2 型糖尿病患者血清IL-1β、MCP-1 的表達(dá)及其與胰島素抵抗發(fā)生的關(guān)系

張燕 徐清芳 胡冬梅 王青梅

（駐馬店市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 駐馬店 463000）

2 型糖尿?。―iabetes mellitus type 2，T2DM）是由于胰島素分泌不足或胰島素抵抗（Insulin resistance，IR）導(dǎo)致的血糖升高的慢性疾病。胰島β 細(xì)胞功能異常與IR 是T2DM 發(fā)病與進(jìn)展的基本環(huán)節(jié)。在T2DM 初期，胰島β 細(xì)胞通過增加分泌量來適應(yīng)機(jī)體升高的血糖，而長期的高血糖會(huì)對(duì)胰島β 細(xì)胞產(chǎn)生較強(qiáng)的負(fù)擔(dān)，且葡萄糖毒性作用可通過慢性氧化應(yīng)激反應(yīng)作用于胰島β 細(xì)胞，損傷胰島β 細(xì)胞正常功能，從而造成胰島素分泌量減少，繼而加重機(jī)體高血糖狀況，促進(jìn)疾病進(jìn)展?？稍斐晒谛牟?、腦血管疾病等并發(fā)癥的發(fā)生，危及患者生命安全。因此，早期尋找相關(guān)指標(biāo)評(píng)估T2DM 患者IR 程度，并采取有效的治療方案對(duì)控制病情發(fā)展、改善患者的預(yù)后尤為重要。

研究顯示，糖尿病發(fā)病的過程與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。白細(xì)胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）是典型的促炎因子，介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的產(chǎn)生[1]。單核細(xì)胞趨化蛋白1（Monocyte chemotactic protein 1，MCP-1）是一種重要的趨化因子，可趨化單核細(xì)胞、T 淋巴細(xì)胞，促使各種炎性細(xì)胞向病變部位聚集，對(duì)炎癥因子的刺激作出應(yīng)答[2]。

因此血清IL-1β、MCP-1 與T2DM 患者IR 可能存在一定聯(lián)系。本研究通過對(duì)不同IR 程度T2DM 患者進(jìn)行血清IL-1β、MCP-1 水平檢測(cè)，旨在探討血清IL-1β、MCP-1 水平與T2DM 患者IR程度的相關(guān)性。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2019 年1 月-2020 年8 月期間本院收治的T2DM 患者作為研究對(duì)象。其中男48 例，女44 例；年齡40-67，平均（53.94±3.82）歲，病程4-13 y，平均（8.57±1.45） y；其中吸煙史33 例，飲酒史31 例，糖尿病家族史26 例。本研究符合醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核要求。

納入標(biāo)準(zhǔn)：符合T2DM 中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，且經(jīng)口服葡萄糖耐量試驗(yàn)確診；無T2DM 急性與慢性并發(fā)癥，如糖尿病視網(wǎng)膜病變、糖尿病腎病等；近期無急慢性感染；患者或家屬均知情并簽訂同意書；精神正常，可配合完成調(diào)查；排除標(biāo)準(zhǔn)：患有精神疾病者；合并自身免疫系統(tǒng)疾病者；合并肝腎等重要器官功能障礙者；有糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑等特殊用藥史者；伴有嚴(yán)重全身性疾病者；合并高血壓、冠心病、高脂血癥等基礎(chǔ)疾病者。

1.2 方法

1.2.1 胰島素抵抗評(píng)估方法

治療過程中，根據(jù)患者每日需要補(bǔ)充的胰島素總劑量（TDID）進(jìn)行分組[3]，分為：IR[TDID 在1-2 U（kg·d）-1]、嚴(yán)重IR[TDID 在2-3 U（kg·d）-1]、極度IR[＞3 U（kg·d）-1]。

1.2.2 基線資料采集方法

設(shè)計(jì)基線資料調(diào)查表，調(diào)查表克倫巴赫系數(shù)為0.831。調(diào)查內(nèi)容主要有患者性別（男、女）、年齡、病程、吸煙史（有、無）、飲酒史（有、無）、糖尿病家族史（有、無）、體質(zhì)量指數(shù)（Body Mass Index，BMI）。其中吸煙史判定標(biāo)準(zhǔn)：每日吸煙至少1 支，連續(xù)吸煙6 m 及以上，或一生中吸煙數(shù)量≥100 支，且仍在吸煙；飲酒史判定標(biāo)準(zhǔn)：每周至少飲酒1 次，持續(xù)1 y 以上，或每周飲用酒精量超過30 g 且持續(xù)1 y 以上。

1.2.3 血清IL-1β、MCP-1 水平及空腹血糖檢測(cè)方法

采集患者入院當(dāng)天空腹外周肘靜脈血6 mL分裝2 管，每管各3 mL，其中1 管以3500 r·min-1 速率離心5 min，離心半徑10 cm，取血清，應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)血清IL-1β 水平，試劑盒由湖南華曦醫(yī)藥有限公司提供，采用酶標(biāo)免疫分析法檢測(cè)血清MCP-1 水平，試劑盒由上海圻明生物科技有限公司提供。另一管采用半自動(dòng)生化分析儀（深圳市盛信康科技有限公司，粵食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2013 第2400525 號(hào)，型號(hào)：SK3002B）測(cè)定空腹血糖水平。

