超聲心動(dòng)圖聯(lián)合血清miR-26b-5p在診斷急性心肌梗死中的應(yīng)用

秦繼周， 金 艷， 羅朝軍*

1. 甘肅省第二人民醫(yī)院心內(nèi)科, 甘肅 蘭州 730000； 2. 甘肅省第二人民醫(yī)院五官科, 甘肅 蘭州 730000

急性心肌梗死(AMI)主要有胸痛、心律失常、急性循環(huán)功能障礙及血清心肌損傷標(biāo)記酶水平升高等臨床表現(xiàn)，因心肌長時(shí)間缺血引發(fā)的心肌急性壞死的常見病癥，病情一般急且重，并具有高死亡率[1]。故而，急性心肌梗死的早期診斷和治療對于改善患者的預(yù)后和降低死亡率至關(guān)重要。既往臨床多通過臨床癥狀、心電圖的動(dòng)態(tài)變化、心肌壞死標(biāo)志物對心肌梗死進(jìn)行診斷評估，但心肌標(biāo)志物多于心肌梗死6 h后才可顯著升高，無法實(shí)現(xiàn)早期AMI診斷[2]。三維超聲心動(dòng)圖屬于非侵入性影像檢查，可作為心室功能評價(jià)、缺血區(qū)心肌壁損害程度等早期心臟疾病的鑒別診斷方法[3]。微小核糖核酸(miRNA)是控制基因表達(dá)的重要因子，有研究[4]提示微小核糖核酸-26b-5p(miR-26b-5p)水平對心肌梗死預(yù)后具有影響，但相關(guān)機(jī)制尚未明晰。本研究探討了超聲心動(dòng)圖聯(lián)合血清miR-26b-5p在AMI中的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年1月至2021年5月在我院治療的115例AMI患者作為觀察組，其中男性78例、女性37例，平均年齡(64.12±9.55)歲；選取80例同期陳舊性心肌梗死患者作為對照組，其中男性49例、女性31例，平均年齡(63.49±8.87)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：相關(guān)診斷符合《急性心肌梗死診斷和治療指南》[5]中的標(biāo)準(zhǔn)；AMI患者發(fā)病至入院時(shí)間≤6 h；均在本院接受超聲心動(dòng)圖、冠狀動(dòng)脈造影(CAG)檢查；患者及家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并有結(jié)核等病原菌感染者；有惡性腫瘤等其他嚴(yán)重疾病者；有先天性心臟病等其他心臟疾病者。本次研究獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。兩組患者性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、總膽固醇和甘油三酯比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

超聲心動(dòng)圖檢查使用美國貝克曼超聲心動(dòng)儀(型號(hào)ASU800)，探頭頻率2～4 MHz，患者取平臥位，平掃胸前及心臟位置，針對性觀察和記錄胸骨旁左室長短軸切面心尖四腔、二腔切面觀察心室壁的運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)性、活動(dòng)幅度及回聲強(qiáng)度，測量、計(jì)算得到左室舒張末期內(nèi)徑(LVEDd)、左室收縮末期內(nèi)徑(LVEDs)、左室舒張末期容積(LVEDV)、左室收縮末期容積(LVESV)、左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)、心肌做功指數(shù)(Tei)、E/A。超聲心動(dòng)圖的陽性診斷標(biāo)準(zhǔn)為出現(xiàn)室壁運(yùn)動(dòng)減弱甚至消失、收縮期不同步、反向運(yùn)動(dòng)或收縮增厚率下降等。冠脈狹窄程度采用Gensini評分評估，總分≤24分為輕度狹窄、25～49分為中度狹窄、≥50分為重度狹窄[6]。

miR-26b-5p檢查：取靜脈血2 mL，置于乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝試管，血漿分離后采用qRT-PCR檢測，人snRNA U6內(nèi)參，miR-26b-5p進(jìn)行相對樣本模板量表示循環(huán)，上游引物5′-TTCAAGTAATTCAGGATAGGT-3′,下游引物5′-GGCCAACCGCGAGAAGATG-3′。Mx3005p儀器計(jì)算RT-PCR，采用RT-PCR相對定量法，以2-ΔΔCt表示心肌梗死組織miR-26b-5p水平，ΔΔCt=(CtmiRNA-U6)心肌梗死組織-(CtmiRNA-U6)正常組織。

