妊娠小鼠甲狀腺功能減退癥對(duì)子代糖代謝的影響

王秀麗 李愛偉 方建紅

山東第一醫(yī)科大學(xué)附屬青島醫(yī)院(266000)

孕早期母體及胎兒發(fā)育對(duì)于甲狀腺功能有顯著依賴性[1]。甲狀腺功能減退癥(甲減)是造成不良妊娠結(jié)局的重要原因[2]。研究顯示[3]，甲狀腺激素T4與胎兒大腦神經(jīng)元細(xì)胞的發(fā)育相關(guān)，甲狀腺激素T4可通過(guò)孕婦胎盤及血腦屏障。但甲減時(shí)胎盤不能從母體獲得足夠的甲狀腺激素T4滿足大腦發(fā)育需求，造成胎兒神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育障礙[4]。既往研究[5]指出，妊娠期較低甲狀腺激素T4水平可造成患者6歲發(fā)生自閉癥的風(fēng)險(xiǎn)升高4倍以上，而產(chǎn)后出血、早產(chǎn)以及胎盤早剝發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)也顯著升高。甲狀腺激素T3與機(jī)體甲狀腺激素受體相互結(jié)合，而此類受體主要在8～9周胎兒大腦皮層中表達(dá)[6]，孕10～18周呈升高趨勢(shì)；所以在甲狀腺疾病進(jìn)展中，通過(guò)分析患者甲狀腺功能變化，對(duì)機(jī)體糖類代謝以及疾病進(jìn)展有重要參考意義[7]。本研究分析妊娠小鼠甲狀腺功能減退癥對(duì)子代糖代謝的影響，為臨床機(jī)理研究提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 儀器與試劑

本研究?jī)x器主要采取酶標(biāo)儀(DNM-9602，北京普朗新技術(shù)有限公司)、冷凍離心機(jī)(TGL20M，JTLIANGYOU)和恒溫水浴箱(HH-W420/W600)進(jìn)行試驗(yàn)。甲狀腺激素分析采用酶標(biāo)儀進(jìn)行，血糖水平采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)。試劑均來(lái)自上海羅氏。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

采用中科院提供的雌性SPF級(jí)新生小鼠80只(合格證號(hào)20170516)，體重(29.3±3.1)g(28～32g)；飼養(yǎng)條件室溫21±2℃，濕度30%～70%，光照每晝夜12h。

1.3 模型構(gòu)建與干預(yù)

①模型組：采用40只小鼠適用性飼養(yǎng)，飲用水用0.02%的丙硫氧嘧啶飼養(yǎng)，飼養(yǎng)0、3、7、14、21 d后對(duì)小鼠進(jìn)行眶后采血，小鼠促甲狀腺激素(TSH)高于正常水平、甲狀腺激素T4低于正常水平為甲減造模成功。所有小鼠按照1:1雄雌比例分籠喂養(yǎng)，當(dāng)小鼠出現(xiàn)陰栓后立即單獨(dú)喂養(yǎng)[8]。②對(duì)照組：小鼠使用正常飲用水飼養(yǎng)，所有小鼠按照1:1雄雌比例分籠喂養(yǎng)，當(dāng)小鼠出現(xiàn)陰栓后立即單獨(dú)喂養(yǎng)。

1.4 標(biāo)本處理與觀察項(xiàng)目

1.4.1激素測(cè)定分別測(cè)定兩組入組前(D0)、干預(yù)3d(D3)、7d(D7)、14d(D14)以及產(chǎn)后1d(P1)甲狀腺激素T4、TSH水平。

1.4.2圍產(chǎn)期指標(biāo)記錄兩組妊娠周期、妊娠期體重增長(zhǎng)、產(chǎn)子數(shù)目、子代出生體重、隨機(jī)血糖水平。

1.4.3子代糖代謝水平分別對(duì)兩組(產(chǎn)后4周)子代進(jìn)行口服葡萄糖耐量試驗(yàn)，比較空腹及15min、30min、60min以及120min時(shí)血糖水平。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 甲狀腺激素T4水平

甲狀腺激素T4水平，D0、D3時(shí)兩組無(wú)差異(P>0.05)，D7、D14、P1時(shí)模型組高于對(duì)照組(P<0.05)；TSH水平，D0時(shí)兩組無(wú)差異(P>0.05)，D3、D7、D14、P1時(shí)模型組均高于對(duì)照組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組不同時(shí)間激素水平比較

