非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后1年生存與呼吸道細(xì)菌微生物分布的關(guān)系

尤 雷，翟俊偉，劉艷虹，吳國峰，邸慶國

肺癌是我國常見惡性腫瘤，臨床癥狀通常表現(xiàn)為咯血、胸痛、咳嗽等，非小細(xì)胞肺癌是其中最常見的類型，也是發(fā)病率最高的肺癌類型[1-3]。目前，非小細(xì)胞肺癌的發(fā)病率也在逐年上升[4]。目前手術(shù)仍是非小細(xì)胞肺癌最有效的治療方式，臨床常用手術(shù)方式有肺葉切除術(shù)、肺段切除術(shù)、全肺切除術(shù)等，但無論選擇哪種手術(shù)方式，術(shù)后都可能存在生存質(zhì)量較差的情況，與影響非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后的各種因素有關(guān)[5]。呼吸道細(xì)菌微生物即是其中一個重要因素，但是與之相關(guān)的研究甚少。因此，本研究旨在探討非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后1年生存與呼吸道細(xì)菌微生物分布的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1病例選擇標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《2005年美國國家綜合癌癥網(wǎng)(NCCN)非小細(xì)胞肺癌臨床指南》[6]中關(guān)于非小細(xì)胞肺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)；經(jīng)組織病理學(xué)檢查首次確診為非小細(xì)胞肺癌；年齡≥18歲；均接受肺癌根治手術(shù)；臨床資料完善。排除標(biāo)準(zhǔn)：接受過相關(guān)手術(shù)治療；合并其他惡性腫瘤；合并嚴(yán)重心腦血管疾病；近期服用過抗凝藥物；嚴(yán)重感染；合并免疫性疾?。粺o法完成院外隨訪者。

1.2臨床資料 回顧性分析2019年4月—2020年4月在我院就診的非小細(xì)胞肺癌180例的臨床資料，根據(jù)術(shù)后1年生存情況分為預(yù)后良好組155例和預(yù)后不良組25例。本研究獲得我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)(2019-23號)。

1.3方法 ①收集患者的一般資料，包括性別、年齡、Karnofsky功能狀態(tài)(KPS)評分、吸煙史、病理類型、分化程度、腫瘤個數(shù)、腫瘤部位、切除部位、是否術(shù)后化療、是否術(shù)后放療、是否貧血、TNM分期。②在患者行纖維支氣管鏡檢查時收集支氣管沖洗液標(biāo)本，置于-80 ℃環(huán)境保存，提取DNA后設(shè)計引物擴(kuò)增，引物為341F/806R，使用Illumina Miseq平臺測序，確定細(xì)菌菌屬。

2 結(jié)果

2.1非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后預(yù)后不良的單因素分析 2組在性別、KPS評分、吸煙史、病理類型、分化程度、腫瘤個數(shù)、腫瘤部位、切除部位、是否術(shù)后化療、是否術(shù)后放療方面比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；預(yù)后不良組年齡≥60歲、貧血、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期占比及鏈球菌屬相對豐度高于預(yù)后良好組，韋榮球菌屬相對豐度低于預(yù)后良好組(P<0.05，P<0.01)。見表1。

表1 非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后預(yù)后不良的單因素分析[例(%)]

2.2韋榮球菌屬、鏈球菌屬預(yù)測非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后預(yù)后不良的ROC曲線分析 經(jīng)ROC曲線分析，呼吸道韋榮球菌屬、鏈球菌屬預(yù)測非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后預(yù)后不良的曲線下面積分別為0.789、0.823。見表2及圖1。

表2 韋榮球菌屬、鏈球菌屬對非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后預(yù)后不良的預(yù)測價值

圖1 韋榮球菌屬、鏈球菌屬預(yù)測非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后預(yù)后不良的ROC曲線

2.3非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后預(yù)后不良的多因素Logistic回歸分析 對單因素分析差異有統(tǒng)計學(xué)意義的指標(biāo)進(jìn)行量化賦值，年齡：≥60歲=1，<60歲=0；貧血：是=1，否=0；TNM分期：Ⅲ～Ⅳ期=1，Ⅰ～Ⅱ期=0；韋榮球菌屬相對豐度≤11.045%=1，>11.045%=0；鏈球菌屬相對豐度≥15.175%=1，<15.175%=0；預(yù)后不良=1，預(yù)后良好=0。多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，年齡≥60歲、貧血、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、韋榮球菌屬相對豐度≤11.045%、鏈球菌屬相對豐度≥15.175%是非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后預(yù)后不良的危險因素(P<0.05，P<0.01)。見表3。

表3 非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后預(yù)后不良的多因素Logistic回歸分析

