功能性免疫調(diào)節(jié)納米載體用于協(xié)同增強(qiáng)腫瘤免疫治療的研究進(jìn)展

莊雅利，高蕓芬，游欣如，吳鈞

（中山大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)院，廣東 深圳，518107）

1 腫瘤免疫治療

腫瘤是當(dāng)今全球衛(wèi)生面臨的一個重大挑戰(zhàn)。盡管手術(shù)、化療及放療等治療手段在臨床上的應(yīng)用日趨成熟，但治療效果不徹底，腫瘤易轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)以及不良反應(yīng)強(qiáng)等問題仍未得到解決，腫瘤治療仍然是臨床上面臨的一大難題[1]。19世紀(jì)90年代，外科醫(yī)生William Coley偶然發(fā)現(xiàn)病人在感染鏈球菌后腫瘤癥狀有所緩解，腫瘤免疫治療的概念開始登上歷史舞臺[2]。其通過放大或恢復(fù)人體本身的自然免疫能力治療腫瘤，與傳統(tǒng)治療方式相比，可針對不同的免疫反應(yīng)環(huán)節(jié)設(shè)計對應(yīng)治療方案，在治療的同時提高宿主免疫力、誘導(dǎo)長期免疫記憶效應(yīng)、抑制腫瘤復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移，達(dá)到更理想的治療效果[3]。經(jīng)過幾十年的發(fā)展，免疫療法逐漸成為治療腫瘤的有力手段。

1.1 免疫治療原理——腫瘤免疫循環(huán)

Chen等[4]在2013年首次提出了腫瘤免疫循環(huán)的概念。簡單地說，腫瘤免疫循環(huán)就是由T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的腫瘤免疫響應(yīng)過程。腫瘤免疫循環(huán)過程分為T細(xì)胞開始響應(yīng)的準(zhǔn)備階段和T細(xì)胞發(fā)揮殺傷作用的效應(yīng)階段。準(zhǔn)備階段主要發(fā)生在淋巴結(jié)，包括腫瘤細(xì)胞釋放抗原、腫瘤抗原呈遞、T細(xì)胞活化3個過程；效應(yīng)階段發(fā)生在腫瘤微環(huán)境（tumor microenvironment，TME）中，包括腫瘤抗原特異性T細(xì)胞的轉(zhuǎn)運和浸潤、T細(xì)胞識別腫瘤細(xì)胞和T細(xì)胞殺傷腫瘤，殺傷腫瘤細(xì)胞過程中會釋放腫瘤相關(guān)抗原，開始下一次免疫循環(huán)（見圖1）[4-6]。針對不同的免疫循環(huán)階段可以設(shè)計不同的免疫調(diào)節(jié)納米藥物，用于不同的免疫治療策略。這種基于腫瘤免疫循環(huán)的免疫療法依靠患者自身的免疫系統(tǒng)激活腫瘤特異性免疫過程，充分發(fā)揮人體自身免疫系統(tǒng)的能動性，相比傳統(tǒng)治療方式更具優(yōu)勢[7]。到目前為止，已經(jīng)有許多免疫療法被美國FDA批準(zhǔn)上市，更多免疫治療策略也正在臨床測試階段[5,8]。

圖1 腫瘤免疫循環(huán)過程示意圖[9]Figure 1 Schematic diagram of tumor immune cycle

1.2 免疫治療的發(fā)展與現(xiàn)狀

針對腫瘤免疫循環(huán)的不同階段，目前已經(jīng)設(shè)計出了不同的免疫療法，如腫瘤疫苗、免疫檢查點阻斷（immune checkpoint blockade，ICB）療法、嵌合抗原受體T細(xì)胞免疫療法、溶瘤病毒療法、免疫原性細(xì)胞死亡（immunogenic cell death，ICD）療法、過繼細(xì)胞療法和重塑腫瘤免疫微環(huán)境調(diào)節(jié)療法等[8,10]。其中，ICB療法為腫瘤治療帶來了新的希望。這一治療方式通過施加免疫檢查點通路抑制劑[如程序性死亡受體（programmed cell death protein 1，PD-1）抗體、細(xì)胞程序性死亡-配體1（programmed cell death 1 ligand 1，PD-L1）抗體 、細(xì)胞毒性T細(xì)胞相關(guān)蛋白-4（cytotoxic T lymphocyte associate protein-4，CTLA-4）抗體等] 恢復(fù)免疫細(xì)胞對病變腫瘤的監(jiān)視和殺傷能力[11]。盡管近幾年在這一方面的研究日漸火熱，但臨床數(shù)據(jù)表明ICB療法并不是對所有腫瘤都有效果。即使有效，治療效果也因人而異，這些都是ICB療法不得不面對的難題[12]。腫瘤疫苗即通過抗原輸送誘導(dǎo)人體自身的抗腫瘤免疫響應(yīng)，刺激和擴(kuò)大免疫系統(tǒng)T細(xì)胞反應(yīng)來預(yù)防或者消除腫瘤細(xì)胞，是一種很有前途的腫瘤治療方法。然而，全身毒性和低免疫原性是目前腫瘤疫苗不可避免的短板。另外，由于提供抗原的全長蛋白、肽片段、DNA質(zhì)粒等材料生產(chǎn)成本相對高昂，腫瘤疫苗的發(fā)展也在一定程度上受到了限制[13]。ICD的概念在2005年引入，指腫瘤細(xì)胞在受到外界刺激發(fā)生死亡的同時由非免疫原性轉(zhuǎn)變?yōu)槊庖咴?，進(jìn)而介導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗腫瘤免疫應(yīng)答的過程。該療法通過調(diào)節(jié)ICD相關(guān)信號，加強(qiáng)ICD介導(dǎo)的免疫應(yīng)答來達(dá)到治療目的[14-15]。近年來已有許多研究報道了化放療、光熱治療和光/聲動力治療對于調(diào)控ICD信號、啟動ICD治療的重要性。由于單一方法治療難以實現(xiàn)腫瘤的根除，基于ICD原理的治療方式可以允許多種療法的聯(lián)合，進(jìn)一步強(qiáng)化機(jī)體對腫瘤的免疫反應(yīng)，在治療效果的提升上或有些許優(yōu)勢。總而言之，上述免疫療法目前仍處于蓬勃發(fā)展階段，在其真正邁入臨床應(yīng)用前，還需要在分子機(jī)制層面完成更系統(tǒng)全面的基礎(chǔ)研究。

