大麥幼苗抗氧化酶系統(tǒng)對(duì)低高溫脅迫的差異響應(yīng)

安兵壯，李 博，徐 樂(lè)*，徐延浩

（1.長(zhǎng)江大學(xué)農(nóng)學(xué)院，湖北 荊州 434025；2.湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院糧食作物研究所，湖北 武漢 430064）

每種植物都有其生長(zhǎng)發(fā)育的最適溫度，異常高溫或低溫對(duì)植物生長(zhǎng)和代謝均具有破壞性影響。由高溫或低溫引起的各種細(xì)胞變化導(dǎo)致有毒化合物的過(guò)量產(chǎn)生，尤其是導(dǎo)致產(chǎn)生氧化應(yīng)激的活性氧（reactive oxygen species，ROS），包括超氧陰離子自由基（O）、羥基自由基（·OH）和過(guò)氧化氫（HO）等。脅迫引起的ROS毒性被認(rèn)為是導(dǎo)致全球作物產(chǎn)量降低的主要原因之一，過(guò)量的ROS會(huì)誘導(dǎo)蛋白質(zhì)氧化、DNA損傷、膜脂質(zhì)過(guò)氧化[丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量增加]和色素破壞，同時(shí)還會(huì)改變植物激素的產(chǎn)生和信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程，引起轉(zhuǎn)錄組的重編程和機(jī)體代謝紊亂。

為避免氧化應(yīng)激造成的損傷，植物形成了多樣而復(fù)雜的抗氧化防御機(jī)制來(lái)清除有毒ROS。抗氧化酶系統(tǒng)主要包括超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、過(guò)氧化物酶（peroxidase，POD）、過(guò)氧化氫酶（catalase，CAT）、抗壞血酸過(guò)氧化物酶（ascorbate peroxidase，APX）、谷胱甘肽還原酶（glutathione reductase，GR）等。在極端溫度條件下，植物傾向于通過(guò)誘導(dǎo)抗氧化系統(tǒng)作為它們的防御系統(tǒng)來(lái)對(duì)抗ROS的產(chǎn)生，并維持它們的氧化還原穩(wěn)態(tài)。李辰彥等觀察到低溫脅迫期間，水稻中SOD、POD、CAT活性顯著上升。Yu等觀察到甘薯在高溫脅迫下SOD活性先上升后下降，POD活性先下降后上升。Ignatenko等研究發(fā)現(xiàn)小麥低溫脅迫下SOD與POD活性持續(xù)上升，CAT活性先上升后下降。然而，植物抗氧化酶系統(tǒng)響應(yīng)低溫與高溫的模式可能存在差異。小麥低溫脅迫下POD、CAT活性顯著上升，而高溫脅迫下活性顯著下降；玉米低溫脅迫下SOD活性顯著下降，而高溫脅迫下顯著上升。由于這些研究結(jié)果來(lái)源于不同的試驗(yàn)，因此植物抗氧化酶系統(tǒng)對(duì)低溫與高溫的響應(yīng)模式還需要進(jìn)一步研究。

