張加寧,陳名利,鄧金華,李 凱,彭 霞,信璐瑤,齊 萌
(塔里木大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院/新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團塔里木動物疫病診斷與防控工程實驗室,新疆 阿拉爾 843300)
綿羊養(yǎng)殖業(yè)是內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)發(fā)展中的主要產(chǎn)業(yè)之一, 在區(qū)域經(jīng)濟中占有較為重要的地位。 腸道蠕蟲病是內(nèi)蒙古牧區(qū)綿羊常見的慢性消耗性疾病,危害綿羊的生長發(fā)育和繁殖,阻礙了養(yǎng)羊業(yè)的健康發(fā)展[1]。 隨著綿羊的養(yǎng)殖方式由散養(yǎng)向規(guī)?;B(yǎng)殖轉(zhuǎn)變, 內(nèi)蒙古地區(qū)多選擇在春秋兩季進(jìn)行預(yù)防性驅(qū)蟲, 然而, 牧民由于專業(yè)知識薄弱,用藥缺乏科學(xué)性和針對性,導(dǎo)致綿羊的腸道寄生蟲病防治存在一定漏洞。 其力木格等[2]在內(nèi)蒙古西烏珠穆沁旗開展的調(diào)查顯示, 綿羊消化道線蟲感染較嚴(yán)重, 感染的優(yōu)勢寄生蟲蟲種對伊維菌素和阿苯達(dá)唑均產(chǎn)生了高度耐藥性。 額葉勒德格等[3]在內(nèi)蒙古烏審旗開展的調(diào)查顯示,該地區(qū)綿羊蠕蟲病流行嚴(yán)重,感染率84.4%(981/1 162)。 該調(diào)查旨在掌握內(nèi)蒙古某大型牲畜交易市場綿羊蠕蟲感染情況和種類分布特征, 以期為該地區(qū)綿羊蠕蟲病的防治提供基礎(chǔ)資料。
1.1.1 綿羊糞便樣本的采集
于2020 年7 月—2021 年6 月, 每月中旬收集內(nèi)蒙古鄂托克前旗某牲畜交易市場綿羊新鮮糞便樣本共1 082 份。 所有樣本均為綿羊剛排出的新鮮糞便, 用一次性無菌塑料手套撿取10~20 g,分別置于潔凈的自封袋內(nèi),編號并記錄綿羊年齡、性別等信息?!? 月齡、7~12 月齡和>1 歲綿羊的糞便樣本分別為385、517、180 份; 公羊和母羊的糞便樣本分別為420、662 份。 糞便樣本置于裝有冰袋的泡沫箱,運送至實驗室,置于4 ℃冰箱,待檢。
1.1.2 主要試劑
飽和蔗糖溶液, 塔里木大學(xué)獸醫(yī)寄生蟲學(xué)實驗室自配。
1.1.3 主要儀器設(shè)備
臺式高速離心機(型號:TDZ5-WS),湖南湘儀實驗室儀器開發(fā)有限公司產(chǎn)品; 普通光學(xué)顯微鏡(型號:CX31RTSF),Olympus Corporation 產(chǎn)品;麥克馬斯特計數(shù)板, 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)寄生蟲學(xué)教研室產(chǎn)品。
1.2.1 綿羊腸道蠕蟲卵檢查
取10 g 左右新鮮糞便樣本, 采用飽和蔗糖溶液漂浮法進(jìn)行檢查, 在普通光學(xué)顯微鏡下觀察蟲卵的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征,參照《獸醫(yī)寄生蟲學(xué)》[4]進(jìn)行寄生蟲的分類鑒定,未鑒定到種。
1.2.2 綿羊蠕蟲感染率