1.3 納米藥物與腫瘤免疫治療的結(jié)合：功能性免疫調(diào)節(jié)納米載體所帶來的機(jī)遇

盡管近幾年針對腫瘤免疫治療的研究越來越多，由于TME的復(fù)雜性以及免疫抑制效應(yīng)，基于免疫循環(huán)的腫瘤免疫療法仍然存在藥物遞送效率和反應(yīng)率不高、易出現(xiàn)難以控制的免疫相關(guān)不良反應(yīng)等問題，限制了其在臨床上的應(yīng)用[6]。近年來，隨著納米技術(shù)的發(fā)展，越來越多的研究將納米技術(shù)與腫瘤免疫治療結(jié)合[16]。這種結(jié)合治療的方式可以提供不少優(yōu)勢：首先，由于納米材料的尺寸優(yōu)勢以及高滲透長滯留效應(yīng)，基于納米載體系統(tǒng)的免疫治療可以靶向遞送免疫藥物、增加腫瘤組織內(nèi)藥物積累、限制藥物對正常組織的暴露、降低全身免疫毒性。其次，大部分的免疫藥物（抗原、抗體及小分子抑制劑）多為核酸蛋白類分子，具有不穩(wěn)定性，借助納米載體給藥的方式可以防止這類免疫藥物與體內(nèi)各種酶相互作用而失效，有效提高藥物的生物利用度，間接增強(qiáng)免疫療效。最后，納米載體的開發(fā)為多種免疫藥物的高效、同時遞送提供了可能性，這對于逆轉(zhuǎn)免疫抑制效應(yīng)導(dǎo)致的免疫應(yīng)答不足至關(guān)重要[17]。以上種種優(yōu)勢證實了納米藥物與腫瘤免疫治療結(jié)合的必要性。

目前，脂質(zhì)體、聚合物、金屬納米粒子、多肽等各種有機(jī)和無機(jī)納米材料已經(jīng)在腫瘤免疫治療中得到了應(yīng)用[18-19]。關(guān)于納米材料在腫瘤免疫治療中的應(yīng)用主要包括以下方面：抗原/佐劑的封裝和遞送、淋巴結(jié)引流、免疫相關(guān)細(xì)胞的攝取與靶向、人工抗原呈遞等[3,18-20]。其中大部分納米材料在腫瘤免疫治療中都是充當(dāng)惰性載體的作用，負(fù)責(zé)將藥物或者抗原更高效地運送到腫瘤部位，但有些納米材料本身表現(xiàn)出免疫調(diào)節(jié)特性，發(fā)揮載體功能的同時自身具有免疫調(diào)節(jié)作用，以“自我輔助”的形式參與腫瘤免疫治療，相比于普通的載體來說，受到了更為廣泛的關(guān)注[19,21]。本文將從設(shè)計原理出發(fā)，對這類免疫調(diào)節(jié)載體的應(yīng)用進(jìn)行重點介紹，總結(jié)這類載體在腫瘤免疫治療中協(xié)同發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能的最新研究進(jìn)展，以期為更多治療策略的開發(fā)提供參考。

2 功能性免疫調(diào)節(jié)納米載體的設(shè)計原理與依據(jù)

在開發(fā)功能性免疫調(diào)節(jié)納米載體時，研究者們需結(jié)合腫瘤免疫循環(huán)深入考慮針對“哪個”具體免疫步驟進(jìn)行設(shè)計，“為什么”需要進(jìn)一步增強(qiáng)這一階段的免疫反應(yīng)，以及載體材料“怎么”在其中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用等關(guān)鍵問題[6]。本節(jié)根據(jù)免疫周期中簡化的3個核心環(huán)節(jié)進(jìn)行分類，詳細(xì)闡述免疫調(diào)節(jié)基本原理，其中重點關(guān)注了各項原理中可用于設(shè)計功能性免疫調(diào)節(jié)納米載體的一些細(xì)節(jié)，以為其協(xié)同增強(qiáng)腫瘤免疫提供重要理論支持及依據(jù)。

2.1 增強(qiáng)抗原釋放與呈遞

抗原的釋放和呈遞是啟動細(xì)胞免疫的先決條件。從腫瘤抗原釋放暴露，到DCs的捕獲、遷移和成熟，以及最后的抗原加工并通過主要組織相容性復(fù)合體（major histocompatibility complex，MHC）分子呈遞至未成熟T細(xì)胞，每個過程對于啟動T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)都至關(guān)重要[22]。因此，針對任一步驟設(shè)計開發(fā)自免疫活性納米載體，對于增強(qiáng)免疫療效來說，都是可行的。然而，由于抗原表達(dá)不足、抗原丟失和抗原調(diào)節(jié)下調(diào)，許多腫瘤的免疫原性較差[23]。因而絕大多數(shù)研究致力于腫瘤納米疫苗的開發(fā)，“從源頭上”誘導(dǎo)內(nèi)源性腫瘤抗原的產(chǎn)生，或直接遞送外源性腫瘤抗原，補(bǔ)充抗原數(shù)量，增強(qiáng)其“釋放與呈遞”[5,24]。

一些具有自佐劑特性的生物材料可以用于納米疫苗的多樣化設(shè)計。其中，介孔碳納米球、二氧化硅納米粒子及二維黑磷納米片等無機(jī)載體是較為典型的例子[25-27]。它們具有高比表面積及自帶免疫原性的特點，一方面可以高效負(fù)載抗原，增強(qiáng)DCs攝取；另一方面，載體自身還具有免疫活性，可促進(jìn)DCs的成熟，減少由DCs功能失調(diào)而帶來的抗原特異性免疫耐受。這一類無機(jī)納米生物材料已成為設(shè)計納米疫苗的優(yōu)良候選材料。另外，具有類似特性的脂質(zhì)樣及多糖類材料也被證明可以通過Toll樣受體（Toll-like receptor，TLR）信號或干擾素基因刺激因子（stimulator of interferon genes，STING）通路參與激活適應(yīng)性免疫[28-29]。TLR信號通路中的重要受體主要包括TLR3和TLR4，它們通過含動物白細(xì)胞介素-1受體蛋白結(jié)構(gòu)域的適配器發(fā)出信號，激活Ⅰ型干擾素（interferon，IFN）響應(yīng)，啟動免疫調(diào)節(jié)[30]。而STING通路則是由環(huán)鳥苷酸-腺苷酸合成酶（cyclic GMP-AMP synthase，cGAS）介導(dǎo)。在感知腫瘤DNA及特定激動劑的刺激后，該酶負(fù)責(zé)產(chǎn)生環(huán)鳥苷酸-腺苷酸（cyclic GMP-AMP，cGAMP）分子信使，隨后催化DCs成熟并刺激腫瘤抗原與共刺激因子抗原分化簇8（cluster of differentiation 8，CD8）T細(xì)胞的交叉呈遞，提高抗腫瘤免疫力[30]。直接在腫瘤部位啟動TLR及STING通路可以顯著增強(qiáng)免疫療效，且不會引起全身性的副作用。因此，研究者們可基于上述原理，設(shè)計無需額外佐劑的自免疫調(diào)節(jié)納米疫苗。通過特定靶向基團(tuán)的修飾、尺寸及表面性質(zhì)的控制，納米疫苗可定向到達(dá)腫瘤部位，釋放抗原，同時發(fā)揮自身免疫調(diào)節(jié)活性，以協(xié)同放大治療效果。

