CK19、Ki67、CK7在肝細(xì)胞癌組織中的表達(dá)

周錦宏 崇楊

原發(fā)性肝細(xì)胞癌(HCC)發(fā)病初期不易被察覺，確診時(shí)多處于中晚期，難以根治，因此早期篩查十分必要[1]。近年來臨床對(duì)腫瘤的研究逐漸從生理層面深入至基因遺傳組學(xué)、細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和分子生物學(xué)，腫瘤相關(guān)蛋白特異性免疫組織染色逐漸應(yīng)用于評(píng)估腫瘤發(fā)生和預(yù)后[2]。HCC患者體內(nèi)含有少量卵圓細(xì)胞，其既可分化表達(dá)為甲胎蛋白，又可表達(dá)細(xì)胞角蛋白19(CK19)和細(xì)胞角蛋白7(CK7)，增殖細(xì)胞核抗原(Ki67)參與調(diào)控血管新生、腫瘤細(xì)胞增殖，已有研究發(fā)現(xiàn)CK19、CK7、Ki67與腫瘤發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后具有較大關(guān)聯(lián)[3-4]。本研究分析HCC患者癌組織及不同病理特征中CK19、Ki67、CK7表達(dá)情況，探討其臨床意義。

資料與方法

一、一般資料

選取泰州市第二人民醫(yī)院2016年3月至2018年3月65例HCC患者作為研究對(duì)象，年齡(62.5±6.2)歲；男38例，女27例。TNM分期[5]：Ⅰ～Ⅱ期23例，Ⅲ～Ⅳ期42例；組織分化：低分化41例，中/高分化24例；腫瘤大小為(4.26±2.16)mm；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移30例；被膜浸潤(rùn)29例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合HCC診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]，并經(jīng)病理檢查確診；②對(duì)象均知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并晚期肝病(肝功能衰竭、肝腹水等)；②合并其他重要臟器損傷；③凝血功能障礙；④伴有其他腫瘤；⑤彌散性肝癌。本研究獲院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

二、方法

將所有標(biāo)本組織制成4 μm切片，行蘇木素-伊紅染色和免疫組化染色。采用 Leica BOND全自動(dòng)免疫組化及原位雜交染色，CK19、Ki67、CK7試劑為儀器配套試劑，CX41光學(xué)顯微鏡(日本Olympus)。染色結(jié)果判斷：CK19、CK7表達(dá)于腫瘤細(xì)胞質(zhì)，Ki67表達(dá)于腫瘤細(xì)胞核，陽(yáng)性細(xì)胞呈淺黃色至棕黃色顆粒。400倍光鏡下隨機(jī)抽取5個(gè)視野，每視野至少對(duì)100個(gè)細(xì)胞計(jì)數(shù)，計(jì)算陽(yáng)性占比，細(xì)胞陽(yáng)性率<10%診斷為陰性；細(xì)胞陽(yáng)性率≥10%診斷為陽(yáng)性。出院患者隨訪3年，每半年1次。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料以(%)表示，組間行χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、癌組織和癌旁組織中CK19、Ki67、CK7表達(dá)

癌組織中CK19、Ki67、CK7陽(yáng)性檢出率較癌旁組織中高(P<0.05)。見表1。

表1 癌組織和癌旁組織中CK19、Ki67、CK7表達(dá)對(duì)比[份(%)]

二、不同臨床病理特征HCC患者CK19、Ki67、CK7陽(yáng)性檢出率比較

不同年齡、性別、腫瘤大小患者的CK19、Ki67、CK7陽(yáng)性檢出率對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期、組織低分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、有被膜浸潤(rùn)患者CK19、Ki67、CK7陽(yáng)性檢出率較高(P<0.05)。見表2。

表2 不同臨床病理特征HCC患者CK19、Ki67、CK7陽(yáng)性檢出率比較[例(%)]

三、HCC患者3年預(yù)后

對(duì)所有患者隨訪3年，兩組均無失訪者，3年后CK19陽(yáng)性、CK19陰性死亡各17例、5例，存活率：34.52%(9/26)、87.18%(34/39)，差異明顯(χ2=19.250，P<0.01)；Ki67陽(yáng)性、Ki67陰性死亡各20例、2例，存活率：58.33%(28/48)、88.24%(15/17)，差異明顯(χ2=4.767，P=0.029)；CK7陽(yáng)性、CK7陰性死亡各19例、3例，存活率：58.70%(27/46)、84.21%(16/19)，差異明顯(χ2=3.910，P=0.048)。

討 論

HCC以男性多發(fā)，全球范圍內(nèi)每年新增HCC約有78萬(wàn)例，HCC多發(fā)生于亞洲，我國(guó)HCC發(fā)生率約占全球50%[7]。HCC極易發(fā)生廣泛轉(zhuǎn)移，使治療難度和患者死亡風(fēng)險(xiǎn)增加，早期篩查并及時(shí)治療是提高HCC生存率的重要措施[8]。腫瘤的發(fā)生發(fā)展是多種基因作用的結(jié)果，隨著近年來臨床對(duì)腫瘤遺傳學(xué)方面的深入研究，各種新的肝癌血清標(biāo)志物逐漸在臨床推廣應(yīng)用，這些標(biāo)志物為臨床診斷、靶向治療提供依據(jù)[9-10]。

本研究中，癌組織中CK19、Ki67、CK7陽(yáng)性檢出率較癌旁組織中高，且其表達(dá)與腫瘤分期、組織分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、被膜浸潤(rùn)密切相關(guān)。CK共30種基因型，位于上皮細(xì)胞及以上皮為來源的腫瘤細(xì)胞骨架系統(tǒng)，對(duì)維持細(xì)胞完整性及連續(xù)性具有重要作用，在上皮源性類腫瘤中多表達(dá)為陽(yáng)性[11-12]。CK7具有調(diào)控腫瘤轉(zhuǎn)移的作用，其陽(yáng)性表達(dá)會(huì)促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移，因此CK7陽(yáng)性患者病灶為惡性可能性大大提高；CK19參與保護(hù)抗體的生成、腫瘤細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移[13]。CK7和CK19多在低分化的HCC中呈陽(yáng)性，輔助腫瘤發(fā)生和發(fā)展，CK7、CK19陽(yáng)性的肝癌惡性程度高，患者預(yù)后差[14]。

Ki67是一種核抗體，細(xì)胞周期不同Ki67表達(dá)差異明顯，一般情況下Ki67陽(yáng)性率越高，其腫瘤分期越晚，腫瘤為惡性可能性越大，患者腫瘤的組織分化、轉(zhuǎn)移、被膜浸潤(rùn)等方面會(huì)往腫瘤惡性趨勢(shì)發(fā)展[15-16]。本研究中，CK19、Ki67、CK7陽(yáng)性HCC患者3年生存率較陰性患者低。

綜上，HCC患者腫瘤組織中CK19、Ki67、CK7陽(yáng)性表達(dá)率高，CK19、Ki67、CK7陽(yáng)性患者腫瘤惡性程度相對(duì)較高。