2019—2021年張家港市小反芻獸疫免疫抗體和病原學(xué)檢測(cè)效果評(píng)價(jià)

李雅梅，張文飛，王嘉熠

（1.揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，江蘇 揚(yáng)州 225000；2.江蘇省張家港市畜牧獸醫(yī)站，江蘇 張家港 215600）

0 引言

2016年以來(lái)，張家港市按照國(guó)家要求，對(duì)全市羊進(jìn)行小反芻獸疫疫苗全覆蓋強(qiáng)制免疫，并定期進(jìn)行免疫效果及疫情風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。2019—2021年，全市小反芻獸疫平均免疫抗體合格率超過(guò)92%，均達(dá)到國(guó)家要求的免疫合格水平，未檢出小反芻獸疫病毒，小反芻獸疫防控工作取得了顯著成效[1]。

1 基本情況

張家港市處于長(zhǎng)江下游南岸，地貌類(lèi)型屬于三角洲沖積平原，地形南高北低。羊的養(yǎng)殖以長(zhǎng)江三角洲白山羊、湖羊?yàn)橹?，近年受環(huán)保和價(jià)格因素的影響，養(yǎng)殖逐步萎縮，2019年存欄 0.36萬(wàn)頭， 2020年存欄0.53萬(wàn)頭、2021年存欄0.55萬(wàn)頭，以小散戶為主，100頭以上的羊養(yǎng)殖場(chǎng)一直維持在10個(gè)以下，見(jiàn)表1。

表1 2019—2021年張家港市羊養(yǎng)殖情況

2 免疫情況

張家港市根據(jù)國(guó)家和江蘇省動(dòng)物疫病免疫計(jì)劃有關(guān)要求，組織開(kāi)展春秋兩季重大動(dòng)物疫病集中防疫行動(dòng)和夏季重大動(dòng)物疫病集中補(bǔ)免和消毒滅原行動(dòng)，保證常年免疫程序落實(shí)到位，突擊防疫工作不放松，實(shí)現(xiàn)全市羊小反芻獸疫免疫全覆蓋。疫苗選用新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司和揚(yáng)州威克生物科技公司生產(chǎn)的小反芻獸疫疫苗。

3 材料與方法

3.1 樣品采集

對(duì)全市羊養(yǎng)殖場(chǎng)按鎮(zhèn)、存欄分類(lèi)采樣的方法，每鎮(zhèn)隨機(jī)抽取5個(gè)場(chǎng)群，不足5場(chǎng)群的鎮(zhèn)100%抽取，場(chǎng)群抽取優(yōu)先次序?yàn)橐?guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)、散養(yǎng)戶。每場(chǎng)群隨機(jī)抽取10份血清樣品，不足10份的100%抽取（存欄量≥30只的養(yǎng)殖場(chǎng)以場(chǎng)為單位統(tǒng)計(jì)、羊存欄量小于30只的散養(yǎng)戶以行政村為單位統(tǒng)計(jì)）。羊個(gè)體樣品應(yīng)優(yōu)先抽取調(diào)入動(dòng)物、繁殖障礙動(dòng)物及有乳腺炎、睪丸炎、附睪炎、關(guān)節(jié)炎的發(fā)病或發(fā)病史的動(dòng)物。

2019—2021年，共對(duì)張家港市8個(gè)鎮(zhèn)的羊養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）累計(jì)采集161場(chǎng)（戶）次，采集樣品2 946份，其中血清學(xué)樣品1 804份，病原學(xué)樣品1 142份。樣品采集按照95%置信水平，假定流行率0～10%，同一養(yǎng)殖場(chǎng)點(diǎn)覆蓋不同生長(zhǎng)階段和不同棟舍的羊群。采樣時(shí)詳細(xì)填寫(xiě)采樣單，標(biāo)明疫苗種類(lèi)（毒株）、免疫次數(shù)、疫苗生產(chǎn)企業(yè)、末次免疫時(shí)間等相關(guān)信息。

