血小板在炎癥型血栓形成中的作用

楊沁雨，章澤恒（.中南大學(xué)湘雅藥學(xué)院藥理學(xué)系，長(zhǎng)沙 4000；2.湖南省藥品審評(píng)與不良反應(yīng)中心，長(zhǎng)沙 4000）

隨著時(shí)間演化，高等哺乳生物機(jī)體形成了結(jié)構(gòu)龐大且復(fù)雜的多細(xì)胞系統(tǒng)。當(dāng)機(jī)體遭受病原體入侵或損傷時(shí)，先天免疫的重要成分補(bǔ)體系統(tǒng)被迅速激活，介導(dǎo)免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)。與此同時(shí)，凝血作為保護(hù)血管完整性的防御機(jī)制也迅速響應(yīng)。補(bǔ)體成分5（C5）可誘導(dǎo)組織因子（TF）表達(dá)顯著增加，TF 是凝血級(jí)聯(lián)反應(yīng)中重要的啟動(dòng)者。此外，多種凝血因子也可在不同水平激活補(bǔ)體級(jí)聯(lián)反應(yīng)。多項(xiàng)研究證實(shí)兩者間存在密切的相互作用。不只是補(bǔ)體系統(tǒng)，血小板-白細(xì)胞聚集體的形成和凝血酶激活白介素-1

α

（IL-1

α

）都證明免疫與凝血系統(tǒng)正以復(fù)雜的方式協(xié)同參與抗感染過(guò)程。

疾病打破了體內(nèi)凝血與抗凝的平衡，并引發(fā)了炎癥。炎癥型血栓形成（thromboinflammation）是指抗感染過(guò)程中血栓形成現(xiàn)象。病理性的炎癥型血栓形成是導(dǎo)致發(fā)病和死亡的主要原因。自身免疫疾病中凝血系統(tǒng)的作用逐漸受到重視，系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）和類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）均受凝血系統(tǒng)調(diào)控。血栓性疾病如非典型溶血尿毒綜合征，其補(bǔ)體系統(tǒng)長(zhǎng)期活化最終導(dǎo)致整個(gè)脈管系統(tǒng)廣泛出現(xiàn)多發(fā)性血栓。急慢性炎癥指標(biāo)C 反應(yīng)蛋白（CRP）與動(dòng)脈粥樣硬化中動(dòng)脈血栓形成有密切聯(lián)系。CRP 通過(guò)激活補(bǔ)體系統(tǒng)和血管細(xì)胞，或誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和血小板聚集等積極參與血栓最終的形成。

炎癥與血栓形成兩者間相互依賴(lài)日漸密切，炎癥觸發(fā)血栓形成，而血栓形成過(guò)程中進(jìn)一步加重了炎癥。血小板在此間發(fā)揮著關(guān)鍵作用?；诓煌牟±?xiàng)l件下血小板在免疫血栓形成中的作用進(jìn)行深入探討將有助于臨床新型療法的發(fā)現(xiàn)以及針對(duì)治療靶標(biāo)新藥的開(kāi)發(fā)。

1 血小板異?；罨?/h2>

血小板活化是止血的先決條件，在生理狀態(tài)下，受損的血管壁通過(guò)胞外基質(zhì)蛋白與血管性血友病因子（vWF）形成vWF 多聚體捕獲血小板。血小板上特定黏附糖蛋白（GP）與vWF 多聚體交聯(lián)并誘發(fā)復(fù)雜的級(jí)聯(lián)信號(hào)，從外至內(nèi)的信號(hào)傳導(dǎo)使血小板活化。血小板活化后不再呈圓盤(pán)狀而是出現(xiàn)了許多偽足。胞內(nèi)顆粒物釋放，其中公認(rèn)的二磷酸腺苷（ADP）和5-羥色胺（5-HT）是血小板激動(dòng)劑，因此能募集更多的血小板和血細(xì)胞，最終形成聚集體。凝血級(jí)聯(lián)加固了初始的聚集體，凝血酶與活化的血小板相互促進(jìn)使凝血加強(qiáng)。在病理狀態(tài)下，顆粒內(nèi)容物釋放增加，黏附分子及受體過(guò)度表達(dá)且凝血酶原激活變得紊亂，過(guò)度凝血反應(yīng)造成血栓的形成。