除了直接遞送外源性腫瘤抗原，通過誘導(dǎo)ICD等方式促進(jìn)內(nèi)源性自體抗原的產(chǎn)生，似乎更能喚起特異性的免疫應(yīng)答，達(dá)到個性化治療的目的[6]。一些過渡金屬基材料被證實可以經(jīng)ICD促進(jìn)損傷相關(guān)分子模式（damage associated molecular patterns，DAMPs）的釋放，包括鈣網(wǎng)蛋白、高遷移率組盒1和三磷酸腺苷[31]。這些 DAMPs可以增強(qiáng)垂死癌細(xì)胞的抗原性，即誘導(dǎo)內(nèi)源性腫瘤抗原生成，并有助于DCs的募集和成熟，從而改善抗原呈遞。大量研究已證明了利用金屬基材料制備納米載體的可行性。進(jìn)一步利用這類材料構(gòu)建載體自身具有免疫調(diào)節(jié)活性的納米藥物，則有望為免疫治療帶來新的突破。

2.2 促進(jìn)T細(xì)胞的啟動和激活

作為獲得性免疫的主力軍，T細(xì)胞在腫瘤免疫治療中扮演著不可或缺的角色，其免疫激活保證了下游免疫調(diào)節(jié)反應(yīng)的正常進(jìn)行。未成熟的T細(xì)胞主要依賴與APCs之間的抗原識別及共刺激信號來啟動并激活成為效應(yīng)T細(xì)胞，以參與腫瘤部位的特定免疫應(yīng)答[4]。這一啟動和活化過程還與眾多氨基酸的代謝及細(xì)胞因子的分泌有關(guān)，理解它們間的聯(lián)系對指導(dǎo)功能性免疫調(diào)節(jié)納米載體的設(shè)計多有助益。

包括色氨酸（tryptophan，Trp）、精氨酸（arginine，Arg）、甲 硫 氨 酸（methionine，Met）、苯 丙 氨酸（phenylalanine，Phe）、半 胱 氨 酸（cysteine，Cys）、亮氨酸（leucine，Leu）在內(nèi)的多種氨基酸均對維持T細(xì)胞的激活、增殖、分化起到關(guān)鍵作用[32-33]。例如，在炎性的腫瘤免疫微環(huán)境中，由于編碼促進(jìn)Trp和Arg的分解代謝的酶的基因高表達(dá) [包括吲哚胺2，3雙 加 氧 酶（indoleamine 2，3-dioxygenase，IDO），精氨酸酶1等]，Trp和Arg的分解代謝會異常升高，將T細(xì)胞所需的這兩種氨基酸轉(zhuǎn)化為犬尿氨酸及L-鳥氨酸[32,34]。自此，T細(xì)胞對Trp和Arg的獲取受限，促使核糖體激酶GCN2及雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）信號激活并刺激細(xì)胞功能的自由基重編程，最終導(dǎo)致其細(xì)胞周期停滯和自噬[32]。在這種情況下，T細(xì)胞難以正常增殖活化，腫瘤的免疫耐受也逐步形成，限制了免疫治療療效。若能基于氨基酸分解代謝原理去針對性地設(shè)計增強(qiáng)T細(xì)胞啟動與激活的免疫治療策略，將會大大提高治療效果。迄今為止，已有大量研究設(shè)計了對應(yīng)藥物以及治療方法。尤其是在Trp代謝方面，已經(jīng)以IDO為靶點開發(fā)了幾種不同的免疫調(diào)節(jié)抑制劑，如烷基化NLG919（aNLG）[35]、1-甲基色氨酸（1-methyltryptophan，1-MT）[36]等?，F(xiàn)如今大部分的免疫治療策略往往通過物理包裹、化學(xué)接枝等方法與納米載體結(jié)合，靶向遞送至腫瘤部位，抑制Trp分解代謝，催化必需的G1期T細(xì)胞的生長[35]。盡管在遞送靶向Trp等氨基酸代謝的免疫調(diào)節(jié)抑制劑方面的研究多有報道，但鮮有人基于該類原理去設(shè)計對應(yīng)的自免疫活性載體。以天然氨基酸為基本單元構(gòu)建的聚合物納米載體（如聚酯酰胺、聚氨基酸）或許可以在遞送藥物的同時，自身調(diào)節(jié)腫瘤原位的氨基酸代謝，協(xié)同APCs實現(xiàn)T細(xì)胞共活化和啟動[37]。因此，在今后的研究中，可以進(jìn)一步探討氨基酸與腫瘤免疫的聯(lián)系，并依此發(fā)掘更多的基于氨基酸的功能性免疫調(diào)節(jié)納米材料。

另一方面，一些細(xì)胞因子及趨化因子，如白細(xì)胞介素-2（interleukin-2，IL-2）和IFN-α/β，在T細(xì)胞活化中也起著至關(guān)重要的作用[38-39]。它們充當(dāng)著免疫激活“開關(guān)”的角色，確保T細(xì)胞可以啟動最佳效應(yīng)器功能，可持續(xù)存活，并形成反應(yīng)性記憶群體[40]。其中，IFN-α可以通過增加具有效應(yīng)器記憶表型的腫瘤特異性CD8+T細(xì)胞的數(shù)量，從而長期、持久地刺激抗腫瘤免疫反應(yīng)[41]；另一種主要T細(xì)胞生長因子IL-2，則通過其高親和力IL-2受體的信號傳導(dǎo)激活效應(yīng)T細(xì)胞的擴(kuò)增和優(yōu)化免疫應(yīng)答[42]。相當(dāng)一部分納米生物材料包括ZnO、脂質(zhì)納米顆粒等，已被證實可在生物體內(nèi)有效促進(jìn)細(xì)胞因子分泌，促進(jìn)T細(xì)胞啟動與激活[24,43]。依此設(shè)計的自免疫活性載體在增強(qiáng)腫瘤免疫治療上也正逐漸成為備受矚目的焦點。

