無償獻(xiàn)血者抗-HCV 陽性與ALT 檢測結(jié)果分析

陳豪

我國《獻(xiàn)血者健康檢查要求》中有關(guān)ALT 檢測值的規(guī)定為：速率法≤40 U/L。由于在上個(gè)世紀(jì)90 年代前臨床特異性檢測試劑并不合適,因此美國輸血協(xié)會(huì)(AABB)指定無償獻(xiàn)血者可采取乙肝核心抗體(抗-HBc)以及ALT 檢測來替代非甲非乙型肝炎(NANBH)試驗(yàn)［1］。對(duì)丙型肝炎病毒(HCV)而言,自從有了抗-HCV檢測方案,特別是出現(xiàn)了第2 代以及第3 代的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑檢測準(zhǔn)確性的提高,導(dǎo)致臨床在檢測獻(xiàn)血者ALT 方面的意義也開始有爭議［2］。本研究選擇2017 年1 月～2021 年12 月期間的109789 例無償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本,所有無償獻(xiàn)血者均接受抗-HCV以及ALT 檢測,使用實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制與管理系統(tǒng)ITSWELL 讀取、保存并匯總檢測結(jié)果,檢測結(jié)果的發(fā)布由穿越血站網(wǎng)絡(luò)管理信息系統(tǒng)進(jìn)行?，F(xiàn)對(duì)具體內(nèi)容做出如下報(bào)告。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2017 年1 月～2021 年12 月期間109789 例無償獻(xiàn)血者的血液標(biāo)本為本次研究對(duì)象,其中,男85635 例,女24154 例；年齡最大67 歲,最小18 歲,平均年齡(31.85±6.25)歲；38427 例未婚,71362 例已婚；107861 例為漢族,128 例為少數(shù)民族。

1.2 方法 所有無償獻(xiàn)血者均采集血液標(biāo)本后給予ALT 以及抗-HCV 檢測,具體方法如下。①研究儀器：由瑞士HAMILTON 公司生產(chǎn)的FAME24/30 全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng),由深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司(mindray)生產(chǎn)的BS-400 全自動(dòng)生化分析儀。②研究試劑：a.初檢試劑：ALT 試劑、抗-HCV 抗體試劑均由英科新創(chuàng)(廈門)科技股份有限公司生產(chǎn)；b.復(fù)檢試劑：ALT 試劑(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司］、抗-HCV 抗體試劑(北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司)。③室內(nèi)質(zhì)控品：ALT 質(zhì)控品(中生北控生物科技股份有限公司),ELISA 試劑(北京康徹思坦生物技術(shù)有限公司)。④檢測方法：血液檢測期間,嚴(yán)格遵守衛(wèi)生部發(fā)表的《獻(xiàn)學(xué)者健康檢查要求》(GB18467-2001),初檢與復(fù)檢均由不同工作人員使用不同廠家的試劑,并按照試劑與儀器說明書中的要求對(duì)同一指標(biāo)進(jìn)行檢測,檢測試劑批檢合格,經(jīng)過確認(rèn),且未在失效期間使用。

1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) 本研究使用煙臺(tái)海深威公司的實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制與管理系統(tǒng)ITSWELL,讀取、保存并匯總檢測結(jié)果,并對(duì)標(biāo)本的合格情況進(jìn)行判定,經(jīng)汕頭市穿越計(jì)算機(jī)軟件有限公司的穿越血站網(wǎng)絡(luò)管理信息系統(tǒng)發(fā)布檢測結(jié)果。嚴(yán)格按照試劑操作說明書設(shè)置相關(guān)參數(shù)。陽性：標(biāo)本吸光度(S)與臨界值(CO)的比值S/CO≥1.0；灰區(qū)：檢測指標(biāo)S/CO 介于0.8～1.0；“反應(yīng)性”：S/CO≥0.8?？?HCV 血液標(biāo)本“不合格”參考標(biāo)準(zhǔn)：①使用2 種試劑對(duì)抗-HCV 標(biāo)本進(jìn)行檢測后,結(jié)果均呈“反應(yīng)性”；②使用1 種試劑檢測抗-HCV 標(biāo)本時(shí)呈“反應(yīng)性”,采用該試劑給予雙孔復(fù)試后,任一孔在雙孔復(fù)試中呈“反應(yīng)性”。ALT 血液標(biāo)本“不合格”參考標(biāo)準(zhǔn)為ALT≥40 U/L。