在炎癥性腸病模型中血栓形成增加，Yan等發(fā)現(xiàn)IL-6 與實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎中血小板異?；罨脱“?白細(xì)胞聚集體（PLA）形成增加相關(guān)。輸注IL-6 后活化的血小板及血小板-PLA 數(shù)量明顯增多，血栓形成加速。

1.1 血小板顆粒釋放

血小板作為無(wú)核的細(xì)胞碎片，活化后調(diào)節(jié)周?chē)h(huán)境主要是靠顆粒內(nèi)容物的釋放，內(nèi)容物主要存在于致密顆粒和

α

-顆粒中。致密顆粒內(nèi)含小分子如鈣、ADP、5-HT 和多磷酸鹽，對(duì)血小板的止血功能起決定性作用。鈣有助于凝血級(jí)聯(lián)的進(jìn)行，ADP 則通過(guò)與兩個(gè)G 蛋白偶聯(lián)受體P2Y和P2Y結(jié)合刺激血小板，誘導(dǎo)其變形并增強(qiáng)其他激動(dòng)劑作用。5-HT 與循環(huán)血小板上受體5-HT相互作用，使胞內(nèi)鈣儲(chǔ)存釋放并活化蛋白激酶C，整合素

α

Ⅱb

β

3 暴露并被激活促進(jìn)血小板聚集和血栓形成。多磷酸鹽是強(qiáng)促凝劑，通過(guò)誘導(dǎo)凝血因子Ⅻ（FⅫ）接觸激活參與促凝血反應(yīng)。致密顆粒中釋放的多磷酸鹽與鈣離子復(fù)合以納米顆粒的形式保留在促凝血小板表面，這些納米顆粒啟動(dòng)FⅫ接觸激活并驅(qū)動(dòng)凝血。

α

-顆粒存儲(chǔ)了約300 余種不同活性的蛋白質(zhì)，影響凝血、血管生成和炎癥。其中vWF、纖連蛋白和纖維蛋白原等對(duì)于穩(wěn)定血栓的形成極為重要，還有血小板因子4（PF4）、

β

-血球蛋白（CXCL7）和IL-8 可通過(guò)吸引中性粒細(xì)胞來(lái)調(diào)節(jié)炎癥。血小板中可溶性

N

-乙基馬來(lái)酰亞胺敏感因子附著蛋白受體（SNARE）復(fù)合物是膜融合和顆粒釋放的關(guān)鍵成分。敗血癥和脂多糖（LPS）誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞活化的過(guò)程中，STX1A 表達(dá)增加，STX4與Munc18c 和突觸小體相關(guān)蛋白23（SNAP-23）的結(jié)合顯著增加，這些蛋白在SNARE 復(fù)合物的組裝中發(fā)揮積極作用。抗炎制劑一氧化碳釋放分子-2（CORM-2）能降低SNARE 復(fù)合物的合成而顯著減少血小板顆粒的胞吐，顆粒釋放受到限制，進(jìn)而影響了炎癥和止血作用。Cardenas 等發(fā)現(xiàn)，敲除控制血小板顆粒胞吐功能的Munc13-4 蛋白后，過(guò)敏性哮喘中嗜酸性粒細(xì)胞炎癥減少，血小板活性與血栓形成穩(wěn)定性大幅降低。血小板活化后會(huì)增強(qiáng)葡萄糖的攝入，反過(guò)來(lái)葡萄糖的攝入也會(huì)進(jìn)一步促進(jìn)血小板的活化。葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3（GLUT3）主要定位于血小板

α-

顆粒，是介導(dǎo)葡萄糖進(jìn)入血小板的主要途徑。隨著

α-

顆粒釋放與質(zhì)膜融合活化的血小板葡萄糖攝取激增，易位的GLUT3 為凝塊收縮等現(xiàn)象供給葡萄糖。在K/BxN關(guān)節(jié)炎模型中，GLUT3 的缺失減輕了血小板脫顆粒、擴(kuò)散和凝塊收縮等現(xiàn)象，GLUT3-KO 小鼠體內(nèi)炎性因子IL-1

α

水平降低，存活率增加。

1.2 黏附分子及受體表達(dá)

黏附分子P-選擇素存在于血小板

α

-顆粒和內(nèi)皮細(xì)胞Weibel-Palade 小體（WPB），血漿中可溶形式的P-選擇素加強(qiáng)了血管損傷部位炎癥、血栓形成及凝血之間的聯(lián)系。通過(guò)與主要配體P-選擇素糖蛋白配體-1（PSGL-1）和GP1b