作物苗期遭遇溫度脅迫，會(huì)導(dǎo)致幼苗發(fā)育遲緩或者死亡，影響其群體構(gòu)建，最終影響其產(chǎn)量。增強(qiáng)作物苗期對(duì)多種非生物脅迫的耐受性將使作物更好地生長(zhǎng)，從而獲得更高的產(chǎn)量。大麥（L.）是全球最重要的谷類作物之一，是食品加工、牲畜飼料和飲料的重要原料。自然條件下，大麥幼苗的生長(zhǎng)受多種環(huán)境脅迫的限制，尤其是面對(duì)越來(lái)越明顯的氣候變化，溫度對(duì)其影響越發(fā)顯著。大麥最適宜的生長(zhǎng)溫度為20～25℃。Zhu等研究發(fā)現(xiàn)，溫度低于15℃或高于37℃會(huì)對(duì)大麥的生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生明顯的影響。本研究選用大麥品種鄂啤2號(hào)為試驗(yàn)材料，以最適溫度[22℃（晝）/18℃（夜）]為對(duì)照，研究苗期大麥在低溫[14℃（晝）/10℃（夜）]與高溫[38℃（晝）/34℃（夜）]處理下的SOD、POD、CAT等關(guān)鍵酶活性以及相關(guān)基因表達(dá)的變化，結(jié)合生理生化與基因表達(dá)研究結(jié)果，分析大麥幼苗抗氧化酶系統(tǒng)對(duì)低溫與高溫脅迫的響應(yīng)模式及差異，旨在為大麥苗期的耐低溫與耐高溫研究提供理論基礎(chǔ)，為我國(guó)大麥生產(chǎn)的防災(zāi)減災(zāi)與提質(zhì)增效提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)以湖北栽培大麥鄂啤2號(hào)為供試材料，由長(zhǎng)江大學(xué)提供。該材料屬春性品種，全生育期195～205 d，具有莖稈粗壯、耐肥和抗倒伏等優(yōu)良特性。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)。選取飽滿度一致的種子，在自來(lái)水流水浸泡3 h后，用2%的次氯酸鈉溶液滅菌25 min，最后用無(wú)菌水沖洗3次。將種子置于22℃培養(yǎng)箱（上海佳語(yǔ)科學(xué)儀器有限公司提供）中進(jìn)行黑暗催芽，培養(yǎng)2～3 d后，選取長(zhǎng)勢(shì)一致、露出小芽的種子放入墊有濾紙的發(fā)芽盒（13 cm×19 cm×9 cm）中，每盒100粒，分別置于（晝/夜）14℃/10℃、22℃/18℃和38℃/34℃的培養(yǎng)箱中進(jìn)行處理。分別在處理前（0 d），處理的第1天（1 d）、第2天（2 d）、第3天（3 d）、第4天（4 d）對(duì)各處理下的幼苗嫩葉（芽苗期）進(jìn)行取樣。每個(gè)試驗(yàn)均設(shè)置3次生物學(xué)重復(fù)。

1.2.2 活性氧含量及抗氧化酶活性的測(cè)定。使用1、2、3、4 d的樣品測(cè)定活性氧含量及抗氧化酶活性。O含量采用羥胺氧化法測(cè)定；HO含量參考林植芳等的方法測(cè)定；MDA含量采用硫代巴比妥酸法測(cè)定；SOD活性采用氮藍(lán)四唑（NBT）光還原法測(cè)定；POD活性采用愈創(chuàng)木酚法測(cè)定；CAT活性采用過(guò)氧化氫還原法測(cè)定；APX活性參考Nakano等的方法測(cè)定；GR活性參考Omar等的方法測(cè)定。每個(gè)生理指標(biāo)測(cè)定3次作為技術(shù)重復(fù)。

1.2.3 抗氧化酶相關(guān)基因表達(dá)量的測(cè)定。使用0、1、3 d的樣品測(cè)定抗氧化酶相關(guān)基因的表達(dá)量。采用Trizol試劑法（TIANGEN，北京）提取總RNA，使用1%瓊脂糖凝膠電泳和Nanodrop 2000 c檢測(cè)RNA的質(zhì)量和濃度。使用反轉(zhuǎn)錄試劑盒（TaKaRa，M1701）合成cDNA第1鏈。實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)采用SYBR Green PCR試劑盒（Thermo Fisher，4385614），以為參照，采用2法計(jì)算基因相對(duì)表達(dá)量。

目的基因與序列及其引物序列設(shè)計(jì)參考Zvobgo等的研究，與序列及其引物序列參考Chen等的研究（表1）。

表1 引物序列

1.3 數(shù)據(jù)處理

使用DPS 8.01軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用單因素方差分析及最小顯著差異法（LSD）分析不同處理間的差異顯著性。使用Excel 2019對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理與作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同溫度脅迫下大麥幼苗葉片活性氧分子（ROS）與MDA含量變化