2 結(jié)果

109789 例無償獻(xiàn)血者的血液標(biāo)本中,不合格標(biāo)本1569 例,占比1.43%,其中245 例抗-HCV 不合格,占比0.22%,1324 例ALT 不合格,占比1.21%。見表1。

表1 2017～2021 年無償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本檢測不合格情況［n(%)］

3 討論

病毒性肝炎共有5 種,包括甲型、乙型、丙型、丁型、戊型,其中HCV 抗體在丙型肝炎感染者血液中大量存在,是臨床檢測HCV 感染的重要標(biāo)志。在臨床中,HCV 感染多由共用血液制品或是輸血引起,在經(jīng)常進(jìn)行血液制品治療或者其他用途的群體中較為高發(fā)。HCV 抗體陽性提示患者存在HCV 感染。ALT 是一種可參與人體蛋白質(zhì)新陳代謝的酶,可以將其作為工業(yè)生產(chǎn)中的催化劑,其在人體內(nèi)的主要作用是加快蛋白質(zhì)氨基酸的轉(zhuǎn)化。ALT 在人體各種器官、組織、骨骼、肌肉中均廣泛存在,尤其在肝臟細(xì)胞的細(xì)胞漿中十分常見,血清中正常的ALT 含量可參考男性9～51 U/L,女性8～41 U/L 為標(biāo)準(zhǔn)值,但由于不同醫(yī)院可采取不同的測試方法,因此參考值可存在一定差異。當(dāng)人體內(nèi)各器官組織病變或活動(dòng)時(shí)血液中即可釋放ALT,此時(shí)血清ALT 的含量可大幅提升。比如當(dāng)肝臟出現(xiàn)發(fā)炎癥狀時(shí),肝細(xì)胞即可將轉(zhuǎn)氨酶釋放至血液中,肝臟生病或出現(xiàn)問題,血清轉(zhuǎn)氨酶也可在一定程度上提高。因此,臨床在進(jìn)行肝臟病變程度檢測時(shí),或是篩查慢性肝炎、重型肝炎、急性乙型肝炎、肝硬化、乙型肝炎病毒(HBV)攜帶者或是肝癌等眾多疾病時(shí),常參考患者的血清轉(zhuǎn)氨酶的水平進(jìn)行判斷。

國內(nèi)報(bào)道研究報(bào)告顯示,我國北京慢性丙型肝炎患者的Ⅱ型感染率以及Ⅲ型感染率分別為86.2%以及13.8%,而新疆的Ⅲ型感染病例占比可達(dá)50%,提示不同型的HCV 人群以及地區(qū)分布特征具有一定差異［3］。在肝炎的防治與診斷方面,ALT 臨床價(jià)值十分顯著,該指標(biāo)主要存在于人體的肝細(xì)胞漿內(nèi),不僅可作為肝細(xì)胞損傷的敏感指標(biāo),也是血站系統(tǒng)對(duì)獻(xiàn)血者進(jìn)行血液篩查的一項(xiàng)重要指標(biāo)［4］。但目前臨床已有越來越多的研究顯示獻(xiàn)血者的抗-HCV 檢出率正不斷提升,因此需要加強(qiáng)對(duì)血液安全性的關(guān)注與重視。