2.3 促進(jìn)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的運輸浸潤/識別殺傷

腫瘤免疫循環(huán)以CTLs的運輸浸潤/識別殺傷過程收尾：激活后的CTLs經(jīng)血液流動滲透至腫瘤部位，最后，根據(jù)T細(xì)胞抗原受體和MHC的相互作用，特異性識別腫瘤細(xì)胞并釋放顆粒酶和穿孔素以執(zhí)行殺傷功能[4]。在免疫抑制的TME中，諸多因素限制了這一過程的順利進(jìn)行。針對這些因素可以合理發(fā)掘功能性免疫調(diào)節(jié)納米載體，在靶向運送免疫藥物的同時協(xié)同增強(qiáng)治療效果。

首先，實體瘤外圍的物理屏障會在很大程度上阻礙CTLs的運輸與浸潤。腫瘤核心外圍缺乏足夠的血液灌注，難以將T細(xì)胞有效轉(zhuǎn)運至內(nèi)部發(fā)揮識別殺傷作用[6]?？刂颇[瘤血管正?；纳锊牧匣蚩捎糜陂_發(fā)納米載體輔助增強(qiáng)免疫療效。例如，一些結(jié)構(gòu)中含有一氧化氮（NO）供體的高分子聚合物可在TME中提供具有調(diào)節(jié)血管生成并維持血管穩(wěn)態(tài)的NO。當(dāng)NO氣體原位受控釋放時，T細(xì)胞在腫瘤處的歸巢得以改善，間接增加TME中T細(xì)胞數(shù)量，有利于免疫殺傷的進(jìn)一步執(zhí)行[44]。

其次，即使CTLs最終浸潤至TME中，腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)的PD-L1配體也會與PD-1受體結(jié)合，減弱T細(xì)胞活化，保護(hù)腫瘤細(xì)胞免受CTLs識別與殺傷[45]。針對PD-1/PD-L1的ICB是一種有前景的抗腫瘤免疫療法。目前已開發(fā)出多種抑制劑（如帕博利珠單抗等）用于臨床治療[46]，但在大多數(shù)情況下，抗PD-1/PD-L1治療的持久反應(yīng)率仍然相對較低。除了前文所述的CTLs浸潤不足外，還與一些TME中免疫抑制細(xì)胞有關(guān)。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）和髓源性抑制細(xì)胞（myeloid derived suppressor cells，MDSCs）可以抑制由檢查點抑制劑再生的抗腫瘤CTLs和輔助性T細(xì)胞(helper T cell，Th）如Th1和Th2反應(yīng)[47]。此外，M2型巨噬細(xì)胞（tumor-associated macrophages，TAMs）可以通過表達(dá)T細(xì)胞免疫檢查點配體（如PD-L1和PD-L2）直接或間接抑制T細(xì)胞功能[48-49]。它們不僅可以分泌轉(zhuǎn)化生長因 子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）等抑制性細(xì)胞因子，還可以持續(xù)招募Treg細(xì)胞，對抗由檢查點抑制劑重新激活的免疫反應(yīng)[50]。這啟示研究者，設(shè)計增強(qiáng)ICB的治療策略可以從增強(qiáng)CTLs浸潤及調(diào)節(jié)免疫抑制細(xì)胞出發(fā)[51]。目前，可自身實現(xiàn)上述雙重調(diào)節(jié)的納米材料（如Fe3O4納米粒子）已在抗腫瘤免疫中取得重大進(jìn)展，相關(guān)研究仍在不斷完善[52]。

3 功能性免疫調(diào)節(jié)納米載體在協(xié)同增強(qiáng)免疫治 療中的應(yīng)用

腫瘤免疫循環(huán)的3大核心環(huán)節(jié)是設(shè)計功能性自免疫活性納米載體的堅實理論基礎(chǔ)。近年來，一系列具有內(nèi)在免疫調(diào)節(jié)特性的納米載體陸續(xù)誕生，為腫瘤免疫治療帶來了新突破。本節(jié)以這些載體的材料類型進(jìn)行分類（有機(jī)與無機(jī)），系統(tǒng)性介紹功能性免疫調(diào)節(jié)納米載體在協(xié)同增強(qiáng)免疫治療中的具體應(yīng)用，以期對更多治療策略的開發(fā)提供指導(dǎo)和建議（見圖2）。

圖2 功能性免疫調(diào)節(jié)載體的分類、形式與特點概述圖Figure 2 Overview diagram of the classification, forms and characteristics of functional immunomodulatory nanocarriers

3.1 無機(jī)納米載體

功能性免疫調(diào)節(jié)無機(jī)納米載體可以分為碳基、硅基、磷基、硒基以及其他金屬基無機(jī)納米載體。與以往所理解的“無機(jī)即惰性”不同，它們也具有固有的免疫原性特征（大小、形狀和化學(xué)性質(zhì)等），可以作為疫苗和免疫療法的反應(yīng)載體，或用于改變體內(nèi)的免疫細(xì)胞功能[20]。盡管相關(guān)免疫調(diào)節(jié)機(jī)制仍未研究得十分透徹，但近幾年基于功能性免疫調(diào)節(jié)無機(jī)納米載體的免疫治療策略在腫瘤治療領(lǐng)域引起了廣泛的關(guān)注，更多研究也在不斷涌現(xiàn)。

3.1.1 碳基作為研究最早的免疫治療疫苗載體之一，碳基納米顆粒已被證實可用于抗原蛋白的定向遞送，同時，其自身還可作為有效的佐劑，提高抗原攝取并加速DCs的成熟，以進(jìn)一步優(yōu)化免疫應(yīng)答[53]。

