LINC02163靶向miR-338-3p影響乳腺癌細(xì)胞增殖、侵襲及遷移

張景臣，李 新，李江濤，李海平，陳艷麗，牛 冰，祁川川，葉貝貝

鄭州人民醫(yī)院乳腺科，河南 鄭州 450053

乳腺癌作為在全球女性中最為常見(jiàn)的惡性腫瘤，盡管目前其診斷及治療取得了極大的進(jìn)步，但患者預(yù)后情況仍不能令人滿意，其中，轉(zhuǎn)移是造成患者死亡的主要原因之一，極大地降低了療效，因此，全面了解乳腺癌的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移機(jī)制對(duì)改善患者預(yù)后具有重要作用［1］。非編碼RNA（non-coding RNA，ncRNA）包括長(zhǎng)鏈ncRNA（long ncRNA，lncRNA）及微小RNA（micro RNA，miRNA）等，lncRNA可作為miRNA海綿來(lái)調(diào)控后者表達(dá)，兩者已被發(fā)現(xiàn)在乳腺癌中失調(diào)，與腫瘤惡性生物學(xué)行為具有密切相關(guān)性［2-3］。LINC02163被發(fā)現(xiàn)在乳腺癌［4］、結(jié)直腸癌［5］等癌癥中異常上調(diào)，將其敲除可抑制乳腺癌細(xì)胞的惡性行為［4］，目前關(guān)于其在乳腺癌中的相關(guān)機(jī)制研究甚少。有研究［6］證實(shí)，miR-338-3p在乳腺癌組織中呈低表達(dá)狀態(tài)，抑制其表達(dá)可增強(qiáng)乳腺癌細(xì)胞（MCF7、HCC1937）生長(zhǎng)、遷移及侵襲和上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）過(guò)程。LINC02163對(duì)乳腺癌細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的促進(jìn)是否與其靶向調(diào)控miR-338-3p表達(dá)有關(guān)值得探究，因此，本研究通過(guò)探究LINC02163靶向miR-338-3p對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖、侵襲及遷移的影響，以期為闡明乳腺癌的發(fā)生機(jī)制提供線索。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

將從河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心購(gòu)買的25只6周齡BALB/c裸小鼠［19～22 g，無(wú)特定病原體（specific pathogen free，SPF）級(jí)］飼養(yǎng)于保持12 h晝夜交替的環(huán)境中7 d，許可證號(hào)：SCXK（豫）2017－0001。

1.2 試劑和儀器

MCF-10 A、MCF-7、BT-20、MDA-MB-231、T47D細(xì)胞系（A2789、SG2226、A2874、ATCC-Y2455、SY4472）購(gòu)自上海酶研生物科技有限公司，sh-NC、sh-LINC02163、inhibitor-NC、miR-338-3p inhibitor購(gòu)自廣州市銳博生物科技有限公司，LipofectamineTM2000 Transfection Reagent（11668-019）購(gòu)自上海偉進(jìn)生物科技有限公司，DMEM 培養(yǎng)基（PM150210）購(gòu)自武漢益普生物科技有限公司，二辛可寧酸（bicinchoninic acid，BCA）法蛋白檢測(cè)試劑盒（mlE3254）購(gòu)自上海酶聯(lián)生物科技有限公司，雙熒光素酶檢測(cè)試劑盒（Omt-03）購(gòu)自北京奧秘佳得醫(yī)藥科技有限公司，兔抗β-actin、c-Myc、E-鈣粘素（E-cadherin）、N-鈣粘素（N-cadherin）、基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）2、MMP9抗體、羊抗兔免疫球蛋白G H&L［辣根過(guò)氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）標(biāo)記］（ab8227、ab32072、ab40772、ab18203、ab37150、ab38898、ab6721）購(gòu)自英國(guó)Abcam公司，MTT檢測(cè)試劑盒、反轉(zhuǎn)錄試劑盒（M1020-500、RP1105）購(gòu)自北京索萊寶科技有限公司，組織化學(xué)試劑盒（G1210）購(gòu)自上海經(jīng)科化學(xué)科技有限公司，兔源抗體Ki-67（100 μg、0.8～1.04 mg/mL，ab15580）購(gòu)自英國(guó)Abcam公司，實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTFQPCR）試劑盒（QPG-020～QPG-023）購(gòu)自上海吉瑪制藥技術(shù)有限公司，Gentier 48E/48R RTFQPCR檢測(cè)系統(tǒng)（FQD-96A）購(gòu)自西安天隆科技有限公司，SH-520凝膠成像系統(tǒng)購(gòu)自杭州申花科技有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 臨床組織樣本獲取

