• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    鈣離子載體激活卵母細(xì)胞對胚胎發(fā)育和妊娠結(jié)局的影響*

    2022-11-01 11:07:38白銀陽
    關(guān)鍵詞:卵裂受精率囊胚

    白銀陽,熊 芳,張 昀,汪 敏,陳 潔

    (無錫市婦幼保健院生殖醫(yī)學(xué)中心,無錫 214002)

    在人類輔助生殖技術(shù)中,卵母細(xì)胞給予胞漿內(nèi)精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)后仍存在受精失敗、胚胎卵裂率低、胚胎發(fā)育阻滯等問題,這主要與卵母細(xì)胞的激活失敗密切相關(guān)[1-2]。細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Ca2+大量釋放(即鈣震蕩)是激活卵母細(xì)胞的關(guān)鍵[3]。對于激活失敗的卵母細(xì)胞,外源性補充Ca2+載體能提高受精率,促進(jìn)胚胎卵裂和囊胚形成[4-7]。既往研究多將Ca2+載體應(yīng)用于ICSI受精失敗的患者。然而臨床上有部分ICSI助孕患者,即使能正常受精,胚胎卵裂過程中仍出現(xiàn)發(fā)育緩慢甚至阻滯、無可移植胚胎的問題。目前關(guān)于Ca2+載體在這類患者中應(yīng)用的研究較少。本研究募集行ICSI助孕中出現(xiàn)胚胎發(fā)育緩慢或阻滯,囊胚形成率低的患者60例,再次ICSI助孕時卵母細(xì)胞給予Ca2+載體A23817進(jìn)行激活,觀察A23817對患者的受精率、胚胎卵裂率、囊胚形成率以及妊娠結(jié)局的影響。

    1 資料與方法

    1.1 研究對象 募集2019年1月至2021年7月于無錫市婦幼保健院生殖醫(yī)學(xué)中心行ICSI助孕治療的患者60例,再次ICSI助孕時,卵母細(xì)胞給予Ca2+載體A23817進(jìn)行激活,進(jìn)行前后兩周期的自身對照研究。入選標(biāo)準(zhǔn):(1)女方年齡22~36歲;(2)不孕原因為男方嚴(yán)重少弱精子癥或梗阻性無精子癥;(3)已行ICSI助孕治療1個周期以上;(4)既往ICSI周期中曾出現(xiàn)胚胎發(fā)育緩慢或停滯、囊胚形成率低等現(xiàn)象。本研究經(jīng)無錫市婦幼保健院倫理委員會批準(zhǔn)?;颊呔炗喼橥鈺?/p>

    1.2 研究方法

    1.2.1 促排卵 采用溫和刺激方案,主要促排卵藥物為克羅米芬(法地蘭高特制藥)和尿促性素(HMG,麗珠制藥),B超示4枚主導(dǎo)卵泡直徑達(dá)到17mm或3枚主導(dǎo)卵泡直徑達(dá)到18mm。予絨促性素(HCG,麗珠制藥)1萬IU扳機(jī),HCG應(yīng)用后34~36h取卵。

    1.2.2 囊胚冷凍 對照組MⅡ期卵母細(xì)胞按常規(guī)ICSI流程處理,激活組MⅡ期卵母細(xì)胞行ICSI注射后立刻置于30μL含Ca2+載體A23817的激活液微滴(GM508 Cult-Active,Gynemed,德國),37℃、6%CO2培養(yǎng)箱中孵育15min。培養(yǎng)液洗滌3次,置常規(guī)胚胎培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。每天觀察卵裂情況,按形態(tài)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)評價胚胎級別至D3,如有可移植胚胎,D3冷凍2枚胚胎,其余胚胎囊胚培養(yǎng)至D5或D6,觀察囊胚形成情況,并行囊胚冷凍。

    1.2.3 凍胚移植 患者卵巢大小及內(nèi)分泌激素恢復(fù)正常后行人工周期準(zhǔn)備內(nèi)膜,首選囊胚移植,如無囊胚,則移植卵裂期胚胎,黃體支持采用本科室標(biāo)準(zhǔn)方案至孕10周。