經(jīng)顯微鏡觀察, 將發(fā)現(xiàn)蠕蟲蟲卵的糞便樣本判定為陽性樣本。根據(jù)不同采樣月份、年齡和性別綿羊的糞便樣本數(shù)和蠕蟲陽性樣本數(shù), 計算感染率(即陽性樣本數(shù)/樣本數(shù)×100%)。
1.2.3 綿羊蠕蟲感染強度測定
經(jīng)飽和蔗糖溶液漂浮法檢測呈蠕蟲卵陽性的糞便樣本:取2 g 糞便樣本置于100 mL 燒杯內(nèi),加入58 mL 的飽和蔗糖溶液, 用一次性筷子充分?jǐn)嚢杈鶆?,采用麥克馬斯特法[5]測定每克糞便中的蟲卵數(shù)(eggs per gram,EPG)。 計算公式為:EPG=(N1×200+N2×200)/2, 其中N1 和N2 分別為每個計數(shù)室內(nèi)所計同種/類蟲卵數(shù)。 顯微鏡觀察呈蠕蟲卵陽性的糞便樣本,采用計數(shù)板未觀察到蟲卵者,計數(shù)為≤200。
1.2.4 感染率的統(tǒng)計學(xué)分析
統(tǒng)計不同采樣時間、 不同年齡段和不同性別的綿羊腸道蠕蟲感染率,使用SPSS 22.0 統(tǒng)計學(xué)軟件, 采用χ2檢驗進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)差異分析,P<0.05 表示統(tǒng)計學(xué)差異顯著,P<0.01 表示統(tǒng)計學(xué)差異極顯著。
對1 082 份綿羊的新鮮糞便樣本進(jìn)行檢查,發(fā)現(xiàn)6 種/類腸道蠕蟲蟲卵,感染率為26.1%(282/1 082), 以圓線蟲為主要感染蟲種, 感染率為16.5%(179/1 082),鞭蟲、莫尼茨絳蟲、細(xì)頸線蟲、蟯蟲和鉤蟲的感染率分別為7.8%(84/1 082)、3.2%(35/1 082)、1.9%(21/1 082)、0.6%(7/1 082)和0.1%(1/1 082),具體結(jié)果見表1。 282 份陽性樣本中,有3 份同時感染3 種寄生蟲,混合感染率為0.3%(3/1 082); 有38 份同時感染2 種寄生蟲,混合感染率為3.5%(38/1 082)。
1—12 月均發(fā)現(xiàn)綿羊感染腸道蠕蟲,以10 月和11 月綿羊腸道蠕蟲的感染率較高, 分別為47.4%(45/95)和43.7%(38/87);1 月和2 月綿羊腸道蠕蟲的感染率較低, 分別為13.0%(12/92)和12.2%(11/90); 其他月份綿羊腸道蠕蟲的感染率為16.5%~30.3%。 不同采樣月綿羊蠕蟲感染率統(tǒng)計學(xué)差異極顯著(χ2=63.957,df=11,P<0.01),具體結(jié)果見表1。
1—12 月均發(fā)現(xiàn)綿羊呈圓線蟲和鞭蟲陽性,感染率分別為2.3%(2/86)~41.4%(36/87)和1.0%(1/98)~15.1%(13/86); 有7 個采樣月發(fā)現(xiàn)綿羊呈細(xì)頸線蟲陽性, 感染率1.0%(1/98)~7.4%(7/95);有9 個采樣月發(fā)現(xiàn)綿羊莫尼茨絳蟲呈陽性, 感染率2.0%(2/98)~7.5%(6/80);有5 個采樣月發(fā)現(xiàn)綿羊蟯蟲呈陽性, 感染率1.0%(1/97)~3.7%(3/81);僅在9 月發(fā)現(xiàn)綿羊感染鉤蟲,感染率1.1%(1/89),具體結(jié)果見表1。
表1 不同采樣月份綿羊腸道蠕蟲的感染情況