收集鄭州人民醫(yī)院2020年1月—2021年9月收治的9例女性乳腺癌患者的乳腺癌組織及距癌組織2 cm外的癌旁組織樣本，患者年齡40～60歲，平均（45.68±3.05）歲。本研究經(jīng)鄭州人民醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)且患者及家屬均簽署知情同意書。通過(guò)RTFQ-PCR檢測(cè)組織中的LINC02163表達(dá)。

1.3.2 細(xì)胞培養(yǎng)

在DMEM培養(yǎng)基中接種人正常乳腺上皮細(xì)胞系（MCF-10A）和乳腺癌細(xì)胞系（MCF-7、BT-20、MDA-MB-231、T47D），于37 ℃、CO2體積分?jǐn)?shù)為5%的常規(guī)培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至細(xì)胞融合度為80%。

1.3.3 分組及轉(zhuǎn)染

以2×105個(gè)/孔將MDA-MB-231細(xì)胞接種到6孔板中，于37 ℃恒溫培養(yǎng)24 h后，將其分為control組、sh-NC組、sh-LINC02163組、sh-LINC02163+inhibitor-NC組和sh-LINC02163+miR-338-3p inhibitor組，使用LipofectamineTM2000試劑盒將sh-NC、sh-LINC02163、inhibitor-NC和miR-338-3p inhibitor分別轉(zhuǎn)染至相應(yīng)組的MDAMB-231細(xì)胞中，48 h后采用RTFQ-PCR檢測(cè)LINC02163及miR-338-3p表達(dá)。

1.3.4 雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)分析LINC02163與miR-338-3p的靶向關(guān)系

采用starBase2.0網(wǎng)址預(yù)測(cè)LINC02163與miR-338-3p的結(jié)合位點(diǎn)；擴(kuò)增LINC02163上與miR-338-3p結(jié)合的片段，插入pmirGLO載體：構(gòu)建野生型LINC02163-wt質(zhì)粒；采用基因突變技術(shù)對(duì)結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行突變，構(gòu)建突變型LINC02163-mut質(zhì)粒。將MDA-MB-231細(xì)胞分為L(zhǎng)INC02163-wt+miR-338-3p mimics組、LINC02163-wt+miRNC組、LINC02163-mut+miR-338-3p mimics組和LINC02163-mut+miR-NC組，將miR-NC、miR-338-3p mimics、LINC02163-wt和LINC02163-mut分別共轉(zhuǎn)染至MDA-MB-231細(xì)胞中，24 h后檢測(cè)海腎及螢火蟲熒光素酶值，計(jì)算MDA-MB-231細(xì)胞的相對(duì)熒光素酶活性。

1.3.5 RTFQ-PCR檢測(cè)LINC02163及miR-338-3p表達(dá)

使用TRIzol試劑提取乳腺癌組織樣本及MCF-10A、MCF-7、BT-20、MDA-MB-231、T47D細(xì)胞總RNA，反轉(zhuǎn)錄成cDNA后行RTFQPCR擴(kuò)增（GAPDH作為L(zhǎng)INC02163內(nèi)參，U6作為miR-338-3p內(nèi)參），引物見(jiàn)表1，用2-??Ct分析LINC02163及miR-338-3p的表達(dá)水平（n=5）。