    1.2.4 妊娠測定 胚胎移植后12d檢測血清β-HCG≥5IU/L定義為HCG陽性,胚胎移植后30d B超檢測見宮內(nèi)孕囊診斷臨床妊娠。

    1.2.5 觀察指標(biāo) 受精率(2PN率)=正常受精卵數(shù)(2PN數(shù))/ICSI注射數(shù)×100%;胚胎卵裂率=卵裂胚胎數(shù)/2PN數(shù)×100%;可移植胚胎率=可移植胚胎數(shù)/2PN數(shù)×100%;優(yōu)質(zhì)胚胎率=優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)/2PN數(shù)×100%;囊胚形成率=囊胚形成數(shù)/養(yǎng)囊胚胎數(shù)×100%;種植率=孕囊數(shù)/移植胚胎數(shù)×100%;血HCG陽性率=HCG陽性周期數(shù)/移植周期數(shù)×100%;臨床妊娠率=臨床妊娠周期數(shù)/移植周期數(shù)×100%,流產(chǎn)率=流產(chǎn)周期數(shù)/臨床妊娠周期數(shù)×100%,活產(chǎn)率=活產(chǎn)周期數(shù)/移植周期數(shù)×100%。

    2 結(jié) 果

    2.1 患者一般情況 患者在前后兩個周期中的體質(zhì)量指數(shù)(body mass index,BMI)、基礎(chǔ)內(nèi)分泌(bFSH、bLH、bE2以及AMH比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),見表1。

    表1 患者基本資料

    2.2 患者的胚胎發(fā)育情況 患者在兩個周期的平均MⅡ卵數(shù)和受精率無顯著差異(P>0.05)。A23187組的胚胎卵裂率、可移植胚胎率、優(yōu)質(zhì)胚胎率及囊胚形成率均顯著高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01),見表2。

    表2 兩組胚胎發(fā)育情況比較

    2.3 患者妊娠結(jié)局比較 對照組中33例患者有可移植胚胎,其中1例胚胎解凍時退化,32例進(jìn)行胚胎移植。A23187組中52例有可移植胚胎均進(jìn)行胚胎移植。A23187組的胚胎種植率、血HCG陽性率、臨床妊娠率及活產(chǎn)率均明顯高于對照組,流產(chǎn)率明顯低于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01)。A23187組臨床妊娠患者中有2例為雙胎妊娠,其中1例孕早期一胎胚胎停育,轉(zhuǎn)為單胎,1例雙胎分娩,最終分娩25例活嬰,產(chǎn)后隨訪均未發(fā)現(xiàn)新生兒出生缺陷。對照組臨床妊娠患者均為單胎妊娠,無分娩者。見表3。

    表3 兩組妊娠結(jié)局比較

    3 討 論

    Ca2+是人類細(xì)胞中最主要的信號傳遞介質(zhì)之一。細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Ca2+大量釋放和胞外Ca2+內(nèi)流,胞內(nèi)Ca2+濃度急劇升高(即鈣震蕩)是激活卵母細(xì)胞的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Ca2+儲存池的脈沖式釋放是Ca2+的主要來源,這一過程主要通過精子特異性磷脂酶Cζ(PLCζ)誘導(dǎo)的三磷酸肌醇(inositol 1,4,5-triphosphate,IP3)通路完成的[8]。細(xì)胞外Ca2+主要通過跨膜轉(zhuǎn)運進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),Ca2+載體對于這一膜轉(zhuǎn)運過程發(fā)揮重要的作用[9]。當(dāng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Ca2+儲存池內(nèi)鈣缺乏時,卵母細(xì)胞不能正常激活,導(dǎo)致受精失敗,此時需補充外源性Ca2+來彌補胞內(nèi)鈣缺乏。Ca2+載體通過細(xì)胞外Ca2+的跨膜轉(zhuǎn)運,誘導(dǎo)卵母細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度迅速升高(即鈣震蕩),激活卵母細(xì)胞,維持受精[3,9]。

