唐菖蒲伯克霍爾德菌椰毒致病變種污染調(diào)查及其生長與產(chǎn)毒特性分析

李兵，葉青華，趙美平，陳維，黃乙卿，吳清平，張菊梅

（1.華南農(nóng)業(yè)大學食品學院，廣東廣州 510642）（2.廣東省科學院微生物研究所，華南應用微生物國家重點實驗室，廣東省微生物安全與健康重點實驗室，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)業(yè)微生物組學與精準應用重點實驗室，廣東廣州 510070）（3.廣東省微生物分析檢測中心，廣東廣州 510070）

唐菖蒲伯克霍爾德菌椰毒致病變種（Burkholderia gladiolipathovarcocovenenans，BGC），國內(nèi)又稱為椰毒假單胞菌酵米面亞種、椰酵假單胞菌[1,2]，是唐菖蒲伯克霍爾德菌（Burkholderia gladioli）中能引起嚴重食物中毒的致病型，也是迄今我國發(fā)現(xiàn)的發(fā)病率和死亡率最高的食源性致病菌[2,3]。該菌產(chǎn)生一種高度不飽和的三羧酸脂肪酸即米酵菌酸（Bongkrekic Acid）是引起食物中毒和死亡的主要毒性代謝物[4,5]。

米酵菌酸是一種無臭、無味、熱穩(wěn)定的物質(zhì)[6]，受污染的食物具有正常的外觀、氣味和風味，因此，米酵菌酸在食品制備和消費過程中很難被察覺到。由唐菖蒲伯克霍爾德菌椰毒致病變種引起的食物中毒在我國東北地區(qū)、廣西、云南、甘肅、貴州、四川、山東[3]、浙江[7]、及廣東等地皆有發(fā)生，中毒食物有發(fā)酵變質(zhì)的米面制品、變質(zhì)銀耳和長時間泡發(fā)的木耳等。以往由該菌引起的食物中毒多發(fā)生在老少邊窮地區(qū)，近年來由BGC 引發(fā)的食物中毒事件多次出現(xiàn)在經(jīng)濟發(fā)達地區(qū)，導致人們對它的關注度持續(xù)上升。其中，廣東省在2018[8]、2019[9]和2020[10]年連續(xù)三年發(fā)生了因食用被污染變質(zhì)的濕米粉和長時間泡發(fā)的木耳而引起米酵菌酸中毒事件。因此，唐菖蒲伯克霍爾德菌椰毒致病變種及其產(chǎn)生的米酵菌酸已經(jīng)對我國公民健康和食品安全造成嚴重威脅。而目前對于該菌的研究報道，仍多限于疾病暴發(fā)與米酵菌酸的生物合成[11,12]及其毒理[13,14]，對其在食品中的污染狀況、存活與產(chǎn)毒特性及機制鮮有報道。

本研究調(diào)查了2020 年廣州市市售米面、淀粉制品和木耳、銀耳中唐菖蒲伯克霍爾德菌椰毒致病變種的污染情況，分析了在不同培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間、pH 和NaCl 濃度下該菌的生長和產(chǎn)毒情況，旨在掌握BGC 在食品中的分布規(guī)律與生長及產(chǎn)毒特性，對預防和控制食品中唐菖蒲伯克霍爾德菌椰毒致病變種的污染提供借鑒和參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品

根據(jù)GB 4789.1-2016[15]中樣品的采集規(guī)則進行采樣。于2020 年8～9 月，從廣州市越秀區(qū)、荔灣區(qū)、增城區(qū)、從化區(qū)，采集四大類食品樣品共100 份，其中淀粉類73 份，面粉類12 份，濕木耳9 份，濕銀耳6 份。樣品均采自當?shù)爻谢蚴袌?，同一地點同類樣品只采集一份。采樣時為避免二次污染，對于小包裝規(guī)格的產(chǎn)品整包購買，大包裝、散裝規(guī)格的產(chǎn)品則從最新開封的產(chǎn)品中取適量樣品后裝入無菌均質(zhì)袋并密閉包裝，每份樣品至少500 g。

1.1.2 儀器和試劑

Synergy HTX 多功能微孔板檢測儀，美國伯騰儀器有限公司；MALDI-TOF MS AutoflexSpeed 基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜微生物鑒定儀，德國布魯克公司；生物安全柜，Thermo scientific；ACQUITYTM 超高效液相色譜儀和Waters XevoTM TQ MS 三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀，Waters 公司。