表1 RTFQ-PCR引物Tab.1 RTFQ-PCR primers

1.3.6 MTT法檢測(cè)MDA-MB-231細(xì)胞活力

收集各組MDA-MB-231細(xì)胞按2.5×104個(gè)/孔接種到96孔板中，48 h后按20 μL/孔添加5 mg/mL MTT溶液溫育4 h，吸去培養(yǎng)液后加入二甲基亞砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）（150 μL）振蕩搖晃，待結(jié)晶消失后用酶標(biāo)儀測(cè)定細(xì)胞490 nm處的吸光度（D）值，細(xì)胞存活率（%）=［（實(shí)驗(yàn)組D值-空白組D值）/（對(duì)照組D值-空白組D值）］×100%，重復(fù)5孔。

1.3.7 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MDA-MB-231細(xì)胞侵襲

使用Matrigel 基質(zhì)膠將上室包被24 h后，于上室接種各組MDA-MB-231細(xì)胞懸液（1×104個(gè)/孔），下室添加DMEM培養(yǎng)基500 μL，培養(yǎng)48 h后棄培養(yǎng)基，使用無(wú)菌棉簽將上室未穿膜的細(xì)胞擦去，下層細(xì)胞經(jīng)過(guò)多聚甲醛溶液固定后進(jìn)行結(jié)晶紫染色（30 min），在倒置顯微鏡下隨機(jī)觀察5個(gè)視野，并對(duì)穿膜細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)（n=5）。

1.3.8 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MDA-MB-231細(xì)胞遷移

收集MDA-MB-231細(xì)胞接種在6孔板中（2×105個(gè)/孔），培養(yǎng)24 h，用移液槍吸嘴（200 μL）于6孔板底部劃痕，用磷酸緩沖鹽溶液（phosphate-buffered saline，PBS）清洗，測(cè)量劃痕間距，記為d0h，24 h后再次測(cè)量間距，記為d24h，計(jì)算遷移率=（d0h-d24h）/d0h］×100%，重復(fù)5孔。

1.3.9 Western blot檢測(cè)MDA-MB-231細(xì)胞c-Myc、MMP2、MMP9、E-cadherin和N-cadherin蛋白的表達(dá)

采用RIPA試劑裂解MDA-MB-231細(xì)胞后提取總蛋白，通過(guò)BCA法定量分析蛋白濃度，經(jīng)十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodium dodecylsulphate polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）后將所分離的蛋白轉(zhuǎn)到PVDF 膜上，封閉2 h 后添加兔抗c-Myc、β-actin、MMP2、MMP9、E-cadherin和N-cadherin抗體（1∶1 000），搖床上溫育過(guò)夜后添加二抗（1∶3 000）溫育2 h，電化學(xué)發(fā)光（electrochemical luminescence，ECL）顯色，凝膠系統(tǒng)曝光，計(jì)算c-Myc、MMP2、MMP9、E-cadherin和N-cadherin蛋白的表達(dá)（n=5）。

1.3.10 體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)

在BALB/c裸小鼠腋下分別注射各組MDAMB-231細(xì)胞（2×107個(gè)），每周測(cè)量1次：腫瘤體積（mm3）=0.5×腫瘤最長(zhǎng)徑×腫瘤最短徑2，飼養(yǎng)30 d后處死裸小鼠，取瘤體并稱重（n=5）。體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)經(jīng)鄭州人民醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.3.11 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)裸小鼠腫瘤組織的Ki-67增殖指數(shù)

取1.3.10的腫瘤組織進(jìn)行常規(guī)石蠟切片制作，經(jīng)脫蠟及水化后，添加3%的H2O2以去除內(nèi)源性的過(guò)氧化物酶，枸櫞酸緩沖液對(duì)抗原進(jìn)行熱修復(fù)后封閉（牛血清白蛋白）20 min，Ki-67一抗溫育1 h，溫育生物素標(biāo)記的二抗30 min，依次進(jìn)行二氨基聯(lián)苯胺（diaminobenzidine，DAB）液染色、蘇木精復(fù)染，HCl分化、脫水、透明及觀察（×200），Ki-67陽(yáng)性細(xì)胞呈棕褐色（n=5）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 LINC02163在乳腺癌及相應(yīng)癌旁組織中的表達(dá)比較

與癌旁組織相比，LINC02163在乳腺癌組織中的表達(dá)顯著升高（1.00±0.06vs1.92±0.20）（n=9，t=13.218，P＜0.05，圖1）。

