幽門螺桿菌抗生素異質(zhì)性耐藥研究進(jìn)展

目前，由于幽門螺桿菌(Helicobacter pylori，

)對(duì)抗生素的耐藥問(wèn)題日趨嚴(yán)重，導(dǎo)致其根除率在全球不少國(guó)家和地區(qū)均處在低于80%的欠理想水平

。異質(zhì)性耐藥(heteroresistance)是細(xì)菌不同亞群具有不同耐藥性的現(xiàn)象，多見(jiàn)于銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、大腸埃希菌等革蘭氏陰性細(xì)菌中

。機(jī)制復(fù)雜的異質(zhì)性耐藥現(xiàn)象是導(dǎo)致針對(duì)致病菌感染的抗生素治療失敗的重要因素，多年來(lái)一直是抗感染治療領(lǐng)域的一個(gè)研究熱點(diǎn)

。近年來(lái)，隨著對(duì)

異質(zhì)性耐藥研究的不斷深入，

對(duì)抗生素的異質(zhì)性耐藥問(wèn)題逐漸被學(xué)術(shù)界關(guān)注

。有研究

相繼報(bào)道了

在各地區(qū)對(duì)克拉霉素、甲硝唑、左氧氟沙星等抗生素異質(zhì)性耐藥的情況，提示

異質(zhì)性耐藥已較為常見(jiàn)，應(yīng)受到臨床的重視

。關(guān)于

異質(zhì)性耐藥的機(jī)制，現(xiàn)有的報(bào)道認(rèn)為

異質(zhì)性耐藥形成的原因可能與感染不同

菌株

、基因改變

、

在胃內(nèi)定植部位變化

等眾多因素有關(guān)。盡管有報(bào)道稱可檢測(cè)

異質(zhì)性耐藥的方法有多種，如：菌群譜分析法(population analysis profiling, PAP)、微滴式數(shù)字PCR(droplet digital PCR, ddPCR)、熒光免疫雜交等，但仍缺乏規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化的檢測(cè)方法，導(dǎo)致其檢測(cè)效果并不理想，可能會(huì)低估

異質(zhì)性耐藥的程度

。本文主要就

異質(zhì)性耐藥可能的形成機(jī)制及目前的檢測(cè)方法作一概述，旨在加深對(duì)

異質(zhì)性耐藥的認(rèn)識(shí)，為臨床提高

根除率提供新的思路。

1 異質(zhì)性耐藥

異質(zhì)性耐藥最初在1947年被描述，直到1970年才被首次報(bào)道，這種現(xiàn)象在革蘭氏陽(yáng)性、陰性細(xì)菌中均有發(fā)現(xiàn)

，但到目前為止，異質(zhì)性耐藥并無(wú)統(tǒng)一的定義。廣義的異質(zhì)性耐藥是指細(xì)菌群體中一個(gè)或數(shù)個(gè)亞群與主要群體相比，表現(xiàn)出對(duì)抗生素更高的耐藥性

。El-Halfawy等

給出了異質(zhì)性耐藥更具臨床意義的定義，即在細(xì)菌群體中一部分細(xì)菌亞群相比主要群體，其對(duì)某種抗生素的最小抑菌濃度(minimum inhibitory concentration，MIC)值顯著增加(至少8倍)。在該定義下，El-Halfawy等

進(jìn)一步通過(guò)在抗生素2倍增量的梯度濃度下設(shè)置細(xì)菌標(biāo)準(zhǔn)耐藥的臨界濃度，若抗生素對(duì)部分亞群的抑菌濃度高于此臨界值，則認(rèn)為該亞群耐藥，并將細(xì)菌群體對(duì)抗生素的異質(zhì)性描述分為三類：(1)細(xì)菌群體對(duì)抗生素敏感，即在低于臨界值的抗生素濃度下，耐藥性最強(qiáng)的細(xì)菌亞群對(duì)抗生素也表現(xiàn)為敏感；(2)細(xì)菌群體對(duì)抗生素耐藥，即群體中耐藥性最弱的亞群在高于臨界值的抗生素濃度下也表現(xiàn)為耐藥；(3)典型的異質(zhì)性耐藥形式，即細(xì)菌群體中大多數(shù)亞群在低于臨界值的抗生素濃度下表現(xiàn)為敏感，而少數(shù)亞群可以耐受高于臨界值的抗生素濃度，這種典型的異質(zhì)性耐藥臨床意義最大