2.1.1 超氧陰離子（O）含量變化。由圖1-A可知，3個(gè)溫度下O平均含量分別為32.73[14℃（晝）/10℃（夜），低溫]、21.71[22℃（晝）/18℃（夜），對(duì)照，下同]、37.87 μmol/g[38℃（晝）/34℃（夜），高溫]。其中，高溫下平均含量最高，分別高于低溫、對(duì)照15.70%、74.44%；其次為低溫，高于對(duì)照50.76%。處理第1天，對(duì)照、低溫與高溫脅迫下O含量均較低，分別為4.10、10.36、3.50 μmol/g（圖1-A）。第2—4天，對(duì)照O含量在23.89～32.56 μmol/g浮動(dòng)變化，低溫下O含量持續(xù)升高，第3、4天顯著高于對(duì)照，分別高于對(duì)照37.01%、98.01%。高溫下O含量第3天開始為同時(shí)期最高，第3、4天分別高于低溫與對(duì)照52.01%、108.26%與22.30%、142.18%。

2.1.2 過(guò)氧化氫（HO）含量變化。由圖1-B可知，處理期間，高溫下HO含量始終低于對(duì)照，低溫下HO含量第1—2天同時(shí)期最低，第3天猛然升高為同時(shí)期最高，而第4天再次下降為同時(shí)期最低。低溫、對(duì)照與高溫脅迫下HO的平均含量分別為8.09、12.33、10.40 μmol/g，低溫與高溫分別低于對(duì)照34.41%和15.65%。處理過(guò)程中，低溫下HO含量逐漸升高，第4天輕微下降。第1、2、4天低溫下HO含量均顯著低于對(duì)照，第4天差異最大，低于對(duì)照47.83%。高溫處理下HO含量逐漸升高但始終顯著低于對(duì)照，第1天與對(duì)照差異最大，低于對(duì)照28.36%，第3天差異最小，低于對(duì)照11.37%。高溫處理下HO含量第1、2、4天均顯著高于低溫處理，第4天差異最大，高于低溫66.46%。

2.1.3 丙二醛（MDA）的含量變化。由圖1-C可知，3個(gè)溫度下MDA含量均呈下降—上升—下降的趨勢(shì)。對(duì)照MDA含量分布在1.09～3.11 μmol/g，平均含量為2.04 μmol/g。低溫處理下MDA含量分布在1.95～4.01 μmol/g，平均含量為2.92 μmol/g，高于對(duì)照43.14%。高溫MDA含量分布在1.67～4.16 μmol/g，平均含量最高，為3.17 μmol/g，分別高于對(duì)照和低溫55.39%、8.56%。低溫處理下第1—3天始終顯著高于對(duì)照，第2天與對(duì)照差異最大，高于對(duì)照126.97%，第4天含量降至與對(duì)照差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而高溫下MDA含量始終顯著高于對(duì)照，第3天開始超過(guò)低溫處理，為同時(shí)期最高，第4天顯著高于對(duì)照和低溫處理，且整個(gè)處理期間差異達(dá)到最大，分別高于對(duì)照和低溫108.30%、96.71%。

圖1 不同溫度處理下O2÷含量（A）、H2O2含量（B）、MDA含量（C）變化

2.2 不同溫度下抗氧化酶的活性分析

2.2.1 超氧化物歧化酶（SOD）活性分析。由表2可知，對(duì)照與低溫SOD活性分別在113.44～129.01 U/(g·min)與121.51～130.83 U/(g·min)小幅度波動(dòng)變化。低溫下SOD活性平均為124.52 U/(g·min)，高于對(duì)照[119.04 U/(g·min)]4.60%。高溫下SOD活性在136.17～173.83 U/(g·min)波動(dòng)變化，平均活性最高，為155.26 U/(g·min)，分別高于低溫與對(duì)照24.69%和30.43%。低溫下第1天SOD活性最高，為130.83 U/(g·min)，顯著高于對(duì)照15.32%，而后活性逐漸降低，第4天與對(duì)照差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。高溫下SOD活性始終高于對(duì)照與低溫，第1天活性最低，第2天上升后至第3天輕微下降，第4天再次上升達(dá)到最大，分別顯著高于對(duì)照與低溫45.47%和42.94%。