    既往大多數(shù)研究將Ca2+載體激活應(yīng)用于低受精率或受精失敗的ICSI助孕患者,并且一致認(rèn)為Ca2+載體能顯著提高受精率,改善患者妊娠結(jié)局[4-7]。然而在排除受精因素后,Ca2+載體激活能否促進(jìn)胚胎發(fā)育,提高胚胎質(zhì)量仍存爭議。本研究發(fā)現(xiàn),在受精率正常、胚胎發(fā)育緩慢和阻滯的ICSI助孕患者,Ca2+載體能明顯改善胚胎質(zhì)量,促進(jìn)囊胚形成,改善患者的臨床妊娠結(jié)局,提高活產(chǎn)率。這些臨床結(jié)果與國外一項前瞻性多中心研究一致。該研究募集胚胎發(fā)育緩慢或阻滯的ICSI助孕患者,并排除了受精率小于30%的患者,結(jié)果發(fā)現(xiàn)Ca2+載體激活后患者的胚胎卵裂率和囊胚形成率顯著提高,而受精率無顯著差異[10]。但該研究為多中心研究數(shù)據(jù),不能排除患者促排卵方案和胚胎培養(yǎng)環(huán)境的差異。本研究對象均為本中心ICSI助孕患者,患者前后兩個周期的促排卵方案及胚胎培養(yǎng)環(huán)境基本相同。盡管這樣,仍不能完全摒除患者自身狀況在Ca2+載體激活前后兩個周期間的微小差異和外源性干擾因素的潛在影響。近期研究進(jìn)一步證實,Ca2+載體激活促進(jìn)細(xì)胞周期分裂的同步性,提高囊胚利用率[11]。但也有研究顯示,在前次ICSI助孕D5囊胚質(zhì)量差的患者中,Ca2+載體激活并不能改變受精率和囊胚的質(zhì)量,但患者例數(shù)太少(19例),未進(jìn)一步觀察Ca2+載體激活對妊娠結(jié)局的影響[12]。

    除正常受精外,鈣震蕩還影響胚胎后期的發(fā)育和基因表達(dá)[11]。研究發(fā)現(xiàn),對于同時存在胚胎卵裂率低或胚胎質(zhì)量差的ICSI受精失敗患者,給予卵母細(xì)胞人工輔助激活不僅提高受精率,還能明顯改善后期胚胎卵裂和囊胚的形成[13]。Ca2+載體在胚胎發(fā)育阻滯、緩慢以及囊胚形成率低的患者中有顯著作用,推測Ca2+載體激活可能參與卵母細(xì)胞活化早期事件的啟動和完成,但可能長期促進(jìn)胚胎發(fā)育。盡管Ca2+震蕩是在卵母細(xì)胞ICSI受精后立即產(chǎn)生的[3],Ca2+載體能維持胚胎后期發(fā)育過程中所需要的充足的鈣供應(yīng)。在細(xì)胞有絲分裂阻滯或Ca2+通道缺乏的細(xì)胞周期中,應(yīng)用Ca2+載體能明顯改善細(xì)胞分裂,并且Ca2+載體在細(xì)胞分裂的初始階段即發(fā)揮至關(guān)重要的作用[14]。此外,Ca2+震蕩波還能促使成熟卵母細(xì)胞進(jìn)行正常減數(shù)分裂。研究發(fā)現(xiàn),卵母細(xì)胞的減數(shù)分裂阻滯大多是由Ca2+通道缺失引起的[15]。因此,Ca2+載體對于細(xì)胞有絲分裂和減數(shù)分裂中任何階段阻滯均具有改善作用。在生理性或病理性鈣缺乏的ICSI助孕患者中易發(fā)生胚胎卵裂阻滯的問題[16],進(jìn)一步證實Ca2+在胚胎卵裂過程中的重要作用。本研究發(fā)現(xiàn),在胚胎發(fā)育阻滯或緩慢的患者中,Ca2+載體能明顯促進(jìn)胚胎的卵裂和囊胚的形成,改善胚胎質(zhì)量。然而未發(fā)現(xiàn)Ca2+載體對受精率的顯著影響,分析原因可能為本研究募集的是ICSI注射后能正常受精的患者,受精過程不需要外源性鈣離子進(jìn)行輔助激活,因此其對受精的影響作用不明顯。由此推測,除導(dǎo)致受精失敗外,卵母細(xì)胞激活過程中Ca2+信號不足還可能影響后期的胚胎卵裂,導(dǎo)致胚胎質(zhì)量差,囊胚形成率低等問題。

