石墨爐原子吸收光譜法測定原料藥酒石酸依利格魯司他中鈀的含量

陳 璐,李琴梅,黃 曌,池海濤,趙 婷,張 梅,2*

(1.北京市科學(xué)技術(shù)研究院 分析測試研究所(北京市理化分析測試中心),北京 100094;2.有機(jī)材料檢測技術(shù)與質(zhì)量評價北京市重點(diǎn)實(shí)驗室,北京100094)

酒石酸依利格魯司他是一種高度特異性神經(jīng)酰胺類似物抑制劑,能夠抑制葡萄糖神經(jīng)酰胺的產(chǎn)生和累積,是治療特定Ⅰ型戈謝病的小分子口服藥物[1-3]。原料藥酒石酸依利格魯司他在生產(chǎn)過程中常用鈀作為催化劑[4],雖然經(jīng)過精制步驟去除,但成品中仍可能殘留鈀。鈀元素可能會對心臟、肝腎和肺造成損害,并產(chǎn)生溶血,還會引發(fā)哮喘、過敏、結(jié)膜炎等疾病[5]。歐洲藥品管理局(EMA)在2008年頒布了《金屬催化劑或金屬試劑殘留量規(guī)定》的指導(dǎo)文件,其中鈀作為第Ⅰ類金屬1A 亞組,具有顯著毒性,其殘留量不得超過10 mg·kg－1(限度值)。目前對酒石酸依利格魯司他中鈀殘留的測定方法研究還鮮有文獻(xiàn)報道。基于此,建立一種快速、準(zhǔn)確測定原料藥酒石酸依利格魯司他中鈀含量的方法對保證該類藥品的用藥安全有重要意義。

目前,測定原料藥中鈀殘留量的方法主要有電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法(ICP-AES)[6-8]、電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)[9-11]和原子吸收光譜法(AAS)[12-13]。但I(xiàn)CP-AES測定的檢出限較高,無法對藥物中痕量元素進(jìn)行檢測;ICP-MS成本高且普及度低,不適于藥品的日常質(zhì)量控制;AAS包括火焰法和石墨爐法,其中火焰法靈敏度低,測得檢出限偏高,不適用于低濃度水平的樣品檢測,石墨爐法對樣品基體要求低、靈敏度高,適用于藥品中鈀殘留量的測定[14]。本工作采用微波消解法對原料藥酒石酸依利格魯司他樣品進(jìn)行前處理,用石墨爐原子吸收光譜法測定其中鈀的含量,該方法檢出限低、靈敏度高、干擾少,且簡單、快速。

1 試驗部分

1.1 儀器與試劑

Pin AAcle 900T 型系列石墨爐原子吸收光譜儀;Ethos型微波消解儀;SQP 型電子分析天平;VB24 Plus型石墨趕酸器;Milli-Q 型超純水儀。

試驗中所用聚四氟乙烯消解罐及容量瓶等均用10%(體積分?jǐn)?shù))硝酸溶液浸泡過夜,用水沖洗后備用。

鈀標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液:10 mg·L－1,精密移取1.0 mL鈀標(biāo)準(zhǔn)溶液(1 000 mg·L－1)于100 mL 容量瓶中,用0.2%(體積分?jǐn)?shù),下同)硝酸溶液定容,搖勻,配制成質(zhì)量濃度為10 mg·L－1的鈀標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液。

鈀標(biāo)準(zhǔn)中間溶液:100μg·L－1,精密移取鈀標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液1.0 mL 于100 mL 容量瓶中,用0.2%硝酸溶液定容,搖勻,得質(zhì)量濃度為100μg·L－1的鈀標(biāo)準(zhǔn)中間溶液。

1 000 mg·L－1鈀標(biāo)準(zhǔn)溶液,編號GSB 04-1743－2004;30%(質(zhì)量分?jǐn)?shù),下同)過氧化氫溶液為優(yōu)級純;高純氬氣,純度不小于99.999%;硝酸為電子級;試驗用水為超純水(電阻率為18.2 MΩ·cm)。

