急性上呼吸道感染性疾病患兒血清中PU.1、IL-4表達(dá)及其臨床診斷價(jià)值

郭朝金，軒妍

兒童急性上呼吸道感染性疾病是由真菌、支原體、病毒、細(xì)菌等多種病原菌引發(fā)的一種炎癥性疾病。兒童由于免疫力較弱，屬于易感人群。如不及時(shí)診治，常引發(fā)鼻咽部感染，導(dǎo)致血行傳播，進(jìn)而引發(fā)不同程度的并發(fā)癥。故快速、早期診斷，給予針對(duì)性治療措施是臨床治療及改善患兒預(yù)后的關(guān)鍵。目前，體格及病史檢查結(jié)合外周血細(xì)胞技術(shù)為臨床診斷兒童急性上呼吸道感染的常用手段。亦有研究顯示，新型的炎癥標(biāo)志物可在一定程度上提高該病診療水平［1-2］。PU.1為Est家族最重要的一種轉(zhuǎn)錄因子，能夠?qū)h9細(xì)胞表型進(jìn)行特異性增強(qiáng)，且是Th9細(xì)胞分化所必需的轉(zhuǎn)錄因子，而Th9細(xì)胞可分泌促炎細(xì)胞因子，進(jìn)而引發(fā)炎癥，促進(jìn)疾病進(jìn)展［3-4］。白細(xì)胞介素4（interleukin-4，IL-4）作為一種炎性因子，可介導(dǎo)免疫，促進(jìn)IgE分泌，在感染性疾病中呈異常表達(dá)，敏感度較高［5-6］。但是目前探究急性上呼吸道感染性疾病患兒血清中PU.1和IL-4表達(dá)的研究相對(duì)較少，仍處于初始研究階段。本研究對(duì)急性上呼吸道感染性疾病患兒血清PU.1和IL-4表達(dá)進(jìn)行分析并探究其臨床診斷價(jià)值，為臨床早期干預(yù)提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年7月—2021年7月在本院接受治療的急性上呼吸道感染疾病患兒78例作為疾病組，并選取同期體檢的健康兒童78例作為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）疾病組患兒均符合《內(nèi)科學(xué)》［7］中急性上呼吸道感染性疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)。（2）患兒家屬配合本研究。（3）疾病組患兒檢查前1 d未服用抗生素治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并內(nèi)分泌系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)疾病。（2）同時(shí)參與其他臨床研究。（3）合并肝腎功能障礙。（4）合并其他炎癥性疾病。本研究經(jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患兒家長(zhǎng)對(duì)本研究?jī)?nèi)容知情并簽署同意書(shū)。

1.2 方法 抽取患者清晨空腹靜脈血3 mL，常溫下靜置1 h，以3 000 r/min離心15 min。取血清，將其置于-80℃冰箱內(nèi)保存。以熒光定量PCR檢測(cè)血清PU.1相對(duì)表達(dá)量，具體操作步驟按照說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格進(jìn)行，試劑盒購(gòu)自HaiGene公司。以酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)血清IL-4、IL-6、C-反應(yīng)蛋白（CRP）、降鈣素原（PCT）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）水平，試劑盒購(gòu)自江蘇江萊生物科技有限公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）描述，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例（%）表示，行χ2檢驗(yàn)。通過(guò)繪制受試者工作特征（ROC）曲線(xiàn)評(píng)估血清IL-4、PU.1表達(dá)用于診斷上呼吸道感染性疾病的診斷價(jià)值。多因素Logistic回歸分析上呼吸道感染性疾病發(fā)生的危險(xiǎn)因素。以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組一般資料比較2組年齡、性別比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），疾病組患兒血清IL-6、CRP、PCT、TNF-α水平明顯高于對(duì)照組（P＜0.01）。見(jiàn)表1。

Tab.1 Comparison of general data between the two groups表1 2組一般資料比較 （n=78）

2.2 血清IL-4水平及PU.1相對(duì)表達(dá)量 疾病組血清IL-4水平及PU.1相對(duì)表達(dá)量均明顯高于對(duì)照組（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

Tab.2 Comparison of serum IL-4 level and relative expression of PU.1 between the two groups表2 2組血清IL-4水平及PU.1相對(duì)表達(dá)量比較（±s）

Tab.2 Comparison of serum IL-4 level and relative expression of PU.1 between the two groups表2 2組血清IL-4水平及PU.1相對(duì)表達(dá)量比較（±s）

＊＊P＜0.01。

組別對(duì)照組疾病組t n 78 78 IL-4（ng/L）6.74±1.78 8.43±1.78 5.937＊＊PU.1 0.74±0.12 0.82±0.18 3.127＊＊

2.3 IL-4及PU.1對(duì)急性上呼吸道感染性疾病的診斷價(jià)值 繪制ROC曲線(xiàn)評(píng)估血清IL-4水平、PU.1相對(duì)表達(dá)量及聯(lián)合檢測(cè)用于診斷上呼吸道感染性疾病患兒的價(jià)值顯示，兩者聯(lián)合檢測(cè)價(jià)值更高。見(jiàn)圖1、表3。

Fig.1 ROC curve of the relative expression of serum IL-4 and PU.1 in the diagnosis of upper respiratory tract infectious diseases圖1血清IL-4及PU.1相對(duì)表達(dá)量診斷上呼吸道感染性疾病的ROC曲線(xiàn)

Tab.3 Diagnostic value of serum IL-4 and PU.1 for upper respiratory tract infectious diseases表3血清IL-4及PU.1對(duì)上呼吸道感染性疾病的診斷價(jià)值

