HIF-1α、VEGF、CT征象與肺結(jié)節(jié)病理性質(zhì)的相關(guān)性分析

王妨娥，郭 青，武慶杰，葛付超

（1.菏澤市第三人民醫(yī)院呼吸科，山東 菏澤 274000；2.菏澤市立醫(yī)院a 神經(jīng)內(nèi)科 b 呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科，山東菏澤 274000；3.菏澤醫(yī)學(xué)專科學(xué)校，山東 菏澤 274000）

肺癌是我國最常見的惡性腫瘤。2018 年全球癌癥統(tǒng)計(jì)報(bào)告顯示，全球肺癌的發(fā)病率和致死率均居所有癌癥之首。近年來，隨著我國醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)的發(fā)展，新輔助化療、放療、靶向治療、免疫治療在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，但肺癌的致死率仍居高不下?？梢?，肺癌的早期診斷和早期治療十分重要。進(jìn)行胸部CT 檢查時對肺結(jié)節(jié)性質(zhì)的判斷主要是取決于肺結(jié)節(jié)病變的形態(tài)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、周圍特征和增強(qiáng)掃描的特征（包括空洞、胸膜凹陷、強(qiáng)化程度等）[1]。組織病理學(xué)檢查是肺結(jié)節(jié)性質(zhì)診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”。有研究發(fā)現(xiàn)，HIF-1α、VEGF 在肺癌的發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程中起著重要的作用[2]。在本文中，筆者主要是分析肺結(jié)節(jié)患者HIF-1α、VEGF 的表達(dá)情況、肺結(jié)節(jié)的CT 征象表現(xiàn)與其肺結(jié)節(jié)病理性質(zhì)之間的相關(guān)性。

1 資料和方法

1.1 一般資料

將我院近年來（2020.4-2021.7 期間）收治的40例住院治療并接受肺穿刺或手術(shù)的肺結(jié)節(jié)患者（病情經(jīng)胸部CT 檢查得到確診）作為本次研究的對象。根據(jù)病理檢查結(jié)果的不同將其分為惡性組及良性組。惡性組20 例患者中有男性11 例，女性9 例；其中年齡最大的77 歲，最小的35 歲，平均年齡（58.59±3.65）歲。良性組20 例患者中有男性12 例，女性8 例；其中年齡最大的79 歲，最小的39 歲，平均年齡（58.63±3.63）歲。兩組患者的年齡等基本資料相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。兩組患者在檢查開始前均知曉本次研究的實(shí)施方法，且均自愿參與本次研究。本次研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。研究對象的納入標(biāo)準(zhǔn)是：由經(jīng)驗(yàn)豐富的醫(yī)師查閱相關(guān)影像學(xué)資料后確診為肺結(jié)節(jié)；肺結(jié)節(jié)的最大直徑＞4mm 且≤30mm，同時存在肺門增大、縱隔淋巴結(jié)腫大、肺不張等影像學(xué)表現(xiàn)。其排除標(biāo)準(zhǔn)是：合并有嚴(yán)重的感染性疾?。淮嬖诜蝺?nèi)炎性CT 影像學(xué)表現(xiàn)；肺結(jié)節(jié)的最大直徑≤4mm 或＞30mm。

1.2 方法

所有患者均需要進(jìn)行HIF-1α、VEGF 檢測、CT檢查及免疫組化檢查。進(jìn)行CT 檢查的方法是：進(jìn)行常規(guī)的CT 掃描檢查，掃描層厚設(shè)置為5mm，掃描后需經(jīng)由兩名經(jīng)驗(yàn)豐富的醫(yī)師閱片，并對圖像征象進(jìn)行分析。進(jìn)行免疫組化檢查的方法是：1）所用試劑：免疫組化試劑盒、抗體、磷酸鹽緩沖液(PBS)。2）蛋白表達(dá)的評定：將細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核呈現(xiàn)黃色作為陽性細(xì)胞的判斷標(biāo)準(zhǔn)，觀察并記錄陽性細(xì)胞率與顯色強(qiáng)度，每張切片在400 倍鏡中隨機(jī)采集5 個視野，統(tǒng)計(jì)陽性細(xì)胞與癌細(xì)胞的比率作為陽性細(xì)胞率，按照陽性細(xì)胞率的高低進(jìn)行評分（分值為0 ～4 分）。根據(jù)染色程度進(jìn)行顯色強(qiáng)度的評分。陽性細(xì)胞率評分的判定標(biāo)準(zhǔn)是：0 分( 陽性細(xì)胞率為0% ～5%)、1 分( 陽性細(xì)胞率為6% ～25%)、2 分( 陽性細(xì)胞率為26% ～50%)、3 分( 陽性細(xì)胞率為51% ～75%)、4 分( 陽性細(xì)胞率為76%～100%)。顯色強(qiáng)度評分的判定標(biāo)準(zhǔn)是：0 分(染色程度與陰性組相同)、1 分( 顏色為淡黃色)、2 分( 顏色接近深褐色)、3 分( 顏色為深褐色)。免疫組化評分為陽性細(xì)胞率評分與顯色強(qiáng)度評分的乘積。免疫組化評分在3 分以上為陽性病例。3）HIF-1α、VEGF蛋白表達(dá)相關(guān)性的評價：根據(jù)HIF-1α、VEGF 蛋白高表達(dá)和低表達(dá)的分類標(biāo)準(zhǔn)將表達(dá)評分為8 分及8 分以上判定為高表達(dá)，表達(dá)評分為3 ～7 分判定為低表達(dá)。

