不同去角方式對低日齡犢牛情感狀態(tài)的影響

谷田雨，王浩南，尹國安

（黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，大慶 163319）

近年來，越來越多的研究表明，動(dòng)物也能夠體驗(yàn)到多種高級(jí)情感，也就是說，動(dòng)物也有豐富的主觀體驗(yàn)，如消極的、中性的或積極的情感。對于動(dòng)物來說，由于它們不能用語言表達(dá)他們的主觀體驗(yàn)，所以直接評估其情感狀態(tài)是困難的。而對人類的研究表明，認(rèn)知功能的幾個(gè)方面，包括注意力和記憶力，都會(huì)受到情感狀態(tài)的影響[1]。有研究發(fā)現(xiàn)去勢會(huì)減少幼畜的游戲行為[2]。游戲行為發(fā)生時(shí)長的減少可能與全身持續(xù)性疼痛有關(guān)。游戲行為是一種與內(nèi)啡肽釋放相關(guān)的自我獎(jiǎng)勵(lì)行為，游戲行為測試用于評估動(dòng)物的情感狀態(tài)，處于低積極情感狀態(tài)的動(dòng)物游戲行為會(huì)相應(yīng)減少[3]。在良好的生存環(huán)境下，幾乎所有的幼年哺乳動(dòng)物均會(huì)表現(xiàn)游戲行為[4]，當(dāng)完成某項(xiàng)任務(wù)時(shí)，游戲行為也被作為獎(jiǎng)勵(lì)[5]。例如，在一項(xiàng)選擇測試中，幼鼠對社交游戲的重視程度與獲得食物的程度一樣高[6]。然而，游戲行為不是動(dòng)物生存所必需的，幼鼠在不利的條件下其游戲行為會(huì)減少甚至消失。幼齡有蹄哺乳動(dòng)物在面臨母乳短缺或斷奶期表現(xiàn)較少的游戲行為[7]。因此，游戲行為可能是評估幼齡動(dòng)物福利的重要指標(biāo)[2]。

最近的研究試圖將動(dòng)物認(rèn)知過程的變化作為評估動(dòng)物情感的一種方法[8]。農(nóng)場動(dòng)物遭受一次負(fù)面經(jīng)歷（如恐懼、疼痛或慢性應(yīng)激）后，會(huì)表現(xiàn)出悲觀等負(fù)面情緒[9]。相反，農(nóng)場動(dòng)物在豐富多樣的環(huán)境下會(huì)偏向于作出樂觀的判斷[10]。動(dòng)物對環(huán)境中積極或消極刺激的感知，反映了它們的情感狀態(tài)[11]，異常的情感狀態(tài)使動(dòng)物的正常生理狀態(tài)出現(xiàn)波動(dòng)，并導(dǎo)致其偏好、動(dòng)機(jī)等主觀意識(shí)出現(xiàn)偏差[12]。在人類的研究中發(fā)現(xiàn)處于消極情感狀態(tài)的人更傾向于以消極的方式應(yīng)對刺激，表現(xiàn)出消極的認(rèn)知偏差，而處于積極情感狀態(tài)的人則會(huì)表現(xiàn)積極的認(rèn)知偏差[13]。情感狀態(tài)會(huì)影響注意力、記憶力及判斷偏差。這些由情感引起的認(rèn)知變化已經(jīng)在許多物種中得到驗(yàn)證[8]。判斷偏差測試已被用來評估動(dòng)物的長期情感狀態(tài)，與動(dòng)物福利的關(guān)系也得到了廣泛的認(rèn)可[14]。判斷偏差測試前期，給予動(dòng)物積極和消極的線索，之后再給予動(dòng)物模棱兩可的信息進(jìn)行測試，當(dāng)動(dòng)物處于負(fù)面情感狀態(tài)時(shí)，對這些模棱兩可線索的反應(yīng)時(shí)間會(huì)增加（即悲觀判斷偏差）[1]。本試驗(yàn)研究在燒烙去角和去角膏去角兩種不同去角方式下，疼痛是否對犢牛造成情感狀態(tài)的影響，以及兩種去角方式之間是否存在差異。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)選用荷斯坦?fàn)倥＃珊邶埥」枮I完達(dá)山奶牛養(yǎng)殖有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選取40頭4日齡犢牛（16頭公犢，24頭母犢）進(jìn)行學(xué)習(xí)訓(xùn)練，訓(xùn)練完成后隨機(jī)選取4頭母犢牛進(jìn)行假去角，根據(jù)去角方式的不同將剩余犢牛分為兩組，第一組采用燒烙方式去角（以下簡稱燒烙組），第二組采用去角膏的方式去角（以下簡稱去角膏組），每組公犢牛8頭、母犢牛10頭。

1.3 飼養(yǎng)管理

犢牛欄內(nèi)犢牛采用群養(yǎng)方式飼養(yǎng)，每日飼喂3次牛奶（分別為05:30、12:30、17:30），犢牛出生后第3天開始給水，出生7d后的犢牛供給充足的開食料（顆粒料）任其自由采食。每天清理糞便污染的墊草，清理后添加新墊草。其他飼養(yǎng)管理程序按照規(guī)?；鰳?biāo)準(zhǔn)統(tǒng)一進(jìn)行。