α

相結(jié)合使血小板、內(nèi)皮細(xì)胞和白細(xì)胞緊密聯(lián)接。動(dòng)脈粥樣硬化中發(fā)炎的斑塊P-選擇素高水平表達(dá)。炎癥過(guò)程中P-選擇素持續(xù)增加，促進(jìn)P-選擇素依賴(lài)性的血小板聚集、PLA 形成及內(nèi)皮細(xì)胞黏附。長(zhǎng)期吸煙導(dǎo)致炎癥性細(xì)胞因子增加并誘發(fā)黏膜炎癥。持續(xù)炎癥狀態(tài)促進(jìn)了吸煙誘導(dǎo)的血栓形成。Harding 等發(fā)現(xiàn)吸煙者血小板表面CD40L表達(dá)增加，CD40L 可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞和單核細(xì)胞TF表達(dá)，激活血小板并穩(wěn)定動(dòng)脈血栓。作為公認(rèn)的心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)因子，CD40L 可通過(guò)CD40/TAK1/NF-

κ

B 信號(hào)通路或與

α

Ⅱb

β

3、

α

5

β

1 和

α

M

β

2 結(jié)合誘導(dǎo)血小板活化聚集并對(duì)血栓刺激增強(qiáng)。整合素

α

Ⅱb

β

3 屬于跨膜糖蛋白受體家族，在血小板中高表達(dá)，是止血和動(dòng)脈血栓形成的核心。其獨(dú)特的雙向信號(hào)傳導(dǎo)調(diào)節(jié)可啟動(dòng)并放大一系列細(xì)胞活動(dòng)，如血小板擴(kuò)散、聚集、凝塊收縮和血栓穩(wěn)定。血小板擴(kuò)散和凝塊收縮分別受早期和晚期

α

Ⅱb

β

3 外向內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)調(diào)節(jié)。全身性炎癥已被證明是一種有效促進(jìn)血栓形成的刺激，Murthy 等發(fā)現(xiàn)炎癥小體NLRP3 與布魯頓酪氨酸激酶共同調(diào)節(jié)血小板活化、聚集和體外血栓形成。Qiao 等對(duì)此進(jìn)行了更深層的機(jī)制研究，其結(jié)果顯示NLRP3通過(guò)IL-1

β

影響

α

Ⅱb

β

3 的信號(hào)傳導(dǎo)，NLRP3血小板分泌的IL-1

β

顯著減少，血小板擴(kuò)散和凝塊收縮能力大幅降低，添加IL-1

β

后情況得到改善。

1.3 凝血級(jí)聯(lián)系統(tǒng)激活

凝血始于凝血酶原激活物的形成，一系列凝血因子參與內(nèi)源性或外源性凝血途徑，凝血級(jí)聯(lián)瀑布式激活迅速發(fā)揮止血效應(yīng)。

外源性凝血途徑主要由組織因子調(diào)節(jié)。血管和周?chē)M織受損后釋放組織因子，將其暴露于凝血因子中形成TF-Ⅶa 復(fù)合物，催化凝血因子FⅩ和FⅨ水解活化，凝血酶生產(chǎn)，最終導(dǎo)致血栓形成。腫瘤壞死因子-

α

（TNF-

α

）、LPS 和IL-1 等炎癥因子可促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞TF 的表達(dá)?；罨哪蜃覨Ⅹa 具有促炎特性，可增加IL-6、IL-8、單核細(xì)胞趨化因子-1（MCP-1）和黏附分子及E-選擇素等炎性因子的表達(dá)，并通過(guò)抑制 TNF誘導(dǎo)的 MAPK 磷酸酶表達(dá)，增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞中TNF介導(dǎo)的TF 和E-選擇素過(guò)度表達(dá)。內(nèi)源性凝血起自凝血FⅫ的活化，循環(huán)于血漿中的FⅫ與帶負(fù)電的表面接觸轉(zhuǎn)化為雙鏈活性形式的FⅫa，進(jìn)一步激活凝血因子FⅪ成為FⅪa，由此啟動(dòng)內(nèi)源性凝血。氯化鐵誘導(dǎo)頸動(dòng)脈和腸系膜動(dòng)脈血栓形成的實(shí)驗(yàn)中，F(xiàn)Ⅻ的缺失有效減少了小鼠體內(nèi)的血栓形成。流行病學(xué)調(diào)查顯示血漿中FⅫ/FⅫa 的水平與動(dòng)脈血栓形成相關(guān)，冠心病和心肌梗死患者血漿中FⅫa 循環(huán)水平增加，凝血接觸系統(tǒng)似乎被激活。接觸系統(tǒng)能夠助長(zhǎng)阿爾茨海默?。ˋD），AD 是一種以錯(cuò)誤折疊的

