發(fā)酵構樹飼料對肉兔生產性能、肉品質、血液生化指標及腸道形態(tài)的影響

張 邦，王瑞華，朱龍龍，顏 顏，王 軍，王占彬*

（1.河南科技大學動物科技學院，河南洛陽 471003；2.禾佳農業(yè)科技有限公司，河南宜陽 471600）

我國蛋白飼料原料以豆粕、菜粕、苜蓿等草本飼料為主，且對進口原料依存度很高。2016 年全國大豆進口量約為8 400 萬t，2020 年超過1 億t[1-2]。國務院頒布的《關于促進畜牧業(yè)高質量發(fā)展的意見》中指出要健全飼草供應體系，開發(fā)利用雜交構樹、飼料桑等新飼草資源。雜交構樹在營養(yǎng)期適時收割，營養(yǎng)價值豐富，能值和粗蛋白質含量等均可與傳統(tǒng)飼料相媲美[3]。構樹也是一種傳統(tǒng)中草藥，含有多種黃酮類化合物、生物堿和多糖等活性成分，具有抗菌、增強免疫力、延緩衰老等藥理活性[4-5]。我國大面積的丘陵山地具有充足的開發(fā)構樹資源的潛力[6-8]。宋博等[9]研究發(fā)現(xiàn)，在育肥豬飼糧中添加10%全株發(fā)酵構樹飼料對育肥豬生產性能無顯著影響，可以提高肌肉中游離氨基酸和肌內脂肪含量，改善肉品質。鄧銘等[10]研究表明，將發(fā)酵構樹飼料用于斷奶仔豬可顯著降低仔豬腹瀉率，且無不利影響。向凌云等[11]使用30%雜交構樹飼料替代肉兔飼糧中的花生秧與花生殼，顯著提高了肉兔平均日增重，也顯著降低了肉兔發(fā)病率與死亡率。構樹葉經發(fā)酵后所含的營養(yǎng)物質較發(fā)酵前有不同程度提高，但對肉兔的研究鮮有報道。因此，本試驗旨在研究發(fā)酵構樹飼料對肉兔生長發(fā)育的影響，為發(fā)酵構樹飼料在肉兔養(yǎng)殖中的應用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗設計 選取體重接近的30 日齡斷奶伊普呂幼兔144 只，隨機分為4 組，每組6 個重，每重復只，每籠3 只兔。試驗于夏季在義馬市金地牧業(yè)科技有限公司開展。對照組飼喂玉米-豆粕型基礎飼糧，參照NRC（1994）營養(yǎng)需要配制顆粒飼糧。試驗組分別添加3%、6%、9%發(fā)酵構樹飼料。在第2 茬雜交構樹生長至1.2 m，離地30 cm 收割枝葉。添加適量發(fā)酵益生菌（乳酸菌2×1010CFU/g）和酶制劑（纖維素酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶11 000 U/g）按比例混合加工，打包裝袋密封發(fā)酵20 d。益生菌與酶制劑均為洛陽市洛丹生物科技有限公司產品。發(fā)酵構樹飼料（洛陽禾佳農牧有限公司）營養(yǎng)成分見表1（重復測定3 次取其均值），飼糧組成及營養(yǎng)成分見表2。預試期7 d，正試期28 d。

表1 發(fā)酵構樹飼料化學成分（風干基礎）

表2 飼糧組成及營養(yǎng)成分（風干基礎）

1.2 飼養(yǎng)管理 幼兔飼養(yǎng)于同一兔舍，采用歐式籠同層飼養(yǎng)，按照每個籠幼兔平均體重的8%定量飼喂，每只兔每隔3 d 增加10 g。自由飲水，免疫程序按常規(guī)進行。每天清掃兔舍，定期清洗飲水管道和糞盤。

1.3 生產性能 在試驗第1、28 天按重復進行空腹稱重，并統(tǒng)計死淘情況，計算平均日增重、平均日采食量、耗料增重比、死亡率和腹瀉率。

1.4 屠宰性能 在試驗結束前12 h 對肉兔停料不停水。每個重復隨機選擇1 只兔共24 只屠宰，耳緣靜脈注射空氣致死。記錄活體重、全凈膛重、半凈膛重、心臟、肝臟、腎臟、肺臟、脾臟等重量，并計算全凈膛率、半凈膛率和器官指數(shù)。