3.2 診斷試劑與儀器設(shè)備

3.2.1 診斷試劑

免疫抗體檢測(cè)試劑使用法國(guó)ID和青島立見(jiàn)公司生產(chǎn)的小反芻獸疫競(jìng)爭(zhēng) ELISA 抗體檢測(cè)試劑盒；病毒核酸檢測(cè)使用用哈爾濱國(guó)生生物科技股份有限公司生產(chǎn)的 RTPCR 檢測(cè)試劑盒。

3.2.2 儀器設(shè)備

熒光定量PCR儀、全自動(dòng)核酸提取儀、酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱、冰箱、微量移液器、純水儀等設(shè)備。

3.3 檢測(cè)方法與判定標(biāo)準(zhǔn)

（1）血清學(xué)樣品?？贵w采用競(jìng)爭(zhēng) ELISA方法（GB/T27982—2011）進(jìn)行免疫效果監(jiān)測(cè)。

（2）病原學(xué)樣品。采用熒光RT-PCR方法（GB/T27982—2011）進(jìn)行病毒核酸檢測(cè)。

（3）判定標(biāo)準(zhǔn)。免疫抗體檢測(cè)判定標(biāo)準(zhǔn)：小反芻獸疫抗體S/N%≤50%為抗體陽(yáng)性；50%＜S/N%≤60%為抗體可疑；S/N%＞60%為抗體陰性。病毒檢測(cè)判定標(biāo)準(zhǔn)：樣品有特異性擴(kuò)增曲線而且 Ct值≤40 判為實(shí)時(shí)熒光 RTPCR擴(kuò)增陽(yáng)性，表述為檢出小反芻獸疫病毒核酸；樣品Ct值＞40 或者無(wú)特異性擴(kuò)增曲線判為實(shí)時(shí)熒光 RT-PCR擴(kuò)增陰性，表述為未檢出小反芻獸疫病毒核酸。

4 檢測(cè)結(jié)果

4.1 總體情況

2019—2021年，檢測(cè)的1 804份血清樣品中，檢出小反芻獸疫免疫抗體合格樣品1 685份，平均免疫抗體合格率為93%，超過(guò)國(guó)家規(guī)定的大于70%的標(biāo)準(zhǔn)。采集樣品的161個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）次中150場(chǎng)（戶）次免疫抗體合格率超過(guò)70%，場(chǎng)均合格率為93%。1 142 份羊口鼻拭子樣品中，未檢出小反芻獸疫病原學(xué)陽(yáng)性樣品，見(jiàn)表2。

表2 2019—2021年張家港市小反芻獸疫監(jiān)測(cè)情況

4.2 不同年份情況

2019—2021年，免疫抗體合格率均超過(guò)90%，分別為92%、93%、95%，逐年穩(wěn)步提高；病原學(xué)檢測(cè)未檢出小反芻獸疫病毒，見(jiàn)表3。

表3 不同年份小反芻獸疫監(jiān)測(cè)情況

4.3 不同場(chǎng)點(diǎn)情況

3年檢測(cè)場(chǎng)點(diǎn)數(shù)累計(jì)為161場(chǎng)（戶）次，其中商品代羊場(chǎng)檢測(cè)26場(chǎng)（戶）次、散養(yǎng)戶檢測(cè)135（戶）次，商品代羊場(chǎng)免疫抗體合格數(shù)為26場(chǎng)（戶）次、散養(yǎng)戶免疫抗體合格數(shù)為124場(chǎng)（戶）次，合格率分別為100%、92%，場(chǎng)均免疫抗體合格率為93%。商品代、散戶病原學(xué)檢測(cè)均未檢出小反芻獸疫病毒。見(jiàn)表4。

表4 不同場(chǎng)點(diǎn)小反芻獸疫監(jiān)測(cè)情況

4.4 不同地區(qū)情況

從不同地區(qū)分布來(lái)看，張家港市8個(gè)地區(qū)的免疫抗體合格率均超過(guò)85%，主要分布在88%～99%，原學(xué)檢測(cè)未檢出小反芻獸疫病毒。見(jiàn)表5。

