乳腺癌組織中VSIG4、雄激素受體的表達及其與臨床病理特征和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系

王 陽 賈國叢 楊紅星

乳腺癌作為嚴重影響女性健康的惡性腫瘤，近年來對其研究更為深入，治療方面更傾向于針對靶點的精準治療[1]。內(nèi)分泌治療一直是乳腺癌的重要治療手段，雌激素受體(ER)/孕激素受體(PR)陽性作為內(nèi)分泌治療靶點的理念已為臨床熟知，同時雌孕激素受體陽性也預(yù)示著乳腺癌良好的預(yù)后[2-3]。早在上世紀50年代就有使用雄激素治療乳腺癌的先例，后來因為不良反應(yīng)大、治療靶點不明確而被棄用[4]。隨著雄激素受體(AR)的發(fā)現(xiàn)，雄激素及AR在乳腺癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用日益受到重視，但是關(guān)于AR在乳腺癌患者中的臨床預(yù)后意義仍舊存在爭議。VSIG4表達水平與卵巢癌、肝細胞癌、前列腺癌、結(jié)直腸癌等多種癌癥的預(yù)后相關(guān)，但關(guān)于VSIG4在乳腺癌中的研究目前仍較少[5-6]。本研究總結(jié)78例浸潤乳腺癌患者臨床資料，分析AR、VSIG4的表達及其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年9月至2020年9月本院收治乳腺癌患者75例，年齡35～89歲，平均(58.43±8.54)歲。納入標準：①符合《中國抗癌協(xié)會乳腺癌診治指南與規(guī)范(2017年版)》[7]，經(jīng)病理診斷為乳腺癌； ②患者簽署自愿受試同意書，患者及其家屬需簽署知情同意書。排除標準：① 精神疾病患者；②合并其他惡性腫瘤患者；③合并其他器官嚴重性病變患者。

1.2 免疫組化法檢測AR

采用免疫組織化學(xué)法進行AR檢測，記錄腫瘤細胞陽性染色比例和染色強度，AR陽性判定標準為≥10%的腫瘤細胞核染色陽性。

1.3 RT-PCR檢測VSIG4

根據(jù)制造商的說明，用Trizol試劑(Takara，Shiga，Japan)從組織中提取總RNA。使用Prime-Script RT試劑盒(Takara)逆轉(zhuǎn)錄mRNA。使用SYBR Premix Ex Taq (Takara)在CFX96系統(tǒng)(Bio-Rad,Hercules,CA,USA) 上擴增和定量cDNA。PCR的最終體積為10 μL，擴增條件為95 ℃ 30 s，95 ℃ 5 s、60 ℃ 20 s，共40個循環(huán)。GAPDH用作內(nèi)源對照。VSIG4的表達量為 2-ΔΔCT。VSIG4引物為：5'-AACCACCATACAGCACAAGCA，3'-CAAGACCAAGACTGAGGCACC；GAPDH：5'-ACAACTTTGGTATCGTGGAAGG，3'-GCCATCACGCCACAGTTTC。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 AR、VSIG4的表達與臨床病理特征的相關(guān)性

AR的表達與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，VSIG4的表達與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病理分期、組織學(xué)分級有關(guān)(P<0.05)，見表1。

表1 AR、VSIG4的表達與臨床病理特征的相關(guān)性分析

2.2 AR、VSIG4的表達與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目的關(guān)系

AR、VSIG4的表達與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目有關(guān)(P<0.05)，AR陽性患者腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目顯著高于AR陰性，VSIG4水平越高腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目越多。見表2。

表2 AR、VSIG4的表達與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目的關(guān)系

2.3 乳腺癌患者腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移水平多因素回歸分析

以患者腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移水平作為因變量，AR、VSIG4為自變量，通過多元線性回歸分析，結(jié)果顯示AR、VSIG4是乳腺癌患者腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移水平的影響因素(P<0.05)，見表3。

表3 乳腺癌患者腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移水平多因素回歸分析

3 討論

乳腺癌作為一種高度異質(zhì)性的惡性腫瘤，其發(fā)生復(fù)發(fā)和遠處轉(zhuǎn)移是影響患者總生存期及預(yù)后的關(guān)鍵[8]。腋窩淋巴結(jié)是乳腺癌首發(fā)轉(zhuǎn)移部位，正確判斷乳腺癌腋窩淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移，對乳腺癌的分期、治療方案的選擇及預(yù)后評估具有重要指導(dǎo)意義。

研究證明，ER/PR的表達是乳腺癌預(yù)后良好的指標，同時也是內(nèi)分泌治療的靶點[9]。由于在人體內(nèi)雄激素與雌激素之間關(guān)系密切，隨著AR的發(fā)現(xiàn)，越來越多的研究開始關(guān)注雄激素在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展、預(yù)后及治療靶點方面的作用。AR在乳腺癌中廣泛表達，陽性率為50%～90%，在某些特殊類型的乳腺癌中甚至比ER/PR的表達更為常見[10-11]。有研究表示AR的表達是乳腺癌預(yù)后的良好標志[12]。VSIG4是B7家族相關(guān)蛋白的成員，該蛋白以其抑制T細胞活化而聞名，并作為共抑制配體發(fā)揮作用，通過 G0/G1期的細胞周期停滯來抑制T細胞活化和細胞因子的產(chǎn)生，并誘導(dǎo)T 細胞無反應(yīng)性[13-14]。VSIG4 作為一種共抑制配體，它通過抑制CD4+和CD8+T細胞增殖和IL-2產(chǎn)生負調(diào)節(jié)T細胞活化[15]。VSIG4可以調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境，促進乳腺癌細胞的增殖、侵襲和遷移，這表明VSIG4也在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起作用[16]。最近的研究證實VSIG4在肺癌、卵巢癌、乳腺癌、膠質(zhì)母細胞瘤、多發(fā)性骨髓瘤等多種癌細胞中過表達，作為致癌基因發(fā)揮細胞免疫功能和促進腫瘤進展的作用[17-18]。本研究中AR的表達與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，VSIG4的表達與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病理分期、組織學(xué)分級有關(guān)，說明AR和VSIG4的表達與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移存在著密切的關(guān)系，與既往研究結(jié)果相同。

國外研究指出，臨床分期和腫瘤直徑與乳腺癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，臨床分期越高和腫瘤直徑越大乳腺癌患者發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的危險越大[19-20]。本研究中AR、VSIG4表達與乳腺癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，提示AR、VSIG4表達能反映乳腺癌的增殖活性和速度，其表達水平越高，表明癌細胞增殖越快，越易發(fā)生侵襲和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

綜上所述，AR、VSIG4表達是乳腺癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的影響因素，對預(yù)測腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有一定的價值。但若要應(yīng)用于臨床，仍需要擴大樣本量和循證醫(yī)學(xué)研究證實以達成臨床共識或制定指南。