粵西某市液態(tài)奶中壬基酚的污染調(diào)查

劉海卿，伍尚森，程仕群

廣東產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院，廣東佛山 528300

0 引言

我國近年來工業(yè)發(fā)展迅速，隨著工業(yè)“三廢”排放加劇，污染物會(huì)對(duì)奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)周圍的土壤、空氣、水源造成污染。2021年10月國家生態(tài)環(huán)境部發(fā)布了《新污染物治理行動(dòng)方案（征求意見稿）》，壬基酚作為高危污染物，被禁止用于農(nóng)藥助劑。壬基酚屬于酚類外源性內(nèi)分泌干擾物之一，是商業(yè)第二大使用量的非離子表面活性劑——烷基酚聚乙酰醚的副產(chǎn)物[1]。壬基酚的存在與人類活動(dòng)密切相關(guān)，其高疏水的特性使其在高有機(jī)物的環(huán)境中累計(jì)存在。壬基酚會(huì)破壞腸道屏障和擾亂腸道菌群[2]，李仕旭[3]通過動(dòng)物試驗(yàn)和細(xì)胞試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)壬基酚可以通過核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3通路導(dǎo)致胃黏膜發(fā)生炎癥反應(yīng)。

《2020年中國奶業(yè)質(zhì)量報(bào)告》顯示，2019年全國乳制品產(chǎn)量同比增長(zhǎng)5.6%，液態(tài)奶消費(fèi)量呈逐年增長(zhǎng)趨勢(shì)，因此，開展市售液態(tài)奶中壬基酚污染調(diào)查分析具有重要的意義。本研究在粵西某市采集了共計(jì)100 種市售液態(tài)奶樣本，根據(jù)殺菌方式歸類，分為巴氏殺菌乳和UHT滅菌乳兩類，使用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定了樣品中的壬基酚含量，以了解不同地區(qū)生產(chǎn)的液態(tài)奶中壬基酚含量情況和全國的總體水平，評(píng)價(jià)其安全性，為相關(guān)部門和消費(fèi)者提供參考。

1 試驗(yàn)方法

1.1 樣品采集

2021年上半年在粵西某市的各行政區(qū)采集滅菌乳及巴氏殺菌乳樣品共100 個(gè)，涵蓋利樂枕、屋脊包、百利包、玻璃瓶等不同包裝形態(tài)，涉及25 個(gè)品牌。

1.2 儀器與試劑

液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀（TripleQuad4500），美國Sciex公司；高速冷凍離心機(jī)，美國Sigma公司；電子分析天平，常熟市金羊砝碼儀器有限公司；超純水機(jī)，密理博中國有限公司。

乙腈（色譜純），美國Thermo Fisher Scientific公司；甲醇（色譜純），美國TEDIA公司；壬基酚標(biāo)準(zhǔn)品，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心。

1.3 樣品提取與處理

1.3.1 樣品的制備

取適量樣品混合均勻，密封并標(biāo)明標(biāo)記，于-20 ℃冰箱冷藏保存。

1.3.2 樣品前處理

準(zhǔn)確稱取1 g（精確至0.001 g）樣品于15 mL具塞玻璃試管中，加入0.1 mL同位素內(nèi)標(biāo)混合標(biāo)準(zhǔn)工作液和5 mL乙腈，渦旋混勻，超聲提取15 min，8 000 r/min離心5 min，取上層乙腈相；殘留部分再用5 mL乙腈重復(fù)提取一次，合并乙腈相，置冰箱-20 ℃冷凍2 h，取出于8 000 r/min離心5 min，取上清液待凈化。

取固相萃取柱，使用前用18 mL甲醇活化，6 mL水平衡。將所得上清液加30 mL水稀釋，充分搖勻后以1～2 mL/min的速度上樣，棄去濾液，用12 mL 60%甲醇水溶液（V/V）淋洗，棄去淋洗液，再用6 mL乙腈洗脫，洗脫液于50 ℃用氮?dú)獯抵两伞Ｓ? mL甲醇溶解殘?jiān)?，待測(cè)。

1.4 儀器分析條件

1.4.1 液相色譜條件

色譜柱：BEH-C18（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）；流速：0.2 mL/min；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣體積：5 μL；流動(dòng)相：0.05%氯水，甲醇；梯度洗脫條件見表1。

表1 梯度洗脫程序表

1.4.2 質(zhì)譜分析條件

多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（Multipler Eaction Monitoring，MRM）：電噴霧負(fù)離子模式；電噴霧電壓：-4 500 V；離子源溫度：650 ℃；干燥氣流量：11 L/min；氣簾氣壓力：25 psi；霧化氣壓力：25 psi；輔助氣壓力：55 psi。

2 結(jié)果與討論

2.1 乳制品中壬基酚檢測(cè)結(jié)果及包裝形態(tài)

對(duì)采集的100 份液態(tài)奶樣本中壬基酚含量進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如表2所示。在100 份樣本中，有88 份樣本檢出壬基酚，檢出率為88.00%，平均含量為82.43 μg/kg。