。Andersson等

在此基礎(chǔ)上，建議在定義不同細(xì)菌的異質(zhì)性耐藥時(shí)，應(yīng)注意描述以下4個(gè)特征：(1)耐藥亞群的克隆性；(2)耐藥亞群的耐藥水平；(3)耐藥亞群的頻率；(4)耐藥亞群的穩(wěn)定性。其中，區(qū)分多克隆異質(zhì)性耐藥和單克隆異質(zhì)性耐藥對(duì)于研究異質(zhì)性耐藥形成的原因十分重要

。多克隆異質(zhì)性耐藥包括對(duì)抗生素不同敏感性的菌株感染和罕見(jiàn)的耐藥突變兩種情況

。多克隆異質(zhì)性耐藥細(xì)菌群體中的耐藥亞群一般是穩(wěn)定的，可以將耐藥性傳遞給子代

。而單克隆異質(zhì)性耐藥由細(xì)菌群體內(nèi)的異質(zhì)性引起，這種耐藥性通常不穩(wěn)定，在維持?jǐn)?shù)代后常常丟失其耐藥性，即抗生素存在時(shí)，細(xì)菌群體中耐藥細(xì)菌的比例增加，但當(dāng)抗生素濃度下降，耐藥細(xì)菌比例又會(huì)降低

。有學(xué)者認(rèn)為單克隆異質(zhì)性耐藥可能與持久性細(xì)胞(persister cells)的形成有關(guān)

。除此之外，Nicoloff等

進(jìn)一步將異質(zhì)性耐藥進(jìn)行限定：細(xì)菌群體中耐藥亞群的比例應(yīng)≥10

，以此能夠更合理地描述異質(zhì)性耐藥。

有觀點(diǎn)認(rèn)為，異質(zhì)性耐藥可能是細(xì)菌對(duì)藥物由敏感發(fā)展到耐藥的中間階段

。相較于常規(guī)藥敏試驗(yàn)結(jié)果(敏感、耐藥或中介)，異質(zhì)性耐藥更強(qiáng)調(diào)這些狀態(tài)之間的轉(zhuǎn)化和過(guò)渡

。異質(zhì)性耐藥可能與抗生素治療失敗和細(xì)菌反復(fù)感染有關(guān)，對(duì)臨床的診治具有重要影響，因此，異質(zhì)性耐藥的相關(guān)問(wèn)題日益引起學(xué)術(shù)界的重視

。

2 H.pylori異質(zhì)性耐藥形成的原因

在2015年的感染人數(shù)接近40億，約占世界總?cè)丝诘?0%，在發(fā)展中國(guó)家具有更高的感染率

。

感染是導(dǎo)致宿主慢性胃炎和消化性潰瘍等疾病的主要原因，也可誘發(fā)胃癌和胃黏膜相關(guān)淋巴組織(mucosa-associated lymphoid tissue，MALT)淋巴瘤等惡性疾病

。近年來(lái)隨著

對(duì)抗生素的耐藥率上升，導(dǎo)致大部分根治方案的根除率欠理想，這成為臨床上根治

的一大難題

。目前越來(lái)越多的研究提示，

中同時(shí)存在耐藥和敏感的亞群是抗生素治療失敗的重要原因之一，

異質(zhì)性耐藥的研究具有重要的臨床意義

。

盡管目前國(guó)內(nèi)外均缺少

異質(zhì)性耐藥的大樣本流行病學(xué)資料，但現(xiàn)有的研究已經(jīng)證實(shí)在不同地區(qū)