Jambhrunkar等[27]于2017年便報道了關(guān)于自佐劑中空碳球納米疫苗的研究。他們使用外表完整但具有內(nèi)陷結(jié)構(gòu)的中空納米碳球（invaginated mesostructured hollow carbon spheres，IMHCSs）遞 送模式抗原卵清蛋白（ovalbumin，OVA)，這一設(shè)計相比于其他的碳基免疫復(fù)合物（如碳納米管復(fù)合免疫蛋白）來說可引發(fā)更高水平的免疫應(yīng)答。一方面，免疫刺激的提升歸因于碳基納米載體形式的優(yōu)化：其迷走型孔道賦予了自身高比表面積特性，可以高效裝載蛋白質(zhì)抗原，實現(xiàn)免疫蛋白的更佳遞送。另一方面，IMHCSs也在促脾細(xì)胞成熟方面提供了優(yōu)勢：通過激活A(yù)PCs表面表達(dá)的共刺激分子（CD40，MHCⅡ），IMHCSs-OVA可有效促進(jìn)DCs和巨噬細(xì)胞的成熟，因而Th2極化的免疫反應(yīng)得到了進(jìn)一步優(yōu)化提升。盡管這一研究尚未深入到具體的疾病治療應(yīng)用，但其顯示了碳基納米材料自身在免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮的重要輔助作用。在此基礎(chǔ)上，2018年發(fā)表的另一項研究則將功能性免疫調(diào)節(jié)碳納米材料的應(yīng)用推進(jìn)至腫瘤治療領(lǐng)域，Luo等[54]將光致發(fā)光碳點與OVA結(jié)合時，觀察到碳點作為佐劑可以有效提升OVA促脾細(xì)胞增殖，并促進(jìn)TNF-α和IFN-γ等因子的分泌，同時，在體內(nèi)，這一納米體系可顯著抑制小鼠B16-OVA黑色素瘤的生長。作為碳點用于腫瘤抑制疫苗自佐劑載體的首次報道，這項工作為其在腫瘤免疫治療和其他潛在臨床應(yīng)用方面的實踐開辟了許多可能性。

3.1.2 硅基類似地，硅基納米顆粒也被認(rèn)為是構(gòu)建具有自身免疫調(diào)節(jié)功能的納米疫苗的有前途的載體之一。它們可以改善體內(nèi)Th1和Th2細(xì)胞因子的分泌，通過增加CD4+和CD8+效應(yīng)記憶T細(xì)胞群，顯著增強(qiáng)抗腫瘤免疫效應(yīng)[55]。Liu等[25]設(shè)計了一種聚乙烯亞胺（polyethyleneimine，PEI）雜化的薄層中空介孔二氧化硅納米顆粒（thin-shell hollow mesoporous silica nanoparticles，THMSNs），可作為自佐劑納米疫苗的有效載體。其超薄的殼層結(jié)構(gòu)為黑色素瘤抗原肽Trp2的高效負(fù)載騰出了更多空間，同時，PEI的表面修飾可以大大提升DCs對納米顆粒的吸收效率，進(jìn)一步促進(jìn)抗原交叉呈遞。實驗結(jié)果證明，基于THMSNs的納米疫苗可在體內(nèi)產(chǎn)生強(qiáng)大的Th1免疫力以及持續(xù)的免疫記憶，最終對腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移都起到顯著的抑制作用，因而THMSNs被認(rèn)為是形成腫瘤疫苗的重要的、有前景的載體和佐劑。

3.1.3 磷基磷基納米平臺具有許多有利的免疫特性，包括促炎性細(xì)胞因子分泌（如TNF-α）、通過鈣流入極化巨噬細(xì)胞等，已在輔助免疫調(diào)節(jié)方面顯示出了優(yōu)異的適用性[56-57]。其中，含高比表面積的二維黑磷納米片（black phosphorus，BPs）應(yīng)用較廣。其大而寬的平面為免疫藥物的結(jié)合提供了充足的錨定位點，同時自身具有光熱效應(yīng)，可誘導(dǎo)ICD產(chǎn)生內(nèi)部腫瘤抗原，增強(qiáng)局部免疫，因而以BPs為載體和助劑的免疫治療策略在增強(qiáng)療效方面有巨大的前景[58]。由Li等[26]開發(fā)的OVA抗原表位包覆的BPs（FKF-OVA@BPs）便是磷基自免疫納米平臺的代表性例子。苯丙氨酸-賴氨酸-苯丙氨酸（FKF）的三肽修飾使得OVA能更有力地結(jié)合在BPs的二維平面上，達(dá)到抗原有效片段高負(fù)載的目的。另外，BPs的近紅外光熱效應(yīng)可以產(chǎn)生溫和的局部熱量，最終改善全身性T細(xì)胞增殖反應(yīng)。當(dāng)與ICB療法相結(jié)合時，F(xiàn)KF-OVA@BPs可以在黑色素瘤小鼠模型中誘導(dǎo)積極的免疫保護(hù)作用，產(chǎn)生強(qiáng)大的協(xié)同療效。這一研究也為利用磷基納米助劑整合免疫活性和光熱效應(yīng)以增強(qiáng)腫瘤免疫治療提供了新的見解。

3.1.4 硒基其他無機(jī)材料往往直接啟動T細(xì)胞免疫直接調(diào)控抗腫瘤免疫反應(yīng)。與此不同的是，含硒納米顆粒則是通過在TME中響應(yīng)特定刺激[如活性氧（reactive oxygen species，ROS）和輻射]而原位氧化產(chǎn)生硒酸來間接調(diào)控自然殺傷（natural killer，NK）細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。目前，硒酸已被報道可以阻礙多種類型腫瘤的細(xì)胞表面HLA-E（一種抑制性配體，可與NK細(xì)胞表面NKG2A受體結(jié)合而抑制免疫）的表達(dá)，從而激活NK細(xì)胞免疫活性，啟動先天性免疫應(yīng)答[59]。這一發(fā)現(xiàn)也奠定了含硒納米載體用于增強(qiáng)免疫治療的可行性。由于特定的治療方式（如放療、化療）可以提供相應(yīng)的高ROS或電離輻射以激活含硒納米顆粒產(chǎn)生硒酸，啟動免疫調(diào)節(jié)，硒基材料載體可通過協(xié)同多重療法展現(xiàn)其優(yōu)良的抗腫瘤潛力。例如，Gao等[60]首次提出了一種涵蓋三重化學(xué)-放射免疫療法的含硒納米膠束治療平臺（PSeR/Dox）。該平臺包含了1個輻射敏感的含二硒醚的聚合物骨架、腫瘤靶向多肽修飾的聚乙二醇（PEG-RGD）和化療藥物阿霉素（doxorubicin，Dox）。其中，含二硒醚的聚合物骨架易于響應(yīng)放療提供的電離輻射而氧化二硒鍵，裂解產(chǎn)生硒酸。這一過程不僅促進(jìn)了Dox在腫瘤細(xì)胞核處的定向釋放，提升化療效率，還可以催化產(chǎn)生DAMPs調(diào)控腫瘤相關(guān)抗原，提高腫瘤對CTLs所介導(dǎo)的免疫治療的敏感性。結(jié)合硒酸的NK細(xì)胞免疫療法，含硒納米膠束平臺PSeR/Dox可對多種腫瘤模型提供“1+1+1＞3”的協(xié)同增強(qiáng)療效。