    引起胚胎發(fā)育緩慢或阻滯的原因較復(fù)雜,除精源性因素外,還有可能是卵母細(xì)胞自身的異常。研究發(fā)現(xiàn),Ca2+載體激活能顯著提高年輕及卵巢功能正?;颊叩氖芫省⒛遗咝纬陕屎湍遗哔|(zhì)量,并不能改善高齡或卵巢儲備低下患者的受精和胚胎質(zhì)量[7]。老年女性的卵母細(xì)胞進(jìn)行Ca2+內(nèi)流的能力嚴(yán)重受損,但卵母細(xì)胞裝載正常精子和PLCζ誘導(dǎo)的Ca2+振蕩特性的能力幾乎不受影響。因此可能是卵母細(xì)胞激活失敗以外的因素,如與年齡相關(guān)的卵母細(xì)胞非整倍體,線粒體DNA損傷以及線粒體功能障礙等均影響著胚胎發(fā)育和胚胎質(zhì)量[17]。因此,本研究募集的人群是年輕(22~36歲)且卵巢功能正常者,盡可能減少卵源性因素對受精和胚胎的潛在影響。此外,本研究采用自身對照,為避免前后兩個周期的個體變化,盡量縮短受試對象前后兩個周期助孕的間隔時間,并且再次ICSI助孕時受試對象重新接受體重、卵巢功能等指標(biāo)的評估,這些指標(biāo)在前后兩個周期中均無顯著差異。為減少外源性因素對胚胎結(jié)局的影響,本研究募集的患者在激活前后兩個周期均采用以克羅米芬和尿促性素為主要促排卵藥物的溫和刺激方案,激活周期根據(jù)患者前次助孕的反應(yīng)性僅做藥物劑量微小的調(diào)整。由于克羅米芬的抗雌激素效應(yīng),其對子宮內(nèi)膜容受性有一定的負(fù)面影響,因此患者全部采用凍胚移植,并且凍胚移植周期均采用人工周期方案準(zhǔn)備內(nèi)膜。盡管玻璃化冷凍及胚胎復(fù)蘇操作對胚胎的影響較小,但仍不能完全排除其對胚胎潛在影響。

    隨著Ca2+載體在輔助生殖領(lǐng)域的不斷應(yīng)用,其作為一項新技術(shù),其安全性也成了人們關(guān)注的焦點。研究發(fā)現(xiàn),Ca2+載體不會影響卵母細(xì)胞減數(shù)分裂中染色體的正常分離[18]。有關(guān)Ca2+載體激活出生的兒童健康隨訪研究發(fā)現(xiàn),Ca2+載體激活后出生兒童的體重、性別比、出生缺陷率及類型,智力發(fā)育、語言和社會行為能力等方面均與常規(guī)ICSI出生的兒童無顯著差異[19-20]。本研究隨訪Ca2+載體激活組患者分娩的25例新生兒,均未發(fā)現(xiàn)新生兒出生缺陷。目前的數(shù)據(jù)尚未發(fā)現(xiàn)Ca2+載體對子代的不良影響,但由于研究樣本量較少,觀察周期的時限性等問題,Ca2+載體對子代的安全性問題還需大樣本的研究和長期的隨訪觀察進(jìn)一步論證。

    總之,Ca2+載體對胚胎發(fā)育阻滯或緩慢患者胚胎卵裂和妊娠結(jié)局有改善作用,是Ca2+載體應(yīng)用領(lǐng)域的新突破,對于ICSI助孕中反復(fù)出現(xiàn)胚胎結(jié)局不良的年輕患者,Ca2+載體輔助激活帶來孕育新生命的希望。但目前研究樣本量有限,Ca2+載體對胚胎發(fā)育的影響及其安全性還需大規(guī)模多中心前瞻性研究進(jìn)行論證。