2.2.2 過(guò)氧化物酶（POD）活性分析。由表2可知，與SOD相似，對(duì)照與低溫下POD活性在小幅度波動(dòng)變化，高溫下POD活性先上升后輕微下降，第4天活性達(dá)到最高。對(duì)照、低溫與高溫SOD活性分別在49.42～67.71、43.35～67.67、58.19～124.46 U/(g·min)變化。對(duì)照平均活性最低，為58.49 U/(g·min)；其次為低溫，為61.02 U/(g·min)；高溫下最高，為86.19 U/(g·min)。低溫下第1、2天POD活性顯著上升，分別高于對(duì)照14.02%、8.23%。隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，第3、4天與對(duì)照差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。高溫下POD活性始終高于對(duì)照和低溫且逐漸上升，第4天達(dá)到最大，顯著高于對(duì)照與低溫83.93%、83.43%。

2.2.3 過(guò)氧化氫酶（CAT）活性分析。由表2可知，對(duì)照CAT活性在722.90～1 299.39 U/(g·min)浮動(dòng)，平均活性為980.34 U/(g·min)。低溫下CAT活性在1 169.83～1 679.76 U/(g·min)浮動(dòng)，平均活性為1 502.47 U/(g·min)，高于對(duì)照53.26%。高溫下CAT活性分布在2 078.50～3 445.05 U/(g·min)，平均活性為2 650.24 U/(g·min)，分別高于對(duì)照和低溫170.03%、76.39%。低溫下第1天CAT活性最高且與對(duì)照活性差異最大，高于對(duì)照132.36%；第2天降至與對(duì)照間的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；第3天活性上升，顯著高于對(duì)照98.14%；第4天與對(duì)照間的差異再次減小，高于對(duì)照21.05%。高溫下CAT活性始終顯著高于對(duì)照與低溫，且隨處理時(shí)間持續(xù)上升，第4天達(dá)到最大，分別高于對(duì)照和低溫165.13%、119.03%。

表2 不同溫度處理下酶活性變化

2.2.4 抗壞血酸過(guò)氧化物酶（APX）活性分析。由表2可知，處理期間，對(duì)照與低溫APX活性均先下降后上升，對(duì)照第3天活性最低，為12.08 U/(g·min)，第4天活性最高，為20.25 U/(g·min)，平均活性為16.22 U/(g·min)。低 溫 下 第2天 活 性 最 低，為17.61 U/(g·min)，第1天活性最高，為32.22 U/(g·min)，平均活性為25.29 U/(g·min)，高于對(duì)照55.92%。高溫下APX活性呈下降—上升—下降趨勢(shì)，第2天活性最低，為23.02 U/(g·min)，第1天活性最高，為39.02 U/(g·min)，平均活性為30.29 U/(g·min)，分別高于對(duì)照和低溫86.73%、19.78%。第1～3天3個(gè)溫度下APX活性大小呈高溫＞低溫＞對(duì)照，第3天各溫度間差異均達(dá)到最大，低溫高于對(duì)照71.39%，高溫分別高于對(duì)照和低溫157.21%、50.07%，均差異顯著。第4天，低溫與高溫?zé)o顯著差異，但均顯著高于對(duì)照，分別高于對(duì)照165.13%、119.03%。

2.2.5 谷胱甘肽還原酶（GR）活性分析。由表2可知，對(duì)照、低溫與高溫下GR活性均呈下降趨勢(shì)，第1天最高，分別為48.57、68.90、87.24 U/(g·min)，第4天最低，分別為15.06、27.83、33.33 U/(g·min)。對(duì)照平均活性最低，為24.13 U/(g·min)；其次為低溫，為45.42 U/(g·min)，高于對(duì)照88.23%；高溫下最高，為56.33 U/(g·min)，分別高于對(duì)照和低溫133.44%、24.02%。低溫與高溫下GR活性始終顯著高于對(duì)照，第1、2天高溫下GR活性最高，第3、4天低溫與高溫下GR活性差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。低溫和高溫均在第2天與對(duì)照差異最大，分別高于對(duì)照180.13%、292.41%，而后差異逐漸減小，第4天分別高于對(duì)照84.74%、121.30%。

2.3 抗氧化酶相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)