對(duì)克拉霉素、左氧氟沙星等常用抗生素存在異質(zhì)性耐藥現(xiàn)象

。Mi等

在我國(guó)貴陽(yáng)市地區(qū)48例

陽(yáng)性患者中經(jīng)篩選發(fā)現(xiàn)，

異質(zhì)性耐藥7例，涉及克拉霉素、阿莫西林、左氧氟沙星及甲硝唑。Wang等

研究發(fā)現(xiàn)，在我國(guó)南昌市地區(qū)124例患者中

異質(zhì)性耐藥情況為：克拉霉素23例(18.5%)、左氧氟沙星25例(20.2%)。Sun等

在河南地區(qū)的研究發(fā)現(xiàn)，

對(duì)克拉霉素異質(zhì)性耐藥情況為：43例

陽(yáng)性患者經(jīng)濃度梯度法(E-test)發(fā)現(xiàn)14例，胃黏膜樣本經(jīng)ddPCR發(fā)現(xiàn)13例，糞便ddPCR結(jié)果顯示12例。Kao等

在我國(guó)臺(tái)灣地區(qū)412例患者中收集了19對(duì)具有異質(zhì)性耐藥的

感染病例，包括左氧氟沙星、克拉霉素和甲硝唑。而我們的研究通過(guò)藥敏實(shí)驗(yàn)和PCR擴(kuò)增23S rRNA鑒定發(fā)現(xiàn)在甘肅地區(qū)112例

感染患者中有4例對(duì)克拉霉素異質(zhì)性耐藥，低于國(guó)內(nèi)同類報(bào)道

，這可能與地域差異以及檢測(cè)方法不同有一定關(guān)系。以下為國(guó)外的一些研究數(shù)據(jù):Selgrad等

在德國(guó)66例患者中檢測(cè)出10例患者的胃竇和胃體的

對(duì)克拉霉素等抗生素具有不同的敏感性。Farzi等

在伊朗地區(qū)的研究結(jié)果為：17.5%(7/40)的患者表現(xiàn)為胃竇和胃體

菌株對(duì)克拉霉素耐藥的異質(zhì)性。此外，一項(xiàng)包括亞洲、歐洲、非洲及美洲部分地區(qū)的薈萃分析表明，

對(duì)克拉霉素和甲硝唑的異質(zhì)性耐藥的發(fā)生率分別為6.8%和13.8%

。如上述，

異質(zhì)性耐藥現(xiàn)象并不少見(jiàn)

。

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在形態(tài)上分為兩種，一種是螺旋狀的B型

，其表面光滑，鞭毛盤繞在自身周圍，并具有嚴(yán)格意義的膜狀結(jié)構(gòu)。另一種是類球體形態(tài)的A型

，也稱為Coccoid形式，其胞膜和胞質(zhì)的結(jié)構(gòu)不規(guī)則且相互粘附，不具有嚴(yán)格意義上的膜性結(jié)構(gòu)，此外，A型

中部分細(xì)菌新陳代謝緩慢甚至停滯，處于非增殖期，這可能是

的一種持久性形式

。在

根除治療期間，當(dāng)抗生素濃度接近MIC時(shí)，一些螺旋狀形態(tài)的B型

會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)轭惽蝮w形態(tài)的A型

。Costa等

發(fā)現(xiàn)，內(nèi)肽酶(endopeptidase)參與了

形態(tài)的轉(zhuǎn)變，且內(nèi)肽酶可水解

細(xì)胞壁抗生素靶蛋白，使A型

對(duì)作用于細(xì)胞壁的抗生素有一定的耐藥性。并且代謝停滯的A型

可對(duì)作用于細(xì)菌繁殖期的抗生素產(chǎn)生耐藥性

。此外，F(xiàn)aghri等

發(fā)現(xiàn)，

從B型到A型形態(tài)的改變與N-乙酰-D-氨基葡萄糖-β(1,4)-N-乙酰胞壁酰-L-Ala-D-Glu(GM二肽)的積累有關(guān)。GM二肽積累的A型

可能對(duì)阿莫西林具有耐藥性

。

關(guān)于不同

感染的相關(guān)概念，一些學(xué)者將其分為多重感染和混合感染。二者均意在描述

不同耐藥性或毒力的亞群在胃內(nèi)同一或不同部位的同時(shí)感染狀態(tài)