3.1.5 金屬基自從80多年前鋁佐劑在疫苗制備上被首次應(yīng)用，越來越多其他的金屬基材料的免疫調(diào)節(jié)功能被慢慢發(fā)掘出來。這類以鋅基、鐵基材料等為代表的免疫活性金屬材料以其易于制備、性能可調(diào)的優(yōu)勢受到認(rèn)可，是作為功能性免疫調(diào)節(jié)納米載體的不二選擇。這些基于金屬的免疫調(diào)節(jié)納米平臺其具體細(xì)節(jié)歸納如表1所示。

表1 基于無機(jī)金屬功能性免疫調(diào)節(jié)納米平臺的免疫治療策略實例Table 1 Examples of immunotherapeutic strategies based on inorganic metal-functional immunomodulatory nanoplatforms

3.2 有機(jī)納米載體

與無機(jī)納米載體相比，應(yīng)用于免疫調(diào)節(jié)的有機(jī)納米載體的種類更為豐富，它們也受到了更為廣泛的研究與關(guān)注。這類可實現(xiàn)自我輔助功能的免疫活性有機(jī)納米載體相比前者可能更具優(yōu)勢： 1）它們來源廣泛，許多天然的脂質(zhì)、糖類均具備免疫刺激功能，易于提取并用于免疫調(diào)節(jié)載體的制備； 2）它們可以被更靈活的設(shè)計和多功能化修飾以滿足免疫需求，例如合成高分子聚合物、小分子合成前藥均可以通過對合成單元和前藥元素的合理選擇去設(shè)計成針對特定靶點的免疫藥物。

3.2.1 聚合物聚合物載體以其制備簡單、易于功能修飾、性能靈活（可通過合成單元調(diào)控結(jié)構(gòu)進(jìn)而影響性能）等特點在腫瘤免疫乃至其他領(lǐng)域都顯示出了重要的應(yīng)用價值[65]。依照來源分類，目前已有兩種聚合物載體被報道用于構(gòu)建自免疫型的納米藥物平臺：基于天然聚合物的納米載體以及基于合成高分子的納米載體。本部分主要舉例一些合成聚合物免疫活性載體的應(yīng)用。

TL：Chinese Proverb-an outwardly attractive but worthless person

氨基酸的自佐劑性能已在一些肽疫苗的使用中得以發(fā)現(xiàn)[66]。如上文所述，氨基酸代謝對于調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)和塑造TME影響重大。因而由氨基酸構(gòu)建的腫瘤免疫治療納米平臺或許能產(chǎn)生意想不到的治療效果。例如，Li等[67]開發(fā)了一種基于L-苯丙氨酸（L-phenylalanine，L-Phe）的負(fù)載Dox的代謝重編程和免疫監(jiān)視激活納米藥物（doxorubicin-loaded metabolic reprogramming and immunosurveillance activating nanomedicine，MRIAN-Dox)，他 們 通 過二羧酸基單體和L-Phe單體縮聚合成聚酯酰胺，并包載化療藥物Dox，為血液系統(tǒng)惡性腫瘤提供了新的治療方法：一方面，MRIAN-Dox可以專門靶向小鼠T細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞性白血病（T-cell acute lymphoblastic leukaemia，T-ALL）模型中的病變細(xì)胞，提供化療藥物；另一方面，MRIAN降解為L-Phe以重新編程MDSCs的能量代謝，這驅(qū)動它們向正常骨髓細(xì)胞的分化，并解除其免疫抑制功能以加強(qiáng)T-ALL中的免疫監(jiān)視，為T-ALL的成功治療提供雙重保障（見圖3）。在此之后，Xu等[37]也開發(fā)了一種治療急性髓系白血病（acute myeloid leukemia，AML）的自組裝亮氨酸聚合物，以用于負(fù)載Dox形成Leu-Dox。它通過釋放Leu，激活了mTOR并且抑制AML細(xì)胞中的自噬，使白血病干細(xì)胞對化療更加敏感。與上述MRIAN-Dox策略類似，這一基于Leu-Dox的策略在白血病的治療上同樣具有革命性意義。

圖3 代謝重編程免疫監(jiān)視恢復(fù)納米藥物的設(shè)計及其抗腫瘤免疫療效[67]Figure 3 The design and antitumor efficacy of metabolic reprogramming and immunosurveillance activating nanomedicine

作為攜帶七元環(huán)狀叔胺結(jié)構(gòu)的pH敏感聚合物，PC7A是另一種常用于自我輔助免疫治療的可靠材料。它通過聚合物自身誘導(dǎo)的STING途徑，激活先天免疫應(yīng)答，促進(jìn)如干擾素調(diào)節(jié)因子7(interferon regulatory factor 7，IRF 7)、C-X-C基序趨化因子10（CXC chemokine ligand-10，CXCL10）等多種免疫因子表達(dá)[68-69]。德克薩斯大學(xué)西南醫(yī)學(xué)中心高教授課題組首次將這類具有免疫激活特性的聚合物篩選出來，并命名為PC7A。通過以PC7A為載體，他們成功制備了腫瘤抗原包裹的自組裝納米疫苗，實現(xiàn)了對黑色素瘤及結(jié)直腸癌的高效免疫治療[70]。這一重大發(fā)現(xiàn)也為日后PC7A在免疫治療方面的更多應(yīng)用鋪平了道路。