表5 不同地區(qū)小反芻獸疫監(jiān)測(cè)情況

5 結(jié)果分析

（1）從張家港全市范圍分析。2019年以來(lái)，小反芻獸疫免疫抗體總體合格率多年來(lái)一直保持在88%以上，疫苗免疫效果很好，能夠較好的起到免疫保護(hù)作用；小反芻獸疫病原學(xué)檢測(cè)未檢出陽(yáng)性樣品，免疫凈化的效果明顯，發(fā)生小反芻獸疫的概率較低。

（2）從不同的年份分析。合格率逐年穩(wěn)步提高，說(shuō)明全市小反芻獸疫防控工作有序開(kāi)展、落實(shí)到位，免疫行動(dòng)“真苗、真打、真有效”。

（3）從不同場(chǎng)點(diǎn)情況分析。商品代羊場(chǎng)免疫抗體合格率達(dá)到100%，高于散養(yǎng)戶92%的水平，說(shuō)明規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)嚴(yán)格執(zhí)行免疫程序，散養(yǎng)戶主體責(zé)任意識(shí)需進(jìn)一步加強(qiáng)。主要原因?yàn)樯唐反驁?chǎng)飼養(yǎng)周期長(zhǎng)，免疫次數(shù)多，管理水平高；散養(yǎng)戶主體意識(shí)淡薄，免疫次數(shù)不夠、免疫時(shí)間間隔長(zhǎng)、操作不規(guī)范，造成免疫效果不好。

（4）從不同地區(qū)情況分析。全市共分為8個(gè)鎮(zhèn)，免疫抗體合格率均超過(guò)88%，符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，其中抗體合格率最高為鳳凰鎮(zhèn)，最低為樂(lè)余鎮(zhèn)，分析原因?yàn)?019年鄉(xiāng)鎮(zhèn)動(dòng)防站開(kāi)展機(jī)構(gòu)改革，防疫監(jiān)管人員有所變動(dòng)，導(dǎo)致部分鎮(zhèn)（區(qū)）動(dòng)物防疫工作銜接不夠、防疫工作推動(dòng)不及時(shí)。

6 討論與結(jié)論

張家港市小反芻獸疫整體免疫效果較好，疫情暴發(fā)風(fēng)險(xiǎn)較低，基本達(dá)到了免疫無(wú)疫，但仍要從以下幾個(gè)方面持續(xù)開(kāi)展工作，鞏固小反芻獸疫的防控的成果。

（1）持續(xù)開(kāi)展好疫情排查。結(jié)合省、市級(jí)相關(guān)要求，每年開(kāi)展全市羊存欄摸底排查，全面掌握轄區(qū)內(nèi)羊養(yǎng)殖情況，了解小反芻獸疫防控情況，科學(xué)評(píng)估疫情風(fēng)險(xiǎn)，推動(dòng)全市小反芻獸疫消滅計(jì)劃。

（2）繼續(xù)落實(shí)好疫苗免疫。按照“預(yù)防為主”的指導(dǎo)思想，強(qiáng)化基礎(chǔ)免疫，確保免疫質(zhì)量，做好小反芻獸疫集中免疫和日常補(bǔ)免工作，確保免疫密度和抗體水平達(dá)到國(guó)家的要求，構(gòu)建有效的免疫屏障[2]。

（3）堅(jiān)持開(kāi)展好免疫監(jiān)測(cè)。以規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)、散養(yǎng)戶、交易市場(chǎng)等區(qū)域?yàn)橹攸c(diǎn)，強(qiáng)化風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)，廣泛開(kāi)展流行病學(xué)調(diào)查工作，強(qiáng)化監(jiān)測(cè)調(diào)查結(jié)果的分析應(yīng)用，提升疫情預(yù)警預(yù)報(bào)能力。

（4）從嚴(yán)落實(shí)好生物措施。對(duì)羊養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）強(qiáng)化技術(shù)指導(dǎo)，督促養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）落實(shí)好生物安全防控措施，定期開(kāi)展消毒滅原工作，嚴(yán)禁落實(shí)產(chǎn)地檢疫報(bào)檢制度，禁止從高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)購(gòu)進(jìn)羊進(jìn)行養(yǎng)殖[3]。