。盡管不乏相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，但不同文獻(xiàn)描述的概念難以將二者嚴(yán)格區(qū)分。并且這兩個(gè)概念更多的是從現(xiàn)象層面描述了

異質(zhì)性耐藥的狀態(tài)，嚴(yán)格意義上講，機(jī)制層面可能與后續(xù)的相關(guān)因素有重疊

。鑒于相關(guān)文獻(xiàn)在概念上的差異，我們此處偏重于它們的共性，并以此作為探討

異質(zhì)性耐藥機(jī)制的起點(diǎn)。

如上所述，A型

和B型

的耐藥性存在差異，而在患者體內(nèi)可同時(shí)觀察到這兩種不同形態(tài)的

。A型

的形成可能會(huì)影響其根除治療效果，造成反復(fù)感染

。研究發(fā)現(xiàn)，阿莫西林、克拉霉素和甲硝唑均可誘導(dǎo)A型

的形成，其中阿莫西林的誘導(dǎo)能力最強(qiáng)

。

長(zhǎng)期感染可能導(dǎo)致細(xì)菌基因組不穩(wěn)定而產(chǎn)生突變

。由于

修復(fù)DNA的效率較低，在有抗生素時(shí)，DNA的損傷不能完全修復(fù)，改變的基因保留在其基因組中，使

基因組多樣化，影響

的表型

。一些常見(jiàn)的

耐藥基因的突變可能引起異質(zhì)性耐藥，如：RdxA基因的突變可能與

對(duì)甲硝唑異質(zhì)性耐藥有關(guān)

。GyrA和GyrB的突變與

對(duì)左氧氟沙星異質(zhì)性耐藥相關(guān)

。De Francesco等

研究發(fā)現(xiàn),在體外A2143G點(diǎn)突變可能與

對(duì)克拉霉素異質(zhì)性耐藥有關(guān)。

對(duì)于

而言，異質(zhì)性耐藥既可以是患者體內(nèi)某一部位同時(shí)存在對(duì)某種抗生素敏感和耐藥的菌株，也可以是胃的不同部位(如胃竇和胃體)具有不同抗生素耐藥性(敏感、耐藥或混合)的菌株

，一些學(xué)者將后者稱為內(nèi)部異質(zhì)性耐藥(interniche heteroresistance)

。

異質(zhì)性耐藥形成的機(jī)制并不清楚，目前認(rèn)為其可能的形成原因有以下幾個(gè)方面。

同時(shí)，

具有丟失和獲得外源DNA的能力，可通過(guò)轉(zhuǎn)化實(shí)現(xiàn)基因重組

，這些發(fā)生在不同

菌株之間的基因重組事件，可導(dǎo)致宿主體內(nèi)產(chǎn)生多種

菌株

。此外，Kao等

研究發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)座酶介導(dǎo)的重組也參與了

基因組多樣性的形成?；蚪M多樣性可能導(dǎo)致異質(zhì)性耐藥

。

能夠侵入胃上皮細(xì)胞和免疫細(xì)胞，該過(guò)程稱為

內(nèi)化(internalization)，內(nèi)化可能是

逃避機(jī)體免疫系統(tǒng)和對(duì)抗生素耐藥的一種方式

。有研究發(fā)現(xiàn)，耐藥菌株相比敏感菌株有著更高的內(nèi)化活性，提示內(nèi)化水平可能與

對(duì)抗生素耐藥性的差異有關(guān)。內(nèi)化程度的不同可能會(huì)造成

對(duì)抗生素的敏感性存在異質(zhì)性，由于抗生素進(jìn)入胃組織深處時(shí)，其濃度下降，內(nèi)化的細(xì)菌會(huì)暴露于較低濃度的抗生素中，在這種非致死的抗生素濃度下，內(nèi)化的