1.3 觀察指標(biāo)

對比兩組患者HIF-1α、VEGF 的水平、CT 征象；分析兩組患者HIF-1α、VEGF 的水平、CT 征象與其肺結(jié)節(jié)病理性質(zhì)（腫瘤分期、大小、分化程度、轉(zhuǎn)移情況）的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 對比兩組患者HIF-1α、VEGF 的水平

良性組患者HIF-1α、VEGF 的水平均明顯高于惡性組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表1。

表1 兩組患者HIF-1α、VEGF 水平的對比（± s）

表1 兩組患者HIF-1α、VEGF 水平的對比（± s）

組別HIF-1α（ng/mL）VEGF（pg/mL）惡性組（n=20） 1.35±0.23512.26±13.26良性組（n=20） 1.95±0.11637.59±23.54 t 值10.52520.745 P 值0.0010.001

2.2 對比兩組患者的CT 征象

分析兩組患者的CT 征象可見，惡性組患者病灶邊緣不規(guī)則、存在分葉現(xiàn)象、內(nèi)部均勻征象的比例均明顯高于良性組患者，良性組患者病灶邊緣清楚、存在內(nèi)部鈣化及胸膜征的比例均明顯高于惡性組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表2。

表2 兩組患者CT 征象的對比[例(%)]

2.3 HIF-1α、VEGF、CT 征象與肺結(jié)節(jié)病理性質(zhì)（腫瘤分期、大小、分化程度、轉(zhuǎn)移情況）的相關(guān)性

進(jìn)行Logistic 回歸分析的結(jié)果顯示，兩組患者HIF-1α、VEGF 的水平、CT 征象與其肺結(jié)節(jié)的病理性質(zhì)（腫瘤分期、大小、分化程度、轉(zhuǎn)移情況）存在相關(guān)性。詳見表3。

表3HIF-1α、VEGF、CT 征象與肺結(jié)節(jié)病理性質(zhì)（腫瘤分期、大小、分化程度、轉(zhuǎn)移情況）相關(guān)性的Logistic 回歸分析