1.4 犢牛訓(xùn)練及去角

訓(xùn)練圍欄由膠合板和鋼架組成，長為200cm、寬為140cm、高為150cm（圖1），圍欄內(nèi)地面鋪有10cm厚的墊草，每星期更換一次新的墊草。電腦屏幕固定在圍欄門的對側(cè)，離地50cm高。在圍欄兩側(cè)距離門30cm、距離地面50cm處，分別設(shè)有切換球（用于屏幕圖片切換）與牛奶獲取口。圍欄設(shè)有監(jiān)控設(shè)備，可對犢牛測試期間持續(xù)錄像記錄。

圖1 犢牛訓(xùn)練圍欄

犢牛從5日齡開始，在每天早（05:30）、中（12:30）、晚（17:30）3個(gè)喂奶時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行訓(xùn)練，在訓(xùn)練過程中每次飼喂1.2～1.5L牛奶，每次訓(xùn)練10～35min。到12日齡時(shí)使?fàn)倥W(xué)會(huì)識(shí)別圖片且會(huì)自動(dòng)切換圖片，建立紅色圖片是懲罰、白色圖片是獎(jiǎng)勵(lì)的機(jī)制。

去角時(shí)間為13日齡11:30，去角順序與訓(xùn)練順序相同，燒烙組使用智牧人去角器，加熱到預(yù)定溫度（600～800℃）燒烙5～7s，去角膏組選用內(nèi)勒博士去角膏（成分：氫氧化鈣38%、氫氧化鈉21%、甘油19.8%、水21.2%），剃掉犢牛角芽周邊毛發(fā)，涂抹直徑大約2cm以覆蓋住角芽，所有犢牛去角均由同一名經(jīng)驗(yàn)豐富的獸醫(yī)完成。

1.5 游戲行為測定

在10日齡時(shí)對試驗(yàn)犢牛進(jìn)行標(biāo)記，使用紅色蠟筆分別在犢牛的左身、右身、背部白色毛發(fā)處標(biāo)記序號(hào)，并在生活圍欄內(nèi)栓系6條麻繩作為玩具，連續(xù)拍攝4d記錄每頭犢牛玩繩的時(shí)間。

1.6 判斷偏差測試

判斷偏差測試時(shí)間為：犢牛去角前6h和去角后1.5h、6h、25.5h、30h。將60張純色圖片（白色、紅色各24張，飽和度為60%、40%、20%的紅色圖片各4張，且所有圖片對比度和銳度相同，在屏幕顯示圖片時(shí)亮度保持一致），統(tǒng)一處理，設(shè)置相同對比度及銳度；使用Microsoft office 2019軟件隨機(jī)排序，制成PPT用于測試。行為判定：觸碰到啟動(dòng)切換球離開時(shí)記為觸碰一次，犢牛鼻尖距離屏幕5cm以內(nèi)視為觸碰屏幕。獎(jiǎng)懲機(jī)制：試驗(yàn)中犢牛觸碰白色圖片給予獎(jiǎng)勵(lì)（喂食牛奶）；觸碰紅色圖片給予懲罰（輕打頭部）；觸碰其他圖片時(shí)不予獎(jiǎng)懲。

1.7 數(shù)據(jù)分析

將游戲行為情況進(jìn)行配對T檢驗(yàn)，與去角前基期值做比較，對去角方法的比較采用獨(dú)立T檢驗(yàn)。判斷偏差測試對時(shí)間數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)處理，各測試點(diǎn)的時(shí)間/基期時(shí)間得到比值，使用獨(dú)立T檢驗(yàn)進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 游戲行為

經(jīng)配對T檢驗(yàn)，與去角前對應(yīng)時(shí)間基期相比，在去角后6～8h，燒烙組與去角膏組游戲行為時(shí)間均顯著降低（P＜0.05）。經(jīng)獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)，兩種去角方式的游戲行為發(fā)生時(shí)間無顯著差異（P＞0.1）（圖2）。

圖2 不同去角方式對犢牛游戲行為時(shí)長的影響

2.2 判斷偏差測試

經(jīng)獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)，與假去角組相比，燒烙組和去角膏組在去角后的四次測試中，對60%飽和度紅色圖片的反應(yīng)時(shí)間均無顯著差異（P＞0.1），兩種去角方式之間也無顯著性差異（P＞0.1）（圖3）。

圖3 不同去角方式對犢牛選擇60%飽和度紅色圖片反應(yīng)時(shí)間的影響

經(jīng)獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)，與假去角組相比，燒烙組在去角后的四次測試中，對40%飽和度紅色圖片的反應(yīng)時(shí)間無顯著差異（P＞0.1），去角膏組在去角后第1次、第2次測試中，對40%飽和度紅色圖片的反應(yīng)時(shí)間高于假去角組，但無顯著性差異（P=0.08、P=0.088），存在升高的趨勢。兩種去角方式之間雖無顯著差異，但在第3次測試中燒烙組低于去角膏組（P=0.072），有下降趨勢（圖4）。