全凈膛率=全凈膛重/活體重×100%

半凈膛率=（全凈膛重+心臟+肝臟+腎臟+肺臟）/活體重×100%

器官指數(shù)=（器官重量/體重）×100%

1.5 肉品質 屠宰完成后采集背腰最長肌取2 cm×1 cm×1 cm 肉樣背腰最長肌樣品，去除結締組織，測定質量m1（g）置于自封袋內，密封懸掛于在4℃冰箱內，24 h后將肉樣取出，濾紙吸干樣品表面水分后稱重m2（g），計算24 h 滴水損失。48 h 滴水損失測定方法相同。滴水損失的計算公式：

滴水損失=100%×（m1-m2）)/ m1

采用便攜式手持專用pH 計（pH-STAR，德國）測背腰最長肌第5 肋骨處的pH，將探頭插入肌肉3 mm 讀數(shù)，讀數(shù)穩(wěn)定5 s 后記錄pH，每個肉樣測定3次不同位置。分別記錄pH45min與pH24h的數(shù)值。

用日本產CR-10 型號便攜式色差儀，利用CIELab 輸出模式，在兔宰后45 min 時在背最長肌第5 腰椎處橫斷面表面切開3 個切面記錄數(shù)值，分別求平均值，得出亮度值（L*）、紅色度值（a*）和黃色度值（b*）。

1.6 血液生化指標 在屠宰試驗當天，進行心臟采血，3 500 r/min 離心取得血清于-20℃冰箱保存?zhèn)溆?。用全自動生化分析儀（庫貝爾 IMagic-V7，中國）測定血清中的葡萄糖（GLU）、尿素氮（BUN）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、甘油三酯（TG）、膽固醇（CHO）、葡萄糖（GLU）、血鈣（Ca）與血磷（IP）含量及丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）、天冬氨酸氨基轉移酶（AST）活性。

1.7 腸道形態(tài) 飼養(yǎng)試驗結束，每個重復選1 只試驗兔，剖開腹腔后，分離小腸，于空腸中段采集3 cm 左右，用生理鹽水洗滌內容物后，放置于多聚甲醛中固定48 h，經過修整、脫水、透明、浸蠟和包埋，采用旋轉切片機進行連續(xù)切片，然后使用蘇木素-伊紅（H-E）染液染色并封片。在各個切片中選取5 個較為完整的絨毛，在電子顯微鏡下測量絨毛高度和隱窩深度，并計算其絨隱比。

1.8 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 22 統(tǒng)計軟件的ANOVA 程序進行單因素方差分析，組間差異用Duncan's 法進行多重比較。數(shù)據(jù)以平均值±標準誤表示。設定P＜0.05 為差異顯著，P＜0.01 為差異極顯著。

2 結果

2.1 發(fā)酵構樹飼料對肉兔生產性能的影響 如表3 所示，試驗肉兔初始體重差異不顯著，構樹組生產性能與對照組無顯著差異。

表3 發(fā)酵構樹飼料對肉兔生產性能的影響

2.2 發(fā)酵構樹飼料對肉兔屠宰性能和器官指數(shù)的影響由表4 可見，構樹組全凈膛重、半凈膛重、全凈膛率、半凈膛率與對照組均無顯著差異；且肉兔各項器官指數(shù)與對照組無顯著差異。

表4 發(fā)酵構樹飼料對肉兔屠宰性能和器官指數(shù)的影響

2.3 發(fā)酵構樹飼料對肉兔背腰最長肌肉品質的影響 如表5 所示，6%、9%構樹組兔肉亮度均高于對照組、3%構樹組（P＜0.05）；3%、6% 構樹組滴水損失24 h 均低于對照組（P＜0.05），9%構樹組低于對照組和3%、6%構樹組（P＜0.01）；構樹組兔肉的pH、紅度與黃度與對照組無顯著差異。

表5 發(fā)酵構樹飼料對肉兔背腰最長肌肉品質的影響

2.4 發(fā)酵構樹飼料對肉兔血液生化指標的影響 由表6所示，構樹組TP 和ALB 含量高于對照組（P＜0.01）；9%構樹組GLO 含量、6% 和9% 構樹組GLU 含量均高于對照組（P＜0.05）；6%和9%構樹組IP 含量高于對照組、3%構樹組（P＜0.01）；各組其他指標無顯著差異。

表6 發(fā)酵構樹飼料對肉兔血液生化指標的影響

2.5 發(fā)酵構樹飼料對肉兔腸道形態(tài)的影響 由表7 和圖1 可知，9%構樹組腸道絨毛高度高于對照組（P＜0.05）；構樹組腸道隱窩深度和絨隱比與對照組無顯著差異。