β

淀粉樣蛋白（A

β

）累積為主要病理特征的神經(jīng)炎癥。錯(cuò)誤折疊的蛋白能夠激活FⅫ，AD 小鼠模型和患者血漿中FⅫa 增加，并呈現(xiàn)高凝狀態(tài)。FⅫa 可將血漿前激肽酶轉(zhuǎn)化為激肽酶，使高分子量激肽原釋放緩激肽。緩激肽是一種有效的促炎肽，遺傳性血管水腫實(shí)驗(yàn)證明緩激肽與FⅫa 活性成正相關(guān)。在RA 中也有相似報(bào)道。

凝血酶是凝血級(jí)聯(lián)的核心蛋白，將可溶性纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗艿睦w維蛋白，穩(wěn)固血栓。凝血酶不僅體內(nèi)最強(qiáng)的血小板激動(dòng)劑之一，還能影響免疫細(xì)胞的功能。它通過(guò)蛋白酶激活受體4（PAR）激活血小板，活化的血小板促進(jìn)白細(xì)胞向內(nèi)皮損傷部位遷移。Kaplan 等證實(shí)PAR小鼠血小板對(duì)凝血酶的刺激毫無(wú)反應(yīng)，血栓穩(wěn)定性顯著降低且白細(xì)胞募集和遷移也受到干擾。凝血酶刺激血液中樹(shù)突狀細(xì)胞表達(dá)PAR，隨后分泌細(xì)胞因子，如單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）、IL-10 和IL-12。然而凝血反應(yīng)和炎癥反應(yīng)同時(shí)也受到這些因子的調(diào)控。

2 血小板-內(nèi)皮細(xì)胞相互作用

血栓形成是一個(gè)多分子參與的復(fù)雜過(guò)程，內(nèi)皮細(xì)胞是其中不可或缺的一部分。其完整性是維持血管穩(wěn)態(tài)的必備條件，血管內(nèi)血漿和管外間質(zhì)的流體平衡主要靠?jī)?nèi)皮細(xì)胞維持。血管內(nèi)皮受損常見(jiàn)于各類(lèi)炎性疾病，可導(dǎo)致一系列并發(fā)癥如血栓形成和組織水腫，同時(shí)血管張力同樣受到影響。血小板與內(nèi)皮細(xì)胞通過(guò)表面受體和細(xì)胞因子等信號(hào)傳導(dǎo)途徑共同促進(jìn)血栓的形成。

內(nèi)皮細(xì)胞和血小板之間有黏附依賴(lài)性和非依賴(lài)性的相互作用。血小板經(jīng)體外活化數(shù)秒后表達(dá)CD40L 且在體內(nèi)形成血栓，血小板上的CD40L 誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞分泌趨化因子并表達(dá)黏附分子，從而在損傷部位產(chǎn)生白細(xì)胞募集和外滲的信號(hào)。炎癥因子TNF-

