新生兒敗血癥病原學及耐藥性情況分析

泰淑紅，王鵬，邵艷，賈莉婷

(鄭州大學第三附屬醫(yī)院/河南省婦幼保健院檢驗科，河南鄭州450052)

新生兒敗血癥病原學及耐藥性情況分析

泰淑紅，王鵬，邵艷，賈莉婷

(鄭州大學第三附屬醫(yī)院/河南省婦幼保健院檢驗科，河南鄭州450052)

目的了解新生兒敗血癥病原學及細菌耐藥狀況，為臨床合理用藥提供依據(jù)。方法收集本院2014年1月-2016年6月血培養(yǎng)陽性的敗血癥病例258例，對其分離的菌株進行鑒定和體外藥敏分析。結果258例血培養(yǎng)陽性標本中，檢出革蘭陽性菌152例（占58.91%），其中以凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）為主；革蘭陰性菌85例（占32.95%），其中以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌為主；真菌21例（占8.14%），其中以白念珠菌為主。革蘭陽性菌中檢出的凝固酶陰性葡萄球菌、金黃色葡萄球菌對青霉素、苯唑西林、大環(huán)內酯類耐藥率大于等于75%，對萬古霉素、利奈唑胺、替考拉寧均敏感。革蘭陰性菌中大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌對氨芐西林普遍耐藥，對頭孢菌素類抗生素耐藥率高于30%，對氨基糖甙類、喹諾酮類及碳青霉烯類抗生素有較高的敏感性；白念珠菌對氟康唑的耐藥率為8.33%，光滑念珠菌對氟康唑普遍耐藥。結論CNS、大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌為新生兒敗血癥的常見病原菌，且對常見抗生素耐藥率較高，臨床醫(yī)師應合理應用抗生素，以提高臨床治療效果。

新生兒；敗血癥；耐藥性；病原菌

新生兒敗血癥是新生兒期病原菌侵入血循環(huán)并在其中生長、繁殖、產(chǎn)生毒素而造成全身性的炎癥反應。由于新生兒免疫系統(tǒng)尚未成熟，發(fā)生感染后很難局限，病死率較高[1]。明確新生兒敗血癥的病原菌及其藥敏有助于臨床及時、合理的選用抗菌藥物，能有效的降低死亡率。本文通過回顧性地分析血培養(yǎng)陽性敗血癥患兒的病原菌分布及耐藥情況，旨在為臨床用藥提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 標本來源收集2014年1月-2016年6月本院新生兒科血培養(yǎng)陽性的敗血癥患兒258例，所有患兒均符合新生兒敗血癥診斷標準[2]，對其菌株分布及耐藥性進行分析。

1.2 儀器與試劑采用法國梅里埃生物有限公司BACT/ALERT3D全自動血培養(yǎng)儀及配套專用血培養(yǎng)瓶；所有菌株采用DL-96細菌測定分析系統(tǒng)（珠海迪爾生物工程有限公司）進行鑒定及藥敏；血瓊脂平板、巧克力瓊脂平板購于鄭州安圖生物有限公司。

1.3 方法

1.3.1 血培養(yǎng)患兒均在入院后使用抗生素前，無菌操作下經(jīng)靜脈采集血標本1~3ml，注入兒童血培養(yǎng)瓶中，放入全自動血培養(yǎng)儀進行需氧培養(yǎng)，按操作程序直接上機培養(yǎng)監(jiān)測。

1.3.2 菌種鑒定及藥敏將陽性瓶分別轉種于血瓊脂平板，巧克力瓊脂平板，放入隔水式二氧化碳恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24~48h后分離純菌，經(jīng)革蘭染色鏡檢后，選擇相應的DL-96試劑板。取純培養(yǎng)單個菌落于稀釋液瓶內研磨成菌懸液，均勻滴于試劑板小孔內，然后將試劑板放入35~37℃的溫箱孵育18~24h，最后將試劑板放入DL-96細菌測定分析系統(tǒng)，判讀菌種種屬及抗菌藥物MIC結果。藥敏結果判斷參照CLSI 2013標準判讀[3]。

1.4 統(tǒng)計學處理采用WHONET5.5軟件進行抗菌藥敏結分析。

2 結果

2.1 新生兒敗血癥病原菌分布及構成比258例血培養(yǎng)陽性標本中，分離出革蘭陽性菌152例（58.91%），革蘭陰性菌85例（32.95%），真菌21例（8.14%）。菌種分布及構成比詳見表1。

2.2 新生兒敗血癥常見革蘭陽性球菌耐藥率見表2。

2.3 新生兒敗血癥常見革蘭陰性桿菌耐藥率見表3。

2.4 新生兒敗血癥真菌耐藥率白念珠菌對氟康唑的耐藥率為8.33%，6例光滑念珠菌對氟康唑全部耐藥。

表1 258例新生兒敗血癥病原菌分布與構成比

3 討論

血培養(yǎng)是臨床診斷敗血癥的金標準，陽性結果對明確診斷、目標性治療有極高的應用價值，但假陽性的問題一直也是微生物學診斷的難點。有資料顯示，血培養(yǎng)中分離凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）被認為污染的比例可高達44.1%[4]，CNS是污染菌還是致病菌需要臨床結合患者的臨床癥狀及其他指標綜合進行評估。本研究發(fā)現(xiàn)，新生兒血培養(yǎng)病原菌中CNS為主要分離病原菌，占42.25%（109/258），這與國內的大多數(shù)報道相一致[5，6]，認為它是新生兒晚發(fā)型敗血癥的主要病原菌之一[7-10]，可能與機械通氣、侵入性操作，靜脈導管插管等各種介入性診治手段的應用有關[11]，CNS可產(chǎn)生粘附素滯留在一次性注射器、輸液器等物體上，患兒靜脈營養(yǎng)或氣管插管、窒息、住院時間長等因素均易引起CNS感染，因此需要臨床加強對各種導管、器械及醫(yī)護人員手的消毒，嚴格無菌操作，避免交叉感染，防范CNS院內感染的發(fā)生。通過苯唑西林對CNS耐藥率（82.57%），可以顯示耐甲氧西林的葡萄球菌在感染中占很高的比例，耐甲氧西林菌對青霉素類、頭孢類、碳青霉烯類均耐藥，應該引起臨床的高度重視。