    猜你喜歡
    卵裂受精率囊胚
    植入前胚胎異常分裂對胚胎持續(xù)發(fā)育能力的影響
    種蛋受精率檢查的重要性和結(jié)果解釋
    提高種鵝受精率的幾項關(guān)鍵措施
    早期異常卵裂不影響囊胚染色體整倍性
    D5囊胚解凍后培養(yǎng)時間對妊娠結(jié)局的影響
    凍融囊胚的發(fā)育天數(shù)和質(zhì)量對妊娠結(jié)局的影響
    產(chǎn)蛋周齡對科寶父母代肉種雞受精率及孵化效果的影響
    廣東飼料(2016年3期)2016-12-01 03:43:11
    不同水平維生素E對雞受精率和孵化率的影響
    移植早期卵裂胚胎對IVF-ET妊娠結(jié)局的影響研究
    一氧化氮在小鼠囊胚發(fā)育和孵化中的調(diào)控作用
    这个男人来自地球电影免费观看 | 永久免费av网站大全| 国产av码专区亚洲av| 国产一区二区激情短视频 | 男人舔女人的私密视频| 免费黄网站久久成人精品| 亚洲美女搞黄在线观看| 日韩视频在线欧美| 宅男免费午夜| 久久99蜜桃精品久久| www.熟女人妻精品国产 | av在线观看视频网站免费| 亚洲国产欧美在线一区| 久久久久网色| 久久久精品免费免费高清| 99精国产麻豆久久婷婷| 久久久久久伊人网av| 一二三四中文在线观看免费高清| 丝瓜视频免费看黄片| 岛国毛片在线播放| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 亚洲精品av麻豆狂野| 婷婷色av中文字幕| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 国产极品天堂在线| 黑人欧美特级aaaaaa片| 欧美丝袜亚洲另类| 成年人免费黄色播放视频| av在线观看视频网站免费| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | av天堂久久9| 桃花免费在线播放| 亚洲精品自拍成人| 在线观看免费日韩欧美大片| 免费观看a级毛片全部| 少妇的逼好多水| 亚洲综合色网址| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 久久97久久精品| 人妻人人澡人人爽人人| 下体分泌物呈黄色| 国产69精品久久久久777片| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产在线免费精品| 一区二区av电影网| videossex国产| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| av免费在线看不卡| 国产精品久久久久久精品电影小说| 国产免费又黄又爽又色| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 国产亚洲最大av| 99热6这里只有精品| 成人午夜精彩视频在线观看| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产1区2区3区精品| 欧美成人精品欧美一级黄| 99国产精品免费福利视频| 两性夫妻黄色片 | 天天影视国产精品| 一级,二级,三级黄色视频| 国国产精品蜜臀av免费| 国产精品国产三级国产专区5o| 国产成人午夜福利电影在线观看| 最新的欧美精品一区二区| 一级毛片电影观看| 亚洲av综合色区一区| 亚洲久久久国产精品| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕 | 精品人妻在线不人妻| 中文天堂在线官网| av天堂久久9| 国产69精品久久久久777片| 亚洲久久久国产精品| 日本午夜av视频| 久久97久久精品| 免费黄网站久久成人精品| 久久久国产精品麻豆| 99热国产这里只有精品6| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 欧美成人午夜免费资源| 在线看a的网站| 少妇的逼好多水| 国产成人aa在线观看| 少妇的逼水好多| 丝袜人妻中文字幕| 国产成人av激情在线播放| 如何舔出高潮| 成年美女黄网站色视频大全免费| 精品一区在线观看国产| 久久久精品区二区三区| 亚洲成色77777| 亚洲av.av天堂| 99久久精品国产国产毛片| 日日摸夜夜添夜夜爱| 久久久久久久大尺度免费视频| 亚洲中文av在线| 亚洲伊人久久精品综合| 免费日韩欧美在线观看| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 美女大奶头黄色视频| 男女边吃奶边做爰视频| 欧美日韩亚洲高清精品| 全区人妻精品视频| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 在线观看免费高清a一片| 精品人妻一区二区三区麻豆| 亚洲av中文av极速乱| 国产精品女同一区二区软件| 免费黄网站久久成人精品| 99国产综合亚洲精品| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 欧美国产精品va在线观看不卡| 三上悠亚av全集在线观看| 国产不卡av网站在线观看| 久久鲁丝午夜福利片| 交换朋友夫妻互换小说| 日本色播在线视频| 久久久久视频综合| 看免费av毛片| 国产老妇伦熟女老妇高清| 韩国精品一区二区三区 | 一边亲一边摸免费视频| 黄色毛片三级朝国网站| 狂野欧美激情性bbbbbb| 伊人久久国产一区二区| 欧美人与善性xxx| 精品福利永久在线观看| 欧美bdsm另类| 国产在视频线精品| 午夜福利,免费看| 99热国产这里只有精品6| 成人无遮挡网站| 久久狼人影院| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲国产精品成人久久小说| 国产探花极品一区二区| 免费高清在线观看视频在线观看| 91aial.com中文字幕在线观看| 欧美3d第一页| 亚洲图色成人| 成人综合一区亚洲| 亚洲中文av在线| 