3 討論

近年來，肺癌仍呈現(xiàn)出高發(fā)態(tài)勢，且致死率一直居高不下。此病患者經(jīng)治療后的遠(yuǎn)期生存率相對較低[3]。惡性肺結(jié)節(jié)在早期并無明顯的特征表現(xiàn)，故在實(shí)際臨床病情診斷及治療中，多數(shù)此病患者在就診時都已經(jīng)處于病情的中晚期，而在這一時期開始進(jìn)行治療的患者其遠(yuǎn)期生存率遠(yuǎn)不及在早期開始進(jìn)行治療的患者[4]。近年來，隨著我國醫(yī)療技術(shù)的不斷提高，低劑量高分辨率螺旋CT 檢查逐漸廣泛應(yīng)用于臨床，這在一定程度上提高了我國群眾肺結(jié)節(jié)（其中最常見的是孤立性結(jié)節(jié)）的檢出率[5]。該疾病具有肺門增大、肺內(nèi)浸潤影等影像學(xué)表現(xiàn)[6]。臨床上常見的惡性肺結(jié)節(jié)病變其CT 征象多表現(xiàn)為毛刺征、空泡征等。根據(jù)惡性肺結(jié)節(jié)病變患者的CT 征象能夠判定其腫瘤的臨床分期及分化程度，同時也可判斷其腫瘤是否發(fā)生轉(zhuǎn)移。借助CT 影像能夠直接對患者的腫瘤進(jìn)行觀察，從而可確定其腫瘤的大小，提高腫瘤的檢出率[7]。雖然用影像學(xué)檢查診斷肺結(jié)節(jié)具有較高的特異性及敏感性，但目前臨床上單用此類檢查對肺結(jié)節(jié)的良惡性進(jìn)行診斷仍存在一定的局限性（診斷早期肺結(jié)節(jié)良惡性的效果欠佳）。有研究指出，早期肺部惡性病變患者在進(jìn)行手術(shù)治療后其遠(yuǎn)期生存率可高達(dá)90% 以上，而中晚期肺部惡性病變患者其術(shù)后遠(yuǎn)期生存率僅為5% 左右?？梢姡诜尾繍盒圆∽兓颊甙l(fā)病早期檢出其病情并及時采取相關(guān)治療措施對挽救其生命具有重要的意義[8]。隨著臨床研究的不斷深入，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)部分生物學(xué)指標(biāo)能夠作為早期肺部惡性病變的診斷指標(biāo)，其中包括了HIF-1α、VEGF 等[9]。HIF-1α是上個世紀(jì)末期在缺氧的細(xì)胞核提取物中發(fā)現(xiàn)的一種核轉(zhuǎn)錄因子，由HIF-1α 和HIF-1β 兩個亞單位組成，其生物學(xué)活性主要由HIF-lα 亞基的表達(dá)和活性決定[10]。在正常的氧濃度環(huán)境下，細(xì)胞內(nèi)的HIF-1α呈現(xiàn)不穩(wěn)定現(xiàn)象，容易被氧依賴性泛素蛋白酶降解，半衰期較短。而在低氧的情況下，HIF-1α 的穩(wěn)定性較高，其能夠在轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞核后形成二聚體，同時能夠與缺氧反應(yīng)元件結(jié)合，促進(jìn)血管內(nèi)皮生長因子等的表達(dá)[11]。有研究發(fā)現(xiàn)，在多種惡性腫瘤組織中均能夠檢出較高水平的HIF-1α?？梢?，HIF-1α 在惡性腫瘤的發(fā)生及發(fā)展中起著重要的作用[12]。此外，在細(xì)胞缺氧的狀態(tài)下，HIF-1α 會調(diào)節(jié)下游基因VEGF，故可提高患者體內(nèi)VEGF 的水平（VEGF 的合成量可增高至正常水平下的12 倍之多）[13-14]。VEGF 是調(diào)節(jié)和控制腫瘤組織滋養(yǎng)血管生長的關(guān)鍵因素，其在腫瘤發(fā)生及發(fā)展的過程中起著重要的作用。有研究指出，在惡性腫瘤患者發(fā)病的早期階段對其進(jìn)行VEGF 檢測有助于醫(yī)師判定其病情的類型及嚴(yán)重程度[15]?？梢姡琀IF-1α、VEGF、CT 征象與肺結(jié)節(jié)的病理性質(zhì)均具有較高的相關(guān)性，進(jìn)行HIF-1α、VEGF 檢測、CT 檢查有助于確定患者的疾病類型，提高其病情的檢出率。本研究的結(jié)果顯示，良性組患者HIF-1α、VEGF 的水平均明顯高于惡性組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。可見，監(jiān)測HIF-1α、VEGF 水平的變化有助于對患者腫瘤的良惡性進(jìn)行區(qū)分。分析兩組患者的CT 征象可見，惡性組患者病灶邊緣不規(guī)則、存在分葉現(xiàn)象、內(nèi)部均勻征象的比例均明顯高于良性組患者，良性組患者病灶邊緣清楚、存在內(nèi)部鈣化及胸膜征的比例均明顯高于惡性組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。進(jìn)行Logistic 回歸分析的結(jié)果顯示，兩組患者HIF-1α、VEGF 的水平、CT 征象與其肺結(jié)節(jié)的病理性質(zhì)（腫瘤分期、大小、分化程度、轉(zhuǎn)移情況）存在相關(guān)性。這表明，HIF-1α、VEGF 水平與CT 征象均與肺結(jié)節(jié)的病理性質(zhì)有一定的關(guān)聯(lián)，臨床上可通過觀察HIF-1α、VEGF 水平、CT 征象來對患者的腫瘤分期、良惡性質(zhì)、大小及轉(zhuǎn)移情況進(jìn)行判定。

綜上所述，HIF-1α、VEGF、CT 征象與肺結(jié)節(jié)病理性質(zhì)均有一定的相關(guān)性，進(jìn)行HIF-1α、VEGF檢測、CT 檢查有助于判定患者腫瘤的良惡性。此法值得在臨床上推廣應(yīng)用。