α

和IL-1

β

能有效激活內(nèi)皮細(xì)胞NF-

κ

B信號(hào)級(jí)聯(lián)，驅(qū)動(dòng)NF-

κ

B 的靶基因黏附分子的表達(dá)。血管細(xì)胞黏附分子-1（V-CAM-1）、胞間黏附分子-1（I-CAM-1）和E-選擇素介導(dǎo)炎癥細(xì)胞進(jìn)入血管壁。TNF 超家族另一個(gè)成員LIGHT 是內(nèi)皮細(xì)胞中黏附分子和趨化因子的有效誘導(dǎo)劑，可刺激內(nèi)皮細(xì)胞和單核細(xì)胞發(fā)生炎癥。Otterdal 等通過(guò)檢測(cè)急性心肌梗死患者的血栓和體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)，血小板被激活后能持續(xù)釋放LIGHT，發(fā)揮致炎作用?；罨难“宀粌H參與凝血還可加重血管炎癥反應(yīng)。類(lèi)似結(jié)果在肺動(dòng)脈高壓（PAH）和慢性血栓栓塞性肺動(dòng)脈高壓（CTEPH）患者中亦有發(fā)現(xiàn)。CTEPH 和PAH 患者體內(nèi)高反應(yīng)性血小板誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)V-CAM-1，V-CAM-1 是內(nèi)皮細(xì)胞炎癥的關(guān)鍵分子。活化的血小板借此增強(qiáng)了肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)，促進(jìn)肺血管中血栓的形成。敗血癥中血小板衍生的外泌體通過(guò)NADPH 氧化酶依賴(lài)性超氧化物的釋放誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞Caspase-3活化并凋亡，造成膿毒性血管功能障礙。Nhek等研究發(fā)現(xiàn)，SLE 患者血小板活性增加且通過(guò)IL-1

β

途徑誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞活化，增強(qiáng)了與血小板的黏附情況，促炎基因IL-8 和細(xì)胞間黏附分子-1（I-CAM-1）表達(dá)上調(diào)。高反應(yīng)性血小板黏附和內(nèi)皮細(xì)胞活化可能代表了通過(guò)內(nèi)皮活化引起血栓并發(fā)癥的各類(lèi)疾病共同發(fā)病機(jī)制。

3 血小板-白細(xì)胞相互作用

血小板不單參與凝血系統(tǒng)的工作，它還在先天和適應(yīng)性免疫中起到積極作用。與不同類(lèi)型的白細(xì)胞接觸是血小板發(fā)揮其免疫作用的先決條件。作為炎癥型血栓形成的標(biāo)志物，體內(nèi)和局部炎癥部位形成的PLA 在多種疾病中增加。Wang等通過(guò)敲除白細(xì)胞整合素Mac-1 及GPIb

α

的Mac-1 結(jié)合位點(diǎn)突變小鼠證實(shí)，白細(xì)胞整合素Mac-1 通過(guò)與血小板GPIb

α

的相互作用調(diào)節(jié)血栓形成。血小板-白細(xì)胞相互作用可能通過(guò)增加TF 的表達(dá)使纖維蛋白沉積，這一點(diǎn)在狒狒動(dòng)脈血栓形成模型中得到驗(yàn)證。體外研究表明多形核白細(xì)胞（PMN）受P-選擇素刺激后能夠產(chǎn)生TF，這一結(jié)果支持炎癥細(xì)胞與血小板相互作用與纖維蛋白沉淀和血栓存在相關(guān)性。

中性粒細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白酶有助于血栓形成，在中性粒細(xì)胞-血小板相互作用過(guò)程中，組織蛋白酶G 和彈性蛋白酶影響凝血因子Ⅹ以促進(jìn)凝血。中性粒細(xì)胞胞外殺菌網(wǎng)絡(luò)（NETs）是富集于炎癥部位的DNA 纖維網(wǎng)，由組蛋白和抗菌蛋白組成，其促進(jìn)血栓形成主要是通過(guò)組蛋白與vWF 結(jié)合從而激活血小板?；罨难“逋ㄟ^(guò)GPIb 繼續(xù)與中性粒細(xì)胞結(jié)合并進(jìn)一步促進(jìn)NETosis（中性粒細(xì)胞的炎性細(xì)胞死亡方式），在這種惡性循環(huán)中血栓形成加重。新型冠狀病毒肺炎（COVID-19）、動(dòng)脈粥樣硬化（AS）和SLE等炎性疾病中NETs可能對(duì)血栓形成起決定性作用。

近期體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明活化血小板釋放的趨化因子CXCL4 可誘導(dǎo)表達(dá)CCR1 單核細(xì)胞遷移。動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的溶血磷脂酸在體外可激活血小板，促進(jìn)血小板-單核細(xì)胞聚集體形成，可能刺激體內(nèi)炎癥反應(yīng)和血栓形成加劇。單核細(xì)胞，樹(shù)突狀細(xì)胞和中性粒細(xì)胞被血小板釋放的可溶性炎性介質(zhì)CCL5、CXCL4 和CXCL7 激活并遷移至受損部位可進(jìn)一步加重動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展。

