P<0.05);各組間雄性親魚血清T水平無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

    從圖1可見:1.75 mg/g VC添加組雌性親魚的ERα表達(dá)量最高,且顯著高于0.175、3.50 mg/g VC添加組(P<0.05);1.75 mg/g VC添加組雌魚卵巢中CYP19a1a基因表達(dá)量最高,且顯著高于 3.50 mg/g VC添加組(P<0.05);0.875 mg/g VC添加組雄性親魚精巢中AR表達(dá)量最高,且顯著高于其他VC組(P<0.05)。

    2.2 VC對(duì)親魚非特異性免疫能力的影響

    從表6可見:飼料中添加VC能顯著增加雌性親魚的血清C3水平(P<0.05),并降低LZM水平(P<0.05);飼料中VC添加量對(duì)雄性親魚血清C3、LZM水平無(wú)顯著性影響(P>0.05)。

    表4 飼料中VC添加量對(duì)親魚繁殖性能及仔魚質(zhì)量的影響Tab.4 Reproductive performance and larval quality of tested fish fed diets containing different contents of VC

    表5 飼料中VC添加量對(duì)親魚血清性激素水平的影響

    標(biāo)有不同字母者表示同一指標(biāo)下不同VC水平組間有顯著性差異(P<0.05),標(biāo)有相同字母者表示組間無(wú)顯著性差異(P>0.05),下同。The means with different letters within same index are significant differences in the different VC level groups at the 0.05 probability level, and the means with the same letter are not significant differences, et sequentia.圖1 飼料中VC添加量對(duì)親魚性腺性類固醇激素 ERα、 CYP19 a1 a和 AR基因表達(dá)水平的影響Fig.1 Sex steroid hormone gene expression levels in gonads of tested fish fed diets containing different contents of VC

    2.3 VC對(duì)親魚抗氧化性能的影響

    從圖2可見:隨著飼料中VC添加量升高,親魚血清SOD水平呈先上升后下降的趨勢(shì),在1.75 mg/g VC添加組雌魚和雄魚血清SOD活力均達(dá)到最高,且顯著高于其他VC組(P<0.05),但其他各組間親魚卵巢和精巢中SOD水平無(wú)顯著性差異(P>0.05);飼料中VC添加量對(duì)雌魚卵巢MDA水平有顯著性影響(P<0.05),0.875、1.75 mg/g VC添加組親魚卵巢MDA水平顯著高于0.175 mg/g VC添加組(P<0.05);飼料中VC添加量對(duì)雌魚血清CAT水平有顯著性影響(P<0.05),以1.75 mg/g VC添加組的CAT水平最高,且顯著高于其他VC組(P<0.05)。

    圖2 飼料中VC添加量對(duì)親魚血清及性腺中SOD、MDA和CAT水平的影響Fig.2 Levels of SOD, MDA and CAT in serum and gonads of tested fish fed diets containing different contents of VC

    表6 飼料中VC添加量對(duì)親魚血清中C3和LZM水平的影響Tab.6 Levels of serums C3 and LZM of tested fish fed diets containing different contents of VC

    從表7可見:飼料中VC添加量對(duì)雌魚卵巢PPARγ水平有顯著性影響(P<0.05),以1.75 mg/g VC添加組卵巢PPARγ表達(dá)水平最高,且顯著高于0.875、3.50 mg/g VC添加組(P<0.05);飼料中VC水平對(duì)雄性親魚精巢PPARγ水平無(wú)顯著性影響(P>0.05)。