GVC 增菌液、馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養(yǎng)基、改良馬鈴薯葡萄糖瓊脂（mPDA）、PCFA 培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖半固體瓊脂培養(yǎng)基、BHI、PD、LB 肉湯、玻璃紙，廣東環(huán)凱微生物科技有限公司；米酵菌酸標準品（1 mg/mL），Sigma Aldrich；甲醇和乙腈（HPLC級），德國Merck 公司；甲酸（HPLC 級），德國CNW公司；氨水（分析純），廣州化學試劑廠；MAX 固相萃取小柱（2 mg/mL），Waters 公司；超純水（18.2 MΩ·cm），實驗室Milli-Q 自制。

1.1.3 標準菌株

唐菖蒲伯克霍爾德氏菌（CICC 10574）、唐菖蒲伯克霍爾德氏菌（ATCC 33664）由廣東省科學院微生物研究所菌種保藏中心提供。

1.2 實驗方法

1.2.1 唐菖蒲伯克霍爾德菌的分離和鑒定

參照GB 4789.29-2020 的方法稍許修改[16]，取25 g 米面、淀粉制品樣品或1 g 濕木耳、銀耳加入到225 mL 或20 mL GVC 增菌液中，37 ℃增菌培養(yǎng)24～48 h 后，分別劃線接種于mPDA 平板、PCFA 平板，再分別挑取5個以上典型或可疑菌落（低于5個全選），接種于PDA 平板，從純培養(yǎng)的PDA 平板上挑取菌落用MALDI-TOF MS 進行菌種鑒定。

1.2.2 產(chǎn)毒培養(yǎng)和米酵菌酸的測定

產(chǎn)毒培養(yǎng)參照GB 4789.29-2020 的方法[16]：將鑒定為唐菖蒲伯克霍爾德菌的菌株接種于PDA 平板，37 ℃培養(yǎng)24 h 后，挑取適量菌苔于3 mL 無菌生理鹽水中，充分渦旋，配成1 麥氏濃度的菌懸液（約為108CFU/mL），吸取0.5 mL 滴在鋪好無菌玻璃紙的直徑150 mm 的馬鈴薯葡萄糖半固體平板上，涂布均勻，26 ℃培養(yǎng)5 d。培養(yǎng)結(jié)束后，取下帶菌的玻璃紙，將半固體平板置于100 ℃流動蒸汽中滅菌30 min，待室溫冷卻后，置于-20 ℃冰箱過夜。過夜后將冰凍好的半固體平板于室溫融化，吸出凍融液過濾至無菌試管中（此為毒素粗提液），4 ℃下避光保存。

取粗提的毒素上清液50 μL，使用超高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法進行米酵菌酸測定[12-17]。先將20 μL 米酵菌酸標準系列工作液注入液相色譜儀中，測定相應的峰面積，以標準工作液的濃度為橫坐標，以峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。再將毒素粗提液制成的試樣溶液注入液相色譜儀中，以保留時間定性，同時記錄峰面積，根據(jù)標準曲線得到待測液中米酵菌酸濃度。

1.2.3 生長曲線的測定

選取唐菖蒲伯克霍爾德菌標準菌株ATCC33664和CICC10574，進行生長曲線的測定。菌株分別接種于PDA 平板，37 ℃培養(yǎng)24 h，挑取單菌落接種至10 mL BHI，于37 ℃，200 r/min 培養(yǎng)約24 h；取10 μL菌液轉(zhuǎn)移到10 mL BHI 液體培養(yǎng)基中混勻（稀釋1 000 倍），取200 μL 稀釋后的菌液加到96 孔板樣品孔中（8 個平行孔），同時以BHI 肉湯為空白對照，置于多功能微孔板檢測儀中進行測定。結(jié)果以培養(yǎng)時間為橫坐標，OD600值為縱坐標，繪制生長曲線。

1.2.4 培養(yǎng)條件對BGC 生長和產(chǎn)毒的特性分析

1.2.4.1 菌株的活化

將保存于4 ℃菌株ATCC33664接種于PDA平板，37 ℃培養(yǎng)24 h，挑取單菌落接種于BHI 肉湯中，于37 ℃，200 r/min，培養(yǎng)至對數(shù)期后待用。