4 血小板-內(nèi)皮細(xì)胞-白細(xì)胞相互作用

白細(xì)胞廣泛參與炎癥反應(yīng)中并與血小板和內(nèi)皮細(xì)胞相互作用共同促進(jìn)免疫血栓形成。

炎癥期間，血小板釋放5-HT 激活內(nèi)皮細(xì)胞WPB 分泌相關(guān)細(xì)胞因子，促進(jìn)白細(xì)胞黏附與募集。連接黏附分子（JAM）由白細(xì)胞、血小板和內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)，在炎癥刺激下，JAM 上調(diào)且在細(xì)胞表面表達(dá)，JAM-A 和JAM-C 促進(jìn)活化內(nèi)皮細(xì)胞上的白細(xì)胞募集，同時(shí)JAM-C 支持白細(xì)胞在血小板上的黏附及隨后的跨內(nèi)皮遷移。Marques 等發(fā)現(xiàn)在代謝綜合征全身性炎癥的環(huán)境下，PLA 通過(guò)CX3CL1/CX3CR1 軸黏附于內(nèi)皮細(xì)胞。中性粒細(xì)胞主要通過(guò)PSGL-1 或CD11b/CD18（MAC-1）與血小板P-選擇素結(jié)合，進(jìn)而向內(nèi)皮遷移，通過(guò)CD11b/CD18 與已活化并構(gòu)成血栓的血小板形成牢固的黏附，從而促進(jìn)中性粒細(xì)胞與沉積在血管損傷部位的血小板結(jié)合。

血小板可直接與單核細(xì)胞相互作用，使得單核細(xì)胞表面CD40、PSGL-1、CD11b 和CCR2 的表達(dá)增強(qiáng)，進(jìn)一步增加了血小板-單核細(xì)胞聚集體，使更多單核細(xì)胞被募集至內(nèi)皮細(xì)胞。動(dòng)脈粥樣硬化中，活化的血小板會(huì)黏附于內(nèi)皮細(xì)胞，通過(guò)釋放趨化因子CCL5 和CXCL4 增強(qiáng)單核細(xì)胞的黏附和組織浸潤(rùn)。促炎性微環(huán)境增強(qiáng)了血小板的功能和黏附性，導(dǎo)致內(nèi)皮功能障礙和斑塊形成增加。深靜脈血栓形成（DVT）早期白細(xì)胞被大量募集至靜脈內(nèi)皮，隨后髓樣白細(xì)胞表達(dá)TF 引發(fā)凝血。在此期間血小板亦被募集，通過(guò)GPIb 與白細(xì)胞相互作用促進(jìn)白細(xì)胞募集并刺激中性粒細(xì)胞形成NETs 最終加劇DVT 發(fā)生。血小板在炎癥型血栓形成中的作用機(jī)制總結(jié)見(jiàn)表1。