    表7 飼料中VC添加量對(duì)親魚性腺 PPARγ表達(dá)水平的影響

    3 討論

    3.1 VC對(duì)親魚性激素合成的影響

    VC被認(rèn)為是卵泡細(xì)胞合成分泌雌激素的一種輔助因子,參與調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)雌激素的合成與分泌[12],并影響性腺發(fā)育。雌激素E2可以誘導(dǎo)雌魚性腺發(fā)育,基因CYP19a1a和ERα通過(guò)調(diào)控激素水平參與雌魚卵巢分化。本研究中,經(jīng)過(guò)4個(gè)月的VC營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化后,發(fā)現(xiàn)飼料中VC添加量為1.75 mg/g時(shí),雌性親魚血清E2水平、CYP19a1a表達(dá)水平、ERα基因表達(dá)水平及相對(duì)懷卵量均高于另外兩組VC含量較低的試驗(yàn)組(0.175、0.875 mg/g),即基因水平、激素水平和繁殖性能結(jié)果一致,這說(shuō)明飼料中VC含量提高有利于雌魚卵巢發(fā)育,進(jìn)而提高了雌魚的產(chǎn)卵性能。這與對(duì)大西洋鮭Salmosalar親魚的研究結(jié)果一致[13]。當(dāng)飼料中VC添加量提高至3.50 mg/g時(shí),E2水平、CYP19a1a表達(dá)水平和ERα表達(dá)水平及相對(duì)懷卵量均出現(xiàn)下降。這可能是由于VC含量過(guò)高或營(yíng)養(yǎng)不均衡,通過(guò)“腦—腦垂體—性腺”內(nèi)分泌系統(tǒng)抑制了E2合成,影響到親魚的生殖進(jìn)程。

    本研究中,雄魚AR表達(dá)水平隨VC添加量增加呈先升高后降低趨勢(shì),與雌魚激素相關(guān)基因的變化趨勢(shì)一致。雄魚血清中睪酮T水平隨飼料中VC水平的變化趨勢(shì)與雌魚血清E2的變化趨勢(shì)并不一致。這可能是由于T是E2的底物,E2是在芳香化酶(CPY)的作用下由T轉(zhuǎn)化而來(lái)的[14],因此,飼料中VC添加量對(duì)T和E2的刺激效果不同。

    3.2 VC對(duì)親魚繁殖性能的影響

    VC對(duì)魚類繁殖性能的重要影響已被廣泛研究證實(shí)。利用添加VC的飼料連續(xù)投喂遮目魚Chanoschanos3年后,遮目魚親魚的產(chǎn)卵量、孵化率和魚苗成活率均得以提高[15]。對(duì)大菱鲆Scophthalmusmaximus[8]、半滑舌鰨Cynoglossussemilaevis[9]等的研究均發(fā)現(xiàn),飼料中添加VC能有效提高親魚的精子密度和卵子受精率。本研究中,飼料中VC添加量為0.175~1.75 mg/g時(shí),供試親魚的相對(duì)懷卵量、精子存活率和精子密度均隨飼料中VC添加量升高而上升,與上述研究結(jié)果一致。當(dāng)VC添加量提高至3.50 mg/g時(shí),龍睛金魚相對(duì)懷卵量、精子存活率和精子密度反而下降。這與對(duì)大菱鲆[8]親魚的研究結(jié)果有所差別,在大菱鲆親魚飼料中VC添加量為0.80 mg/g時(shí),其產(chǎn)卵量與對(duì)照組相比顯著增加,而當(dāng)VC添加量增加到4.80 mg/g時(shí),大菱鲆親魚的產(chǎn)卵量與0.80 mg/g VC組相比無(wú)顯著性差異,但有升高趨勢(shì)。這種差異可能與魚的種類有關(guān),不同魚類對(duì)VC的需求、敏感度和耐受能力不同。對(duì)龍睛金魚而言,飼料中添加1.75 mg/g VC可能更有利于提高親魚產(chǎn)卵量。

    3.3 VC對(duì)親魚健康及后代仔魚質(zhì)量的影響

    觀賞魚飼養(yǎng)過(guò)程中常面臨營(yíng)養(yǎng)過(guò)?;騾T乏所引發(fā)的營(yíng)養(yǎng)性應(yīng)激反應(yīng)。應(yīng)激壓力易導(dǎo)致機(jī)體非特性免疫防御系統(tǒng)遭到破壞,外源病菌易感性增加[16]。觀賞魚親魚免疫力低不僅影響自身健康與觀賞性能,同時(shí)可能影響后代仔魚質(zhì)量。本研究表明,飼料中VC添加量對(duì)雌魚血清C3、LZM、血清SOD、CAT及卵巢PPARγ水平均有顯著影響,適宜的VC含量(0.875~1.75 mg/g)能顯著提高龍睛金魚雌魚的非特異免疫能力和抗氧化性能;同時(shí),仔魚發(fā)眼率、出膜率和仔魚出膜后4 d的成活率對(duì)VC添加量的響應(yīng)變化趨勢(shì)與雌魚非特異免疫力一致。經(jīng)典免疫學(xué)認(rèn)為,母源免疫在免疫防御中發(fā)揮重要作用,雌性親魚免疫力和抵抗力的提高,可由卵子直接傳遞到初生子代,從而提高子代質(zhì)量[17]。因此,推測(cè)飼料中VC可能通過(guò)增強(qiáng)雌性親代免疫力提升后代質(zhì)量。