3 討論

肺癌在我國發(fā)病率和致死率極高，許多研究表明呼吸道細(xì)菌微生物可能和肺癌的發(fā)展及預(yù)后有關(guān)[7-9]。目前已經(jīng)知道肺癌患者的呼吸道細(xì)菌微生物與健康人群存在差異，但呼吸道細(xì)菌微生物對非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后影響的相關(guān)研究較少。本研究結(jié)果顯示，非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后1年生存率為86.11%，與李紀(jì)遠(yuǎn)等[10]研究結(jié)果接近。

本研究結(jié)果顯示，預(yù)后不良組年齡≥60歲、貧血、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期占比及鏈球菌屬相對豐度高于預(yù)后良好組，韋榮球菌屬相對豐度低于預(yù)后良好組，提示上述因素可能是非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后預(yù)后不良的危險因素。分析原因：①非小細(xì)胞肺癌發(fā)病率增高的因素有人口老齡化、不良生活習(xí)慣、吸煙、環(huán)境污染等，尤其是人口老齡化[11]。同時，年齡增長使得患者機(jī)體功能下降，臟器功能受損，并發(fā)癥增多，患者對手術(shù)的耐受性差，術(shù)后恢復(fù)時間長，并發(fā)癥較多，這些因素都提高了非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后的病死率[12]。②貧血是非小細(xì)胞肺癌并發(fā)癥之一，貧血可能與營養(yǎng)不良、炎癥反應(yīng)、溶血、鐵代謝異常、腎功能損傷、骨髓受侵、出血等因素相關(guān)[13]。貧血會導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞缺氧，并造成基因表達(dá)異常，使低氧誘導(dǎo)因子表達(dá)升高，而低氧誘導(dǎo)因子能夠影響腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡、轉(zhuǎn)移、血管新生和耐藥性，縮短非小細(xì)胞肺癌患者生存期[14-16]。③TNM分期是肺癌患者預(yù)后的獨立影響因素[17-19]，能夠體現(xiàn)腫瘤疾病進(jìn)展及嚴(yán)重程度，依據(jù)分期可有效判斷患者的病情、選擇對應(yīng)治療方案、評估療效及預(yù)后。非小細(xì)胞肺癌處于早期時病灶比較局限，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移少，可以通過清掃淋巴結(jié)及切除肺葉的方式盡可能根治非小細(xì)胞肺癌，因此患者預(yù)后較好[20]。雖然部分晚期非小細(xì)胞肺癌患者耐受度高，也接受了手術(shù)治療，但是腫瘤過大、不局限于某處、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移多、伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、胸腔積液等因素影響了患者的預(yù)后[21]。另外，分化程度與TNM分期相關(guān)，分化程度越低病情越嚴(yán)重，TNM分期越高，但本研究中2組分化程度比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，推測其原因可能是樣本數(shù)較少，影響了腫瘤分化程度在非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后中的預(yù)測價值。④肺癌患者肺組織及病灶組織中的小桿菌屬、鏈球菌屬、葡萄球菌屬等相對豐度呈現(xiàn)動態(tài)變化態(tài)勢[22]，預(yù)后良好患者中韋榮球菌屬相對豐度較高，預(yù)后不良患者中鏈球菌屬相對豐度較高，說明細(xì)菌微生物的遷移和失調(diào)可能與肺癌的發(fā)展及預(yù)后有關(guān)。也有研究表明，呼吸道細(xì)菌微生物會影響慢性氣道疾病的預(yù)后[23-24]，而慢性氣道疾病是肺癌發(fā)生的危險因素，所以呼吸道細(xì)菌微生物可能也會影響肺癌患者的預(yù)后。但目前鮮有研究報道呼吸道細(xì)菌微生物和疾病預(yù)后特別是與非小細(xì)胞肺癌間的關(guān)系，其具體機(jī)制尚不明確，因此在后續(xù)的研究中仍有必要繼續(xù)深入探討。

為探討韋榮球菌屬、鏈球菌屬預(yù)測非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后預(yù)后不良的價值，本研究行ROC曲線分析和多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示韋榮球菌屬、鏈球菌屬用于非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后預(yù)后評估的曲線下面積分別為0.789、0.823，且敏感度與特異度均較高，同時發(fā)現(xiàn)年齡≥60歲、貧血、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、韋榮球菌屬相對豐度≤11.045%、鏈球菌屬相對豐度≥15.175%是非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后預(yù)后不良的危險因素。故在此類患者的治療中應(yīng)密切關(guān)注上述影響因素。

綜上所述，年齡、貧血、TNM分期及呼吸道韋榮球菌屬、鏈球菌屬與非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后1年生存相關(guān)，呼吸道細(xì)菌微生物遷移可能影響非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后。