1.2.4.2 培養(yǎng)基對BGC 生長和產(chǎn)毒的分析

取10 μL 培養(yǎng)至對數(shù)期的菌液分別接種至10 mL PD、BHI、LB 液體培養(yǎng)基，37 ℃培養(yǎng)48 h，培養(yǎng)結(jié)束后測定菌液的OD600值。同時，將培養(yǎng)至對數(shù)期的菌液配成1 麥氏濃度的菌懸液分別涂布到鋪有玻璃紙的PD 半固體平板、BHI 半固體平板與LB 半固體平板上，26 ℃培養(yǎng)5 d，培養(yǎng)結(jié)束后進行米酵菌酸的含量測定。

1.2.4.3 培養(yǎng)時間對BGC 產(chǎn)毒的分析

將培養(yǎng)至對數(shù)期的菌液配成1 麥氏濃度的菌懸液在鋪有玻璃紙的馬鈴薯葡萄糖半固體平板上涂布均勻后，26 ℃培養(yǎng)1、2、3、4、5、6、7、10、15 d，培養(yǎng)結(jié)束后進行米酵菌酸的含量測定。

1.2.4.4 溫度對BGC 生長和產(chǎn)毒的分析

取10 μL 培養(yǎng)至對數(shù)期的菌液接種于10 mL BHI液體培養(yǎng)基，4、15、20、25、30、37、42 ℃培養(yǎng)48 h，培養(yǎng)結(jié)束后測定各溫度下菌液的OD600值。同時，將配成1 麥氏濃度的菌懸液涂布于鋪有玻璃紙的馬鈴薯葡萄糖半固體平板，4、15、20、25、30、37、42 ℃培養(yǎng)5 d，培養(yǎng)結(jié)束后進行米酵菌酸的含量測定。

1.2.4.5 pH 對BGC 生長和產(chǎn)毒的分析

將BHI 與PD 液體培養(yǎng)基及馬鈴薯葡萄糖半固體培養(yǎng)基pH 值分別調(diào)至1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10.0、11.0，取10 μL 培養(yǎng)至對數(shù)期的菌液分別接種于BHI 與PD 液體培養(yǎng)基，37 ℃培養(yǎng)48 h，培養(yǎng)結(jié)束后測定各pH 值下菌液的OD600值。同時，將配成1 麥氏濃度的菌懸液分別涂布于鋪有玻璃紙調(diào)好pH 的馬鈴薯葡萄糖半固體平板，26 ℃培養(yǎng)5 d，培養(yǎng)結(jié)束后進行米酵菌酸的含量測定。

1.2.4.6 NaCl 濃度對BGC 生長和產(chǎn)毒的分析

在BHI 與PD 液體培養(yǎng)基及馬鈴薯葡萄糖半固體培養(yǎng)基中分別添加質(zhì)量濃度為0、0.005、0.01、0.015、0.02、0.025、0.03、0.035、0.04、0.05、0.06 g/mL 的NaCl 的溶液，取10 μL 培養(yǎng)至對數(shù)期的菌液分別接種于10 mL BHI 與PD 液體培養(yǎng)基，37 ℃培養(yǎng)48 h，培養(yǎng)結(jié)束后測定各NaCl 濃度下菌液的OD600值。同時，將配成1 麥氏濃度的菌懸液涂布于鋪有玻璃紙?zhí)砑覰aCl 的馬鈴薯葡萄糖半固體平板，26 ℃培養(yǎng)5 d，培養(yǎng)結(jié)束后進行米酵菌酸的含量測定。

1.2.5 數(shù)據(jù)處理

每個試驗重復3 次，通過IBS SPSS 24.0 軟件進行數(shù)據(jù)分析，并用Duncan 檢驗比較組間差異，采用Excel 2010、Origin 2019 軟件制表作圖。