NO是免疫調(diào)節(jié)過程中的重要信號轉(zhuǎn)導(dǎo)生物分子[71]。一些含有NO供體的聚合物納米載體，可在腫瘤部位響應(yīng)刺激而受控釋放NO，扮演間接調(diào)控腫瘤免疫的角色。Jiang等[72]設(shè)計制備了這樣一種多硝化聚酯NO納米發(fā)電機(jī)（NanoNO）。在腫瘤位置的高谷胱甘肽作用下，NO大量富集于TME，觸發(fā)了有效的ICD反應(yīng)。隨后，免疫活性的NO可以有效調(diào)節(jié)抑制性微環(huán)境，支持了抗腫瘤免疫。這一例子為氣體治療型免疫活性載體的應(yīng)用提供了有力佐證。

3.2.2 小分子合成前藥一些小分子免疫調(diào)節(jié)劑（如ICD誘導(dǎo)藥物、抗體或其他通路抑制劑）的分子結(jié)構(gòu)中存在著易于反應(yīng)的活性基團(tuán)?；谛》肿雍铣墒侄危鲜霾煌庖哒{(diào)節(jié)劑有望通過化學(xué)修飾、共價連接的方式整合成為單一的免疫活性前藥載體，以實現(xiàn)增強(qiáng)的免疫療法[73-74]。例如，Zhou等[75]開發(fā)了一種極簡的功能性雙前藥免疫調(diào)節(jié)納米平臺，其中，吉西他濱（gemcitabine，GEM）和1-MT被設(shè)計為雙前藥分子（GEM-1-MT)，可自組裝成“自載體”GEM-1-MT納米粒子用于腫瘤化學(xué)免疫治療。該雙前藥納米體系到達(dá)腫瘤部位后可充分發(fā)揮“一石四鳥”的作用：一方面，釋放的GEM能殺死腫瘤細(xì)胞觸發(fā)ICD 并誘導(dǎo)選擇性 MDSCs消耗 ；另一方面，釋放的1-MT還同時導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞、MDSCs的雙重IDO抑制，緩解了免疫抑制，增強(qiáng)了化學(xué)免疫療法的整體治療效果?？傮w而言，這一雙前藥免疫調(diào)節(jié)納米藥物喚醒并增強(qiáng)了機(jī)體內(nèi)在的免疫治療能力，為用于協(xié)同增強(qiáng)抗腫瘤免疫的極簡納米平臺的設(shè)計提供了新的概念。

3.2.3 多肽由有限數(shù)量氨基酸殘基組成的多肽已被廣泛用作制備腫瘤疫苗的生物材料。它具有易于合成、可自組裝等特點，在構(gòu)建為自免疫活性納米平臺時可通過自身抗原性誘導(dǎo)強(qiáng)烈的T細(xì)胞反應(yīng)，實現(xiàn)腫瘤免疫治療[76]。超分子共組裝是生產(chǎn)這類“自我免疫”肽疫苗的簡單方法。Su等[77]就采用了這種方式開發(fā)了對應(yīng)的含有抗原表位偶聯(lián)肽納米纖維水凝膠疫苗平臺。皮下接種后，該共組裝肽疫苗可以激活DCs中的核轉(zhuǎn)錄因子（nuclear transcription factor-κB，NF-κB）信號通路來引發(fā)T細(xì)胞免疫，而不會誘導(dǎo)局部炎癥反應(yīng)，具有較好的治療效果。但是，這種遞送單個外源性肽抗原的治療方式無法引發(fā)更為全面、強(qiáng)大的免疫應(yīng)答，腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)的概率仍舊較高，造成了其應(yīng)用的局限性?？稍惶峁┤?xì)胞腫瘤抗原的疫苗平臺也因此在免疫治療方面更勝一籌。Yu等[78]利用蜂毒肽、脂質(zhì)材料開發(fā)了一種靶向淋巴結(jié)的全細(xì)胞抗原納米疫苗。相比于前者而言，它可以有效引發(fā)全身性的抗腫瘤免疫反應(yīng)，達(dá)到治療目的。在他們的設(shè)計中，蜂毒肽美利?。é?melittin）是促進(jìn)腫瘤全細(xì)胞抗原釋放的關(guān)鍵成分。作為一種陽離子宿主防御肽，它具有多種免疫調(diào)節(jié)作用，可以通過破壞細(xì)胞膜來誘導(dǎo)腫瘤壞死或細(xì)胞凋亡，使細(xì)胞內(nèi)容物如全腫瘤抗原和損傷相關(guān)分子模式爆發(fā)性原位釋放，以最大化啟動疫苗的免疫反應(yīng)。經(jīng)實驗驗證，使用α-melittin納米疫苗治療的小鼠原發(fā)性腫瘤大小減少了95%，腫瘤抑制率達(dá)到70%，同時，遠(yuǎn)端腫瘤大小也減少了92%，并且也具有50%的抑制率。這一策略也為基于多肽的自身免疫調(diào)節(jié)納米平臺的設(shè)計提供了新的思路。

3.2.4 脂質(zhì)自1964年脂質(zhì)體的問世到1995年首個基于脂質(zhì)的納米藥物（聚乙二醇化的阿霉素脂質(zhì)體Doxil）獲得美國FDA的批準(zhǔn)以來，脂質(zhì)納米顆粒在腫瘤治療方面的應(yīng)用已被廣泛發(fā)掘[79]。它是該領(lǐng)域研究得最為成熟的材料之一，憑借其毒性低、帶電性質(zhì)可控、結(jié)構(gòu)類膜等特性，適宜作為通用的載體遞送化療藥物、免疫蛋白、RNA等多種治療物質(zhì)。近年來，一些研究闡明了脂質(zhì)在腫瘤免疫調(diào)節(jié)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)方面的重要作用[80]，自此，越來越多基于脂質(zhì)的免疫調(diào)節(jié)納米載體被開發(fā)，以用于解決當(dāng)前免疫療法的局限性，進(jìn)一步增強(qiáng)療效。