≤6 月齡、7~12 月齡和>1 歲綿羊腸道蠕蟲的感染率分別為14.5%(56/385)、31.1%(161/517)和36.1%(65/180),隨綿羊年齡的增長呈逐漸遞增趨勢。不同年齡段綿羊均以圓線蟲為感染優(yōu)勢蟲種,其中, 圓線蟲和莫尼茨絳蟲主要感染>1 歲羊,鞭蟲和蟯蟲主要感染7~12 月齡羊,細(xì)頸線蟲主要感染≤6 月齡羊,僅發(fā)現(xiàn)7~12 月齡羊存在鉤蟲感染,不同年齡段綿羊腸道蠕蟲的感染率統(tǒng)計學(xué)差異極顯著(χ2=42.853,df=2,P<0.01),具體結(jié)果見表2。
公羊和母羊腸道蠕蟲的感染率分別為24.3%(102/420)和27.2%(180/662),均以圓線蟲為優(yōu)勢感染蟲種。 母羊的圓線蟲和莫尼茨絳蟲感染率均高于公羊,而公羊的鞭蟲、細(xì)頸線蟲和蟯蟲感染率高于母羊,僅發(fā)現(xiàn)母羊存在鉤蟲感染,公羊和母羊的腸道蠕蟲感染率無統(tǒng)計學(xué)差異(χ2=1.125,df=1,P>0.05),具體結(jié)果見表2。
表2 不同年齡和性別綿羊的腸道蠕蟲感染情況
對陽性糞便中蠕蟲蟲卵進(jìn)行感染強度測定。在179 份圓線蟲蟲卵陽性樣本中,最大EPG 值為2 100 個, 最小EPG 值≤200 個, 平均EPG 值為352.5 個。在84 份鞭蟲蟲卵陽性樣本中,最大EPG值為350 個,最小EPG 值≤200 個,平均EPG 值為201.8 個; 在35 份莫尼茨絳蟲蟲卵陽性樣本中,最大EPG 值為1 900 個,最小EPG 值≤200 個,平均EPG 為324.3 個;21 份細(xì)頸線蟲、7 份蟯蟲和1 份鉤蟲蟲卵陽性樣本的EPG 值均≤200 個。
那日蘇等[6]調(diào)查發(fā)現(xiàn)內(nèi)蒙古烏審旗綿羊腸道蠕蟲感染率為51.4%(1 089/2 118),經(jīng)系統(tǒng)剖檢法和形態(tài)學(xué)方法鑒定出12 種蠕蟲, 以捻轉(zhuǎn)血矛線蟲為主要感染蟲種;其力木格等[2]調(diào)查發(fā)現(xiàn)內(nèi)蒙古西烏珠穆沁旗綿羊腸道蠕蟲感染率為73.5%(1 484/2 018), 經(jīng)系統(tǒng)剖檢法和形態(tài)學(xué)方法鑒定出9 種蠕蟲,以捻轉(zhuǎn)血矛線蟲為主要感染蟲種;溫晴[7]調(diào)查發(fā)現(xiàn),泰來、錫林浩特和牙克石綿羊胃腸道蠕蟲感染率為71.8%(718/1 000), 檢出8 種線蟲卵,以捻轉(zhuǎn)血矛線蟲、類圓線蟲、食道口線蟲和毛圓線蟲為優(yōu)勢感染蟲種;郭利英[8]調(diào)查發(fā)現(xiàn)內(nèi)蒙古烏蘭察布市農(nóng)村地區(qū)羊腸道蠕蟲感染率為73.3% (66/90),檢出12 種蠕蟲,以捻轉(zhuǎn)血矛線蟲為主要感染蟲種;馬曉野[9]調(diào)查發(fā)現(xiàn)內(nèi)蒙古通遼地區(qū)綿羊腸道蠕蟲感染率為95.9%(93/97), 以捻轉(zhuǎn)血矛線蟲為主要感染蟲種;郭筱璐等[10]對國內(nèi)9 個?。ㄖ陛犑小⒆灾螀^(qū))進(jìn)行調(diào)查發(fā)現(xiàn),內(nèi)蒙古地區(qū)綿羊90 份樣品中線蟲的感染率為73.3%(66/90),檢出3 種線蟲蟲卵,以捻轉(zhuǎn)血矛線蟲為優(yōu)勢蟲種;劉利霞等[11]調(diào)查發(fā)現(xiàn)內(nèi)蒙古錫林浩特周邊地區(qū)綿羊線蟲感染率為35.3%(622/1 760),檢出4種線蟲蟲卵,以細(xì)頸線蟲為優(yōu)勢蟲種。該次調(diào)查發(fā)現(xiàn), 內(nèi)蒙古某牲畜交易市場綿羊腸道蠕蟲總感染率為26.1%(282/1 082),低于上述報道,可能與糞便樣本選擇、檢測方法、季節(jié)、驅(qū)蟲保健和飼養(yǎng)管理等因素存在較大相關(guān)性。