表2 市售液態(tài)奶中壬基酚檢測(cè)結(jié)果

對(duì)不同類型樣本中壬基酚污染狀況進(jìn)一步分析，巴氏殺菌乳中壬基酚含量區(qū)間為7.4～243 μg/kg，平均值為87.06 μg/kg；UHT滅菌乳中壬基酚含量區(qū)間為7.88～262 μg/kg，平均值為77.80 μg/kg。

UHT滅菌乳的包裝形態(tài)均為盒裝，巴氏殺菌乳的包裝形態(tài)較多，涵蓋瓶、杯、袋等多個(gè)品種，巴氏殺菌乳各類包裝形態(tài)的數(shù)量見表3，有部分樣本在包裝上注明了包裝材料的品牌，包括利樂、SIG、EVERPACK。

表3 市售巴氏殺菌乳包裝形態(tài)統(tǒng)計(jì)

2.2 巴氏殺菌乳和UHT滅菌乳中壬基酚含量分布狀況

對(duì)不同類型樣本中壬基酚污染狀況進(jìn)行進(jìn)一步分析，UHT滅菌乳樣本中壬基酚檢出率和含量均高于巴氏殺菌乳。對(duì)其分布狀況進(jìn)行分析，不同種類的樣品測(cè)定含量分布區(qū)間見圖1。結(jié)果多集中在檢出限7.4～50.0 μg/kg之間，隨著檢出值增大，檢出樣本呈遞減趨勢(shì)。

圖1 巴氏殺菌乳和UHT滅菌乳中壬基酚污染情況

2.3 不同人群對(duì)壬基酚的膳食暴露評(píng)估

按照世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法原則進(jìn)行壬基酚膳食暴露評(píng)估。暴露評(píng)估所用的不同人群的食物消費(fèi)量數(shù)據(jù)和年齡、性別、體質(zhì)量等數(shù)據(jù)來自2002年中國居民營(yíng)養(yǎng)與健康狀況調(diào)查數(shù)據(jù)庫[4，5]。將總體目標(biāo)人群按照年齡分為10組，并按照性別劃分為20 個(gè)性別年齡組。其中，液態(tài)奶消費(fèi)數(shù)據(jù)來自于我國最近一次居民營(yíng)養(yǎng)與健康狀況監(jiān)測(cè)（2010—2013年）。對(duì)于每一性別年齡組，按照公式E=CT/W進(jìn)行暴露評(píng)估研究，C代表組人群對(duì)液態(tài)奶的平均攝入量，T代表液態(tài)奶中壬基酚的平均含量，W代表該組人群的平均體質(zhì)量，E代表該組人群通過液態(tài)奶對(duì)壬基酚的總體平均攝入量。

如表4所示，不同性別年齡組中，31～45歲男性消費(fèi)人群通過液態(tài)奶對(duì)壬基酚的攝入量最低，2～4歲男性消費(fèi)通過液態(tài)奶對(duì)壬基酚的攝入量最高，一般人群對(duì)壬基酚的平均攝入量為0.08 μg/kg·d，消費(fèi)人群對(duì)壬基酚的平均攝入量為0.34μg/kg·d?？傮w分析原因?yàn)閶胗變簩?duì)液態(tài)奶等乳制品的消費(fèi)量相對(duì)較高，同時(shí)體重遠(yuǎn)低于成年人和老年人。目前，壬基酚的毒性資料還不完全，僅丹麥環(huán)境保護(hù)局提出了壬基酚的每日耐受攝入量TDI值（5 μg/kg·bw），本次研究的壬基酚的平均攝入量數(shù)據(jù)遠(yuǎn)低于該TDI值，說明目前通過液態(tài)奶途徑攝入的壬基酚量較少，風(fēng)險(xiǎn)較低。

3 結(jié)論

本研究樣本的主要來源是粵西某市的市場(chǎng)、攤檔、超市和商場(chǎng)，覆蓋了市民購買液態(tài)奶的主要渠道，具有一定代表性，可以大致反映市售液態(tài)奶中壬基酚的污染現(xiàn)狀。

檢測(cè)結(jié)果顯示，液態(tài)奶中壬基酚總檢出率為80.00%，巴氏殺菌乳檢出率為100%，UHT滅菌乳檢出率為76.00%。液態(tài)奶中壬基酚含量最高達(dá)262 μg/kg。被測(cè)的兩種市售液態(tài)奶樣品中均有壬基酚殘留情況，檢出值集中在7.4～100 μg/kg之間。

鑒于液態(tài)奶中壬基酚污染情況普遍，兩類銷售量較高的類型均涉及的情況，建議相關(guān)研究者對(duì)其他類型的乳制品，如發(fā)酵乳、調(diào)制乳、乳酪等的污染情況開展調(diào)查，以獲更多污染數(shù)據(jù)，做出更加精確、全面的暴露評(píng)估，為風(fēng)險(xiǎn)管理提供可靠的依據(jù)。

液態(tài)奶中殘留酚類物質(zhì)的來源以及是否與生產(chǎn)加工流程有關(guān)值得進(jìn)一步研究，提醒有關(guān)部門進(jìn)一步加強(qiáng)和完善管理，建立健全相關(guān)的限量標(biāo)準(zhǔn)，確保動(dòng)物性食品的食用安全。