    3.4 龍睛金魚親魚飼料的適宜VC水平

    培育健康、優(yōu)質(zhì)的后代仔魚是觀賞魚親魚培育的主要目標(biāo)。親魚在性腺發(fā)育過(guò)程中,尤其是卵子需要積累大量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以滿足胚胎和仔魚早期的正常發(fā)育[2-3]。因此,親魚營(yíng)養(yǎng)狀況直接影響親魚繁殖性能及后代仔魚產(chǎn)量[3]。本研究中,VC添加量為0.875 mg/g時(shí),雖然從相對(duì)懷卵量、精子密度和4 d仔魚成活率方面對(duì)親魚的繁殖性能和后代質(zhì)量有一定促進(jìn)作用,但飼料中VC的含量顯然不能滿足親魚在繁殖期對(duì)VC的需求;而VC添加量為1.75 mg/g時(shí),對(duì)親魚的繁殖性能有顯著改善。值得注意的是,在飼料中VC添加量增加至3.50 mg/g時(shí),親魚繁殖性能相比1.75 mg/g VC添加組反而出現(xiàn)下降。綜合考慮,飼料中添加1.75 mg/kg VC更有利于改善龍睛金魚親魚的繁殖性能。

    普通金魚飼料VC含量一般在0.140~0.17 mg/g,基本能夠滿足日常營(yíng)養(yǎng)需求,但本研究中發(fā)現(xiàn),VC添加劑量為0.875~1.75 mg/g時(shí)才能滿足親魚對(duì)VC的需求。對(duì)虹鱒Oncorhynchusmykiss的研究也發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象,虹鱒生長(zhǎng)發(fā)育所需VC添加量為0.05 mg/g,但親魚繁殖期所需VC添加量為0.40 mg/g[18-19]。這可能是因?yàn)轸~類在親魚階段對(duì)VC需求量更高的原因。

    4 結(jié)論

    1)飼料中添加VC后,龍睛金魚親魚雌魚血清C3、LZM、SOD、CAT及卵巢PPARγ水平均顯著改善,說(shuō)明飼料中添加適量的VC能提升龍睛金魚親魚的非特異性免疫能力和抗氧化能力。

    2)飼料中添加VC后,龍睛金魚雌性親魚相對(duì)懷卵量、雄性親魚精子存活率和精子密度均顯著提高,說(shuō)明飼料中添加適量的VC能改善龍睛金魚親魚的繁殖性能。

