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    一種蔬菜乳酸菌發(fā)酵工藝的研究

    2022-10-20 09:06:04余薇,任濤,潘篤杰
    現(xiàn)代食品 2022年17期
    關(guān)鍵詞:發(fā)酵劑總酸泡菜

    蔬菜經(jīng)發(fā)酵后含有大量人體必需氨基酸、多種維生素、礦物質(zhì)和豐富的膳食纖維。目前國內(nèi)制作泡菜多采用自然發(fā)酵工藝,其原理是在高濃度食鹽溶液中,利用食鹽的高滲透壓抑制有害微生物的生長,而附著在蔬菜表面的乳酸菌不斷增長成為主導(dǎo)菌,發(fā)酵產(chǎn)酸獲得泡菜[1]。該方法存在發(fā)酵周期長、產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定、亞硝酸鹽和食鹽含量高等弊端。為解決上述問題,人工引入純益生菌參與蔬菜發(fā)酵,是蔬菜發(fā)酵產(chǎn)業(yè)的一大必然趨勢[2]。本研究利用篩選出的優(yōu)良乳酸菌,直接采用發(fā)酵罐模式,利用復(fù)合純菌種凍干菌粉直投式對蔬菜進(jìn)行發(fā)酵,開發(fā)出一套工業(yè)化新型發(fā)酵模式,可全程監(jiān)控蔬菜發(fā)酵,有效保證了產(chǎn)品質(zhì)量,縮短了發(fā)酵時(shí)間,有利于降低成本,過程中所有發(fā)酵指標(biāo)及泡菜成品指標(biāo)均能有效控制,保證工業(yè)化過程的專業(yè)性和成品質(zhì)量的一致性。

    1 材料與方法

    1.1 材料與設(shè)備

    發(fā)酵劑:實(shí)驗(yàn)室自主研發(fā),由植物乳桿菌A、乳酸乳球菌B以及輔料組成(活菌均≥109CFU·g-1);蔬菜:包菜、蘿卜、姜、蒜、小米椒和花椒(菜場購得)。

    發(fā)酵罐:314不銹鋼20 L發(fā)酵罐(有單向排氣閥以及物料放料口)。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1 發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化篩選

    1#——食鹽2.5%、發(fā)酵促進(jìn)劑20%、食用葡萄糖2%;2#——食鹽2.5%、蔬菜汁20%、食用葡萄糖2%;3#——食鹽2.5%、輔料浸出液20%、食用葡萄糖2%;4#——食鹽2.5%、10BX°麥芽汁20%[3]、食用葡萄糖2%;5#——食鹽2.5%、食用葡萄糖2%;接種0.5 g·L-1發(fā)酵劑以及蔬菜后置于37 ℃恒溫發(fā)酵36 h,檢測發(fā)酵液的活菌、pH以及蔬菜總酸含量,結(jié)合口感情況進(jìn)行篩選。

    發(fā)酵培養(yǎng)基成分盡量選擇食品類原材料制備。①發(fā)酵促進(jìn)劑:蒜10%、姜25%、紅小米椒10%,將材料洗凈,用50 ℃溫開水1∶1混合后浸泡30 min,榨汁機(jī)打碎,4層紗布過濾,備用。②蔬菜汁:將需要進(jìn)行發(fā)酵的蔬菜與水1∶1混合進(jìn)行榨汁破碎,4層紗布過濾,備用。③輔料浸出液:蒜10%、姜25%、紅小米椒10%用80~100 ℃熱水浸泡30 min,取浸出液備用。發(fā)酵蔬菜要求完全浸沒于液體中。

    1.2.2 發(fā)酵劑投菌量篩選

    菌劑投加量控制,使其加入后初始乳酸菌活菌數(shù)分別為 105CFU·mL-1、106CFU·mL-1、107CFU·mL-1以及108CFU·mL-1。每6 h取一次樣分別檢測泡菜水的pH值和菜的總酸含量,比較發(fā)酵產(chǎn)酸情況,確定發(fā)酵劑的最適添加量。

    1.2.3 食用葡萄糖濃度的篩選

    加入一定量的葡萄糖主要是為乳酸菌前期生長提供一定的碳源,加快發(fā)酵速度,也能對蔬菜口感產(chǎn)生一定影響,控制其添加濃度分別為0%、1%、2%、3%和4%,36 h發(fā)酵結(jié)束后測定發(fā)酵液pH、活菌以及菜的總酸。