圖1 發(fā)酵構樹飼料對肉兔腸道形態(tài)的影響（9×）

表7 發(fā)酵構樹飼料對肉兔腸道形態(tài)的影響

3 討 論

3.1 發(fā)酵構樹飼料對斷奶幼兔生長性能的影響 幼兔因其機體生長發(fā)育過快，消化系統(tǒng)發(fā)育不能及時完善，導致胃酸和消化酶分泌不足，進而引起腹瀉最終面臨死亡，是肉兔生產中常見的難題[12]。構樹飼料經發(fā)酵過后，產生多種芳香類的物質[13]，可降解構樹中所含的一些抗營養(yǎng)因子，還會產生乳酸菌等有益菌，刺激幼兔采食促進營養(yǎng)物質的消化吸收[14]。一定量的構樹飼料可以提升兔的胃容積，促進腸道發(fā)育，并在消化過程中增強消化器官蠕動，增加消化液的分泌[15]。而本試驗中構樹組肉兔平均末重和平均日增重較對照組均有所增加，但其生產性能無顯著變化，這可能與限飼有關，肉兔的腹瀉率和死亡率在飼喂發(fā)酵構樹后有所改善，但并未達到統(tǒng)計學上的顯著性差異。鄧銘等[10]和Chen 等[16]均報道，構樹飼料可以顯著降低斷奶仔豬腹瀉率，因此肉兔在自由采食模式下可能產生顯著效果。在育肥豬飼糧中添加10%發(fā)酵構樹飼料不產生負面影響[7,17]，而生長豬飼糧中發(fā)酵構樹飼料比例達到20% 時就會產生負面影響[18]。本試驗中，發(fā)酵構樹添加量最高比例為9%，并未對肉兔的生長性能造成負面影響。此外，發(fā)酵構樹來源、飼喂方式以及添加量不同都會產生不同影響。相對豆粕或魚粉而言，木本植物飼料提供的粗蛋白質成本比較低廉。因此，在小型草食動物的飼料原料選擇上，構樹飼料具有很好的發(fā)展?jié)摿Γ陲曃拱l(fā)酵構樹飼料時，根據(jù)實際條件確定適宜飼喂方式與飼用量，才能更好地發(fā)揮發(fā)酵構樹飼料的優(yōu)勢。

3.2 發(fā)酵構樹飼料對肉兔屠宰性能、器官指數(shù)與肉品質的影響 屠宰性能是衡量肉兔生產性能的重要指標，可反映畜禽產肉率。本試驗結果表明，發(fā)酵構樹飼料對肉兔屠宰性能無顯著影響。張興等[19]研究也發(fā)現(xiàn)，使用30%發(fā)酵構樹飼料飼喂湘沙豬對其屠宰性能未見顯著差異。內臟器官是機體生理功能的物質基礎，其發(fā)育狀況可反映機體的器官能力。王小平等[20]研究發(fā)現(xiàn)，添加不同比例青貯構樹飼料的各試驗組間肉羊的心、肝、脾、肺、腎的器官指數(shù)無顯著變化。本試驗中，發(fā)酵構樹飼料對肉兔的心、肝、脾、肺和腎的器官指數(shù)也均無顯著影響。目前，有關發(fā)酵構樹飼料對肉兔的屠宰性能和器官指數(shù)影響的研究不多，其可能存在的機制尚待進一步研究。

肉品質是畜禽生產中的重要經濟性狀，其評價指標包括肉色、系水力、pH 等[21]。熊羅英等[22]發(fā)現(xiàn)，在AA 肉仔雞飼糧中添加6.75%發(fā)酵構樹飼料對肉仔雞的屠宰率無顯著影響，但可以顯著降低胸肌和腿肌的滴水損失，這表明發(fā)酵構樹飼料可以提高雞肉系水力和多汁性。本試驗中，發(fā)酵構樹飼料顯著降低了肉兔背腰最長肌的滴水損失。肌肉水分流失會帶走其中的營養(yǎng)物質、風味物質和血紅素等，對肉的營養(yǎng)價值、風味和肉色造成損害[23]。相關研究表明，發(fā)酵構樹飼料可以提高育肥豬瘦肉率、降低背膘厚度、增加肉色和系水力，進而改善豬肉質量及風味[17,24]。在反芻動物中使用發(fā)酵構樹飼料也可顯著提高其屠宰率和肉品質[25]。這可能是因為構樹中含有較多黃酮類、葡萄糖苷類、生物堿類等活性成分，可減少自由基對肌肉蛋白的損傷，從而改善肉品質[26]。因此，在肉兔飼養(yǎng)中使用發(fā)酵構樹具有一定優(yōu)勢，但本次試驗僅探索發(fā)酵構樹飼料使用的可行性，并未針對其肉品質做詳細探究，后續(xù)可以深入研究。