圖4 不同去角方式對犢牛選擇40%飽和度紅色圖片反應(yīng)時(shí)間的影響

經(jīng)獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)，與假去角組相比，燒烙組和去角膏組在去角后的四次測試中，對20%飽和度紅色圖片的反應(yīng)時(shí)間均無顯著差異（P＞0.1），兩種去角方式之間雖無顯著性差異，但在第1次測試時(shí)燒烙組低于去角膏組（P=0.071），存在一定下降趨勢（圖5）。

圖5 不同去角方式對犢牛選擇20%飽和度紅色圖片反應(yīng)時(shí)間的影響

3 討論

研究證實(shí)懸掛的麻繩可以作為犢牛的玩具，且犢牛一般會(huì)在下午喂奶后和上午喂奶前這兩個(gè)階段出現(xiàn)長時(shí)間的玩繩行為[15]。本試驗(yàn)也得到相似的結(jié)果，犢牛在早上06:00～08:00及傍晚18:00～20:00喂奶后出現(xiàn)長時(shí)間的游戲行為，因此在分析去角對游戲行為影響時(shí)選取這兩個(gè)時(shí)間段。有研究人員對不同牛奶攝入量（6L、12L）的犢牛游戲行為進(jìn)行比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，低牛奶攝入量的犢牛游戲行為更少，同時(shí)他們還發(fā)現(xiàn)較早斷奶的犢牛（7周齡斷奶）游戲行為少于13周齡斷奶犢牛[7]。與群養(yǎng)犢牛相比，單獨(dú)飼養(yǎng)的犢牛游戲更少[16]。與假去角組犢牛相比，去角組犢牛在去角后玩耍行為減少[17]。即當(dāng)動(dòng)物受到損害（如疼痛、饑餓、生病）時(shí)，游戲行為時(shí)間較少[18]。Russhen等研究發(fā)現(xiàn)，在去角后的第二天，使用去角膏去角的犢牛玩耍次數(shù)低于未去角犢牛[19]。本研究也有相似結(jié)果，去角后24h犢牛游戲時(shí)間減少，隨后恢復(fù)到去角前的水平。去角后6～8h顯著低于去角前，這與Mintline等的研究結(jié)果相似[20]。即兩種去角方式都影響了犢牛的積極情感，使?fàn)倥Ｔ谌ソ呛笥螒驎r(shí)間減少，18～20h后恢復(fù)正常，兩種去角方式之間沒有差異。

Lecorps等研究使用對模棱兩可信息的反應(yīng)時(shí)間，來檢測疼痛引起的情緒變化。犢牛在去角后6h觸碰高獎(jiǎng)勵(lì)位置的時(shí)間增加，表明犢牛由于疼痛產(chǎn)生了消極的情感狀態(tài)[21]。用犢?？吹侥＠鈨煽蓤D片時(shí)的反應(yīng)時(shí)間作為判斷偏差測試的指標(biāo)，有研究人員認(rèn)為反應(yīng)時(shí)間延長是情感變化更敏感的表現(xiàn)[22]。以前的試驗(yàn)很少有人在疼痛預(yù)計(jì)消散后繼續(xù)測試犢牛，Lecorps等研究發(fā)現(xiàn)，在去角后6h，燒烙去角對犢牛情感有顯著影響，而在去角后22和70h測試時(shí)，發(fā)現(xiàn)燒烙去角對犢牛情感無影響[21]。在本研究中，犢牛去角后1.5、7、24和48h進(jìn)行了多次測試（第1、2、3、4次測試），目的是找到兩種去角方式引起犢牛疼痛的持續(xù)時(shí)間。研究發(fā)現(xiàn)，去角后犢牛對模棱兩可圖片的反應(yīng)時(shí)間與未去角組無顯著差異，但去角膏組犢牛在去角后第1次測試和第2次測試對40%飽和度的紅色圖片反應(yīng)時(shí)間較未去角組有升高趨勢，這些反應(yīng)時(shí)間的增加，可能是去角后疼痛引起的。兩種去角方式之間雖無顯著性差異，但在第1次測試時(shí)對20%飽和度的紅色圖片反應(yīng)時(shí)間和第3次測試時(shí)對40%飽和度的紅色圖片反應(yīng)時(shí)間上，燒烙組低于去角膏組，說明去角膏組比燒烙影響更大。但兩種去角方式并沒有造成情感上的波動(dòng)，可能是由于犢牛日齡比較小，對去角帶來的傷害沒有那么敏感，或者是群養(yǎng)犢牛的抗應(yīng)激能力比單獨(dú)飼養(yǎng)的犢牛強(qiáng)，所以兩種去角方式未造成犢牛消極的情感狀態(tài)。

4 結(jié)論

燒烙和去角膏均會(huì)引發(fā)13日齡犢牛去角疼痛，但僅導(dǎo)致積極情感降低且在18h后影響消失。因此，犢牛在低日齡去角是一種生產(chǎn)中的更佳選擇。