1%莫西菌素微乳制劑的綿羊安全性試驗(yàn)

張國華，金振華，王麗坤，黃新育，張備，李燁，楊昊天，薛沾枚

（黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)分院，黑龍江齊齊哈爾 161005）

莫西菌素是一種具有較高的驅(qū)蟲活性和安全特性的藥物，對畜禽消化道線蟲、肺線蟲和體外寄生蟲均具有良好的驅(qū)殺作用，具有廣譜、高效、安全、不易產(chǎn)生耐藥性、單次投藥效果顯著等優(yōu)勢，是獸醫(yī)臨床理想的抗寄生蟲藥物[1-2]。目前，莫西菌素藥物劑型主要包括粉劑、膠囊、澆潑劑等[3]。莫西菌素相對難溶于水和大多數(shù)有機(jī)溶劑，但溶解度優(yōu)于伊維菌素、阿維菌素等藥物[4]。多數(shù)莫西菌素液體制劑使用大量的有機(jī)溶劑，成本高且載藥量低，臨床用藥量大，常引起用藥部位發(fā)生炎癥以及壞死，影響了藥物的使用效果。

微乳是一種新型的藥物載體，于20世紀(jì)80年代首次被發(fā)現(xiàn)并命名。目前，微乳作為藥物載體受到了一定重視，我國對于微乳制劑的研究也愈發(fā)廣泛[5]。微乳的基質(zhì)是由水相、油相、表面活性劑以及助表面活性劑根據(jù)一定的比例融合，形成一種均勻、透明度高、熱力學(xué)穩(wěn)定性強(qiáng)的分散體系，其顆粒個體直徑十分細(xì)小，相對優(yōu)于乳劑，是一種適合應(yīng)用于臨床的藥物載體[6-7]。本研究結(jié)合微乳制備技術(shù)研制了莫西菌素微乳劑，旨在方便莫西菌素的臨床使用，提高對寄生蟲病的防治作用，增加畜牧業(yè)的經(jīng)濟(jì)收益；通過安全性試驗(yàn)將藥物應(yīng)用于靶動物綿羊，確定其藥物安全性，為莫西菌素微乳制劑未來應(yīng)用于臨床提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

莫西菌素原料藥物購自河南零壹藥業(yè)有限公司，1%莫西菌素微乳制劑由黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)分院養(yǎng)羊研究室自制。

60只健康綿羊公羊由齊齊哈爾某綿羊養(yǎng)殖場提供，體重為37～42 kg。試驗(yàn)綿羊單獨(dú)進(jìn)行飼養(yǎng)，試驗(yàn)前進(jìn)行疫病檢測，結(jié)果均為陰性；隔離飼養(yǎng)21 d后復(fù)檢仍為陰性，開始進(jìn)行安全性試驗(yàn)。飲水及喂食的全價綿羊飼料，不含抗生素以及抗寄生蟲類藥物。

1.2 儀器與試劑

主要儀器：HB-7501獸用全自動血細(xì)胞分析儀（江蘇英諾華醫(yī)療技術(shù)有限公司）、日立-7020全自動生化分析儀（日立有限公司）、RM2235石蠟組織切片機(jī)（萊卡公司）。

主要試劑：血清生化檢測總膽固醇、葡萄糖、甘油三酯、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、尿素氮、鈣、尿酸、磷、鎂、球蛋白、乳酸脫氫酶、總蛋白、白蛋白、堿性磷脂酶、磷酸肌酸激酶等指標(biāo)，試劑盒購自長春匯力生物技術(shù)有限公司。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

60只健康綿羊，隨機(jī)分為5個組，每組4個重復(fù)，每個重復(fù)3只羊，記錄每組綿羊的耳號。T1組為對照組（頸部皮下注射等體積的微乳基質(zhì)）,T2組、T3組、T4組、T5組綿羊分別按照0.2、0.6、1.0、2.0 mg/kg頸部皮下注射1%莫西菌素微乳制劑。

按照耳號注射不同劑量的藥劑及對照，于首次給藥后1周進(jìn)行第二次給藥，完成兩次給藥后24 h，采集綿羊全血、肝素抗凝血及尿液，進(jìn)行血液生理指標(biāo)、血清生化指標(biāo)及尿液理化指標(biāo)檢測。試驗(yàn)期7 d。

1.4 測定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長性能

注射藥物后每日觀察綿羊精神狀態(tài)、采食量、體溫、呼吸是否出現(xiàn)異?，F(xiàn)象、死亡情況。在試驗(yàn)開始前及試驗(yàn)第7 d稱重，記錄每日剩料量，計(jì)算平均日增重、平均日采食量及料重比。

小說以虛幻世界為背景，為使讀者更能清晰深刻理解，小說中運(yùn)用大量的比喻，使事物生動、形象、具體，給人以鮮明的印象；化無形為有形，使抽象的事物更形象具體，使深奧的道理變得淺顯易懂。

1.4.2 血液生理指標(biāo)

完成兩次給藥后24 h，對進(jìn)行試驗(yàn)的所有綿羊進(jìn)行血液采集，每只羊采靜脈血10 mL，放置于肝素抗凝管中，全血樣本采用全自動血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血常規(guī)檢測。

1.4.3 血清生化指標(biāo)