圖1 LINC02163在乳腺癌及相應(yīng)癌旁組織中的表達(dá)比較Fig.1 Comparison of the expression of LINC02163 in breast cancer and corresponding adjacent tissues

2.2 LINC02163在人正常乳腺上皮細(xì)胞系（MCF-10A）和乳腺癌細(xì)胞系（MCF-7、BT-20、MDA-MB-231、T47D）中的表達(dá)水平比較

與MCF-10 A 細(xì)胞（1.01±0.09）相比，LINC02163在MCF-7、BT-20、MDAMB-231和T47D細(xì)胞中的表達(dá)均顯著升高，分別為1.40±0.11、1.62±0.24、2.06±0.32和1.51±0.16，并且其在MDA-MB-231細(xì)胞中升高最為顯著（P＜0.05），因此取MDA-MB-231細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2.3 LINC02163與miR-338-3p靶向關(guān)系的驗(yàn)證

采用starBase網(wǎng)址預(yù)測(cè)LINC02163與miR-338-3p間存在結(jié)合位點(diǎn)，詳見(jiàn)圖2。雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)結(jié)果顯示，與LINC02163-wt+miRNC組相比，MDA-MB-231細(xì)胞熒光素酶活性在LINC02163-wt+miR-338-3p mimics組中顯著降低（0.89±0.09vs0.41±0.05，P＜0.05），而在LINC02163-mut+miR-338-3p mimics組、LINC02163-mut+miR-NC組中無(wú)顯著變化（0.87±0.09vs0.88±0.10，P＞0.05）。

圖2 LINC02163與miR-338-3p結(jié)合位點(diǎn)Fig.2 Binding site of LINC02163 and miR-338-3p

2.4 各組MDA-MB-231細(xì)胞中LINC02163及miR-338-3p表達(dá)水平的比較

與control組相比，LINC02163及miR-338-3p表達(dá)在sh-NC組中無(wú)顯著變化（P＞0.05），sh-LINC02163組LINC02163表達(dá)顯著降低，miR-338-3p表達(dá)顯著升高（P＜0.05）。與sh-LINC02163組相比，LINC02163及miR-338-3p表達(dá)在sh-LINC02163+inhibitor-NC組中無(wú)顯著變化（P＞0.05），sh-LINC02163+miR-338-3p inhibitor組LINC02163表達(dá)無(wú)顯著變化（P＞0.05），miR-338-3p表達(dá)顯著降低（P＜0.05，圖3）。

圖3 各組MDA-MB-231細(xì)胞中LINC02163及miR-338-3p表達(dá)水平的比較Fig.3 Comparison of LINC02163 and miR-338-3p expression levels in MDA-MB-231 cells in each group

2.5 各組MDA-MB-231細(xì)胞存活率的比較

與control組相比，MDA-MB-231細(xì)胞存活率在sh-NC組中無(wú)顯著變化（P＞0.05），在sh-LINC02163組中顯著降低（P＜0.05）。與sh-LINC02163組相比，MDA-MB-231細(xì)胞存活率在sh-LINC02163+inhibitor-NC組中無(wú)顯著變化（P＞0.05），在sh-LINC02163+miR-338-3p inhibitor組中顯著增加（P＜0.05，圖4）。

圖4 各組MDA-MB-231細(xì)胞存活率的比較Fig.4 Comparison of MDA-MB-231 cell survival rate in each group

2.6 各組MDA-MB-231細(xì)胞侵襲能力的比較

與control組相比，MDA-MB-231細(xì)胞侵襲細(xì)胞數(shù)在s h-N C 組中無(wú)顯著變化（P＞0.05），在sh-LINC02163組中顯著降低（P＜0.05）。與sh-LINC02163組相比，侵襲細(xì)胞數(shù)在sh-LINC02163+inhibitor-NC組中無(wú)顯著變化（P＞0.05），在sh-LINC02163+miR-338-3p inhibitor組中顯著增加（P＜0.05，圖5）。

圖5 各組MDA-MB-231細(xì)胞侵襲能力的比較Fig.5 Comparison of the invasion ability of MDA-MB-231 cells in each group