可能產(chǎn)生耐藥突變

。

具有趨向胃內(nèi)pH值更高部位的特性，故

常定植于胃竇。長(zhǎng)期單獨(dú)使用PPI會(huì)使胃體產(chǎn)酸受到抑制，可導(dǎo)致

從胃竇向胃體擴(kuò)散

。Selgrad等

發(fā)現(xiàn)，患者的胃竇和胃體

分離菌株之間具有不一致的藥敏結(jié)果，經(jīng)DNA指紋分析顯示兩者的指紋圖譜相似甚至相同，該研究認(rèn)為患者胃內(nèi)不同部位

的異質(zhì)性耐藥不是由混合感染所致，而是由同一菌株變異、擴(kuò)散形成。Farzi等

也認(rèn)為胃體定植的菌株通常是從最初定植胃竇的菌株轉(zhuǎn)移而來(lái)。

根據(jù)設(shè)計(jì)要求，選用斜齒圓柱齒輪作為減速箱的傳動(dòng)齒輪，這是因?yàn)榕c直齒圓柱齒輪相比，在相同條件下斜齒齒輪的尺寸更小。表1所示為選用的斜齒齒輪的相關(guān)參數(shù)，設(shè)計(jì)中采用7級(jí)精度，初定螺旋角β=14°。

胃竇和胃體

之間具有不同的抗生素敏感性已是一種常見(jiàn)現(xiàn)象

。如上所述，這種情況也被稱為內(nèi)部異質(zhì)性耐藥

。一些研究表明此類異質(zhì)性耐藥很可能是導(dǎo)致

治療失敗的原因之一

。此時(shí)，若只檢測(cè)某一部位的藥敏情況，極有可能造成漏診

。因此，理論上講，多部位內(nèi)鏡取樣進(jìn)行

藥敏試驗(yàn)對(duì)于指導(dǎo)其治療是有必要的

。

持久性細(xì)胞是指在抗生素治療下無(wú)法生長(zhǎng)但可以存活的細(xì)胞表現(xiàn)形式，當(dāng)撤去抗生素后，此類細(xì)胞會(huì)恢復(fù)生長(zhǎng)

。Andersson等

認(rèn)為耐受抗生素的持久性細(xì)胞是群體異質(zhì)性的一種特殊情況。也有學(xué)者認(rèn)為持久性形成是細(xì)菌單克隆異質(zhì)性耐藥的潛在機(jī)制

。由于持久性細(xì)胞特性，其存在可造成治療后細(xì)菌感染的復(fù)發(fā)

。

一些研究指出，來(lái)自意大利

和馬來(lái)西亞

的

異質(zhì)性耐藥患者胃內(nèi)不同分離菌株之間的DNA模式存在差異，提示異質(zhì)性耐藥可能是由于不同

菌株感染所致。

綜上所述，在高校籃球運(yùn)動(dòng)發(fā)展的過(guò)程當(dāng)中，如何解決當(dāng)前存在的問(wèn)題，是推動(dòng)高校體育教師培養(yǎng)學(xué)生籃球運(yùn)動(dòng)發(fā)展最根本性的內(nèi)容。因此，切實(shí)的從高校體育教師培養(yǎng)學(xué)生籃球運(yùn)動(dòng)的發(fā)展角度出發(fā)，對(duì)現(xiàn)存的問(wèn)題進(jìn)行解決，具有發(fā)展性的意義。

異質(zhì)性耐藥形成的原因有可能是基因改變，而非感染不同

菌株

。Kao等

通過(guò)分析我國(guó)臺(tái)灣地區(qū)患者體內(nèi)

遺傳多樣性發(fā)現(xiàn)，19例

異質(zhì)性耐藥患者中，僅有1例患者體內(nèi)不同

分離菌株之間的DNA指紋模式差異較大，其余18例異質(zhì)性耐藥患者不同

分離菌株有相同或相似的DNA指紋模式，這提示異質(zhì)性耐藥可能是由于原有菌株基因改變產(chǎn)生，而非感染不同的

菌株所致。Selgrad等(德國(guó))

、Lee等(韓國(guó))