2 結(jié)果與討論

2.1 BGC 的污染調(diào)查

從100 份樣品中共檢出4 份唐菖蒲伯克霍爾德菌陽性樣品，陽性率為4%，按照食品類型分析（表1），木耳[18]、銀耳及淀粉類樣品的檢出率分別為20%、14.29%、1.33%，面粉類樣品則無檢出。4 份陽性樣本共分離出12 株唐菖蒲伯克霍爾德菌，經(jīng)產(chǎn)毒培養(yǎng)與毒素測定，1 株（S6，分離自木耳）米酵菌酸含量為14.9 μg/mL，其它菌株的含量均＜0.005 μg/mL。需要注意的是，兩株唐菖蒲伯克霍爾德菌標準株中，CICC10574 的含量＜0.005 μg/mL，而ATCC33664 的米酵菌酸含量為131 μg/mL，且生長穩(wěn)定、產(chǎn)毒量大，適合作為后續(xù)試驗的標準株使用。

表1 按照食品類型分類的BGC 陽性樣本分布Table 1 Distribution of BGC positive samples classified by food type

2018 年廣東省首次因食用河粉引起米酵菌酸中毒事件，同年蘇嘉妮等[19]調(diào)查分析了廣東省1570 份米面制品、淀粉及其制品中BGC 的污染情況，檢出率為0.06%（1/1570）。陳榮橋等[20,21]調(diào)查我國南方部分省份食品工業(yè)中常用的米和食用淀粉中BGC 污染情況，檢出率為3.1%（4/129），4 份陽性樣本全部來自于進口碎米；并利用全基因組重測序與單核苷酸多態(tài)性分析菌株的同源關系，表明原料米中BGC 的基因組序列與產(chǎn)地溯源具有較大相關性，在濕粉生產(chǎn)加工過程中存在BGC 污染傳遞的風險。近年來我國暴發(fā)了多起因食用泡發(fā)2～3 d的干木耳引起米酵菌酸中毒事件，并有多例重癥和死亡病例[22]。黑木耳是我國栽培產(chǎn)量第二大的食用菌品種[23]，隨機抽查的木耳中檢出唐菖蒲伯克霍爾德菌和BGC，表明木耳中存在較高的被唐菖蒲伯克霍爾德菌椰毒致病變種污染的風險。

2.2 唐菖蒲伯克霍爾德氏菌的生長曲線

如圖1 所示，產(chǎn)毒株ATCC33664 和不產(chǎn)毒株CICC10574在培養(yǎng)0～10 h內(nèi)均處于延遲期，生長緩慢，在培養(yǎng)約10 h 后先后進入對數(shù)生長期，并持續(xù)到約20 h，20～50 h 時進入穩(wěn)定期，50 h 后進入衰亡期。產(chǎn)毒株與不產(chǎn)毒株的唐菖蒲伯克霍爾德氏菌在生長趨勢上無明顯區(qū)別。

圖1 唐菖蒲伯克霍爾德氏菌的生長曲線Fig.1 The growth curve of Burkholderia gladiolus

2.3 培養(yǎng)條件對BGC 生長和產(chǎn)毒的特性分析

2.3.1 不同培養(yǎng)基對BGC 生長和產(chǎn)毒的影響

如圖2，BGC 在BHI、PD 和LB 中均生長良好，且在BHI 中生長最好，其次為LB、PD 水；產(chǎn)毒培養(yǎng)中，培養(yǎng)于PD 半固體瓊脂（馬鈴薯半固體瓊脂）的菌株產(chǎn)毒量（231.24 μg/mL）明顯大于BHI 半固體瓊脂（55.85 μg/mL）和LB 半固體瓊脂（38.84 μg/mL），說明馬鈴薯半固體瓊脂更適宜椰毒假單胞菌酵米面亞種的產(chǎn)毒。間接證實了BGC 主要污染的食品類型為富含多糖、淀粉類的發(fā)酵米面制品、銀耳、木耳等。

圖2 BGC（ATCC 33664）在不同培養(yǎng)基中的生長與產(chǎn)毒情況Fig.2 Growth and toxin production of BGC (ATCC 33664) in different media

2.3.2 培養(yǎng)時間對BGC 產(chǎn)毒的影響

如圖3 所示，前3 d 僅有微量的米酵菌酸的生成（0.56～1.84 μg/mL），從第4 d 開始，米酵菌酸大量產(chǎn)生（40.63 μg/mL），并在第5 d 達到最高值（606.9 μg/mL）；繼續(xù)進行產(chǎn)毒培養(yǎng)，6～15 d 米酵菌酸的含量仍然處于高含量范圍（4 3 5.1 9～515.86 μg/mL），無明顯下降趨勢，且在第15 d 時，半固體培養(yǎng)基表面仍有少量淡黃綠色菌苔生長。提示消費者們，為最大限度降低或消除風險隱患，不可食用長時間泡發(fā)的米面制品、銀耳木耳等。