由圖2可知，與對(duì)照相比，低溫與高溫脅迫誘導(dǎo)抗氧化酶相關(guān)基因表達(dá)量顯著上調(diào)，且高溫較低溫的表達(dá)水平更高。低溫與高溫下、、表達(dá)量隨處理時(shí)間的延長(zhǎng)持續(xù)上升，第3天達(dá)到峰值，分別高于對(duì)照235.12%和397.62%、185.93%和442.96%、221.05%和467.49%。低溫與高溫下與在第1天表達(dá)量最高，分別高于對(duì)照103.8%和178.33%、51.43%和126.29%，第3天開始下降，但仍顯著高于對(duì)照，分別高于對(duì)照136.76%和108.09%、30.37%和37.78%。

圖2 不同溫度處理下HvSOD（A）、HvPOD（B）、HvCAT2（C）、HvGR1（D）、HvAPX（E）的轉(zhuǎn)錄表達(dá)

3 討論

高等植物生長(zhǎng)發(fā)育會(huì)產(chǎn)生ROS，正常情況下，其產(chǎn)生與清除處于代謝平衡狀態(tài)，冷熱脅迫會(huì)打破平衡導(dǎo)致ROS（如O、HO、·OH等）代謝失調(diào)而過(guò)量積累。本研究中，低溫與高溫脅迫誘導(dǎo)了O含量顯著升高，表明溫度脅迫會(huì)顯著誘導(dǎo)大麥幼苗ROS的產(chǎn)生。然而，HO含量較對(duì)照顯著下降，這與大多數(shù)脅迫研究的結(jié)果不同。在甜菜的鹽脅迫研究中，Hossain等認(rèn)為，HO含量的降低可能是由于鹽脅迫下甜菜通過(guò)抗氧化酶將細(xì)胞氧化還原環(huán)境調(diào)節(jié)到比在對(duì)照條件下更低的氧化應(yīng)激水平。APX與GR參與的AsA-GSH循環(huán)是清除HO的主要途徑之一，在非生物脅迫中扮演著重要的角色。在早期對(duì)擬南芥的低溫脅迫研究中發(fā)現(xiàn)，HO含量低于對(duì)照時(shí)伴隨著APX與GR含量的上升。本研究中，低溫與高溫降低HO含量的同時(shí)也顯著誘導(dǎo)了APX與GR活性的上升。因此，大麥幼苗中HO含量的降低可能與抗氧化酶調(diào)節(jié)的細(xì)胞氧化還原環(huán)境有關(guān)，而APX與GR可能是其中主要的參與者，關(guān)于HO含量下降的具體原因還有待進(jìn)一步研究。

ROS極具活性且能夠參與細(xì)胞區(qū)室相互作用，脂質(zhì)過(guò)氧化被降解是其負(fù)面影響之一，最終導(dǎo)致結(jié)構(gòu)破壞和細(xì)胞損傷。MDA是磷脂中不飽和脂肪酸過(guò)氧化的最終產(chǎn)物，通常用作脂質(zhì)過(guò)氧化水平的指標(biāo)，以評(píng)估應(yīng)激條件下的細(xì)胞膜損傷水平?？寡趸甘羌?xì)胞抵御氧化應(yīng)激系統(tǒng)的主要成分，在清除ROS保護(hù)植物免受氧化損傷方面具有重要作用。處理初期，MDA含量與各抗氧化酶活性均顯著提升，表明低溫與高溫對(duì)大麥幼苗造成了氧化應(yīng)激，酶促防御系統(tǒng)迅速啟動(dòng)，調(diào)節(jié)抗氧化酶活性顯著升高。水稻的溫度脅迫研究中，低溫與高溫脅迫顯著誘導(dǎo)了水稻葉片中SOD、POD、CAT活性的上升，這與本研究結(jié)果類似。隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，低溫下MDA含量與氧化酶活性逐漸趨于對(duì)照，表明低溫脅迫下抗氧化酶積極發(fā)揮作用，參與氧化還原過(guò)程，氧化損傷在緩慢修復(fù)。張軍等也有類似發(fā)現(xiàn)：5個(gè)小麥品種在低溫處理后，有3個(gè)品種在2 d的持續(xù)低溫后，通過(guò)自身的適應(yīng)調(diào)節(jié)，其質(zhì)膜部分得以修復(fù)。然而，高溫下抗體氧化酶活性始終處于較高水平且顯著高于低溫與對(duì)照，MDA含量持續(xù)升高。這表明高溫下脅迫程度較低溫更高，較高的抗氧化酶活性更有助于緩解脅迫帶來(lái)的氧化傷害。高溫下，15種水稻材料中，耐熱和強(qiáng)耐熱品種的抗氧化酶活性顯著高于非耐熱品種。此外，推測(cè)38℃高溫脅迫超出了大麥幼苗的耐受脅迫“閾值”，致使質(zhì)膜系統(tǒng)持續(xù)受到損傷。Yu等在甘薯的高溫脅迫研究中發(fā)現(xiàn)，高溫早期階段植株會(huì)產(chǎn)生過(guò)量的ROS，SOD活性迅速增強(qiáng)以應(yīng)對(duì)脅迫，但不足以消除過(guò)量的ROS，植物膜脂的過(guò)氧化程度持續(xù)增加，表明已超出植株的自我調(diào)節(jié)能力。