以脂質(zhì)及其衍生物去搭建疫苗載體是最常見的一種自免疫調(diào)節(jié)腫瘤治療策略。無論是抗原肽連接的脂質(zhì)類似物、抑或是碳水化合物抗原連接的脂質(zhì)衍生物，都已被證實可以作為合適的自佐劑疫苗，促進(jìn)抗原呈遞，啟動特異性CD8+T細(xì)胞免疫[81]。然而，這種基于抗原偶聯(lián)物的脂類疫苗的合成可能既昂貴又耗時。使用可以快速簡單合成的脂類mRNA疫苗來代替前者或能解決這一難題。Miao等[28]就巧妙地通過三維組分反應(yīng)系統(tǒng)，短時間內(nèi)一步合成了1000多種可用于mRNA疫苗的脂質(zhì)制劑。經(jīng)過篩選后，他們確認(rèn)了具有環(huán)狀胺基基團(tuán)的脂質(zhì)材料（A2-Iso5-2DC18，A2）可以在小鼠模型中更有效地輸運mRNA，同時激活STING通路以刺激免疫，是作為制備腫瘤疫苗的首選結(jié)構(gòu)。這一研究為基于脂質(zhì)的免疫活性mRNA疫苗載體開發(fā)提供了杰出的先例。在此以后，Zhang等[24]也基于類似的陽離子脂質(zhì)樣材料C1，開發(fā)了一種極簡的自免疫活性納米疫苗。通過有效地遞送mRNA至APCs，并發(fā)揮脂質(zhì)載體自身的TLR4受體激活特性，接種有該疫苗的荷瘤小鼠體內(nèi)均可以產(chǎn)生強(qiáng)大的T細(xì)胞活化反應(yīng)。以上兩種涉及免疫調(diào)節(jié)活性的合成脂質(zhì)應(yīng)用實例，均為協(xié)同增強(qiáng)免疫療效提供了可行的方法。

免疫細(xì)胞衍生的納米脂質(zhì)囊泡（如M1巨噬細(xì)胞或NK細(xì)胞來源納米囊泡）表面具有豐富的可與腫瘤免疫微環(huán)境相互作用的受體和配體，可有效改善微環(huán)境免疫抑制效應(yīng)，也被用于腫瘤免疫治療[85]。例如，Hong等[86]設(shè)計了一種T細(xì)胞來源的納米囊泡（T cell-derived nanovesicles，TCNVs)，它由CTLs通過具有微/納米孔的膜連續(xù)擠壓所產(chǎn)生，能夠抑制T細(xì)胞衰竭并在免疫抑制TME中保持抗腫瘤活性。通過該囊泡表面編程的PD-1受體和TGF-β受體，能夠阻斷癌細(xì)胞上的PD-L1，清除免疫抑制TME中的TGF-β，從而防止CTLs衰竭。基于該自免疫活性的TCNVs治療是克服腫瘤免疫抑制機(jī)制的新型有效的治療策略。

3.2.5 糖類一些具有特殊重復(fù)碳水化合物單元的微生物來源多糖大分子往往也具有有效的免疫刺激能力。它們包括甘露聚糖、葡聚糖及其衍生物，已被報道可與各種模式識別受體[如C型凝集素、TLR、凝集素樣甘露糖受體（CD206）]相互作用，促進(jìn)DCs的強(qiáng)激活[87-88]。因此，基于糖類的免疫活性載體在腫瘤疫苗的制備上正嶄露頭角，它們可以被設(shè)計成膠囊、水凝膠等各種形式，在遞送抗原的同時發(fā)揮自身免疫特性[89-90]。Son等[29]制備的基于雙重微生物多糖的免疫原性納米膠囊就是mRNA疫苗遞送方面的典型應(yīng)用實例。他們使用PEI包被的SiO2納米顆粒作為犧牲模板，通過與mRNA及多糖分子的簡單先后孵育，以及對模板的去除，最終可以得到尺寸在200 nm左右的空心糖膠囊疫苗。利用自身尺寸效應(yīng)，納米粒子可以有效傳遞至淋巴并積累，實現(xiàn)DCs激活，誘發(fā)強(qiáng)大的抗腫瘤免疫反應(yīng)。這一利用病原體來源多糖構(gòu)建免疫刺激材料的獨特策略或?qū)⒊蔀槲磥硌芯康姆较蛑弧?/p>

4 結(jié)語與展望

與納米技術(shù)結(jié)合的腫瘤免疫治療在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域已經(jīng)掀起了革命性的浪潮。較傳統(tǒng)免疫治療而言，納米載體不僅可以發(fā)揮靶向遞藥、響應(yīng)釋藥的功能，還可以通過合適的材料選擇、合理的結(jié)構(gòu)設(shè)計在腫瘤原位啟動固有免疫調(diào)節(jié)，提高原有的治療功效。這種基于功能性免疫調(diào)節(jié)納米載體的治療策略將引起越來越多的關(guān)注。為了進(jìn)一步推進(jìn)其臨床轉(zhuǎn)化，日后在研究過程中還應(yīng)特別關(guān)注以下幾點。1）免疫活性納米載體的安全性、有效性須得到進(jìn)一步評價。盡管在現(xiàn)有的研究中，這類載體在細(xì)胞及動物層面的安全性被初步證實，但部分材料的使用還是可能會給人體帶來潛在的危害。例如，未經(jīng)純化和修飾的微生物來源材料（如來源于細(xì)菌的脂多糖）在人體內(nèi)可能會引起嚴(yán)重的感染，或?qū)е逻^度免疫而引發(fā)全身性的不良反應(yīng)[91]。因此，在臨床應(yīng)用前，應(yīng)建立更系統(tǒng)的方式全面評價這類載體的安全性，為治療提供保障。2）針對單一靶點設(shè)計的活性載體免疫療效往往不足，需聯(lián)合使用多種手段，以進(jìn)一步提高療效。復(fù)雜而多變的TME為多種免疫抑制細(xì)胞的活動及免疫抑制因子的分泌提供場所，導(dǎo)致部分腫瘤存在著免疫不敏感的特性，也被稱之為“冷腫瘤”。聯(lián)合多種療法如放療、光動力療法、光熱療法的免疫治療策略有望增強(qiáng)“冷腫瘤”的免疫原性，將其轉(zhuǎn)化為“熱腫瘤”，實現(xiàn)更好的治療效果[10]。因此，未來基于免疫活性載體的腫瘤治療策略也應(yīng)考慮多手段聯(lián)用。3）仍有多個基于腫瘤免疫循環(huán)的調(diào)控途徑未被開發(fā)為對應(yīng)的自免疫活性載體治療策略，例如Trp分解代謝，僅有特定的小分子抑制劑（如1-MT）被開發(fā)且使用，未來可期待這些創(chuàng)新策略的誕生，以提供多元化的腫瘤治療方案。

基于功能性免疫調(diào)節(jié)納米載體的治療策略有望在腫瘤免疫治療方面得到進(jìn)一步應(yīng)用，這需要不同領(lǐng)域研究人員的共同努力。隨著研究繼續(xù)深入，期待功能性免疫調(diào)節(jié)納米載體未來進(jìn)一步向臨床的轉(zhuǎn)化。