磁共振影像學(xué)參數(shù)與乳腺癌患者腫瘤微血管密度及生物因子相關(guān)性以及對治療效果評估

魏 剛， 許保剛， 賀 朝， 黃瑞瑜， 劉 輝， 郭長義， 李 斌， 張 瑜， 張 婉

陜西中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院 影像中心，陜西 咸陽 712000

乳腺癌是近年來臨床上女性群體中容易被發(fā)現(xiàn)且發(fā)病率較高的腫瘤之一[1-4]。及時有效并準(zhǔn)確地評估患者的病情，采取相應(yīng)措施干預(yù)，可顯著降低乳腺癌患者的病死率[5]。有研究報道，采用磁共振成像(magnetic resonance imaging，MRI)實施乳腺檢測已成為當(dāng)前臨床上最主要的乳腺癌高危群體篩選的手段之一，具有較高的臨床應(yīng)用價值，也是指導(dǎo)臨床治療和預(yù)后輔助評估的重要方案[6]。MRI影像學(xué)檢查可通過清晰的圖像對乳腺病變形態(tài)學(xué)特點進(jìn)行描述和分析，可有效實現(xiàn)通過增強后信號增高幅度反映病變組織內(nèi)血管密度[7]。微血管密度(microvascular decompression，MVD)是定量的對腫瘤的新生血管能力方面的指標(biāo)給予分析，可用于評估腫瘤相關(guān)的血管生成情況[8]。乳腺癌腫瘤MVD及多種生物學(xué)因子均與MRI表現(xiàn)密切相關(guān)，但MRI影像學(xué)參數(shù)與乳腺癌患者腫瘤MVD及生物因子的相關(guān)性及治療療效的評估仍有待深入挖掘分析。本研究以乳腺癌患者為研究對象，分析MRI影像學(xué)參數(shù)與乳腺癌患者腫瘤MVD及生物因子的相關(guān)性并評估治療效果?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取自2019年1月至2021年6月陜西中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院收治的104例乳腺癌患者為觀察組，均為女性；年齡29～78歲，平均年齡(49.82±12.91)歲；平均體質(zhì)量指數(shù)(23.28±2.91)kg/m2；其中，導(dǎo)管原位癌10例，浸潤性導(dǎo)管癌84例，浸潤性小葉癌8例，導(dǎo)管原位癌伴浸潤2例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)經(jīng)病理學(xué)確診為乳腺癌[9]；(2)臨床均接受MRI掃描檢查；(3)入組前未行手術(shù)、靶向治療或放化療；(4)均接受《中國臨床腫瘤學(xué)會乳腺癌診療指南》[10]推薦的方案治療；(5)隨訪時間均>12個月，每3個月到院隨訪1次。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)MRI掃描檢查結(jié)果質(zhì)量不佳；(2)臨床資料缺失；(3)治療后失訪。另選取同期于我院經(jīng)病理學(xué)診斷確診為乳腺良性病變的80例患者為常規(guī)組，均為女性；年齡28～71歲，平均年齡(50.21±12.11)歲；平均體質(zhì)量指數(shù)(23.37±2.87)kg/m2；其中，乳腺囊性增生38例，漿細(xì)胞性乳腺炎12例，乳腺分葉狀腫瘤13例，乳腺導(dǎo)管內(nèi)的乳頭狀瘤10例，乳腺纖維腺瘤7例。兩組研究對象的一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審議并批準(zhǔn)。所有研究對象均簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 MRI檢查 所有研究對象均采用Avanto 1.5T(德國西門子)MRI掃描機進(jìn)行掃描檢查?；颊呷「┡P位，采用乳腺專用的線圈實施掃描，F(xiàn)SE T2WI、T1WI加脂肪抑制序列實施橫斷位的掃描；采用自旋平面的回波成像序列實施橫斷位掃描，橫斷位的FLASH T1WI序列掃描層厚1.0 mm；注射對比劑前則實施蒙片掃描，后經(jīng)肘正中靜脈以團(tuán)注方式采用高壓注射器注入對比劑，然后行8期動態(tài)掃描，單期的掃描時長為55 s，層數(shù)為128層；采用的對比劑為釓噴酸葡胺注射液，注射速率2.0～2.5 ml/s，劑量0.2 mmol/kg，用量15～20 ml。然后，將所有圖像傳輸至配套工作站，并由7年以上醫(yī)師完成圖像處理及參數(shù)測量。