国产黄色免费在线视频| 一级毛片我不卡| 中文天堂在线官网| 熟女av电影| 老熟女久久久| 美女中出高潮动态图| 国产一区二区三区综合在线观看 | 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 亚洲高清免费不卡视频| 午夜精品国产一区二区电影| 亚洲性久久影院| 亚洲精品自拍成人| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 春色校园在线视频观看| 久久久久久人妻| 久久久久精品人妻al黑| 国产黄频视频在线观看| 国国产精品蜜臀av免费| 在现免费观看毛片| av在线app专区| 亚洲成色77777| 国产一区二区在线观看日韩| 青青草视频在线视频观看| 亚洲四区av| 国产日韩欧美亚洲二区| 日本欧美国产在线视频| 久久韩国三级中文字幕| 少妇 在线观看| a级毛色黄片| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 欧美人与性动交α欧美软件 | 免费大片黄手机在线观看| 婷婷色麻豆天堂久久| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| av不卡在线播放| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 色网站视频免费| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 国产精品99久久99久久久不卡 | 9191精品国产免费久久| 晚上一个人看的免费电影| 亚洲人成网站在线观看播放| 久久久久精品久久久久真实原创| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 黄色配什么色好看| 色哟哟·www| 妹子高潮喷水视频| 亚洲精品aⅴ在线观看| 精品少妇久久久久久888优播| tube8黄色片| 91国产中文字幕| 性色avwww在线观看| 国产色婷婷99| 精品久久久久久电影网| 亚洲五月色婷婷综合| 成人免费观看视频高清| 成人漫画全彩无遮挡| av黄色大香蕉| 亚洲天堂av无毛| 欧美人与性动交α欧美软件 | 亚洲综合精品二区| 热99久久久久精品小说推荐| www.av在线官网国产| 桃花免费在线播放| 男女边吃奶边做爰视频| 久久久久人妻精品一区果冻| av不卡在线播放| 香蕉精品网在线| 秋霞伦理黄片| 插逼视频在线观看| 亚洲精品,欧美精品| 丰满乱子伦码专区| 欧美精品亚洲一区二区| 日韩欧美一区视频在线观看| 22中文网久久字幕| 国产精品三级大全| 国产黄色视频一区二区在线观看| 赤兔流量卡办理| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 男女国产视频网站| 一级黄片播放器| 国产精品人妻久久久久久| 久久99精品国语久久久| 天堂8中文在线网| 亚洲精品成人av观看孕妇| 91成人精品电影| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 欧美最新免费一区二区三区| 国产精品偷伦视频观看了| 国产精品免费大片| 咕卡用的链子| 香蕉精品网在线| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 久久女婷五月综合色啪小说| 一级片免费观看大全| 日韩制服骚丝袜av| 久久午夜综合久久蜜桃| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 另类亚洲欧美激情| 男的添女的下面高潮视频| 多毛熟女@视频| 麻豆乱淫一区二区| 午夜福利,免费看| 中文字幕人妻熟女乱码| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 丁香六月天网| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 国产片内射在线| 在线观看www视频免费| 国产伦理片在线播放av一区| 一边亲一边摸免费视频| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 日本av手机在线免费观看| 999精品在线视频| 午夜福利,免费看| 成人毛片60女人毛片免费| 国产精品三级大全| 99热全是精品| 欧美人与善性xxx| 日韩精品有码人妻一区| 丰满少妇做爰视频| 夜夜爽夜夜爽视频| 亚洲一区二区三区欧美精品| 日本av手机在线免费观看| 久久久久久人妻| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 久久久国产一区二区| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 赤兔流量卡办理| 欧美日韩精品成人综合77777| 久久久久久久精品精品| 国产黄色视频一区二区在线观看| 美女中出高潮动态图| 欧美+日韩+精品| 亚洲美女黄色视频免费看| av国产精品久久久久影院| 国产深夜福利视频在线观看| 在线精品无人区一区二区三| 男女边摸边吃奶| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 欧美 日韩 精品 国产| 欧美最新免费一区二区三区| 大码成人一级视频| 亚洲欧美一区二区三区国产| 伦精品一区二区三区| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 午夜福利影视在线免费观看| 精品视频人人做人人爽| 国产精品成人在线| 丝袜美足系列| h视频一区二区三区| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产精品欧美亚洲77777| 成年人午夜在线观看视频| 两个人免费观看高清视频| 亚洲一区二区三区欧美精品| 国产视频首页在线观看| 超碰97精品在线观看| 国产男女超爽视频在线观看| 一级片'在线观看视频| 国产精品国产三级国产专区5o| 