    3)飼料中添加VC后,龍睛金魚仔魚發(fā)眼率、出膜率和仔魚出膜后4 d成活率顯著提升,說(shuō)明飼料中添加適量的VC能提高龍睛金魚仔魚質(zhì)量。

    猜你喜歡
    仔魚親魚金魚
    饑餓對(duì)似魚句早期仔魚發(fā)育、攝食及生長(zhǎng)的影響
    可愛的小金魚
    花?親魚池塘套養(yǎng)培育及規(guī)模人工繁殖技術(shù)
    小金魚
    小金魚
    注水在四大家魚親魚中繁育的作用
    小金魚
    加強(qiáng)春季親魚培育管理確保繁殖順利進(jìn)行
    斑鱖仔魚饑餓試驗(yàn)及不可逆點(diǎn)的確定
    饑餓對(duì)半刺厚唇魚(Acrossocheilius hemispinus)仔魚早期發(fā)育的主要影響
    久久天躁狠狠躁夜夜2o2o | 亚洲精品国产区一区二| 成人三级做爰电影| 各种免费的搞黄视频| 国产成人欧美在线观看 | 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 在线观看免费午夜福利视频| 色吧在线观看| 亚洲精品视频女| 69精品国产乱码久久久| 国产成人91sexporn| 日韩伦理黄色片| 老鸭窝网址在线观看| 国产伦理片在线播放av一区| 欧美激情极品国产一区二区三区| 国产免费又黄又爽又色| 国产色婷婷99| 国产精品久久久人人做人人爽| 亚洲欧美成人精品一区二区| 涩涩av久久男人的天堂| 国产一区有黄有色的免费视频| 另类亚洲欧美激情| 午夜影院在线不卡| 久久精品久久久久久久性| 99国产极品粉嫩在线观看| 亚洲 国产 在线| 97人妻精品一区二区三区麻豆 | 亚洲精品在线美女| 给我免费播放毛片高清在线观看| 久久久精品欧美日韩精品| 国产精品 国内视频| 久久中文字幕人妻熟女| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 精品免费久久久久久久清纯| 国产成人影院久久av| 亚洲五月婷婷丁香| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 午夜亚洲福利在线播放| 18美女黄网站色大片免费观看| av网站免费在线观看视频| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 一进一出抽搐动态| aaaaa片日本免费| 真人一进一出gif抽搐免费| 精品国产一区二区久久| 无人区码免费观看不卡| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 99热只有精品国产| 99精品欧美一区二区三区四区| 国产精品一区二区三区四区久久 | 国产熟女午夜一区二区三区| 欧美色欧美亚洲另类二区 | 老汉色∧v一级毛片| 亚洲一区二区三区不卡视频| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 欧美精品啪啪一区二区三区| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 久久婷婷成人综合色麻豆| 亚洲自拍偷在线| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 精品久久久久久久久久免费视频| 日韩欧美在线二视频| 看免费av毛片| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 一区二区三区激情视频| 九色亚洲精品在线播放| 999精品在线视频| 一级a爱片免费观看的视频| 国产精品二区激情视频| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 国产亚洲精品久久久久5区| 久久精品成人免费网站| 一进一出抽搐动态| 欧美日韩一级在线毛片| 精品午夜福利视频在线观看一区| 淫妇啪啪啪对白视频| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 成人亚洲精品av一区二区| 国产在线精品亚洲第一网站| 精品高清国产在线一区| av免费在线观看网站| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲精品中文字幕在线视频| 波多野结衣av一区二区av| 在线免费观看的www视频| 一夜夜www| 极品教师在线免费播放| 日本 欧美在线| av超薄肉色丝袜交足视频| а√天堂www在线а√下载| 一区二区三区精品91| 欧美黄色淫秽网站| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 精品第一国产精品| 久久久久久久久中文| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 自线自在国产av| 涩涩av久久男人的天堂| 91麻豆精品激情在线观看国产| 午夜福利免费观看在线| 免费人成视频x8x8入口观看| 两个人视频免费观看高清| 69精品国产乱码久久久| 日韩欧美在线二视频| 久久精品国产综合久久久| 成年版毛片免费区| 在线观看www视频免费| 久久久国产欧美日韩av| 日本 av在线| or卡值多少钱| 欧美激情高清一区二区三区| 制服诱惑二区| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 黄色丝袜av网址大全| 国产精品电影一区二区三区| 少妇 在线观看| 日韩成人在线观看一区二区三区| 亚洲男人天堂网一区| 99国产精品免费福利视频| 一个人免费在线观看的高清视频| 丝袜人妻中文字幕| 欧美丝袜亚洲另类 | 老司机深夜福利视频在线观看| 欧美久久黑人一区二区| 无限看片的www在线观看| 午夜两性在线视频| 亚洲精品在线美女| 大型黄色视频在线免费观看| 精品人妻在线不人妻| 欧美日本中文国产一区发布| 国产成人精品久久二区二区91| 美女高潮到喷水免费观看| 黄频高清免费视频| tocl精华| 国产片内射在线| 久久久久精品国产欧美久久久| 色播在线永久视频| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 亚洲国产精品999在线| 日韩精品免费视频一区二区三区| 