觀察組患者于治療后3個(gè)月進(jìn)行隨訪，記錄是否發(fā)生主要不良心血管事件(MACE)：心力衰竭、再發(fā)心肌梗死、惡性心律失常、心源性死亡等。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 兩組超聲心動(dòng)圖參數(shù)、血清miR-26b-5p比較

在LVEDd、LVEDs、LVEDV、LVESV、Tei比較中，觀察組明顯高于對照組(P<0.05)；在LVEF、E/A、miR-26b-5p比較中，觀察組明顯低于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組超聲心動(dòng)圖參數(shù)、血清miR-26b-5p比較

2.2 觀察組不同患者超聲心動(dòng)圖參數(shù)、血清miR-26b-5p比較

觀察組不同性別、年齡患者超聲心動(dòng)圖參數(shù)、血清miR-26b-5p比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；冠脈不同狹窄程度患者LVEF、血清miR-26b-5p比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 觀察組不同患者超聲心動(dòng)圖參數(shù)、血清miR-26b-5p比較

2.3 觀察組患者血清miR-26b-5p與Gensini評分相關(guān)性分析

相關(guān)分析結(jié)果顯示：血清miR-26b-5p與Gensini評分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.503，P<0.05)。

2.4 血清miR-26b-5p鑒別診斷AMI的價(jià)值

血清miR-26b-5p鑒別診斷AMI的ROC曲線下面積(AUC)為0.812(P<0.05)，截?cái)嘀禐?.20，靈敏性為78.00%，特異性為83.50%。

2.5 超聲心動(dòng)圖聯(lián)合血清miR-26b-5p診斷AMI的價(jià)值

超聲心動(dòng)圖聯(lián)合血清miR-26b-5p診斷AMI的靈敏性和陰性預(yù)測值明顯高于超聲心動(dòng)圖單獨(dú)預(yù)測(P<0.05)；特異性、準(zhǔn)確性及陽性預(yù)測值比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

表3 超聲心動(dòng)圖聯(lián)合血清miR-26b-5p診斷AMI的價(jià)值

2.6 發(fā)生MACE和未發(fā)生MACE患者超聲心動(dòng)圖參數(shù)、血清miR-26b-5p比較

觀察組患者中，發(fā)生MACE患者LVEDs、LVESV明顯高于未發(fā)生MACE患者(P<0.05)，LVEF、miR-26b-5p明顯低于未發(fā)生MACE患者(P<0.05)。見表4。

表4 發(fā)生和未發(fā)生MACE患者超聲心動(dòng)圖參數(shù)、血清miR-26b-5p比較

2.7 超聲心動(dòng)圖參數(shù)、血清miR-26b-5p預(yù)測MACE發(fā)生的價(jià)值

LVEDs、LVEF、miR-26b-5p及聯(lián)合預(yù)測MACE發(fā)生的AUC分別為0.753、0.732、0.701和0.915，P<0.05；LVESV預(yù)測MACE發(fā)生的ROC曲線下面積為0.558，P>0.05，無預(yù)測價(jià)值。見圖1。

圖1 預(yù)測MACE的ROC曲線圖

3 討論

AMI的臨床表現(xiàn)復(fù)雜多變，部分患者并無典型的胸疼癥狀，梗死面積較小患者的早期變化較弱，近期出現(xiàn)心梗的患者再發(fā)心梗時(shí)無法通過肌鈣蛋白診斷等多種原因，現(xiàn)臨床上急需一種能夠在早期對心梗進(jìn)行診斷的檢測手段[7]。超聲心動(dòng)圖能夠檢測室壁活動(dòng)，特別是測定負(fù)荷情況下局部室壁運(yùn)動(dòng)異常，可間接地估量心肌缺血，但該技術(shù)具有一定的時(shí)間性，準(zhǔn)確率、敏感性均較低，現(xiàn)階段主要局限于冠心病的定性診斷階段，還需聯(lián)合其他診斷方法對心肌缺血程度進(jìn)行診斷[8,9]。