本組數(shù)據(jù)中無乳鏈球菌（GBS）6株，占2.33%（6/258），檢出率與國內相關報道相近[12]，然而美國調查數(shù)據(jù)顯示早發(fā)型新生兒敗血癥中GBS引起的感染占到38%-43%[13]，遠高于國內，可能與國內對該病認識不足及檢測手段局限有關，也可能與菌株分布的地區(qū)差異有關。分離到GBS的6例患兒中，有5例的母親陰道分泌物也分離到GBS，故患兒可能通過母嬰垂直傳播獲得。GBS常定植于妊娠婦女的下消化道和泌尿生殖道，可導致圍產(chǎn)期孕婦的嚴重感染，也是引起新生兒感染性疾病的主要細菌性病原菌[14]，因此積極開展孕期GBS普遍篩查和分娩時靜脈給予抗生素預防性用藥具有重要的意義，研究表明該預防策略可顯著降低新生兒感染GBS的發(fā)病率[15]。另外分離到產(chǎn)單核李斯特菌5株，均為宮內感染，病死率高，該菌對頭孢類抗菌藥物天然耐藥，因此臨床對于重癥患者選擇抗生素用藥時應該覆蓋此菌。

本研究顯示革蘭陰性桿菌中以大腸埃希氏菌和肺炎克雷伯菌為主，真菌以白念珠菌為主，與邊興艷等[5]曹慧春等[6]文獻報道一致。大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯菌對哌拉西林/他唑巴坦、頭孢西丁耐藥率均在30%~50%，對三代、四代頭孢菌素的耐藥率均在50%~75%，均不適合作為臨床經(jīng)驗性治療的首選藥物，碳青霉烯類抗菌藥物抗菌作用強、抗菌譜廣，可作為重癥敗血癥患者的首選。本研究中檢出耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌，提示本地區(qū)可能存在碳青霉烯酶，應做好感控，防范感染的播散。

綜上所述，引起新生兒敗血癥的病原菌主要為革蘭陽性球菌，尤其以CNS為主要病原菌，革蘭陰性菌中以大腸埃希菌較常見，耐藥情況均較嚴峻。掌握本地區(qū)病原菌的分布和藥敏數(shù)據(jù)，對臨床經(jīng)驗性治療和合理使用抗菌藥物具有重要的價值。

表2 新生兒敗血癥常見革蘭陽性球菌對15種抗菌藥物的耐藥率（%）

表3 新生兒敗血癥主要革蘭陰性桿菌對19種抗菌藥物的耐藥率（%）

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Drug Resistance Analysis and Distribution Characteristics of Pathogens in Neonatal Septicemia

TAI Shuhong，WANG Peng，SHAO Yan，JIA Liting.Department of Laboratory Medicine，the Third Affiliated Hospital of Zhengzhou University，Zhengzhou 450052，China.

Objective To investigate distribution characteristics and antibiotic resistance of pathogens in neonatal septicemia provides the basis for clinical treatment.Methods The 258 cases of blood culture and drug susceptibility test for neonates diagnosed with septicemia from Jan 2014 to June 2016 were retrospectively analyzed，and the isolated strains were identified and their resistance to antibiotics were tested.Result A total of 258 strains were detected in culture-positive blood samples，with a result of 152 Gram-positive strains(58.91%)，85Gram-negative strains(32.95%)，and 21 strains of fungi(8.14%).The most common pathogens of Gram-negative strains，Gram-positive strains and fungi were Coagulase-negative Staphylococcus，Escherichia coli and Klebsiella pneumonia，and Candida albicans，respectively.Coagulase-negative Staphylococcus and Staphylococcus aureus demonstrated strong resistance to penicillin，oxacillin and macrolides was greater than or equal to 75%，while they were sensitive to vancomycin，linezolid and teicoplanin completely.The resistance rate of Gram-negative Escherichia coli and Klebsiella pneumonia to ampicillin and cephalosporins were respectively 100%and more than 30%，and their susceptibility to aminoglycosides，quinolones and carbapenems was evident.Candida albicans bore a low resistance to fluconazole(8.33%).Conclusion Coagulase-negative staphylococci，Escherichia coli and Klebsiella pneumonia were common pathogens causing neonatal septicemia in our hospital，and their resistance to common antibiotics condition were high and serious.It is reminded that the clinical use of antibiotics should be reasonably used to improve clinical efficacy.

∶Neonate；Septicemia；Pathogen；Antibiotic resistance

R446.5，Q939.92，R722.13+1

A

1674-1129(2017)04-0461-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2017.04.003

2016-12-15；

2017-02-19)

河南省科技廳重點科研團隊項目資助（編號：B20140269）

泰淑紅，女，1982年生，碩士研究生，主管技師，主要從事臨床微生物檢驗工作。Email：taishuhong@163.com。

賈莉婷，女，1957年生，主任技師，Email：jialt@163.com。