也有相似的研究報(bào)道。

選取2016年9月～2018年7月本院接診的冠心病患者50例作為實(shí)驗(yàn)組，男28例，女22例，年齡41～67歲，平均（50.21±3.69）歲，不穩(wěn)定型心絞痛者21例，穩(wěn)定型心絞痛者18例，心肌梗死者11例。另選取本院同期接診的健康體檢者30例作為對(duì)照組，男16名，女14名，年齡38～67歲，平均（49.83±4.01）歲。所有入選者對(duì)此研究均知情同意，依從性良好，能夠積極配合完成檢驗(yàn)，且有完善的臨床資料，獲得醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。比較兩組的性別構(gòu)成比等一般資料，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

3 H.pylori異質(zhì)性耐藥的診斷

拓展階段分為兩部分：小組講臺(tái)匯報(bào)和教師引導(dǎo)討論。十個(gè)小組依據(jù)抽簽書序，選取代表上臺(tái)匯報(bào)敘述性描寫特征（每組2分鐘）（組內(nèi)一位同學(xué)在黑板書寫句子），匯報(bào)后同學(xué)和老師給予評(píng)價(jià)反饋（每組1分鐘）。所有組匯報(bào)結(jié)束后，教師引導(dǎo)討論給出一個(gè)綜合性的概括，然后結(jié)合文章和同學(xué)一起逐一詳細(xì)找出和解釋敘述性描寫的應(yīng)用（共25分鐘）。最后的5分鐘為整個(gè)講解及授課的綜合答疑和布置作業(yè)。

忽視

的異質(zhì)性耐藥可能會(huì)低估其耐藥的程度，影響根治效果，若能檢測(cè)出

異質(zhì)性耐藥，則可能對(duì)

的根除具有重要意義

。但關(guān)于

異質(zhì)性耐藥的檢測(cè)并不理想，一方面，目前檢測(cè)

耐藥常用的方法仍是細(xì)菌培養(yǎng)后進(jìn)行藥敏試驗(yàn)

。而獲得

主要通過(guò)內(nèi)鏡檢查，由于其侵入性和患者依從性差等原因，許多未進(jìn)行內(nèi)鏡檢查的患者無(wú)法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)

。另一方面，胃內(nèi)不同部位

之間呈現(xiàn)不同的抗生素敏感性已較為常見(jiàn)

，如果僅從胃竇或胃體檢測(cè)其耐藥性，也可能會(huì)低估

的耐藥程度，影響治療效果

。因此，理論上來(lái)講，除了檢測(cè)同一部位細(xì)菌亞群耐藥情況之外，檢測(cè)不同部位

的耐藥情況也是有必要的，這樣不僅可以增加檢測(cè)出

的可能性，同時(shí)也提高了檢出異質(zhì)性耐藥的可能性

。截至現(xiàn)在，國(guó)內(nèi)外并無(wú)標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)

異質(zhì)性耐藥的方法，目前報(bào)道與

異質(zhì)性藥敏檢測(cè)相關(guān)的方法如下。

異質(zhì)性耐藥的常用表型耐藥檢測(cè)方法有紙片擴(kuò)散法、E-test、PAP等。PAP被認(rèn)為是確定異質(zhì)性耐藥的金標(biāo)準(zhǔn)，其是在梯度抗生素濃度為增量的數(shù)個(gè)平板/液體培養(yǎng)基中對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)進(jìn)行計(jì)數(shù)，以完全抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的抗生素濃度與開(kāi)始抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的抗生素濃度之間的差值來(lái)描述細(xì)菌異質(zhì)性耐藥情況

。但若每例患者均進(jìn)行典型的PAP方法，會(huì)耗費(fèi)大量時(shí)間精力，不適用于臨床的快速檢測(cè)