2.4 上呼吸道感染性疾病發(fā)生的影響因素 以是否發(fā)生上呼吸道感染性疾病為因變量（是=1，否=0），血清IL-4、PU.1、IL-6、CRP、PCT、TNF-α表達(dá)水平為自變量行多因素Logistic回歸分析。結(jié)果顯示，血清IL-4、PU.1、IL-6、CRP、TNF-α水平升高為影響上呼吸道感染性疾病發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P＜0.05）。見(jiàn)表4。

Tab.4 Multivariate Logistic analysis of factors affecting the occurrence of upper respiratory tract infectious diseases表4多因素Logistic回歸分析上呼吸道感染性疾病發(fā)生的影響因素

3 討論

上呼吸道感染性疾病為臨床常見(jiàn)的兒科疾病，可發(fā)生于一年四季，多發(fā)于冬春季節(jié)及氣溫驟變時(shí)［8］。若不能及時(shí)防治，該病可引發(fā)多個(gè)器官感染，導(dǎo)致肺炎、氣管炎、咽喉腫脹及中耳炎等疾病發(fā)生，嚴(yán)重影響患兒健康，因此，早期診斷并給予防治在臨床中具有重要價(jià)值。

3.1 炎性因子在上呼吸道感染性疾病中的作用PCT主要由甲狀腺C細(xì)胞分泌，為前體激素，可作為細(xì)菌感染的診斷標(biāo)志物，能夠預(yù)測(cè)急性上呼吸道感染病情［9］。CRP在組織受到損傷或機(jī)體發(fā)生細(xì)菌感染時(shí)水平明顯上升，而且CRP水平的上升不受免疫功能、性別及年齡等因素的干擾，也不受免疫抑制劑或各種藥物的干擾，為診斷急性上呼吸道感染的重要標(biāo)志物［10］。IL-6為典型的炎性因子，也是臨床診斷上呼吸道感染性疾病的常用指標(biāo)［11］。TNF-α為重要的炎癥介質(zhì)，主要由巨噬細(xì)胞分泌，感染性疾病發(fā)生時(shí)其水平明顯升高［12］。本研究對(duì)急性上呼吸道感染性疾病患兒及體檢健康兒童以上指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)分析，結(jié)果顯示，疾病組患兒血清IL-6、CRP、PCT、TNF-α水平明顯高于對(duì)照組，與陳娟等［13-14］研究基本一致。提示炎性因子參與上呼吸道感染性疾病的發(fā)生。

3.2 血清IL-4水平對(duì)上呼吸道感染性疾病的診斷價(jià)值 以往多需進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)、病毒分離及病毒血清學(xué)檢查等方法才能確定上呼吸道感染病原體，易延誤確診時(shí)間。引入新的血清學(xué)指標(biāo)有利于臨床早期診斷及治療上呼吸道感染患者［15］。因此，本研究通過(guò)檢測(cè)血清學(xué)指標(biāo)，以期為臨床診斷上呼吸道感染性疾病提供參考。IL-4主要由T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，可提升T淋巴細(xì)胞活性，促進(jìn)B細(xì)胞分裂增殖，還能夠分泌IgE，促進(jìn)肥大細(xì)胞增殖［16］。Saggini等［17］研究顯示，中耳炎患者IL-4水平明顯升高，IL-4可參與炎癥反應(yīng)的發(fā)生。本研究通過(guò)對(duì)上呼吸道感染性疾病患兒血清IL-4水平進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示，疾病組血清IL-4水平明顯高于對(duì)照組，與Saggini等［17］研究類(lèi)似，推測(cè)IgE通過(guò)與肥大細(xì)胞的特異性結(jié)合，導(dǎo)致大量生物活性物質(zhì)（白三烯、組胺等）的合成與釋放，促使機(jī)體增加呼吸道黏液分泌量，從而增加上呼吸道感染性疾病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。ROC曲線(xiàn)分析發(fā)現(xiàn)，血清IL-4水平為臨床診斷上呼吸道感染性疾病的有效指標(biāo)，提示檢測(cè)IL-4水平對(duì)早期判斷上呼吸道感染性疾病的發(fā)生有積極意義。

3.3 血清PU.1水平對(duì)上呼吸道感染性疾病的診斷價(jià)值 轉(zhuǎn)錄因子PU.1是Est家族中的一員，能夠活化炎癥相關(guān)的部分受體及相關(guān)細(xì)胞因子［18］。張明海等［19］研究顯示，PU.1可直接結(jié)合IL-9基因啟動(dòng)子，誘導(dǎo)IL-9的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生。郭錦均等［20］研究顯示，PU.1在膿毒癥患兒中呈高表達(dá)，與患兒預(yù)后關(guān)系密切。本研究中，疾病組血清PU.1相對(duì)表達(dá)量較對(duì)照組高，推測(cè)PU.1可能通過(guò)調(diào)控炎性因子IL-4、TNF-α等參與上呼吸道感染性疾病的發(fā)生，具體機(jī)制需深入探討。ROC曲線(xiàn)結(jié)果顯示，PU.1用于疾病診斷有一定的價(jià)值，且血清PU.1、IL-4聯(lián)合檢測(cè)診斷上呼吸道感染性疾病的效果更好。另外，多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，血清IL-4、PU.1、IL-6、CRP、TNF-α表達(dá)水平為上呼吸道感染性疾病發(fā)生的獨(dú)立影響因素。這也提示當(dāng)患兒上述因子水平升高時(shí)應(yīng)加強(qiáng)監(jiān)測(cè)，同時(shí)與臨床癥狀相結(jié)合進(jìn)行診斷，及早干預(yù)，以改善患兒預(yù)后。

綜上所述，急性上呼吸道感染性疾病患兒血清中PU.1、IL-4、IL-6、CRP、PCT、TNF-α表達(dá)水平較高，檢測(cè)血清中PU.1、IL-4水平可能有助于輔助診斷急性上呼吸道感染性疾病。