血清炎癥因子及T 淋巴細(xì)胞亞群與病毒性肝炎肝硬化腹水的相關(guān)性分析

林劍煉，彭雁忠

（1.深圳市福田區(qū)慢性病防治院全科醫(yī)療科，廣東 深圳 518048；2.廣州醫(yī)科大學(xué)，廣東 廣州 510182；3.北京大學(xué)深圳醫(yī)院感染性疾病科，廣東 深圳 518036）

病毒性肝炎是以多種肝炎病毒導(dǎo)致患者肝臟發(fā)生病變?yōu)橹饕卣鞯囊环N傳染病，其中甲型病毒性肝炎與戊型病毒性肝炎已成為全球各國(guó)傳播較為廣泛的腸道傳染病，一般表現(xiàn)為急性感染癥狀且能自愈[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)2004 年至2018 年報(bào)告戊型病毒性肝炎患者358 122 例，每年的平均發(fā)病率是1.78/10 萬[2]。而乙型病毒性肝炎與丙型病毒性肝炎是腸道外傳染性疾病。據(jù)WHO 公開數(shù)據(jù)[3]顯示，2015 年全球各國(guó)慢性病毒性肝炎患者的感染人數(shù)達(dá)3.25億人次，有134 萬人死于因病毒性肝炎病毒感染引起相關(guān)疾病，該類致死人數(shù)遠(yuǎn)超瘧疾、肺結(jié)核和艾滋病等重大疾病的致死人數(shù)，嚴(yán)重威脅世界各國(guó)人民的健康。若不及時(shí)治療，病毒性肝炎可能會(huì)引起危及患者生命的并發(fā)癥，如肝癌、肝硬化、肝硬化腹水等。而病毒性肝炎肝硬化腹水是指因病毒性肝炎間接或直接誘發(fā)的肝硬化腹水，其發(fā)生與病毒性肝炎患者的感染有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，輔助型T 細(xì)胞1（Th1）可分泌出腫瘤壞死因子α（TNF-α）、干擾素γ（IFN-γ）、白細(xì)胞介素-2（IL-2），能參與機(jī)體內(nèi)的細(xì)胞免疫應(yīng)答，殺死細(xì)胞內(nèi)的病毒及細(xì)菌；而輔助型T 細(xì)胞2（Th2）能分泌出白細(xì)胞介素-4（IL-4）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）及白細(xì)胞介素-10（IL-10），可參與機(jī)體內(nèi)的抗體介導(dǎo)的免疫應(yīng)答[4]。研究發(fā)現(xiàn)，T 細(xì)胞為細(xì)胞免疫作用的重要效應(yīng)細(xì)胞，按T 細(xì)胞表面抗體表達(dá)及功能分為T 抑制類型細(xì)胞CD8+細(xì)胞和T 輔助類型細(xì)胞CD4+細(xì)胞[5]。本研究探究IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ、CD3+CD4+、CD4+/CD8+與病毒性肝炎肝硬化腹水發(fā)生的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2019 年1 月至2021 年6 月深圳市福田區(qū)慢性病防治院收治的100 例病毒性肝炎肝硬化腹水患者作為研究組，并選取同期就診的100 例病毒性肝炎患者作為對(duì)照組，進(jìn)行回顧性分析。兩組患者的一般資料，具體見表1。本研究經(jīng)深圳市福田區(qū)慢性病防治院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過。納入標(biāo)準(zhǔn)：①被確診為病毒性肝炎肝硬化腹水疾病；②患者年齡在18 歲以上；③患者智力、精神正常，意識(shí)清醒，對(duì)事物有較清晰的表達(dá)能力。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并原發(fā)性肝癌者；②合并感染巨細(xì)胞病毒或Epstein-Barr 病毒（EBV）感染者；③合并造血系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、嚴(yán)重心腦血管相關(guān)疾病者；④曾行經(jīng)頸靜脈肝肝內(nèi)分流術(shù)者或脾切除術(shù)者；⑤合并嚴(yán)重免疫缺陷疾病者。