完成兩次給藥后24 h，對進(jìn)行試驗(yàn)的所有綿羊進(jìn)行血液采集，每只羊采靜脈血10 mL，于37℃靜置4 h析出血清，樣本采用全自動生化分析儀進(jìn)行血清生化檢測。

1.4.4 尿液理化指標(biāo)

完成兩次給藥后24 h，對進(jìn)行試驗(yàn)的所有綿羊進(jìn)行尿液理化指標(biāo)檢測，每只羊插管采集尿液50 mL，立即測定pH值，并盡快在實(shí)驗(yàn)室采用試劑盒測定尿液鈣、磷、鎂、肌酐等指標(biāo)（試劑盒購自南京建成生物工程研究所）。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用Excel2017軟件與SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同劑量1%莫西菌素微乳制劑對綿羊生長性能的影響（見表1）

表1 不同劑量1%莫西菌素微乳制劑對綿羊生長性能的影響Tab.1 Effect of different doses of 1%moxidectin microemulsion on growth performance of sheep

2.2 不同劑量1%莫西菌素微乳制劑對綿羊血液生理指標(biāo)的影響（見表2）

由表2可知，各組綿羊的血液生理指標(biāo)差異均不顯著（P＞0.05），結(jié)果表明，莫西菌素微乳制劑對靶動物綿羊血細(xì)胞生產(chǎn)無不良影響。

表2 不同劑量1%莫西菌素微乳制劑對綿羊血液生理指標(biāo)的影響Tab.2 Effect of different doses of 1%moxidectin microemulsion on blood physiological indexes of sheep

2.3 不同劑量1%莫西菌素微乳制劑對綿羊血清生化指標(biāo)的影響（見表3）

由表3可知，各組綿羊的血清生化指標(biāo)差異均不顯著（P＞0.05），表明莫西菌素微乳制劑對于靶動物綿羊物質(zhì)代謝能力無顯著影響，并且對肝功能、腎功能未見損傷。

表3 不同劑量1%莫西菌素微乳制劑對綿羊血清生化指標(biāo)的影響Tab.3 Effect of different doses of 1%moxidectin microemulsion preparation on serum biochemical indexes of sheep

2.4 不同劑量1%莫西菌素微乳制劑對綿羊尿液理化指標(biāo)的影響（見表4）

由表4可知，各組綿羊的尿液理化指標(biāo)差異均不顯著（P＞0.05），表明莫西菌素微乳制劑對于靶動物綿羊?qū)ξ镔|(zhì)代謝水平無影響。

表4 不同劑量1%莫西菌素微乳制劑對綿羊尿液理化指標(biāo)的影響Tab.4 Effect of different doses of 1%moxicillin microemulsion on physicochemical indexes of sheep urine

3 討論

目前國內(nèi)市場尚無莫西菌素微乳產(chǎn)品。莫西菌素微乳制劑的研制解決了莫西菌素難溶水以及多數(shù)有機(jī)溶劑的問題，生產(chǎn)便于推廣使用的莫西菌素注射新劑型，能夠使驅(qū)蟲殺蟲藥具有緩釋作用，延長藥物的治療時間。微乳劑提高了藥物的生物利用度，用藥劑量隨之減少，可降低藥物對靶動物的毒副作用、避免產(chǎn)生耐藥性，局部組織刺激性小，并降低藥物在動物體內(nèi)的殘留，從而提高動物食品的安全性[8-9]。為更好地驗(yàn)證莫西菌素微乳制劑的安全性，為莫西菌素微乳制劑的臨床應(yīng)用提供參考，研究進(jìn)行了藥物安全性試驗(yàn)[10]。

安全性是藥物最基本的屬性之一，對于藥物的新劑型而言，藥物安全性的研究非常重要[11-12]。藥物的臨床應(yīng)用可以很好地評價藥物安全性，不同試驗(yàn)動物的臨床反應(yīng)可能有所不同[13-15]。因此，研究新劑型的藥物時應(yīng)針對不同的靶動物進(jìn)行安全性試驗(yàn)，獲得更加豐富的數(shù)據(jù)。

本試驗(yàn)對研究室自制的1%莫西菌素微乳制劑進(jìn)行藥物安全性試驗(yàn)，對試驗(yàn)動物進(jìn)行臨床觀察，計(jì)算平均日增重等生長性能指標(biāo)，測定血液生理指標(biāo)、血清生化指標(biāo)及尿液理化指標(biāo)，結(jié)果顯示，對照組與各試驗(yàn)組綿羊各指標(biāo)差異不顯著，且均在正常范圍內(nèi)。試驗(yàn)結(jié)果表明，皮下注射1倍劑量（推薦劑量）、3倍劑量、5倍劑量、10倍劑量的1%莫西菌素微乳制劑對靶向動物綿羊安全，適用于臨床推廣，具有良好的應(yīng)用前景，本試驗(yàn)結(jié)果為莫西菌素微乳制劑的進(jìn)一步研究提供了參考。

4 結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明，綿羊皮下注射1倍劑量（推薦劑量）、3倍劑量、5倍劑量、10倍劑量的1%莫西菌素微乳制劑對于靶向動物綿羊安全，1%莫西菌素微乳制劑對綿羊是一種較安全的劑型。