久久久国产精品麻豆| 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产极品粉嫩免费观看在线| 精品第一国产精品| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 在线观看午夜福利视频| 嫩草影院精品99| 午夜精品在线福利| 亚洲第一电影网av| 一级毛片高清免费大全| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 亚洲全国av大片| 亚洲片人在线观看| 欧美日韩乱码在线| 久久久国产精品麻豆| 日韩大码丰满熟妇| 久久久久国产一级毛片高清牌| 国产成人免费无遮挡视频| 国产亚洲av高清不卡| 老司机靠b影院| 久久狼人影院| 天天添夜夜摸| 成年人黄色毛片网站| 国产国语露脸激情在线看| 国产高清videossex| 一本大道久久a久久精品| 精品电影一区二区在线| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 亚洲av美国av| 国产成人精品无人区| 日韩有码中文字幕| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 中文字幕最新亚洲高清| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 国产av在哪里看| 色综合亚洲欧美另类图片| 亚洲av电影在线进入| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 午夜a级毛片| 精品国产乱码久久久久久男人| 操出白浆在线播放| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 亚洲色图综合在线观看| 久久香蕉精品热| 日韩欧美一区视频在线观看| 婷婷六月久久综合丁香| 久久天堂一区二区三区四区| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产精品一区二区在线不卡| 又黄又爽又免费观看的视频| 午夜精品国产一区二区电影| 不卡一级毛片| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 久久人妻熟女aⅴ| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 国产精品亚洲av一区麻豆| 中文字幕久久专区| 曰老女人黄片| 精品电影一区二区在线| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 成人免费观看视频高清| 99香蕉大伊视频| 人人澡人人妻人| 99精品在免费线老司机午夜| 久久国产精品影院| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 一级片免费观看大全| 色av中文字幕| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 亚洲成人精品中文字幕电影| 啦啦啦 在线观看视频| 亚洲九九香蕉| 三级毛片av免费| 窝窝影院91人妻| 一区二区三区激情视频| 国产欧美日韩一区二区三| 国产成年人精品一区二区| 这个男人来自地球电影免费观看| 亚洲国产中文字幕在线视频| 国产亚洲精品一区二区www| 国产精品影院久久| 久久久国产精品麻豆| 日本 欧美在线| √禁漫天堂资源中文www| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 免费看a级黄色片| 免费高清在线观看日韩| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 美国免费a级毛片| 成人国产一区最新在线观看| 在线天堂中文资源库| 人成视频在线观看免费观看| 国产97色在线日韩免费| 国产免费男女视频| 国产一区在线观看成人免费| 国产主播在线观看一区二区| 视频在线观看一区二区三区| 久久久久精品国产欧美久久久| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 看黄色毛片网站| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 叶爱在线成人免费视频播放| 成熟少妇高潮喷水视频| 淫妇啪啪啪对白视频| 国产高清视频在线播放一区| 国产一区二区激情短视频| 国内精品久久久久久久电影| 热re99久久国产66热| 身体一侧抽搐| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 男女床上黄色一级片免费看| 日韩有码中文字幕| 黑人操中国人逼视频| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲av熟女| 日本三级黄在线观看| 欧美色视频一区免费| 最近最新中文字幕大全电影3 | 两人在一起打扑克的视频| 成人三级做爰电影| 热re99久久国产66热| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 国产黄a三级三级三级人| 99精品久久久久人妻精品| 麻豆一二三区av精品| 此物有八面人人有两片| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 欧美在线一区亚洲| 伦理电影免费视频| 欧美亚洲日本最大视频资源| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产成人精品无人区| 国产精品永久免费网站| 在线观看www视频免费| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲男人的天堂狠狠| 亚洲成人免费电影在线观看| 99国产精品免费福利视频| 日本一区二区免费在线视频| 欧美另类亚洲清纯唯美| 97人妻天天添夜夜摸| 国产精品久久久人人做人人爽| 久久性视频一级片| 亚洲国产欧美网| 一区二区三区激情视频| 99在线人妻在线中文字幕| 亚洲欧美激情综合另类| www日本在线高清视频| 国产一卡二卡三卡精品| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 