1.2 標(biāo)本采集與檢測(cè)方法入院后次日清晨的兩組患者空腹采集4 mL 外周血，均置于抗凝試管，再經(jīng)離心處理（離心速度為3 500 r/min，離心時(shí)間為10 min，離心半徑為12 cm），并分離出上清液，置于-20 ℃的環(huán)境中備用。采用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行檢測(cè)，選用美國(guó)BD 公司提供的試劑，依照試劑盒上說明書檢測(cè)IL-2、IL-4、TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-10 指標(biāo)水平及CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+水平。

1.3 觀察指標(biāo)①單因素分析。收集患者的全部臨床資料，包括患者的性別、年齡、民族、吸煙史、飲酒史、肝病家族史、身體鍛煉情況、勞動(dòng)情況、對(duì)自身疾病的理解程度、對(duì)自身疾病的治療情況，是否長(zhǎng)期抗病毒治療等，并進(jìn)行單因素分析。②多因素Logistic 分析。將單因素分析中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的數(shù)據(jù)納入多因素Logistic 回歸模型中進(jìn)行分析，并篩選影響因素。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 24.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以[ 例(%)]表示，行χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以(±s)表示，行t檢驗(yàn)；使用Logistic 回歸模型分析影響病毒性肝炎肝硬化腹水發(fā)生的因素。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 影響病毒性肝炎肝硬化腹水發(fā)生的單因素分析單因素分析顯示，兩組患者在長(zhǎng)期抗病毒治療、長(zhǎng)期吸煙、鍛煉身體、IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ、CD3+CD4+、CD4+/CD8+等方面比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表1。

表1 影響病毒性肝炎肝硬化腹水發(fā)生的單因素分析

2.2 影響病毒性肝炎肝硬化腹水發(fā)生的多因素Logistic回歸分析以病毒性肝炎患者發(fā)生肝硬化腹水為因變量，以單因素分析的結(jié)果中有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的項(xiàng)目為自變量，Logistic 回歸分析的結(jié)果為，長(zhǎng)期抗病毒治療是病毒性肝炎肝硬化腹水發(fā)生的保護(hù)因素，IL-2、IL-6、TNF-α、TNF-γ、CD3+CD4+、CD4+/CD8+水平高是病毒性肝炎肝硬化腹水發(fā)生的危險(xiǎn)因素（均P＜0.05），見表2。

表2 影響病毒性肝炎肝硬化腹水發(fā)生的多因素Logistic 回歸分析

3 討論

腹水為病毒性肝硬化腹水患者癥狀最突出的臨床疾病，也是一種較為常見的病毒性肝硬化患者并發(fā)癥，研究發(fā)現(xiàn)[6]，病毒性肝硬化患者在失代償期出現(xiàn)腹水的概率在75%以上。腹水患者常表現(xiàn)為腹下垂、蛙腹、腹部膨隆、腹脹等，影像學(xué)檢查可提示有腹水的存在。導(dǎo)致腹水的主要原因是鈉水潴留，而病毒性肝硬化腹水發(fā)病可能與肝淋巴液分泌過多、抗利尿激素及繼發(fā)性的醛固酮增多、門靜脈壓力升高、低白蛋白血癥及循環(huán)血量不足等因素相關(guān)聯(lián)[7]。病情輕重程度不同的肝硬化腹水均表現(xiàn)出免疫力低下，極易引起感染[8]。探討血清中的炎癥因子及T 淋巴細(xì)胞亞群與病毒性肝炎相關(guān)性肝硬化腹水的相關(guān)性具有重要意義。