miRNA是患者病理及生理變化早期的生物標(biāo)志物，具有優(yōu)良的穩(wěn)定性和抗RNA酶降解能力，既往研究發(fā)現(xiàn)miRNA與心力衰竭具有密切聯(lián)系，呈顯著相關(guān)性，已成為影響心室重構(gòu)的潛在指標(biāo)，但具體機(jī)制還有待證實(shí)[10,11]。本研究結(jié)果顯示，觀察組LVEF、E/A、miR-26b-5p明顯低于對照組，LVEDd、LVEDs、LVEDV、LVESV、Tei明顯高于對照組，此外，冠脈不同狹窄程度患者LVEF、血清miR-26b-5p水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AMI患者由于梗死區(qū)心室壁節(jié)段性運(yùn)動(dòng)紊亂、變?nèi)跎踔镣Ｖ惯\(yùn)動(dòng)導(dǎo)致LVEDd、LVEDs、LVEDV、LVESV升高及節(jié)段室壁厚度下降，因此心肌梗死組織的相關(guān)心肌動(dòng)力指標(biāo)顯著異常，此外，miR-26b-5p也出現(xiàn)顯著變化，這可能與miR-26b-5p的作用機(jī)制有關(guān)，還需要進(jìn)一步探討。

將觀察組患者血清miR-26b-5p與Gensini評分進(jìn)行相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)血清miR-26b-5p與Gensini評分呈負(fù)相關(guān)，血清miR-26b-5p鑒別診斷AMI具有較高的靈敏性。既往的機(jī)制研究[12]發(fā)現(xiàn)，肥胖小鼠內(nèi)臟脂肪組織miR-26b存在顯著下降，而人體肥胖組織的miR-26b下降與胰島素抵抗具有密切相關(guān)性，提示miR-26b水平下降與胰島素抑制具有敏感性；后續(xù)相關(guān)研究[13]發(fā)現(xiàn)，miR-26b能夠靶向激活PI3K/AKT促進(jìn)胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)機(jī)體加強(qiáng)對葡萄糖的充分利用，降低血糖濃度，而AMI患者miR-26b-5p水平下降，提示機(jī)體血糖濃度升高，血糖升高已被證實(shí)是促進(jìn)心肌梗死的重要獨(dú)立危險(xiǎn)因素；另有研究[14]發(fā)現(xiàn)心肌細(xì)胞miR-26b含量最為豐富。因此，通過檢測miR-26b-5p能夠評估機(jī)體的心肌梗死程度。本研究中，超聲心動(dòng)圖聯(lián)合血清miR-26b-5p診斷AMI的靈敏性(94.78%)明顯高于超聲心動(dòng)圖(80.87%)和miR-26b-5p(78.00%)單獨(dú)診斷，提示二者聯(lián)合一定程度上可以彌補(bǔ)單一指標(biāo)的不足，提高診斷AMI的靈敏性。

本研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)生MACE患者LVEDs、LVESV明顯高于未發(fā)生MACE患者，LVEF、miR-26b-5p明顯低于未發(fā)生MACE患者，此外，LVEDs、LVEF、miR-26b-5p預(yù)測MACE發(fā)生的AUC均在0.7以上，聯(lián)合預(yù)測的AUC為0.915，預(yù)測價(jià)值更高。AMI發(fā)生后隨即會(huì)引發(fā)心室重構(gòu)，從而使得室壁所承受的牽引張力以及壓力負(fù)荷出現(xiàn)適應(yīng)性重置以及變化，梗死區(qū)可拓展或向外膨出，非梗死區(qū)心室壁由于牽拉導(dǎo)致所受張力負(fù)荷劇增，繼而引起心室壁波動(dòng)異常，進(jìn)一步加重心室重構(gòu)，最終在超聲心動(dòng)圖上成像為LVEDs升高及LVEF的下降。三維超聲心動(dòng)圖不依賴幾何形態(tài)假設(shè)，可更為準(zhǔn)確地得到心臟各個(gè)結(jié)構(gòu)的立體描述結(jié)果，從而得到心室、心房整體及局部的容積和運(yùn)動(dòng)的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)變化，可提高對AMI發(fā)生后室壁階段性運(yùn)動(dòng)異常、收縮功能障礙等的正確診斷。此外，AMI患者冠狀動(dòng)脈急性閉塞致血流中斷，進(jìn)而引起的局部心肌缺血性壞死及相關(guān)炎癥指標(biāo)，引起miR-26b-5p下降，可反映AMI患者的嚴(yán)重程度，這一特點(diǎn)可為臨床治療提供參考。

綜上所述，急性心肌梗死患者的血清miR-26b-5p水平降低，miR-26b-5p聯(lián)合超聲心動(dòng)圖參數(shù)在鑒別診斷AMI以及預(yù)測MACE方面有較好的應(yīng)用價(jià)值。