根據(jù)試劑盒及儀器說明進(jìn)行所有操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS23.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)和例數(shù)（%、n）表示，用χ2檢驗(yàn)；經(jīng)Shapiro-Wilk 正態(tài)性檢驗(yàn)檢驗(yàn)計(jì)量資料正態(tài)性，以（±SD）表示符合正態(tài)分布計(jì)量資料，采用單因素方差檢驗(yàn)分析多組間比較，采用SNK-q檢驗(yàn)組間兩兩比較，應(yīng)用雙變量Kendall’s tau-b 直線相關(guān)檢驗(yàn)血清IL-1β、MCP-1 水平與T2DM 患者IR 的相關(guān)性，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 T2DM 患者IR 情況

92 例T2DM 患者中，IR 組40 例，占43.48%（40/92），嚴(yán)重IR34 例，占36.96%（34/92），極度IR18 例，占19.57%（18/92）。

2.2 一般資料及血清IL-1β、MCP-1 水平對(duì)比

極度IR 組血清IL-1β、MCP-1 水平最高，嚴(yán)重IR 組其次，IR 組最低，三組組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；三組性別、年齡、病程、吸煙史、飲酒史、糖尿病家族史、BMI、空腹血糖比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

2.3 血清IL-1β、MCP-1 水平與T2DM 患者IR 的相關(guān)性

經(jīng)雙變量Kendall’s tau-b 相關(guān)檢驗(yàn)，結(jié)果顯示，T2DM 患者IR 與血清IL-1β、MCP-1 呈正相關(guān)（r＞0，P＜0.05）。見表2。

表1 三組一般資料及血清IL-1β、MCP-1 水平比較

表2 血清IL-1β、MCP-1 水平與T2DM 患者IR 的相關(guān)性分析

3 討論

T2DM 患者常處于一種慢性低度炎癥狀態(tài)，機(jī)體在糖、脂毒性等代謝應(yīng)激反應(yīng)狀態(tài)下可促使脂肪組織產(chǎn)生大量細(xì)胞因子，這些因子與炎癥產(chǎn)物廣泛參與胰島β 細(xì)胞的功能紊亂，導(dǎo)致T2DM患者多伴有不同程度的IR。本研究92 例T2DM患者中，IR40例（43.48%），嚴(yán)重IR34例（36.96%），極度IR18 例（19.57%），可見多數(shù)患者IR 較為嚴(yán)重，臨床需加以重視。

IL-1β 是巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的IL-1 的β 亞型，是最重要的促細(xì)胞凋亡及促炎細(xì)胞因子，可刺激參與炎性反應(yīng)與免疫反應(yīng)過程[4]。MCP-1 是CC 亞家族的成員之一，可趨化單核巨噬細(xì)胞、T 淋巴細(xì)胞，促進(jìn)炎性介質(zhì)、細(xì)胞因子的合成與分泌，在慢性炎癥中發(fā)揮重要作用[5]。而慢性炎癥被認(rèn)為是導(dǎo)致T2DM 患者IR 的重要原因之一。因此推測(cè)IL-1β、MCP-1 可能與T2DM 患者IR 存在一定關(guān)系。

本研究中極度IR 組血清IL-1β、MCP-1 水平最高，嚴(yán)重IR 組其次，IR 組最低，可見T2DM患者IR 越嚴(yán)重，血清IL-1β、MCP-1 水平越高。且經(jīng)雙變量Kendall’s tau-b 相關(guān)檢驗(yàn)，結(jié)果顯示，T2DM 患者IR 與血清IL-1β、MCP-1 呈正相關(guān)。究其原因在于，T2DM 患者胰島β 細(xì)胞長期在高糖環(huán)境下，會(huì)刺激IL-1β 的高表達(dá)；IL-1β 水平的升高可進(jìn)一步誘導(dǎo)胰島β 細(xì)胞釋放一氧化氮合酶，促進(jìn)一氧化氮生成。大量的一氧化氮會(huì)直接導(dǎo)致胰島β 細(xì)胞損傷。同時(shí)一氧化氮還可抑制三羧酸循環(huán)，降低三磷酸腺苷生成，損傷胰島β 細(xì)胞，造成IR。且β 細(xì)胞損傷越嚴(yán)重，胰島功能越差，導(dǎo)致IR 水平越嚴(yán)重[6]。MCP-1 水平的升高可使單核細(xì)胞、NF-κB、JNK 等途徑被激活，增加炎性因子IL-1、IL-6、干擾素γ 等的釋放，提高巨噬細(xì)胞黏附因子水平，刺激嗜堿性粒細(xì)胞對(duì)組織胺的釋放，從而產(chǎn)生靶細(xì)胞效應(yīng)。同時(shí)能限制抑制胰島素介導(dǎo)的葡萄糖攝取，抑制脂肪細(xì)胞中脂質(zhì)的聚集與過氧化物酶體的受體y、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4 的表達(dá)，促進(jìn)IR 的發(fā)生與加重[7]。此外，MCP-1 的升高還可下調(diào)脂肪組織中的脂蛋白酯酶，促進(jìn)脂肪分解、游離脂肪酸升高，促使脂肪細(xì)胞退變，加重IR[8]。而IR 的加重又會(huì)促使胰島素與胰島素受體相結(jié)合，誘導(dǎo)脂肪細(xì)胞表達(dá)MCP-1，進(jìn)一步促進(jìn)血清MCP-1 水平異常升高，從而形成惡性循環(huán)，加重機(jī)體IR 程度。

綜上所述，血清IL-1β、MCP-1 與T2DM 患者IR密切相關(guān)，臨床可早期檢測(cè)血清IL-1β、MCP-1 水平，以及時(shí)評(píng)估T2DM 患者IR 情況，為后續(xù)治療方案的制定提供指導(dǎo)。