欧美日韩福利视频一区二区| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 欧美色视频一区免费| 91九色精品人成在线观看| 久久狼人影院| 嫁个100分男人电影在线观看| 精品一区二区三区av网在线观看| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 久热爱精品视频在线9| 久久精品影院6| av片东京热男人的天堂| 国产乱人伦免费视频| 91精品三级在线观看| 在线av久久热| 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲国产看品久久| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 日韩精品青青久久久久久| 午夜亚洲福利在线播放| 天堂影院成人在线观看| 成人国产一区最新在线观看| 日韩成人在线观看一区二区三区| 国产精品 国内视频| 精品国产乱子伦一区二区三区| 久久人人精品亚洲av| 51午夜福利影视在线观看| 国产片内射在线| 久久久久久人人人人人| 欧美黄色片欧美黄色片| 热99re8久久精品国产| 亚洲国产精品合色在线| 日韩欧美三级三区| 日本一区二区免费在线视频| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产高清激情床上av| 日韩欧美免费精品| 中文字幕最新亚洲高清| 久久人人97超碰香蕉20202| 亚洲一码二码三码区别大吗| 亚洲第一电影网av| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲国产精品成人综合色| 麻豆一二三区av精品| 丁香欧美五月| 真人一进一出gif抽搐免费| 色婷婷久久久亚洲欧美| 日韩欧美三级三区| 桃色一区二区三区在线观看| 一级毛片精品| 欧美日本亚洲视频在线播放| 免费看十八禁软件| 国产激情欧美一区二区| 在线视频色国产色| 亚洲成av人片免费观看| 久久午夜综合久久蜜桃| 亚洲精品在线观看二区| 香蕉丝袜av| 黄色片一级片一级黄色片| 亚洲一区中文字幕在线| 天堂动漫精品| 亚洲九九香蕉| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 亚洲精品在线美女| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 一级a爱视频在线免费观看| 久久精品影院6| 人妻久久中文字幕网| 免费在线观看影片大全网站| 他把我摸到了高潮在线观看| x7x7x7水蜜桃| 亚洲专区国产一区二区| 成人免费观看视频高清| 欧美国产日韩亚洲一区| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲精品久久国产高清桃花| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 欧美亚洲日本最大视频资源| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产在线精品亚洲第一网站| 久久国产乱子伦精品免费另类| 麻豆av在线久日| 亚洲avbb在线观看| 日本黄色视频三级网站网址| 欧美激情高清一区二区三区| 91老司机精品| 午夜福利欧美成人| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 超碰成人久久| 久久人人精品亚洲av| 黄片大片在线免费观看| 老司机深夜福利视频在线观看| АⅤ资源中文在线天堂| 精品欧美一区二区三区在线| 在线观看www视频免费| 免费在线观看完整版高清| 欧美黄色淫秽网站| 欧美亚洲日本最大视频资源| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 波多野结衣巨乳人妻| 宅男免费午夜| 老司机午夜福利在线观看视频| 99国产精品一区二区三区| 欧美激情极品国产一区二区三区| 欧美中文综合在线视频| av天堂在线播放| 制服诱惑二区| 欧美精品亚洲一区二区| 91麻豆精品激情在线观看国产| 99久久精品国产亚洲精品| 午夜两性在线视频| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产精品电影一区二区三区| 婷婷六月久久综合丁香| a级毛片在线看网站| 久久精品国产综合久久久| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 老司机午夜福利在线观看视频| 嫩草影视91久久| 久久午夜亚洲精品久久| 岛国在线观看网站| 色综合亚洲欧美另类图片| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲一区二区三区色噜噜| 一级片免费观看大全| 欧美乱码精品一区二区三区| 免费高清视频大片| 亚洲一区高清亚洲精品| 一级a爱视频在线免费观看| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 亚洲五月婷婷丁香| 一级毛片精品| 亚洲成人国产一区在线观看| av视频在线观看入口| 18禁美女被吸乳视频| 91精品国产国语对白视频| 国产免费av片在线观看野外av| 69精品国产乱码久久久| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 国产av精品麻豆| 国内精品久久久久精免费| 国产主播在线观看一区二区| 国内精品久久久久久久电影| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 中出人妻视频一区二区| www.自偷自拍.com| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 国产精品一区二区免费欧美| 国产又色又爽无遮挡免费看| 在线观看免费午夜福利视频| 久久精品91蜜桃| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 亚洲欧美精品综合久久99| 大型黄色视频在线免费观看| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 国产精品免费视频内射| АⅤ资源中文在线天堂| 国产精品一区二区在线不卡| av欧美777| 夜夜夜夜夜久久久久| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 后天国语完整版免费观看| 久久香蕉精品热| 亚洲无线在线观看| www.