表1 血小板在炎癥型血栓形成中的作用機(jī)制
Tab 1 Function of platelets in thromboinflammation

病理變化具體機(jī)制血小板顆粒異常釋放 炎癥條件下，SNARE 復(fù)合物合成增加[23-24]；GLUT3 易位，活化血小板攝取葡萄糖激增[25]血小板黏附分子及受體異常表達(dá)P-選擇素高表達(dá)，通過(guò)與 PSGL-1 和GP1bα 相結(jié)合使血小板、內(nèi)皮細(xì)胞和白細(xì)胞緊密聯(lián)結(jié)[26]；CD41L 可通過(guò)CD40/TAK1/NF–κB 信號(hào)通路或與αⅡbβ3、α5β1 和αMβ2 結(jié)合誘導(dǎo)血小板活化聚集[31-34]；NLRP3 通過(guò)IL-1β 影響αⅡbβ3的信號(hào)傳導(dǎo)，放大血小板擴(kuò)散、聚集、凝塊收縮等凝血活動(dòng)凝血級(jí)聯(lián)系統(tǒng)過(guò)度激活TNF-α、IL-1 和LPS 等炎癥因子促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)TF，啟動(dòng)外源性凝血途徑[38-39]；凝血酶通過(guò)PAR4 激活血小板，促進(jìn)白細(xì)胞向內(nèi)皮損傷部位遷移，增加血栓穩(wěn)定性[43]內(nèi)皮細(xì)胞過(guò)度活化TNF-α 和IL-1β 有效激活內(nèi)皮細(xì)胞NF-κB 信號(hào)級(jí)聯(lián)，驅(qū)動(dòng)NF-κB 靶基因黏附分子V-CAM-1、I-CAM-1 和E-selectin表達(dá)[48]；活化的血小板表達(dá)CD41L 或釋放LIGHT 均可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞分泌趨化因子并表達(dá)黏附分子[47，49]形成血小板-白細(xì)胞聚集體白細(xì)胞整合素Mac-1 通過(guò)與血小板GPIbα 的相互作用調(diào)節(jié)血栓形成[54]；多形核白細(xì)胞（PMN）受P-選擇素刺激后能夠產(chǎn)生TF，通過(guò)增加TF 表達(dá)使纖維蛋白沉積[56]；中性粒細(xì)胞產(chǎn)生組織蛋白酶G 和彈性蛋白酶影響凝血因子Ⅹ以促進(jìn)凝血[57]；NETs 與vWF 結(jié)合激活血小板，活化的血小板通過(guò)GPIb 繼續(xù)與中性粒細(xì)胞結(jié)合并進(jìn)一步促進(jìn)NETosis[58]血小板-內(nèi)皮細(xì)胞-白細(xì)胞相互作用JAM-A 和JAM-C 均可在炎癥條件下促進(jìn)活化內(nèi)皮細(xì)胞上的白細(xì)胞募集，同時(shí)JAM-C 支持白細(xì)胞在血小板上的黏附以及隨后的跨內(nèi)皮遷移[66]；PLA 通過(guò)CX3CL1/ CX3CR1 軸黏附于內(nèi)皮細(xì)胞[67]；中性粒細(xì)胞向內(nèi)皮遷移主要通過(guò)PSGL-1 或CD11b / CD18（MAC-1）與血小板P-選擇素結(jié)合進(jìn)行[63，68]，通過(guò)CD11b / CD18 與已活化并構(gòu)成血栓的血小板形成牢固的黏附；血小板可直接與單核細(xì)胞相互作用，使得單核細(xì)胞表面CD40，PSGL-1，CD11b 和CCR2 的表達(dá)增強(qiáng)，進(jìn)一步增加了血小板-單核細(xì)胞聚集體，使得更多單核細(xì)胞被募集至內(nèi)皮細(xì)胞處[63]；活化的血小板會(huì)黏附于內(nèi)皮細(xì)胞，通過(guò)釋放趨化因子CCL5 和CXCL4 增強(qiáng)單核細(xì)胞的黏附和組織浸潤(rùn)[70]

5 抗炎癥型血栓形成進(jìn)展

血栓形成與炎癥的密切相關(guān)，白細(xì)胞、血小板和內(nèi)皮細(xì)胞三者相互作用進(jìn)一步放大了細(xì)胞效應(yīng)，在諸如動(dòng)脈粥樣硬化、敗血癥和SLE 等疾病中至關(guān)重要。時(shí)至今日，單純針對(duì)血小板的藥物已不足以應(yīng)對(duì)多因素造成的血栓形成，靶向如炎癥和內(nèi)皮損傷等方面的新型藥物將有助于臨床更好地治療相關(guān)頑疾。

姜黃素是一種具有抗血栓形成活性的多酚類(lèi)化合物，其作用靶點(diǎn)主要涉及血小板和白細(xì)胞。姜黃素可抑制花生四烯酸、腎上腺素和膠原蛋白誘導(dǎo)的血小板聚集，劑量依賴(lài)性地減少血小板中血栓素的形成以抵抗花生四烯酸誘導(dǎo)的聚集。此外它還可通過(guò)影響環(huán)氧合酶活性及阻斷鈣信號(hào)發(fā)揮作用。使用姜黃素預(yù)處理血小板或內(nèi)皮細(xì)胞后可降低凝血酶或TNF-

α

誘導(dǎo)的P-selectin 表達(dá)，并減少了白細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞和白細(xì)胞-血小板間的黏附作用。鑒于姜黃素的抗血栓特性，已有研究開(kāi)始將其制成載有姜黃素的纖維蛋白原納米顆粒治療癌癥，結(jié)果表明該納米顆粒可能是一種很有前途的癌癥治療藥。