圖3 BGC（ATCC 33664）在不同培養(yǎng)時間下的產(chǎn)毒情況Fig.3 Toxin production of BGC (ATCC 33664) under different culture time

2.3.3 溫度對BGC 生長和產(chǎn)毒的影響

由圖4a 可以看出，在4、15 ℃培養(yǎng)2 d，BGC 的OD600值增長緩慢；20～37 ℃溫度下，隨著溫度的升高該菌的OD600值逐漸增大，在37 ℃時增至最大；在溫度達到42 ℃時，該菌的OD600值趨近于0，說明該菌的適宜生長溫度為20～37 ℃，最適生長溫度為37 ℃，低于15 ℃或高于42 ℃條件下，生長緩慢或幾乎不生長。

由圖4b 可以看出，BGC 在4 ℃下不產(chǎn)米酵菌酸（＜0.005）、15 ℃下產(chǎn)生米酵菌酸的含量較低（2.11 μg/mL）；20～30 ℃范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，產(chǎn)毒量逐漸增大（23.03～1 225.17 μg/mL）；隨著溫度的進一步提升，產(chǎn)毒量逐漸下降，37℃下該菌的產(chǎn)毒量仍然維持在較高的狀態(tài)（528.3 μg/mL），直至42 ℃，僅極微量米酵菌酸產(chǎn)生（0.28 μg/mL）；說明該菌的適宜產(chǎn)毒溫度在20～37 ℃，最適產(chǎn)毒溫度為30 ℃，低于15 ℃或高于42 ℃條件下，產(chǎn)毒量較少或幾乎不產(chǎn)毒。BGC 在低溫環(huán)境下（4～15 ℃）仍然存活，且產(chǎn)生少量的米酵菌酸，需引起消費者的注意。

圖4 BGC（ATCC 33664）在不同培養(yǎng)溫度下的生長與產(chǎn)毒情況Fig.4 Growth and toxin production of BGC (ATCC 33664)under different culture temperatures

2.3.4 pH 對BGC 生長和產(chǎn)毒的影響

由圖5a 可以看出，pH 值在1.0～3.5 和9.0～10.5時，BGC 在BHI 中的生長受到了明顯的抑制，OD600值幾乎接近于0，而在PD 水中BGC 在pH 值為9.0～10.5 的條件下仍能較好生長，說明BGC 在堿性環(huán)境下（9.0～10.5）的生長受培養(yǎng)基的影響較大；pH 值在4.0～8.5 時，BGC 在BHI 與PD 中均生長良好；當pH 值為11.0 時，BGC 在BHI 與PD 水中的OD600值均趨于0。

BGC 在不同pH 值的馬鈴薯葡萄糖半固體瓊脂上的產(chǎn)毒情況與在PD 水中的生長趨勢一致，如圖5b 所示，在pH 值≤3.5 時，BGC 幾乎不產(chǎn)毒（0.004 μg/mL）；當pH 值在4.0～7.0 時，隨著pH 值的升高，產(chǎn)毒量迅速上升（36.98～425.61 μg/mL），并在pH 值為7.0 時達到最大值（425.61 μg/mL）；繼續(xù)增大pH 值至10.0 時，該菌的產(chǎn)毒量仍然處于較高水平（2 2 7.8 1～348.5 μg/mL），當pH 值為11 時，BGC 幾乎不生長，產(chǎn)毒量也下降趨至0。

圖5 BGC（ATCC 33664）在不同pH 值下的生長與產(chǎn)毒情況Fig.5 Growth and toxin production of BGC (ATCC 33664)under different pH