    1.2.4 食鹽濃度篩選

    食鹽的作用主要是維持乳酸菌生長的滲透壓,促進(jìn)菌體生長同時(shí)為泡菜的口感豐富一些咸香口味??刂破涮砑訚舛确謩e為0%、1%、2%、3%和4%,36 h發(fā)酵結(jié)束后測定發(fā)酵液pH、活菌以及菜的總酸和亞硝酸鹽含量。

    1.2.5 不同蔬菜連續(xù)發(fā)酵

    采用篩選出的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵蔬菜,在第一次發(fā)酵蔬菜白蘿卜完成后,取出白蘿卜真空封口包裝后進(jìn)行高溫瞬時(shí)滅菌處理終止發(fā)酵,在原發(fā)酵液中加入新的發(fā)酵蔬菜包菜進(jìn)行二次發(fā)酵,結(jié)束后再進(jìn)行新鮮蔬菜三次發(fā)酵、每批次蔬菜發(fā)酵時(shí)間控制為36 h,測定菜的總酸、亞硝酸鹽含量,評定蔬菜口感。

    1.2.6 分析方法

    (1)活菌計(jì)數(shù):10倍梯度稀釋傾注法。

    (2)總酸以及亞硝酸鹽測定:滴定法[4-5]。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 發(fā)酵培養(yǎng)基篩選

    根據(jù)上述1.2.1中5組培養(yǎng)基進(jìn)行蔬菜發(fā)酵,蔬菜采用白蘿卜進(jìn)行試驗(yàn),發(fā)酵完成檢測發(fā)酵液活菌情況以及其他相應(yīng)指標(biāo)參數(shù)如表1所示。

    表1 不同培養(yǎng)基發(fā)酵蔬菜參數(shù)指標(biāo)表

    由表1可知,1#培養(yǎng)基發(fā)酵情況最好,發(fā)酵液活菌高達(dá)1.5×109CFU·mL-1,產(chǎn)酸也高達(dá)0.65 g/100 g,說明該培養(yǎng)基非常適宜實(shí)驗(yàn)中乳酸菌生長產(chǎn)酸,利用其進(jìn)行蔬菜發(fā)酵,發(fā)酵出的泡菜口感能媲美傳統(tǒng)發(fā)酵的口感,為最適宜的發(fā)酵蔬菜培養(yǎng)基。

    2.2 發(fā)酵劑投菌量試驗(yàn)

    根據(jù)2.1篩選出的最佳培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵蔬菜,控制乳酸菌發(fā)酵劑投菌量進(jìn)行蔬菜發(fā)酵試驗(yàn),發(fā)酵情況如圖1所示。當(dāng)發(fā)酵達(dá)36 h時(shí),發(fā)酵劑添加量為 106CFU·mL-1、107CFU·mL-1、108CFU·mL-1時(shí)發(fā)酵產(chǎn)酸情況相差不大,考慮成本情況,可以選擇106CFU·mL-1作為發(fā)酵劑投菌量,發(fā)酵劑活菌為2×109~ 4×109CFU·g-1,則發(fā)酵劑添加量為 0.5 g·L-1。

    圖1 發(fā)酵劑添加量對蔬菜發(fā)酵產(chǎn)酸影響圖

    2.3 不同葡萄糖濃度對蔬菜發(fā)酵的影響

    不同葡萄糖濃度對發(fā)酵會產(chǎn)生一定的影響,如圖2、圖3、圖4所示,糖添加量為1%~4%時(shí),其對發(fā)酵液pH以及蔬菜的總酸影響相差不大,糖添加量為2%~4%時(shí),發(fā)酵液活菌數(shù)目相差不大,糖作為碳源對菌體的生長會有一定的促進(jìn)作用。從實(shí)際應(yīng)用成本情況考慮,選擇2%葡萄糖濃度較為適宜。