多項(xiàng)研究指出,HCV 感染與血液中ALT 升高具有一定的聯(lián)系,且兩者之間為正向相關(guān)。有學(xué)者證實(shí),相較ALT 正常的獻(xiàn)血者,單項(xiàng)ALT 值異常的獻(xiàn)血者抗-HCV 陽性率明顯更高。美國等一些國家的血液中心在20 世紀(jì)80 年代初時(shí),在獻(xiàn)血者血液篩選中將ALT 檢測納為重要的項(xiàng)目之一,目的旨在預(yù)防NANBH,因此在HCV 核酸檢測技術(shù)(HCV-NAT)以及ELISA 還尚未完全完善之前,檢測ALT 值對(duì)感染HCV 的窗口期意義重大［5］。ALT 在本次研究中的不合格率為1.21%,占總不合格率的大部分,該結(jié)果并非完全由病理因素所致。有研究調(diào)查結(jié)合了ALT 升高的原因,發(fā)現(xiàn)雖然多種因素均可能使ALT 升高,但其主要可分為兩種因素,一種為非病理性因素,一種為病理性因素,其中由于非病毒性因素所致的群體占比約為82%［6］。通常情況下,臨床認(rèn)為ALT 活性可受到包括疲勞、運(yùn)動(dòng)、飲酒、應(yīng)用藥物以及體質(zhì)量指數(shù)等多種因素的影響。本單位參考2017～2019 年ALT 不合格率,配置了干式生化儀,主要用于篩查ALT,同時(shí)建立了相對(duì)固定的采血人員團(tuán)隊(duì),并嚴(yán)格參照本中心質(zhì)量管理規(guī)范以及《獻(xiàn)血者健康檢查要求》加強(qiáng)血液檢查、獻(xiàn)血者體檢,加大無償獻(xiàn)血宣傳的開展力度,啟動(dòng)了查詢屏蔽系統(tǒng),避免以往獻(xiàn)血不合格者發(fā)生重復(fù)獻(xiàn)血的現(xiàn)象,在一定程度上降低了ALT 的不合格率［7］。

HCV 是一種單正鏈小RNA 病毒,具有包膜,HCV感染可能引起多種疾病,常見的有肝纖維化、肝炎、肝硬化,部分群體可發(fā)展為肝細(xì)胞癌［8］。臨床的一項(xiàng)病毒性肝炎流行病學(xué)調(diào)查報(bào)告中顯示,目前在全世界范圍內(nèi)約有3%的抗HCV 抗體陽性率群體,主要途徑傳播為血液制品、輸血等［9］。本研究中,血液標(biāo)本的抗HCV 抗體不合格率為0.22%,但因?yàn)镠CV 有“窗口期”,因此抗HCV 抗體陰性結(jié)果并不能夠完全將HCV感染排除。伴隨臨床ELISA 檢測技術(shù)的逐漸成熟化,2 代、3 代抗-HCV 診斷試劑的特異性、敏感性均有一定程度的增強(qiáng),使HCV 感染的窗口期縮短為6 周,與人體發(fā)生ALT 活性指標(biāo)異常的時(shí)間已無較大的差別,這也使得檢測獻(xiàn)血者的ALT 指標(biāo)失去了篩查HCV 感染窗口期的實(shí)際意義［10］。有學(xué)者通過研究獻(xiàn)血者ALT水平以及HCV 感染情況之間的相關(guān)性,指出ALT 水平與HCV 感染并無關(guān)聯(lián),ALT 不能作為HCV 感染窗口期獻(xiàn)血者的排除,總之,ELISA 檢測技術(shù)檢測ALT這項(xiàng)指標(biāo)作為HCV 窗口期的篩查已經(jīng)失去了實(shí)際意義［11］。之前,在本市采血點(diǎn)或采血車中,僅可對(duì)ALT以及ABO 血型等指標(biāo)進(jìn)行快速的篩查,但尚未開展其他指標(biāo)的快速篩查。獻(xiàn)血者在獻(xiàn)血前對(duì)其進(jìn)行初篩,可將血液報(bào)廢率明顯降低,而選擇具有較高特異性以及敏感性的試劑篩查,更有利于將血液資源的浪費(fèi)情況改善。但即使血液標(biāo)本的初篩、后續(xù)檢測均開展的較好,也不能夠完全保障獻(xiàn)血安全。這是由于在疾病的“窗口期”,仍無法及時(shí)的檢出抗HCV 抗體等,這也是引起病原體經(jīng)輸血傳播的因素之一。近年來發(fā)展起來的高特異性、敏感性的核酸檢測技術(shù)(NAT),可將抗HCV 抗體等在疾病的“窗口期”明顯縮短。本單位作為NAT 檢測單位,將該項(xiàng)技術(shù)應(yīng)用于無償獻(xiàn)血者的血液篩查中,能夠在一定程度上將其血液質(zhì)量提高,同時(shí)確保無償獻(xiàn)血者的輸血安全［12］。

綜上所述,我國病毒性肝炎感染等患者群體基數(shù)巨大,而病毒基因型并不能夠呈規(guī)則性分布,且相較國外的流行病學(xué)特點(diǎn)區(qū)別較大,因此為無償獻(xiàn)血等群體行ALT、抗HCV 檢測十分的重要且必要,必須加強(qiáng)臨床、社會(huì)以及相關(guān)人員的重視。