姜佳林[12]調(diào)查發(fā)現(xiàn)內(nèi)蒙古克什克騰旗和巴林右旗的綿羊線蟲和絳蟲多流行于溫暖潮濕的多雨季節(jié),以9 月和10 月的感染率最高,11 月至翌年1 月感染率均較低,表明天氣、溫度和降水情況均可影響綿羊腸道蠕蟲寄生蟲的感染和流行; 王權(quán)等[13]調(diào)查發(fā)現(xiàn)天祝藏族自治縣綿羊腸道線蟲的感染率在春季3—4 月和秋季8—9 月感染率較高,冬季感染率較低,莫尼茨絳蟲感染率在8 月最高;岳建偉等[14]調(diào)查發(fā)現(xiàn),內(nèi)蒙古巴彥淖爾地區(qū)舍飼成年肉羊線蟲感染率在7—10 月感染率較高,12月至翌年2 月感染率較低。該次調(diào)查顯示,該牲畜交易市場綿羊腸道蠕蟲感染率以秋季10 月和11月較高,而冬季1 月和2 月感染率較低,與上述報道一致, 進(jìn)一步提示應(yīng)在溫潤多雨季節(jié)做好驅(qū)蟲工作。
Bansal 等[15]調(diào)查發(fā)現(xiàn),印度印多爾地區(qū)母羊腸道蠕蟲的感染率(91.0%,946/1 040) 高于公羊(87.4%,319/365), 以圓線蟲為優(yōu)勢感染蟲種;Bihaqi 等[16]調(diào)查發(fā)現(xiàn),查謨和克什米爾溫帶地區(qū)母羊腸道蠕蟲感染率 (75.9%,677/892) 高于公羊(66.1%,82/124),以圓線蟲為優(yōu)勢感染蟲種;Singh等[17]調(diào)查發(fā)現(xiàn),印度西部地區(qū)母羊腸道蠕蟲的感染率(87.4%,291/333)高于公羊(72.4%,42/58),以線蟲為優(yōu)勢感染蟲種;姜佳林[12]調(diào)查發(fā)現(xiàn),內(nèi)蒙古赤峰地區(qū)母羊腸道蠕蟲的感染率(15.4%,92/596)高于公羊(8.6%,10/117),均以線蟲為優(yōu)勢感染蟲種;該次調(diào)查顯示,母羊腸道蠕蟲感染率略高于公羊,均以圓線蟲為優(yōu)勢感染蟲種,與上述調(diào)查結(jié)果相類似。
黃占欣等[18]調(diào)查發(fā)現(xiàn),河北省邯鄲地區(qū)<2 月齡羔羊未檢測出腸道蠕蟲感染, 育成羊和成年羊的腸道蠕蟲感染率分別為69.5%(130/200)和40.2%(53/132);該次調(diào)查發(fā)現(xiàn),綿羊蠕蟲感染率隨年齡增長呈現(xiàn)遞增趨勢,與上述調(diào)查相一致。關(guān)琛等[19]調(diào)查發(fā)現(xiàn),河北省張家口地區(qū)羔羊線蟲感染率 (27.0%,108/200) 高于成年羊 (16.0%,66/200);陳思羽[20]調(diào)查發(fā)現(xiàn)四川省涼山彝族自治州羔羊腸道蠕蟲感染率(44.8%,104/232)略高于成年羊(41.4%,179/432);溫晴[7]調(diào)查發(fā)現(xiàn),泰來、錫林浩特、 牙克石<6 月齡綿羊腸道蠕蟲感染率(80.1%,218/272) 高于6~12 月齡 (69.5%,244/351)和>1 歲綿羊(67.9%,256/377)。上述調(diào)查結(jié)果表明,不同地區(qū)綿羊腸道蠕蟲感染存在分布差異,應(yīng)根據(jù)具體調(diào)查結(jié)果制定合理的驅(qū)蟲方案, 針對性用藥和科學(xué)管理。