在乳腺MRI增強的第1期注入1 min內(nèi)挑選適當(dāng)?shù)母信d趣區(qū)(region of interest，ROI)，將病灶內(nèi)出血、囊變、壞死區(qū)避開，選定病灶邊緣區(qū)域和中心作為ROI，測量ROI的信號強度，并計算早期增強率。經(jīng)處理后生成自動偽彩灌注圖，勾畫并計算增強掃描達(dá)峰時間及映增強掃描強化曲線下面積。在病灶實性部分盡量避開壞死、囊變、出血區(qū)的灌注圖腫塊內(nèi)選擇3個ROI，其中，ROI選取保持大小一致，記錄灌注圖參數(shù)并取3個ROI區(qū)域的均值作為各參數(shù)指標(biāo)的評估結(jié)果。

1.2.2 免疫組織學(xué)檢測 采用SP法的免疫組織化學(xué)法對患者病理組織進(jìn)行檢查，參照說明書進(jìn)行操作，切取乳腺癌組織蠟塊后行脫蠟、水化，高壓將抗原修復(fù)后在過氧化氫室溫條件下孵育，然后分別滴加一抗和二抗，采用DAB顯色并利用蘇木素實施復(fù)染封片。參照Weidner法挑選微血管分布最密的位置，計算不重復(fù)的視野內(nèi)具體的CD34染成棕色的血管條數(shù)，取其中的均值做為MVD。并采用SP法的免疫組織化學(xué)法檢測觀察組患者的人類表皮生長因子受體2(human epidermal receptor 2，HER-2)、雌激素受體(estrogen receptor，ER)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)及Ki-67水平。HER-2定位于細(xì)胞膜，其余均定位于細(xì)胞核。按照陽性細(xì)胞占比與顏色深淺程度評分乘積作為結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)，0分判定為陰性，1～2分判定為弱陽性，3分及以上判定為強陽性。若患者出現(xiàn)病灶區(qū)長短徑之和增長>20%則判定為病情進(jìn)展，否則判定為疾病控制即預(yù)后有效。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者M(jìn)RI影像學(xué)參數(shù)檢測結(jié)果 觀察組患者對比劑的速率常數(shù)(Kep)及容量轉(zhuǎn)移常數(shù)(Ktrans)分別為(2.67±0.51)、(1.31±0.33)，常規(guī)組患者的Kep及Ktrans分別為(1.82±0.32)、(0.83±0.12)。觀察組患者的Kep及Ktrans均高于常規(guī)組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。觀察組和常規(guī)組的血管外細(xì)胞外間隙容積比(Ve)分別為(0.53±0.17)、(0.51±0.19)，組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。觀察組典型病例見圖1。

2.2 觀察組患者M(jìn)VD及生物因子檢測結(jié)果 觀察組患者的MVD為(54.39±5.12)，HER-2、ER、PR及Ki-67的強陽性率分別為46.15%、44.23%、47.12%及41.35%。觀察組患者的免疫組化染色結(jié)果見圖2。

2.3 不同生物因子檢測結(jié)果患者的MRI影像學(xué)參數(shù)檢測結(jié)果 HER-2、ER、PR及Ki-67強陽性及預(yù)后病情進(jìn)展患者的Kep及Ktrans均高于各指標(biāo)弱陽性及陰性，且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 不同生物因子檢測結(jié)果患者的MRI影像學(xué)參數(shù)檢測結(jié)果

2.4 MRI影像學(xué)參數(shù)與乳腺癌患者腫瘤MVD的相關(guān)性分析 乳腺癌患者腫瘤MVD與Kep及Ktrans均呈顯著正相關(guān)，其中，腫瘤MVD與Kep相關(guān)性模型為Y=9.314 3x+29.059(R2=0.975 6，r=0.987 7)，MVD與Ktrans相關(guān)性模型為Y=15.486x+35.119(R2=0.979 9，r=0.989 9)。

2.5 MRI影像學(xué)參數(shù)與不同生物因子檢測結(jié)果的相關(guān)性分析 乳腺癌患者的HER-2、ER、PR及Ki-67強陽性以及預(yù)后病情進(jìn)展與Kep均呈顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.643、0.593、0.609、0.615、0.674(P<0.05)。乳腺癌患者的HER-2、ER、PR及Ki-67強陽性以及預(yù)后病情進(jìn)展與Ktrans均呈顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.598、0.611、0.608、0.643、0.625(P<0.05)。