日韩成人伦理影院| 欧美少妇被猛烈插入视频| videos熟女内射| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 伊人亚洲综合成人网| 我要看黄色一级片免费的| 看十八女毛片水多多多| av卡一久久| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 久久热在线av| 亚洲性久久影院| 欧美精品av麻豆av| 免费看不卡的av| 午夜久久久在线观看| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 色婷婷av一区二区三区视频| 国产乱人偷精品视频| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 18禁观看日本| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 男人舔女人的私密视频| 免费在线观看黄色视频的| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲精品,欧美精品| 少妇 在线观看| 日韩人妻精品一区2区三区| 亚洲av免费高清在线观看| 精品国产露脸久久av麻豆| 亚洲高清免费不卡视频| 波野结衣二区三区在线| av国产久精品久网站免费入址| 亚洲中文av在线| 亚洲色图综合在线观看| 看十八女毛片水多多多| 精品国产国语对白av| 女人久久www免费人成看片| 亚洲精品久久午夜乱码| 高清视频免费观看一区二区| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 人妻一区二区av| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 免费看不卡的av| 少妇的逼好多水| 久久狼人影院| 各种免费的搞黄视频| 亚洲国产精品国产精品| 五月伊人婷婷丁香| 午夜精品国产一区二区电影| 久久精品国产自在天天线| 婷婷色av中文字幕| 国产熟女午夜一区二区三区| 久久久精品区二区三区| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲美女搞黄在线观看| 七月丁香在线播放| 亚洲欧美色中文字幕在线| 少妇的丰满在线观看| 丝袜喷水一区| 日韩av免费高清视频| 男女无遮挡免费网站观看| 精品午夜福利在线看| 如何舔出高潮| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 少妇的丰满在线观看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 麻豆乱淫一区二区| 黑丝袜美女国产一区| 国国产精品蜜臀av免费| 国产日韩欧美亚洲二区| 国产一区二区三区av在线| 美女国产高潮福利片在线看| 少妇高潮的动态图| 国产精品人妻久久久影院| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 全区人妻精品视频| 久久热在线av| 精品亚洲成a人片在线观看| 国产黄频视频在线观看| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产一区二区激情短视频 | 久久鲁丝午夜福利片| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 午夜精品国产一区二区电影| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 性色avwww在线观看| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 777米奇影视久久| 久久久久久人妻| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 免费日韩欧美在线观看| 日韩一本色道免费dvd| 麻豆乱淫一区二区| 美女主播在线视频| 精品人妻一区二区三区麻豆| 国产一区亚洲一区在线观看| 两个人免费观看高清视频| 搡老乐熟女国产| 欧美激情国产日韩精品一区| 热re99久久国产66热| 精品国产露脸久久av麻豆| 亚洲四区av| 欧美精品一区二区大全| 亚洲欧美一区二区三区国产| 香蕉国产在线看| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 桃花免费在线播放| 亚洲丝袜综合中文字幕| 久久久久人妻精品一区果冻| 国产在线免费精品| 婷婷色综合www| 交换朋友夫妻互换小说| 久久精品久久久久久久性| 日本午夜av视频| 老熟女久久久| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 青春草视频在线免费观看| 精品一区在线观看国产| 在线天堂中文资源库| 好男人视频免费观看在线| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 国产成人aa在线观看| 91国产中文字幕| 中文字幕免费在线视频6| 日日撸夜夜添| 秋霞伦理黄片| 日本av手机在线免费观看| 色94色欧美一区二区| 国产亚洲精品久久久com| 精品福利永久在线观看| 婷婷色av中文字幕| 美女国产视频在线观看| 久久这里有精品视频免费| 9色porny在线观看| 国产精品一区二区在线观看99| 春色校园在线视频观看| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲精品456在线播放app| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 亚洲精品一区蜜桃| 亚洲综合色网址| a级片在线免费高清观看视频| 久久97久久精品| 国产熟女欧美一区二区| 国产 精品1| 国产精品一国产av| 男女午夜视频在线观看 | 捣出白浆h1v1| 春色校园在线视频观看| 丝袜人妻中文字幕| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 