。因此，El-Halfawy等

推薦將紙片擴(kuò)散法或E-test與PAP結(jié)合以提高檢測(cè)效率，方法為：首先進(jìn)行紙片擴(kuò)散法或E-test，若在抑菌區(qū)內(nèi)無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)，則認(rèn)為是均質(zhì)性耐藥。若發(fā)現(xiàn)有生長(zhǎng)的菌株，則初步判定異質(zhì)性耐藥，進(jìn)一步通過(guò)PAP驗(yàn)證，若完全抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的抗生素濃度與開(kāi)始抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的抗生素濃度之間相差>8倍，則認(rèn)為是異質(zhì)性耐藥，若相差值=8倍，則稱為中間異質(zhì)性耐藥(intermediate heterogeneity)，若≤4倍，則認(rèn)為是均質(zhì)性耐藥，但該研究推薦的檢測(cè)方法未闡述差值在4～8倍時(shí)所表示的耐藥情況。

分子檢測(cè)具有快速、無(wú)需細(xì)菌培養(yǎng)等優(yōu)點(diǎn)，但需要明確耐藥位點(diǎn)，目前僅適用于

對(duì)克拉霉素和喹諾酮類抗生素的藥敏檢測(cè)

。檢測(cè)異質(zhì)性耐藥的主要方法是基于PCR，PCR在檢測(cè)異質(zhì)性耐藥方面有一定的優(yōu)勢(shì)，但也存在特異性低或假陰性的情況

。目前報(bào)道有關(guān)

異質(zhì)性耐藥的分子檢測(cè)方法如下。

以案例推動(dòng)、示范引領(lǐng)抓落實(shí)，重點(diǎn)打造一批省內(nèi)甚至國(guó)內(nèi)叫得響、立得住、社會(huì)公認(rèn)的水利工程先進(jìn)典型，總結(jié)一批可復(fù)制、可借鑒、可推廣的成功經(jīng)驗(yàn)。

區(qū)域上出露地層有青白口系、震旦系、寒武系、白堊系和第四系。其中冷家溪群大面積出露于幕阜山復(fù)式巖體西南部, 屬于揚(yáng)子陸塊變質(zhì)褶皺基底，為一套淺變質(zhì)碎屑巖系[3]。

3.2.1 隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA標(biāo)記-PCR(random amplified polymorphic DNA markers-PCR, RAPD-PCR)：RAPD-PCR被認(rèn)為是鑒別

分離株的一種簡(jiǎn)單、快速、低成本的理想方法

。該方法能夠區(qū)分不同菌株之間的異質(zhì)性耐藥

。但這種方法不能提供有關(guān)其毒力特性和遺傳進(jìn)化的信息

。

3.2.2 ddPCR：Sun等

發(fā)現(xiàn)，ddPCR是一種較為靈敏的檢測(cè)方法，可用于檢測(cè)

對(duì)克拉霉素耐藥的異質(zhì)性，而且具有無(wú)創(chuàng)的特點(diǎn)。該方法可以同時(shí)對(duì)胃黏膜標(biāo)本和糞便標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，且該報(bào)道顯示其對(duì)兩種標(biāo)本

感染的檢出率均接近

C尿素呼氣試驗(yàn)。

4 總結(jié)與展望

綜上所述，

的異質(zhì)性耐藥現(xiàn)象其實(shí)并不少見(jiàn)

。雖然一些研究表明異質(zhì)性耐藥的存在可能對(duì)臨床根除

的影響有限

。但隨著對(duì)

異質(zhì)性耐藥研究的深入，不少研究提示忽視異質(zhì)性耐藥可能會(huì)影響

的根除效果，應(yīng)給予重視

。但到目前為止，仍然缺少

異質(zhì)性耐藥的標(biāo)準(zhǔn)定義和檢測(cè)方法，這限制了

異質(zhì)性耐藥的進(jìn)一步研究

。同時(shí)，由于

異質(zhì)性耐藥與根除治療失敗相關(guān)的臨床證據(jù)仍然缺乏，導(dǎo)致臨床對(duì)于異質(zhì)性耐藥的重視程度依舊不足

。因此，有必要進(jìn)行大樣本的臨床研究，全面系統(tǒng)地探究

對(duì)常用抗生素異質(zhì)性耐藥的發(fā)生率及對(duì)根除治療的影響。此外，類球體形態(tài)可能是

的一種持久形式，其對(duì)根除治療的負(fù)面影響需進(jìn)一步探究

。

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