3 討論

目前，臨床上主要利用MVD的數(shù)量定量分析乳腺癌新生血管的情況，并用于分析血管生成程度[10]。腫瘤的血管生成和乳腺癌MVD關(guān)系密切，低MVD則被認(rèn)為腫瘤的血供不好，腫瘤組織可能發(fā)生了緩慢生長或壞死的情況[11]。而高M(jìn)VD值則被認(rèn)為腫瘤的血供較良好，通常情況下提示腫瘤生長活躍，癌細(xì)胞易進(jìn)入微循環(huán)，并可能導(dǎo)致腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[12]。目前，臨床上通過免疫組織化學(xué)法檢測腫瘤組織樣本內(nèi)的MVD水平，其結(jié)果只能反映腫瘤組織極個別位置血管的生成的具體情況，并無法有效實現(xiàn)對腫瘤整體血管生成狀態(tài)的評估[13]。乳腺MRI掃描檢查屬于經(jīng)典的無創(chuàng)檢查方法，可有效實現(xiàn)活體狀態(tài)下反映腫瘤血管的生成狀況，對乳腺癌的臨床評估和分析具有十分重要的意義[14]。

有研究報道，乳腺癌患者的預(yù)后質(zhì)量和生物學(xué)相關(guān)特點關(guān)系密切，通過檢測受試者病灶組織中ER、Ki-67、PR及HER-2等生物學(xué)指標(biāo)有助于選擇合理的治療方案，并可用于指導(dǎo)患者的臨床預(yù)后判斷及內(nèi)分泌治療[15]。MRI掃描是經(jīng)典的無創(chuàng)灌注成像，可有效提供血管滲透性等指標(biāo)，用于評估患者病灶區(qū)血流動力學(xué)情況，反映組織血管化程度及微血管灌注情況，為腫瘤的臨床分級診斷、腫瘤定性及臨床治療方案的確定提供數(shù)據(jù)支持和依據(jù)[16]。PR是細(xì)胞中重要的類固醇激素受體蛋白，也是常用的乳腺癌預(yù)后評估指標(biāo)，PR及ER陽性乳腺癌患者病變程度惡性較低，存活期長，激素治療效果好[17]。本研究結(jié)果顯示，隨著患者組織中PR水平升高，Kep和Ktrans水平也隨之升高，筆者分析認(rèn)為，隨著乳腺癌患者組織中PR水平的降低，多提示腫瘤分化差、生長迅速、細(xì)胞合成技術(shù)受體能力降低。PR陰性或弱陽性患者腫瘤生長速度更為迅速，且新生血管更為豐富，內(nèi)部細(xì)胞不完整，因此導(dǎo)致局部微血管血流狀態(tài)及滲透性增強。此外，乳腺癌患者惡性程度顯著升高，會導(dǎo)致血流速度加快，增強細(xì)胞生長旺盛程度，加快對比劑通過速度，與Kep水平升高密切相關(guān)。HER-2在體內(nèi)過表達(dá)會導(dǎo)致血管內(nèi)皮生長因子合成和釋放，并可起到促進(jìn)腫瘤新生血管生成的作用。HER-2高表達(dá)多提示腫瘤細(xì)胞血液灌注豐富，對內(nèi)分泌治療反應(yīng)差，惡性程度高，隨HER-2水平升高，多伴隨出現(xiàn)血流灌注豐富程度提高，Kep和Ktrans水平也隨之升高[18-19]。本研究結(jié)果顯示，觀察組Kep及Ktrans均高于常規(guī)組，觀察組患者M(jìn)VD為(54.39±5.12)，HER-2、ER、PR及Ki-67強陽性率均>40%。筆者進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，HER-2、ER、PR及Ki-67強陽性及預(yù)后病情進(jìn)展患者的Kep及Ktrans均高于弱陽性及陰性。采用相關(guān)性分析結(jié)果顯示，乳腺癌患者腫瘤MVD與Kep及Ktrans均呈顯著正相關(guān)關(guān)系，乳腺癌患者HER-2、ER、PR及Ki-67強陽性及預(yù)后病情進(jìn)展與Kep及Ktrans均呈顯著正相關(guān)關(guān)系。筆者分析認(rèn)為，臨床中可通過MRI掃描檢查評估受試者Kep及Ktrans指標(biāo)，并可有效間接反映受試者的血流灌注情況，用于評估乳腺癌的惡性程度。

綜上所述，MRI影像學(xué)參數(shù)與乳腺癌患者腫瘤MVD及生物因子均呈現(xiàn)顯著相關(guān)關(guān)系，并可作為評估臨床治療療效的潛在方法。但本研究入組臨床樣本數(shù)較少，且并未對患者進(jìn)行長期隨訪和追蹤，有待后續(xù)深入研究和分析。