亚洲精品色激情综合| 另类亚洲欧美激情| 国产1区2区3区精品| 99精国产麻豆久久婷婷| 狂野欧美激情性bbbbbb| 少妇被粗大猛烈的视频| 午夜影院在线不卡| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 这个男人来自地球电影免费观看 | 我要看黄色一级片免费的| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 三上悠亚av全集在线观看| 各种免费的搞黄视频| 国产精品国产av在线观看| xxxhd国产人妻xxx| 日本免费在线观看一区| 国产精品国产三级国产专区5o| 最新中文字幕久久久久| 精品一区二区三卡| 天堂8中文在线网| 久久久久久久久久人人人人人人| 美女国产高潮福利片在线看| 成人黄色视频免费在线看| 乱码一卡2卡4卡精品| www.熟女人妻精品国产 | 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 2022亚洲国产成人精品| 亚洲伊人色综图| 精品久久国产蜜桃| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 又黄又粗又硬又大视频| 在线观看免费日韩欧美大片| 十八禁高潮呻吟视频| 亚洲欧洲日产国产| 少妇高潮的动态图| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 国产69精品久久久久777片| 极品人妻少妇av视频| 成年女人在线观看亚洲视频| 男女边吃奶边做爰视频| 午夜免费男女啪啪视频观看| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 色哟哟·www| videos熟女内射| 欧美bdsm另类| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 两性夫妻黄色片 | 国产色婷婷99| 亚洲综合色网址| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 大片电影免费在线观看免费| 精品视频人人做人人爽| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| h视频一区二区三区| 一级a做视频免费观看| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 搡老乐熟女国产| 色5月婷婷丁香| 精品少妇久久久久久888优播| www.av在线官网国产| 国产1区2区3区精品| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产免费一区二区三区四区乱码| 99精国产麻豆久久婷婷| 国产在视频线精品| 国产成人精品久久久久久| a级毛片黄视频| 视频在线观看一区二区三区| 国产乱人偷精品视频| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 少妇熟女欧美另类| 亚洲伊人久久精品综合| 两个人免费观看高清视频| 国产成人a∨麻豆精品| 久久久亚洲精品成人影院| 自线自在国产av| 免费av中文字幕在线| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 亚洲国产精品成人久久小说| 久久久久精品久久久久真实原创| 成人午夜精彩视频在线观看| 美女内射精品一级片tv| 国产极品天堂在线| 久久久a久久爽久久v久久| 免费大片18禁| 国产成人精品久久久久久| 久热久热在线精品观看| 国产男女内射视频| 女性生殖器流出的白浆| 亚洲精品第二区| 我的女老师完整版在线观看| 亚洲性久久影院| 热99国产精品久久久久久7| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 免费黄网站久久成人精品| √禁漫天堂资源中文www| 久久女婷五月综合色啪小说| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 一本色道久久久久久精品综合| 99国产精品免费福利视频| 亚洲精品日本国产第一区| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 成人午夜精彩视频在线观看| 日韩欧美精品免费久久| 成人手机av| 午夜福利视频在线观看免费| 日本爱情动作片www.在线观看| 亚洲精品aⅴ在线观看| 自线自在国产av| av天堂久久9| 精品熟女少妇av免费看| 亚洲国产成人一精品久久久| 一级毛片电影观看| 国产av码专区亚洲av| 欧美亚洲日本最大视频资源| 国产精品免费大片| 免费高清在线观看日韩| 热re99久久精品国产66热6| 在线观看三级黄色| 性高湖久久久久久久久免费观看| 亚洲精品第二区| 亚洲精品乱久久久久久| 黄色配什么色好看| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 亚洲精品乱久久久久久| 九草在线视频观看| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 最近最新中文字幕免费大全7| 久久久久精品人妻al黑| 一二三四在线观看免费中文在 | 国产欧美日韩一区二区三区在线| 一级毛片电影观看| 免费观看av网站的网址| 纯流量卡能插随身wifi吗| 成人影院久久| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 满18在线观看网站| 老熟女久久久| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 欧美精品一区二区大全| 国产日韩欧美亚洲二区| 免费观看性生交大片5| 国产精品 国内视频| 久久久a久久爽久久v久久| 日日摸夜夜添夜夜爱| av在线观看视频网站免费| 久久狼人影院| 精品久久久精品久久久| 观看av在线不卡|