熟女人妻精品国产| 成人三级黄色视频| 久久这里只有精品19| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 久久中文字幕人妻熟女| 久久青草综合色| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 成人亚洲精品av一区二区| 精品久久久久久,| 国内精品久久久久久久电影| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 美女高潮到喷水免费观看| 九色国产91popny在线| 久久婷婷人人爽人人干人人爱 | 国产亚洲精品第一综合不卡| 国产极品粉嫩免费观看在线| 国产亚洲精品一区二区www| 午夜久久久在线观看| 亚洲国产精品sss在线观看| 两性夫妻黄色片| 黄色成人免费大全| 欧美在线一区亚洲| 757午夜福利合集在线观看| 国产亚洲精品久久久久5区| 国产成+人综合+亚洲专区| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 成人三级做爰电影| 日本欧美视频一区| 大码成人一级视频| 日本欧美视频一区| 少妇的丰满在线观看| 男女午夜视频在线观看| 性少妇av在线| 真人做人爱边吃奶动态| 国产私拍福利视频在线观看| 国产人伦9x9x在线观看| 亚洲激情在线av| 午夜久久久久精精品| 久久亚洲精品不卡| 多毛熟女@视频| 色综合亚洲欧美另类图片| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 韩国精品一区二区三区| 精品熟女少妇八av免费久了| 久久久久久人人人人人| 99精品久久久久人妻精品| 少妇粗大呻吟视频| 在线观看日韩欧美| 男人舔女人的私密视频| 黄频高清免费视频| 国产伦一二天堂av在线观看| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | av视频免费观看在线观看| 最新在线观看一区二区三区| 免费看a级黄色片| 精品一区二区三区四区五区乱码| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲国产欧美一区二区综合| 激情在线观看视频在线高清| 性色av乱码一区二区三区2| 香蕉久久夜色| 亚洲九九香蕉| 国产精品亚洲美女久久久| 亚洲性夜色夜夜综合| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 欧美中文综合在线视频| 国产免费av片在线观看野外av| 级片在线观看| 国产精品久久久人人做人人爽| 国产av一区在线观看免费| 1024香蕉在线观看| 两个人看的免费小视频| 国产精品影院久久| 免费不卡黄色视频| 人人妻人人澡欧美一区二区 | 亚洲自拍偷在线| 99久久综合精品五月天人人| 国产xxxxx性猛交| 亚洲国产精品久久男人天堂| 一区二区三区高清视频在线| 操出白浆在线播放| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 免费不卡黄色视频| 国产精品久久久av美女十八| 欧美一级毛片孕妇| 久久狼人影院| 亚洲精品国产色婷婷电影| 久久久久久人人人人人| 在线观看日韩欧美| 久久欧美精品欧美久久欧美| 夜夜夜夜夜久久久久| 免费少妇av软件| 国产激情久久老熟女| 免费av毛片视频| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 国产又色又爽无遮挡免费看| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 国产私拍福利视频在线观看| 国内精品久久久久精免费| 国产精品日韩av在线免费观看 | 亚洲人成77777在线视频| 超碰成人久久| 美女高潮到喷水免费观看| 91九色精品人成在线观看| 日本a在线网址| 成年版毛片免费区| 久久久久九九精品影院| 色哟哟哟哟哟哟| 国产成人av教育| 国产在线观看jvid| 国产av一区在线观看免费| 亚洲成人精品中文字幕电影| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 亚洲激情在线av| 免费在线观看日本一区| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 亚洲专区字幕在线| 国产伦人伦偷精品视频| 亚洲av片天天在线观看| 久久久国产精品麻豆| 国产1区2区3区精品| 日本免费a在线| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 12—13女人毛片做爰片一| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 日韩成人在线观看一区二区三区| √禁漫天堂资源中文www| 国产精品二区激情视频| 日本三级黄在线观看| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 成人精品一区二区免费| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 欧美成人午夜精品| av福利片在线| 波多野结衣av一区二区av| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 黄片小视频在线播放| 精品高清国产在线一区| 人成视频在线观看免费观看| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 免费人成视频x8x8入口观看| 亚洲一区二区三区色噜噜| 操美女的视频在线观看| 久久狼人影院| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 黑丝袜美女国产一区| 国产精品99久久99久久久不卡|