2.3.5 NaCl 濃度對BGC 生長和產(chǎn)毒的影響

由圖6a 可以看出，在BHI 和PD 水中添加0～0.02 g/mL 質(zhì)量濃度的NaCl 時，隨著NaCl 的增加，OD600值均逐漸降低；當NaCl 質(zhì)量濃度≥0.02 g/mL時，在BHI 中的OD600值開始趨于0，而在PD 水中NaCl 質(zhì)量濃度為0.02～0.04 g/mL 時，該菌仍然生長較好，直到質(zhì)量濃度≥0.04 g/mL 時，才趨于0。在產(chǎn)毒方面，NaCl 的添加嚴重抑制BGC 的產(chǎn)毒：當NaCl質(zhì)量濃度≤0.035 g/mL 時，該菌仍然有一定的產(chǎn)毒量（52.27～37.44 μg/mL），直到0.04 g/mL 時，才趨于0。

圖6 BGC（ATCC 33664）在不同NaCl 濃度下的生長與產(chǎn)毒情況Fig.6 Growth and toxin production of BGC (ATCC 33664)under different NaCl concentrations

唐菖蒲伯克霍爾德菌椰毒致病變種是一種發(fā)病率和死亡率極高的食源性致病菌，易對米面發(fā)酵品、變質(zhì)銀耳、長時間泡發(fā)的木耳及薯類制品等造成污染。因此開展食品中唐菖蒲伯克霍爾德菌椰毒致病變種的污染調(diào)查工作，是保障食品安全與公共衛(wèi)生的重要措施之一。本研究針對廣東地區(qū)居民飲食中常見的濕淀粉類與濕面制品、濕木耳與銀耳進行BGC 分離鑒定。結(jié)果顯示，從100 份樣品中檢出4 份唐菖蒲伯克霍爾德菌陽性樣品，總檢出率為4%（4/100），檢出1 份BGC 陽性樣品（產(chǎn)毒量為14.9 μg/mL），總檢出率為1%（1/100），其中濕木耳的檢出率為11.11%（1/9），銀耳與淀粉類制品無檢出。

由唐菖蒲伯克霍爾德菌椰毒致病變種引起的食物中毒多發(fā)生在偏遠、經(jīng)濟相對落后的地方，近年來，由該菌產(chǎn)生的毒素所引起的食物中毒偶有發(fā)生在經(jīng)濟發(fā)達地區(qū)，也因此人們對它的關注度持續(xù)上升。本研究分析了BGC 在不同環(huán)境條件下的生長和產(chǎn)毒情況，結(jié)果顯示，該菌的生長與產(chǎn)毒受培養(yǎng)基的影響較大；在堿性（pH 值為9.0～10.5）與一定滲透壓（NaCl 質(zhì)量濃度為0.02～0.04 g/mL）環(huán)境下，BGC 在PD 中能生長，而在BHI 幾乎不生長；BGC 最適生長溫度與pH 值分別為37 ℃、6.0，最佳產(chǎn)毒溫度與pH 值為30 ℃、7.0；BGC 在低質(zhì)量濃度的NaCl（0～0.02 g/mL）環(huán)境下生長良好，當NaCl 質(zhì)量濃度≥0.025 g/mL，BGC 的生長受到抑制，同時NaCl 的添加對BGC 的產(chǎn)毒具有明顯的抑制，當NaCl 質(zhì)量濃度達到0.04 g/mL 時，則完全抑制米酵菌酸的產(chǎn)生。結(jié)果提示在食品加工或貯存過程中添加一定濃度的NaCl 以及營造低溫環(huán)境可有效減少由米酵菌酸引起的食物中毒。對相應食品在生產(chǎn)、運輸、儲存、銷售等環(huán)節(jié)提出了切實建議，為相關部門在各環(huán)節(jié)加強安全監(jiān)管，保障人民的身體健康和飲食安全提供了理論基礎。

3 結(jié)論

本研究對廣州地區(qū)淀粉類，面粉類，濕木耳及濕銀耳中唐菖蒲伯克霍爾德菌椰毒致病變種的污染情況進行了調(diào)查，并對BGC 在不同培養(yǎng)條件下的生長與產(chǎn)毒特性進行了分析，初步了解了BGC 的污染與分布情況，掌握了BGC 在不同培養(yǎng)基、培養(yǎng)時間、培養(yǎng)溫度、pH 和NaCl 濃度下的生長與產(chǎn)毒規(guī)律。對市售的米面制品、木耳銀耳等進行了風險預警，為相關企業(yè)加強防控，相關部門規(guī)范管理提供了參考。同時，對于該菌在不同環(huán)境下的存活機理和產(chǎn)毒機制的研究則將是下一步的工作重點。