龔鎮(zhèn)洪, 余彬彬, 2, 3, 黃盼盼, 汪曉麗, 錢曉睛
(1.揚(yáng)州大學(xué)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部耕地質(zhì)量監(jiān)測(cè)與評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 揚(yáng)州 225127; 2.南開大學(xué)環(huán)境污染過(guò)程與基準(zhǔn)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津 300071; 3.農(nóng)業(yè)部產(chǎn)地環(huán)境污染防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/天津市農(nóng)業(yè)環(huán)境與農(nóng)產(chǎn)品安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津 300071; 4.山東省東營(yíng)市生態(tài)環(huán)境局,山東 東營(yíng) 257100)
近年來(lái),畜牧業(yè)經(jīng)營(yíng)越來(lái)越集約化,獸用抗生素被大量用于預(yù)防或治療動(dòng)物疾病,其中約有60%~90%的抗生素及其代謝產(chǎn)物由于無(wú)法被動(dòng)物完全吸收,通過(guò)排泄的形式排出,畜禽糞便又作為有機(jī)肥施入土壤,從而導(dǎo)致土壤中抗生素的高殘留[1]??股卦谑澜绺鲊?guó)的使用量急劇上升,2030年預(yù)計(jì)將達(dá)到2.0×105t[2],中國(guó)、俄羅斯、南非、巴西、和印度的抗生素使用量估計(jì)將增加99%,幾乎是這些國(guó)家預(yù)計(jì)人口增長(zhǎng)的7倍[3]。世界范圍內(nèi),不同土壤環(huán)境中被廣泛檢出喹諾酮類[4]、四環(huán)素類[5]、磺胺類[1]和大環(huán)內(nèi)酯類[6]等抗生素,抗生素進(jìn)入土壤環(huán)境后,植物的吸收作用是抗生素重要的遷移轉(zhuǎn)化步驟。即使暴露在低劑量的受污染的土壤中,植物也會(huì)積累抗生素,最后通過(guò)食物鏈的方式影響人類健康[7]。大環(huán)內(nèi)酯類抗生素是僅次于β-內(nèi)酰胺類抗生素的第二大常用抗生素。2013年,中國(guó)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素使用量為4.22×104t,占抗生素總消費(fèi)量的26%[8]。羅紅霉素作為一種典型的大環(huán)內(nèi)脂類抗生素被添加到畜禽飼料中作為畜禽的促生長(zhǎng)劑,有研究者對(duì)珠江口水產(chǎn)養(yǎng)殖區(qū)的水和沉積物中抗生素殘留進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)脫水紅霉素質(zhì)量濃度范圍為0.97~85.25 ng/g[9],另外有研究者發(fā)現(xiàn)雞糞、牛糞中羅紅霉素質(zhì)量分?jǐn)?shù)范圍分別為1.21~1.77 mg/kg和1.23~1.52 mg/kg[10]。
供試小麥(TriticumaestivumL.)品種為徐麥33,由江蘇省連云港市種子站提供。羅紅霉素(Roxithromycin, ROX)購(gòu)于上海生工生物工程公司,純度98%。小麥種子用3%的雙氧水浸泡,消毒20 min,經(jīng)去離子水反復(fù)沖洗后,將種子放在鋁盤中,蓋上去離子水潤(rùn)濕的濾紙,放入培養(yǎng)箱中催芽,培養(yǎng)箱溫度設(shè)置為(25±1) ℃。
待種子完全露白后,移入ROX質(zhì)量濃度為0 mg/L、0.1 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L、10.0 mg/L 5個(gè)水平的1/4霍格蘭氏營(yíng)養(yǎng)液中培養(yǎng),待培養(yǎng)到兩葉一心后,用含相同ROX質(zhì)量濃度的1/2霍格蘭氏營(yíng)養(yǎng)液培養(yǎng)。全霍格蘭氏營(yíng)養(yǎng)液配方為:Ca(NO3)24.0 mmol/L,KNO35.0 mmol/L,NH4NO31.0 mmol/L,KH2PO41.0 mmol/L,MgSO42.0 mmol/L,F(xiàn)e-EDTA 0.5 mmol/L,KI 2.5×10-5mmol/L,HBO35×10-4mmol/L,MnSO47.4×10-4mmol/L,ZnSO45×10-5mmol/L,Na2MoO41×10-6mmol/L,CuSO41.6×10-7mmol/L,CoCl21×10-7mmol/L,pH為5.5。每3 d更換一次營(yíng)養(yǎng)液,并且每小時(shí)間歇通氣20 min。
吸收試驗(yàn)采用質(zhì)量濃度梯度法[18]:小麥苗長(zhǎng)到3葉1心時(shí),將培養(yǎng)液換為含5個(gè)質(zhì)量濃度水平ROX(0 mg/L、0.1 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L和10.0 mg/L)的無(wú)氮營(yíng)養(yǎng)液,將不含ROX的無(wú)氮營(yíng)養(yǎng)液作為對(duì)照,在其中耗竭2 d,使植株處于氮素養(yǎng)分饑餓狀態(tài),支持電解質(zhì)為0.2 mmol/L CaSO4。
采用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,Duncan法進(jìn)行多重比較,Origin軟件進(jìn)行作圖。圖、表中所有數(shù)據(jù)均為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差,顯著水平為P<0.05。
圖1 不同羅紅霉素(ROX)質(zhì)量濃度下小麥根系的硝態(tài)氮吸收動(dòng)力學(xué)曲線(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)Fig.1 Absorption kinetics of nitrate nitrogen in wheat roots under different concentrations of roxithromycin (ROX)
圖2 不同羅紅霉素(ROX)質(zhì)量濃度下小麥根系對(duì)銨態(tài)氮的吸收動(dòng)力學(xué)曲線(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)Fig.2 Absorption kinetics of ammonium nitrogen in wheat roots under different concentrations of ROX
表1 不同羅紅霉素(ROX)質(zhì)量濃度下小麥吸收的動(dòng)力學(xué)參數(shù)(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)
表2 不同ROX質(zhì)量濃度下小麥吸收的動(dòng)力學(xué)參數(shù)(平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差)