2.7 各組MDA-MB-231細(xì)胞遷移能力的比較

與control組相比，MDA-MB-231細(xì)胞遷移率在sh-NC組中無(wú)顯著變化（P＞0.05），在sh-LINC02163組中顯著降低（P＜0.05）。與sh-LINC02163組相比，細(xì)胞遷移率在sh-LINC02163+inhibitor-NC組中無(wú)顯著變化（P＞0.05），在sh-LINC02163+miR-338-3p inhibitor組中顯著增加（P＜0.05，圖6）。

圖6 各組MDA-MB-231細(xì)胞遷移能力的比較Fig.6 Comparison of MDA-MB-231 cell migration ability in each group

2.8 各組MDA-MB-231細(xì)胞c-Myc、MMP2、MMP9、E-cadherin和N-cadherin蛋白水平的比較

與control組相比，MDA-MB-231細(xì)胞c-Myc、MMP2、MMP9、E-cadherin和N-cadherin蛋白水平在sh-NC組中無(wú)顯著變化（P＞0.05），c-Myc、MMP2、MMP9和N-cadherin水平在sh-LINC02163組中顯著降低，E-cadherin水平顯著增加（P＜0.05）。與sh-LINC02163組相比，c-Myc、MMP2、MMP9、E-cadherin和N-cadherin水平在sh-LINC02163+inhibitor-NC組中無(wú)顯著變化（P＞0.05），c-Myc、MMP2、MMP9和N-cadherin水平在sh-LINC02163+miR-338-3p inhibitor組中顯著增加，E-cadherin水平顯著降低（P＜0.05，表2，圖7）。

圖7 各組MDA-MB-231細(xì)胞蛋白水平的比較Fig.7 Comparison of MDA-MB-231 cell protein level in each group

表2 各組MDA-MB-231細(xì)胞c-Myc、MMP2、MMP9、E-cadherin、N-cadherin蛋白表達(dá)的比較Tab.2 Compare of c-Myc,MMP2,MMP9,E-cadherin,and N-cadherin protein expression in each group of MDA-MB-231 cells

2.9 各組MDA-MB-231細(xì)胞成瘤能力及移植瘤組織Ki-67增殖指數(shù)的比較

與control組相比，腫瘤體積及重量、Ki-67增殖指數(shù)在sh-NC組中無(wú)顯著變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），在sh-LINC02163組中顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與sh-LINC02163組相比，腫瘤體積及重量、Ki-67增殖指數(shù)在sh-LINC02163+inhibitor-NC組中無(wú)顯著變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），在sh-LINC02163+miR-338-3p inhibitor組中顯著增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，圖8）。

圖8 各組MDA-MB-231細(xì)胞成瘤能力及Ki-67增殖指數(shù)的比較Fig.8 Comparison of tumor-forming ability and Ki-67 proliferation index of MDA-MB-231 cells in each group

3 討論

隨著生活節(jié)奏的加快及工作壓力的增加，乳腺癌的發(fā)生率也在逐漸升高，盡管近年來(lái)患者的生存率明顯提高，預(yù)后也明顯改善，但術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移仍是患者死亡的主要原因［7-8］，乳腺癌患者整體5年生存率約為90%，而轉(zhuǎn)移患者5年生存率僅為26%，因此，闡明乳腺癌的潛在轉(zhuǎn)移機(jī)制，尋找新的治療靶點(diǎn)對(duì)患者生存至關(guān)重要［9］。