原料藥酒石酸依利格魯司他由某藥廠提供。

1.2 儀器工作條件

1.2.1 微波消解儀

微波消解程序見表1。

表1 微波消解程序Tab.1 Program of microwave digestion

1.2.2 石墨爐原子吸收光譜儀

測定波長247.64 nm;光源為鈀空心陰極燈;狹縫寬度0.7 nm;保護(hù)氣為氬氣;工作燈電流10 m A;進(jìn)樣體積20μL;測定方式為標(biāo)準(zhǔn)曲線法;測定次數(shù)為3次。石墨爐升溫程序見表2。

表2 石墨爐升溫程序Tab.2 Program of temperature elevation of graphite furnace

1.3 試驗方法

準(zhǔn)確稱取原料藥酒石酸依利格魯司他約0.1 g于聚四氟乙烯消解罐中,加入3 mL 硝酸和2 mL 30%過氧化氫溶液,裝好外置套,旋緊旋塞,置入微波消解儀中,按表1 程序進(jìn)行消解,同時做樣品空白。消解完全后置于石墨趕酸器上于160℃趕酸至近干,冷卻后用水定容至10 mL容量瓶中,搖勻,用水稀釋5倍后,按照儀器工作條件進(jìn)行測定。

2 結(jié)果與討論

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線與檢出限

由自動進(jìn)樣系統(tǒng)將鈀標(biāo)準(zhǔn)中間溶液稀釋成5,10,20,50,100μg·L－1的鈀標(biāo)準(zhǔn)溶液系列,以0.2%硝酸溶液為空白,測量吸光度。以鈀的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),對應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。所得線性回歸方程為y＝6.700×10－4x＋9.200×10－4,線性范圍為5～100μg·L－1,相關(guān)系數(shù)為0.999 2。

取樣品空白溶液,連續(xù)進(jìn)11針后得到鈀的吸光度,根據(jù)《中華人民共和國藥典》(2020 年版)四部“藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)原則”計算檢出限(3.3s/k),其中s為標(biāo)準(zhǔn)偏差,k為標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率,再換算為質(zhì)量分?jǐn)?shù),得出鈀的方法檢出限為0.508 mg·kg－1。

2.2 精密度試驗

2.2.1 儀器精密度

取適量的20μg·L－1(限度值對應(yīng)的質(zhì)量濃度)鈀標(biāo)準(zhǔn)溶液,按照儀器工作條件連續(xù)進(jìn)樣20次,測量鈀的吸光度,計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。結(jié)果表明,RSD 為3.0%,表明儀器精密度良好。

2.2.2 重復(fù)性

精密平行稱取6份酒石酸依利格魯司他樣品,因為樣品中鈀含量均小于檢出限,所以需加入限度值對應(yīng)質(zhì)量濃度的鈀標(biāo)準(zhǔn)溶液,然后分別按照試驗方法前處理并測定。結(jié)果表明,測定值的RSD 為0.81%,表明方法的重復(fù)性良好。

2.3 回收試驗

精密平行稱取9份0.1 g樣品于聚四氟乙烯消解罐中,分3組,每組做3個平行樣,按80%,100%和120%限度值進(jìn)行加標(biāo),按照試驗方法進(jìn)樣測定,并計算回收率,結(jié)果見表3。

表3 回收試驗結(jié)果Tab.3 Results of test for recovery

由表3 可知,鈀的加標(biāo)回收率為96.2%～108%,表明所建立的方法準(zhǔn)確度高。

2.4 樣品分析

采用建立的試驗方法對3個批次的酒石酸依利格魯司他樣品中鈀的含量進(jìn)行測定,結(jié)果表明,鈀的測定值均低于檢出限,說明不同批次酒石酸依利格魯司他中鈀含量接近,且均小于規(guī)定限度值10 mg·kg－1。進(jìn)一步證明建立的方法實(shí)用性強(qiáng),可以對樣品進(jìn)行批量檢測。

本工作提出了石墨爐原子吸收光譜法測定原料藥酒石酸依利格魯司他中鈀含量的分析方法。該方法簡便、快速、準(zhǔn)確,可用于原料藥酒石酸依利格魯司他中鈀元素的測定,適用于醫(yī)藥及其中間產(chǎn)物的分析,為原料藥的質(zhì)量安全控制提供了檢測方法依據(jù),可在實(shí)際工作中得到應(yīng)用。