研究表明，低高溫脅迫下抗氧化酶活性與其基因表達(dá)密切相關(guān)。抗氧化酶活性變化背后的基因表達(dá)可能促進(jìn)植物的分子適應(yīng)，并且維持較高水平的抗氧化酶轉(zhuǎn)錄本可以在保護(hù)植物免受氧化應(yīng)激方面發(fā)揮關(guān)鍵作用。He等研究發(fā)現(xiàn)，SOD、CAT、POD相關(guān)基因的表達(dá)有助于提高枳橙的耐旱性，Kaur等研究發(fā)現(xiàn)，抗氧化酶基因表達(dá)的上調(diào)是緩解蕓薹極端溫度脅迫下氧化應(yīng)激的重要手段。本研究發(fā)現(xiàn)，低溫與高溫顯著誘導(dǎo)了、、、與表達(dá)上調(diào)且高溫下增幅更高，表明抗氧化酶基因的高表達(dá)有利于提高大麥幼苗對(duì)極端溫度的耐受性，且表達(dá)水平會(huì)隨著其脅迫程度的加深而升高。舒必超等研究發(fā)現(xiàn)，低溫誘導(dǎo)狗牙根葉片抗氧化酶基因的上調(diào)表達(dá)，且隨著處理溫度的下降，其表達(dá)水平呈上升趨勢(shì)。高溫下抗氧化酶基因的表達(dá)與其酶活變化一致，表明高溫下抗氧化酶基因的表達(dá)量與其酶活變化相關(guān)且可能呈正相關(guān)關(guān)系。低溫下抗氧化酶的活性并不完全隨著其基因的表達(dá)變化而變化，低溫下SOD、CAT的活性第3天較第1天下降，POD的活性第3天與對(duì)照間的差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而、2和的表達(dá)量始終顯著高于對(duì)照且呈上升趨勢(shì)。這種酶活與基因表達(dá)的差異可能是由于低溫與高溫脅迫類型的差異，也可能是由于存在不同的抗氧化酶異構(gòu)體。此外，基因表達(dá)調(diào)控的機(jī)制復(fù)雜，抗氧化酶相關(guān)基因的表達(dá)也并不能與其活性直接相關(guān)。抗氧化酶基因與酶活變化的復(fù)雜調(diào)控網(wǎng)絡(luò)還有待進(jìn)一步探索。

4 結(jié)論

低溫與高溫誘導(dǎo)大麥幼苗產(chǎn)生氧化應(yīng)激，導(dǎo)致ROS積累顯著增加，引起膜脂過(guò)氧化?？寡趸赶到y(tǒng)通過(guò)提高關(guān)鍵酶活及相關(guān)基因的表達(dá)積極響應(yīng)低溫與高溫脅迫并參與調(diào)解。相較于38℃（晝）/34℃（夜）高溫，大麥幼苗對(duì)14℃（晝）/10℃（夜）低溫耐受性更強(qiáng)，抗氧化酶系統(tǒng)有效緩解了14℃（晝）/10℃（夜）低溫下膜脂過(guò)氧化損傷，而38℃高溫誘導(dǎo)了較低溫更高的抗氧化酶活性及相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄水平，但氧化損傷程度仍持續(xù)升高，已無(wú)法有效緩解脅迫帶來(lái)的氧化傷害。