長(zhǎng)度大于200個(gè)核苷酸的lncRNA作為一類來(lái)自基因組非編碼區(qū)的轉(zhuǎn)錄本，被發(fā)現(xiàn)可調(diào)節(jié)癌癥的許多重要病理學(xué)過(guò)程，如腫瘤發(fā)生、增殖、轉(zhuǎn)移及抗藥性［10］。LINC02163是近幾年新發(fā)現(xiàn)的lncRNA，盡管被發(fā)現(xiàn)在胃癌［11］、結(jié)直腸癌［12］、肝癌［13］及乳腺癌［4］中具有明顯的促癌作用，但其機(jī)制仍不完全清楚。LINC02163可通過(guò)抑制miR-511-3p/蛋白激酶B（protein kinase B，AKT）3軸促進(jìn)結(jié)直腸癌進(jìn)展，而抑制其表達(dá)則可減弱癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移［12］。LINC02163在乳腺癌組織中表達(dá)上調(diào)，其表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、腫瘤大小密切相關(guān)，在體外抑制LINC02163表達(dá)可降低MDA-MB-231及MCF-7細(xì)胞增殖、遷移和侵襲并增加細(xì)胞凋亡，這可能與其激活miR-511-3p/高遷移率族蛋白A2（high mobility group A2，HMGA2）軸有關(guān)［4］。EMT是細(xì)胞由上皮極性向間充質(zhì)細(xì)胞特性轉(zhuǎn)化的過(guò)程，該過(guò)程中由于E-cadherin表達(dá)降低，而N-cadherin表達(dá)增加，可降低細(xì)胞間的黏附作用，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移［14］。本研究發(fā)現(xiàn)，LINC02163在乳腺癌組織及細(xì)胞系中表達(dá)顯著升高，抑制其表達(dá)可顯著降低MDA-MB-231細(xì)胞存活率、侵襲細(xì)胞數(shù)及遷移率、c-Myc、MMP2、MMP9、N-cadherin表達(dá)、裸小鼠移植瘤體積及重量、腫瘤組織中的Ki-67增殖指數(shù)，增加E-cadherin表達(dá)，與之前的研究［4］一致，本研究結(jié)果表明，LINC02163表達(dá)降低可抑制乳腺癌細(xì)胞增殖、遷移、轉(zhuǎn)移及EMT過(guò)程，其可作為乳腺癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移機(jī)制研究的潛在靶點(diǎn)。

有研究［15］顯示，miRNA在癌癥中失調(diào)，可充當(dāng)腫瘤抑制因子或癌基因參與癌癥進(jìn)程。miR-338-3p可在胃癌中通過(guò)直接靶向SOX5并阻斷Wnt/β-連環(huán)蛋白（β-catenin）信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)來(lái)充當(dāng)腫瘤抑制因子［16］。Zhang等［17］研究發(fā)現(xiàn)，miR-338-3p在乳腺癌組織及乳腺癌細(xì)胞系（BCAP-37和HCC1937）中表達(dá)降低，Hsa_circ_0008945可通過(guò)靶向抑制miR-338-3p表達(dá)來(lái)促進(jìn)同源框A3（homeobox A3，HOXA3）表達(dá)，從而加快乳腺癌進(jìn)程。黃芩苷可通過(guò)促進(jìn)miR-338-3p表達(dá)來(lái)抑制MORC4表達(dá)，從而抑制MCF-7及MDAMB-231細(xì)胞活力、遷移及侵襲，并促進(jìn)細(xì)胞凋亡［18］。本研究證實(shí)在乳腺癌中miR-338-3p是LINC02163的靶基因，LINC02163過(guò)表達(dá)可抑制miR-338-3p表達(dá)，因此，LINC02163可能通過(guò)靶向miR-338-3p促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖、侵襲及遷移。本研究還發(fā)現(xiàn)，LINC02163表達(dá)沉默可促進(jìn)miR-338-3p表達(dá)，而降低miR-338-3p表達(dá)可逆轉(zhuǎn)LINC02163低表達(dá)對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞增殖、遷移、轉(zhuǎn)移及EMT過(guò)程的抑制作用，表明LINC02163低表達(dá)可能是通過(guò)促進(jìn)miR-338-3p表達(dá)來(lái)抑制乳腺癌細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為。

綜上所述，LINC02163低表達(dá)可通過(guò)促進(jìn)miR-338-3p表達(dá)來(lái)抑制乳腺癌細(xì)胞增殖、侵襲及遷移。本研究不僅有助于闡明LINC02163在乳腺癌中的作用機(jī)制，還為尋找新的治療靶點(diǎn)提供了線索，但仍需深入研究。

利益沖突聲明：所有作者均聲明不存在利益沖突。