3.3 發(fā)酵構樹飼料對肉兔血液生化指標的影響 動物血清生化各項指標可反映動物機體生理機能代謝狀況[27]。血清中BUN 含量減少，反映了機體對BUN 的沉積量增加，氮的利用率提高。AST 和ALT 活性可反映肝臟對蛋白質和氨基酸的代謝能力。本試驗中，AST 和ALT 有所上升，可能因為發(fā)酵構樹飼料中含有黃酮、糖苷類等藥用成分能提高肝臟代謝能力[28-30]。TC 和TG含量能反映機體脂肪代謝情況[31]。本研究中，構樹組TC 含量相較于對照組有一定減少，表明發(fā)酵構樹飼料具有有一定降血脂作用。有研究發(fā)現(xiàn)發(fā)酵桑葉飼喂蛋雞可以降低血脂[32]。而構樹與桑樹中有類似的生物堿等活性成分可以調節(jié)脂質代謝。GLU 是細胞的能量來源和新陳代謝中間產物，是單胃動物最直接的能量來源。本試驗中，6% 構樹組與9% 構樹組GLU 含量極顯著高于對照組，表明發(fā)酵構樹飼料對斷奶幼兔的能量代謝有顯著影響。TP 含量是衡量機體對蛋白質吸收能力、利用能力以及機體免疫水平的指標。動物的代謝系統(tǒng)可以調控血漿蛋白質、氨基酸和組織蛋白以保證內環(huán)境穩(wěn)態(tài)[33-34]。王玉田等[35]發(fā)現(xiàn)，飼喂含枯草芽孢桿菌等復合益生菌的發(fā)酵飼料能提高斷奶仔豬血清中TP 含量。本試驗中，構樹組血清中TP 含量極顯著高于對照組，這可能因為發(fā)酵構樹飼料也含有較多種類的益生菌，改善了幼兔腸道健康，進而影響了蛋白的消化利用。在本試驗中，6%構樹組和9%構樹組IP 含量極顯著高于對照組。血液中磷含量主要由腸道吸收，說明發(fā)酵構樹飼料能促進兔腸道上皮細胞的吸收[36]。以上結果表明，發(fā)酵構樹飼料具有一定提高幼兔小腸吸收能力的作用，具體機制有待探究。

3.4 發(fā)酵構樹飼料對腸道形態(tài)的影響 肉兔對飼糧中營養(yǎng)成分吸收量，很大程度上依賴于腸道的發(fā)育情況。因此，腸道組織健康狀況是動物機體能否最大程度消化吸收飼糧的關鍵。絨毛和隱窩是腸道重要的生理結構，分別影響營養(yǎng)物質與腸道的接觸面積和腸絨毛上皮細胞的分泌功能[37]。絨毛高度可以直觀反映腸道吸收能力，隱窩深度為腸腺離黏膜表面的最近距離[38]。本試驗中，9%構樹組肉兔的空腸絨毛長度顯著高于對照組，雖然3%構樹組和6%構樹組絨毛長度沒有提高，但隱窩深度有一定降低，進而提高了絨隱比。而飼喂玉米皮飼糧顯著提高了生長肉兔十二指腸絨毛高度，改善了其腸道形態(tài)結構，認為可能是由于谷物麩皮類飼料原料纖維組成結構與基礎飼糧不同[39]；相關研究也表明，不同來源纖維，不同纖維成分均可影響兔腸道組織形態(tài)[40-41]。在生長兔飼糧中使用不同來源的纖維飼料，對生長肉兔的腸道發(fā)育會產生不同效果。相對于傳統(tǒng)草本飼料，發(fā)酵構樹飼料屬于木本飼料可能在小腸中停留更長時間，進而改善了腸道消化吸收能力。

4 結 論

本研究結果表明，使用發(fā)酵構樹飼料可以提高兔肉背腰最長肌亮度、降低其滴水損失，提高空腸絨隱比，且對血液生化指標有一定提高作用，使用9%發(fā)酵構樹飼料未見不良影響，可繼續(xù)探究其在實踐生產中的使用。