動(dòng)脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血（SAH）中免疫細(xì)胞持續(xù)招募加強(qiáng)了免疫性血栓的形成，使細(xì)胞黏附分子持續(xù)激活血小板形成微血栓。臨床研究顯示SAH 中不僅凝血級(jí)聯(lián)功能不正常，炎癥反應(yīng)也異?；钴S。法舒地爾能顯著改善SAH 預(yù)后，作為Rho 激酶抑制劑可阻斷多種SAH 相關(guān)的病理通路，包括內(nèi)皮功能障礙，炎癥和白細(xì)胞活化等。尼莫地平與低劑量肝素合用的臨床數(shù)據(jù)表明SAH患者出院率有所增加。作為鈣離子通道阻滯劑，尼莫地平可減少白細(xì)胞浸潤(rùn)，而肝素可有效減輕血管梗塞。雖然具體作用機(jī)制尚不明確，但此類(lèi)研究表明抗炎和抗凝合并治療具有一定的潛力。

脾臟酪氨酸激酶（Syk）在各類(lèi)造血細(xì)胞中均有表達(dá)，作為細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子，其在免疫系統(tǒng)中的作用備受關(guān)注。體外實(shí)驗(yàn)證明炎癥和血小板通路交匯于Syk。Syk 不僅在血小板中傳遞高剪切應(yīng)力誘導(dǎo)的信號(hào)，還可促進(jìn)白細(xì)胞向發(fā)炎和受損血管募集。在活化內(nèi)皮細(xì)胞中可調(diào)節(jié)選擇素依賴(lài)的白細(xì)胞黏附。白細(xì)胞

β

2 整合素Mac-1和血小板受體GPIb

α

通過(guò)Syk 造成伴有內(nèi)皮剝脫、血小板沉積和白細(xì)胞募集的血管損傷。具高度選擇性的新型Syk 抑制劑PRT060318 在多個(gè)動(dòng)物模型中表現(xiàn)出了卓越的抗血栓功效，此外明顯抑制了血管損傷時(shí)白細(xì)胞-血小板依賴(lài)性反應(yīng)，包括炎性細(xì)胞招募和新生內(nèi)膜形成。治療動(dòng)脈粥樣硬化小鼠模型的結(jié)果顯示，PRT060318 能減少36%的病變面積而不改變白細(xì)胞、血紅素和血小板數(shù)量，證明Syk 參與了急慢性動(dòng)脈血管損傷。從炎癥和血栓形成交點(diǎn)切入，Syk 有潛力成為新型抗血栓炎癥的靶點(diǎn)。

Senchenkova 等發(fā)現(xiàn)AnxA1-Fpr2/ALX 信號(hào)通路作為血小板功能的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑還有促進(jìn)炎癥消退的作用。臨床數(shù)據(jù)顯示急性缺血性中風(fēng)患者血漿中抗炎/可分解膜聯(lián)蛋白A1（AnxA1）水平降低，給予AnxA1 后可有效預(yù)防腦部血栓炎癥和中風(fēng)后血栓形成的發(fā)展，減少了卒中后血小板對(duì)腦部發(fā)炎內(nèi)皮細(xì)胞的黏附并改變了血小板-白細(xì)胞相互作用。通過(guò)AnxA1-Fpr2 / ALX 途徑，AnxA1 外源性給藥減輕了以血小板為主要靶標(biāo)的免疫血栓形成。有希望用于治療缺血再灌注的損傷和降低腦血栓形成風(fēng)險(xiǎn)。

6 展望

綜上所述，炎癥和血栓形成關(guān)系密切，血小板在免疫系統(tǒng)和凝血系統(tǒng)的串聯(lián)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。大量研究從不同分子機(jī)制揭示了其在免疫血栓形成中的作用，鑒于炎癥病理狀態(tài)和血栓形成過(guò)程中的復(fù)雜性，血小板在其中仍有著未知且有待發(fā)掘的潛力。筆者認(rèn)為機(jī)體作為一個(gè)統(tǒng)一的循環(huán)整體，免疫系統(tǒng)和凝血系統(tǒng)間存在巨大的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，血小板不僅能在凝血系統(tǒng)中發(fā)揮作用還兼具免疫細(xì)胞的部分功能，遍布機(jī)體的內(nèi)皮細(xì)胞橋接血小板和免疫細(xì)胞，為免疫和凝血系統(tǒng)相互作用提供平臺(tái)。目前尚需更深入、更廣泛的研究闡述兩系統(tǒng)中其他成分的功能及作用機(jī)制，構(gòu)建完整的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，為血栓這一高發(fā)性并發(fā)癥的治療提供新的思路和靶點(diǎn)。