本研究結(jié)果顯示，長(zhǎng)期抗病毒治療是病毒性肝炎肝硬化腹水發(fā)生的保護(hù)因素，且長(zhǎng)期抗病毒治療與病毒性肝炎肝硬化腹水發(fā)生有較高的相關(guān)性，說明長(zhǎng)期抗病毒治療能延緩病毒性肝炎肝硬化腹水的發(fā)生，積極進(jìn)行保肝抗病毒治療能明顯降低病毒性肝炎肝硬化腹水及其他并發(fā)癥的發(fā)生，此結(jié)果與既往研究[9]結(jié)果相一致。人體內(nèi)存在兩種不同T 細(xì)胞亞群，其中Th1 細(xì)胞能分泌出IFN-γ、IL-2、TNF-α，而Th2 可分泌出IL-4、L-6、IL-5、IL-10 及IL-13 等。機(jī)體在正常的情況下，Th1/Th2 細(xì)胞處于平衡狀態(tài)，若機(jī)體功能出現(xiàn)異常時(shí)，兩種細(xì)胞的平衡被打破，常表現(xiàn)為偏向一方，即為“Th1/Th2 平衡漂移”，若Th1/Th2 細(xì)胞間的平衡被打破，會(huì)導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞因子間的動(dòng)態(tài)平衡打破，從而導(dǎo)致疾病的發(fā)生及發(fā)展[10]。本研究結(jié)果顯示，IL-2、IL-6、TNF-α、TNF-γ是病毒性肝炎肝硬化腹水發(fā)生的危險(xiǎn)因素，與劉鎮(zhèn)平等[11]研究結(jié)果有相似之處，表明細(xì)胞因子在肝硬化患者中不僅能介導(dǎo)肝臟器官中肝細(xì)胞損傷，還會(huì)隨著機(jī)體內(nèi)血清水平的增加而加重其肝臟損傷程度，加速肝硬化患者疾病發(fā)展，增加肝硬化腹水的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，IL-2、IL-6、TNF-α、TNF-γ 與病毒性肝炎肝硬化腹水發(fā)生有較高的關(guān)系。

T淋巴細(xì)胞亞群中的CD4+表示T輔助細(xì)胞，CD8+表示T 殺傷細(xì)胞和T 抑制細(xì)胞，在患者機(jī)體免疫反應(yīng)時(shí)常表現(xiàn)為CD4+T 淋巴細(xì)胞，而在免疫反應(yīng)中的起效應(yīng)細(xì)胞主要為CD8+T 細(xì)胞[12]。本研究結(jié)果顯示，CD3+CD4+、CD4+/CD8+是病毒性肝炎肝硬化腹水發(fā)生的危險(xiǎn)因素（P＜0.05），且CD3+CD4+、CD4+/CD8+與病毒性肝炎肝硬化腹水發(fā)生有較高的相關(guān)性，與李娜[13]研究的結(jié)果有相似之處，肝硬化腹水的發(fā)生會(huì)引起免疫反應(yīng)，作為輔助性的CD3+CD4+T 細(xì)胞會(huì)參與免疫反應(yīng)，從而引起其濃度的改變。王昀等[14]認(rèn)為乙肝相關(guān)性肝硬化患者隨著病情的惡化，其機(jī)體免疫系統(tǒng)發(fā)生紊亂，并逐漸加重，此結(jié)論證明肝硬化腹水的發(fā)生與機(jī)體免疫的降低有關(guān)。

綜上所述，病毒性肝炎肝硬化腹水的發(fā)生會(huì)使患者體內(nèi)的細(xì)胞因子（IL-2、IL-6、TNF-α、TNF-γ）和T 淋巴細(xì)胞亞群（CD3+CD4+、CD4+/CD8+）呈現(xiàn)異常高表達(dá)狀態(tài)，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)病毒性肝炎患者的血清中細(xì)胞因子及T 淋巴細(xì)胞亞群的監(jiān)測(cè)，發(fā)現(xiàn)異常并及時(shí)干預(yù)，延緩病毒性肝炎患者疾病發(fā)生的進(jìn)程，提高其生存質(zhì)量。