    圖2 糖添加量對發(fā)酵液pH的影響圖

    圖3 糖添加量對發(fā)酵蔬菜總酸的影響圖

    圖4 糖添加量對發(fā)酵液活菌的影響圖

    2.4 不同食鹽濃度對蔬菜發(fā)酵的影響

    添加5組不同濃度的食鹽進(jìn)行發(fā)酵試驗(yàn),相應(yīng)的發(fā)酵情況如表2所示。

    表2 不同食鹽濃度對發(fā)酵情況的影響表

    由表2可知,食鹽濃度在0%~4%均能實(shí)現(xiàn)蔬菜正常發(fā)酵,說明其對發(fā)酵的影響不大,但考慮到泡菜口感,選擇2%~3%較為適宜。且5組鹽濃度發(fā)酵蔬菜的亞硝酸鹽的含量均低于5 mg·kg-1,而國家標(biāo)準(zhǔn)對醬腌菜亞硝酸鹽含量要求為不高于20 mg·kg-1[6],完全滿足健康食品要求。對于傳統(tǒng)自然發(fā)酵而言,食鹽的添加量一般高達(dá)6%~10%,主要是利用高鹽濃度抑制其他有害微生物生長,但高鹽濃度會帶來高亞硝酸鹽風(fēng)險(xiǎn),不利于人體健康。本研究的純菌種發(fā)酵蔬菜,添加食鹽主要是豐富泡菜成品的咸香口感,添加量可以根據(jù)需要調(diào)節(jié),不會對發(fā)酵產(chǎn)生很大影響。

    2.5 不同蔬菜連續(xù)發(fā)酵情況

    在發(fā)酵液中加入白蘿卜進(jìn)行一次發(fā)酵36 h,發(fā)酵結(jié)束將菜取出終止發(fā)酵處理,檢測相關(guān)指標(biāo),然后在原發(fā)酵液中投入新的蔬菜,包菜進(jìn)行二次發(fā)酵,繼續(xù)發(fā)酵36 h,結(jié)束發(fā)酵,將泡菜取出終止發(fā)酵檢測相關(guān)指標(biāo)。驗(yàn)證該發(fā)酵液能否不斷投入新的蔬菜進(jìn)行持續(xù)發(fā)酵,在二次發(fā)酵結(jié)束,將發(fā)酵好的泡菜取出后,再次投入新的蔬菜進(jìn)行發(fā)酵,進(jìn)行試驗(yàn),相應(yīng)結(jié)果如表3所示。

    表3 連續(xù)發(fā)酵蔬菜情況表

    由表3實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出,該發(fā)酵模式只能進(jìn)行二次發(fā)酵,不能持續(xù)到三次發(fā)酵,分析原因可能是菌體發(fā)酵快速大量繁殖,堆積產(chǎn)生的大量代謝物以及死菌體等會對發(fā)酵蔬菜的口感造成較大的影響。

    3 結(jié)論

    本文研究了一種蔬菜乳酸菌發(fā)酵工藝,采用實(shí)驗(yàn)室自制的乳酸菌凍干菌粉,采用發(fā)酵罐進(jìn)行純菌種發(fā)酵蔬菜,研究開發(fā)了一種最適宜的培養(yǎng)基:乳酸菌劑0.5 g·L-1,食鹽2%~3%、發(fā)酵促進(jìn)劑20%、糖2%,pH 6.5,37 ℃發(fā)酵36 h,發(fā)酵蔬菜總酸含量高達(dá)0.60%~0.65%,發(fā)酵蔬菜口感佳。一次發(fā)酵蔬菜結(jié)束后能加入新鮮蔬菜進(jìn)行二次發(fā)酵,不影響發(fā)酵產(chǎn)酸和口感。目前市面上蔬菜發(fā)酵仍多數(shù)采用傳統(tǒng)自然發(fā)酵或者發(fā)酵劑強(qiáng)化的半自然發(fā)酵,這些發(fā)酵模式都有一定的不可控環(huán)境因素,發(fā)酵時(shí)間較長,易發(fā)生有害微生物污染,采用食鹽濃度較高,易造成亞硝酸鹽超標(biāo),對人體健康不利。本研究采用乳酸菌劑純菌種工藝發(fā)酵蔬菜,其亞硝酸鹽含量較低。有研究表明,植物乳桿菌具有亞硝酸鹽還原特性[7],因此加入大量菌體后各類蔬菜中產(chǎn)生的亞硝酸鹽被及時(shí)還原,使得乳酸菌發(fā)酵泡菜中亞硝酸鹽殘留低。本研究工藝發(fā)酵蔬菜成本低,低鹽低糖無亞硝酸鹽、綠色健康、發(fā)酵周期短,純菌種發(fā)酵,整個發(fā)酵過程可控,泡菜產(chǎn)品可以實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn),便于工業(yè)化轉(zhuǎn)化放大。

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