2.2 圍產(chǎn)期指標(biāo)

兩組妊娠周期、產(chǎn)子數(shù)目比較無(wú)差異(P>0.05)，模型組妊娠期體重增長(zhǎng)、子代出生體重小于對(duì)照組，隨機(jī)血糖水平高于對(duì)照組(均P<0.05)。見表2。

表2 兩組圍產(chǎn)期指標(biāo)比較

2.3 子代糖代謝水平

兩組子代空腹、15min、30min時(shí)血糖水平無(wú)差異(P>0.05)，60min、120min時(shí)血糖水平模型組子代高于對(duì)照組子代(均P<0.05)。見表3。

表3 兩組子代不同糖耐量試驗(yàn)血糖水平比較

3 討論

甲減是臨床較為常見的內(nèi)分泌疾病，胎兒發(fā)育除了與遺傳因素密切相關(guān)外[9]，同時(shí)與機(jī)體內(nèi)分泌、母體營(yíng)養(yǎng)狀況以及代謝情況密切相關(guān)。胎兒甲狀腺發(fā)育過(guò)程中，母體甲狀腺激素是胎兒甲狀腺激素獲取的唯一來(lái)源，對(duì)于胎兒器官形成以及生長(zhǎng)發(fā)育具有重要價(jià)值[10]。臨床治療發(fā)現(xiàn)，新由于生兒使用抗甲狀腺激素生成藥物，可造成胎兒甲狀腺激素水平顯著抑制[11]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為[12]，胎兒甲狀腺是在孕10～12周開始發(fā)育，直到16～20周時(shí)則可以自主產(chǎn)生甲狀腺激素，所以在妊娠16周前胎兒對(duì)母體甲狀腺激素有顯著依賴性[13]。該階段母體甲狀腺激素消耗量顯著升高，甲狀腺結(jié)合蛋白水平也顯著升高，尿液中尿碘含量顯著增加，進(jìn)一步加劇了母體甲狀腺激素消耗[14]。孕早期隨著母體絨毛膜促性腺激素水平升高，進(jìn)一步代償性造成甲狀腺激素T4水平升高，TSH水平呈下降趨勢(shì)[15]。在正常機(jī)體代謝過(guò)程中，甲狀腺激素可顯著提升機(jī)體代謝水平，近年來(lái)研究認(rèn)為糖尿病、肥胖患者甲狀腺激素水平呈現(xiàn)異常[16]，也使研究者的目光重新回到對(duì)甲狀腺激素的研究中。

正常人體血液中甲狀腺激素多以蛋白結(jié)合方式存在，少數(shù)以游離狀態(tài)存在，而只有游離甲狀腺激素T3、T4有生物學(xué)意義。在甲狀腺細(xì)胞內(nèi)，T4主要5’-脫碘酶向T3進(jìn)行轉(zhuǎn)變，而脫碘酶D3對(duì)于甲狀腺激素T3以及T4均具有顯著的終止活性作用[17]。本研究模型組小鼠T4水平下降、TSH水平上升，與以往研究一致。而圍產(chǎn)期指標(biāo)，模型組與對(duì)照組妊娠期體重增長(zhǎng)以及出生體重均存在差異，一定程度上驗(yàn)證了激素異常帶來(lái)的結(jié)果。在子代糖代謝水平分析中，服糖后60min、120min的糖耐量模型組血糖水平均高于對(duì)照組。大量研究證實(shí)，甲狀腺激素對(duì)機(jī)體胰島β細(xì)胞功能具有調(diào)控作用，甲狀腺激素對(duì)于胰島β細(xì)胞的增殖以及胰島素分泌均具有重要作用；研究已證實(shí)，母體甲狀腺激素可與胎盤組織的甲狀腺激素轉(zhuǎn)運(yùn)體結(jié)合蛋白結(jié)合，進(jìn)入機(jī)體胚胎影響子代糖類代謝。多項(xiàng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[18]已經(jīng)證實(shí)，宮內(nèi)甲減狀態(tài)可以導(dǎo)致胚胎時(shí)期子代胰島功能喪失，導(dǎo)致糖類代謝異常。

綜上所述，妊娠甲狀腺功能減退癥小鼠其子代血糖水平異常。