潘康鎖，代德華，侯佳琪，辛怡霖，唐 熙，李青云，張 欣，祁會彩，李引乾*

(1.陜西省農(nóng)業(yè)檢驗檢測中心，陜西西安 710016；2.陜西省動物衛(wèi)生與屠宰管理站，陜西西安 710016；3.西北農(nóng)林科技大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，陜西楊陵 712100；4.西安市農(nóng)業(yè)綜合執(zhí)法支隊未央大隊，陜西西安 710016)

奶牛乳房炎是危害奶牛養(yǎng)殖最普遍的疾病之一，全球約有30%的奶?；加腥榉垦祝?jīng)濟(jì)損失嚴(yán)重[1]。乳房炎根據(jù)臨床癥狀分為臨床型乳房炎和隱型乳房炎。病原微生物感染是導(dǎo)致乳房炎的主要病因。目前已報道致奶牛乳房炎的病原微生物共有100多種微生物，其中主要為金黃色葡萄球菌、鏈球菌和大腸埃希氏菌[2]。近年來，抗生素在防治奶牛乳房炎方面發(fā)揮了重要作用，但是抗生素治療易造成藥物殘留，且耐藥菌株變多，影響了抗生素的治療效果[3]。而中藥制劑有辨證施治、標(biāo)本兼治、天然溫和、低毒低殘留的特點，具有良好的應(yīng)用前景[4]，且中藥制劑不易產(chǎn)生耐藥性，體內(nèi)代謝較快、高效低毒、無殘留，可替代化學(xué)合成藥物用于奶牛乳房炎的防治。因此，研制開發(fā)中藥制劑具有廣闊的發(fā)展前景。本試驗選用高、中、低3個劑量組公英翹蘆散與公英散對奶牛乳房炎進(jìn)行臨床療效試驗，以期對比觀察公英翹蘆散對奶牛乳房炎臨床治療效果。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗用動物 試驗用動物選由西北農(nóng)林科技大學(xué)畜牧站提供患有臨床乳房炎的奶牛，主要表現(xiàn)為患病乳區(qū)奶汁異常(出現(xiàn)絮片、凝塊或呈水樣)，乳房有不同程度的紅、腫、熱、痛癥狀，產(chǎn)奶量下降，但無明顯的全身癥狀。

1.1.2 試驗藥品 供試品：公英翹蘆散(批號：191201)，含蒲公英 30 g，連翹 20 g，王不留行30 g，路路通20 g，漏蘆10 g，黃芩20 g，當(dāng)歸20 g，川芎10 g，白術(shù)10 g，乳香10 g，沒藥10 g，皂角刺10 g，共12味中藥，內(nèi)蒙古華天制藥有限公司產(chǎn)品。對照藥物：公英散(批號：191121)，含蒲公英60 g，金銀花60 g，連翹60 g，絲瓜絡(luò)30 g，通草25 g，芙蓉葉25 g，貝母30 g，共7味中藥。

1.1.3 主要儀器 KQ-500 DE型數(shù)控超聲波清洗器，江蘇省昆山市超聲儀器有限公司產(chǎn)品；不銹鋼手提式壓力蒸氣滅菌器，上海申安醫(yī)療器械廠產(chǎn)品；PHS-精密pH計和超凈工作臺，上海精密科學(xué)有限公司產(chǎn)品；真空泵和真空蓋式除菌過濾器，Pall-Gelman 公司產(chǎn)品；DGG-9053A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海森信實驗儀器有線公司產(chǎn)品；低速離心機(jī)，湖南凱達(dá)科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；高速離心機(jī)，美國貝克曼公司產(chǎn)品；恒溫水浴鍋，天津市泰斯特儀器有限公司產(chǎn)品；便攜式體細(xì)胞計數(shù)儀C-Reader，韓國Digital Bio Technology公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 試驗分組 將臨床診斷確診為乳房炎的40頭奶牛，隨機(jī)分為公英翹蘆散給藥組和對照藥物給藥組。公英翹蘆散給藥組，設(shè)高、中(推薦劑量)、低3個劑量試驗組，每組試驗動物10頭，并記錄患病乳區(qū)數(shù)。藥物對照組，即“公英散”組，按照推薦劑量給藥，試驗動物10頭，并記錄患病乳區(qū)數(shù)。

1.2.2 用法用量 給藥前，將藥物散劑與3倍量水混合均勻，經(jīng)胃管灌胃給藥，1日1次，7 d為1個療程。經(jīng)2個療程未治愈者改用其他藥物治療。參照文獻(xiàn)[5-6]，公英翹蘆散給藥組，設(shè)高、中(即產(chǎn)品說明書中推薦劑量)、低3個試驗組，每次分別經(jīng)胃管灌服公英翹蘆散600 g、300 g、150 g，1日1次，7 d為1個療程。最多治療2個療程。藥物對照組，即“公英散”組，每次經(jīng)胃管灌服“公英散” 300 g，1日1次，7 d為1個療程。最多治療2個療程。

1.2.3 臨床型奶牛乳房炎的納入標(biāo)準(zhǔn) 患奶牛乳房炎的奶牛一般出現(xiàn)以下臨床癥狀：乳汁異常、乳房的大小、質(zhì)地和溫度出現(xiàn)變化，患區(qū)表現(xiàn)疼痛，根據(jù)病情不同還常伴有不同程度的全身反應(yīng)。且在治療前未使用其它藥物治療，均可作為病例收治。

1.2.4 治療后各組奶牛有效乳區(qū)數(shù)統(tǒng)計 在乳房炎奶牛治療7 d后，綜合考察患病奶牛的整體狀況與感染乳區(qū)的局部癥狀，記錄各組奶牛有效乳區(qū)數(shù)。

1.2.5 乳樣體細(xì)胞數(shù)檢測 在乳房炎奶牛治療前后，分別采集并測定乳液中體細(xì)胞數(shù)(SCC)。采樣時先擠掉前幾把奶，隨后擠取約30 mL奶于50 mL離心管中，采用便攜式體細(xì)胞檢測儀對其進(jìn)行檢測。

1.2.6 奶牛乳房炎的療效判定標(biāo)準(zhǔn) 對確診患乳房炎的奶牛按1.2.2的方法給藥后，觀察治療效果，并按以下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行治療效果評定[7]。①治愈：臨床癥狀消失，乳房恢復(fù)正常，產(chǎn)乳量恢復(fù)，乳汁外觀正常，乳汁體細(xì)胞數(shù)降至正常范圍(50萬/mL以下)，治愈率=(組內(nèi)治愈乳區(qū)數(shù)/組內(nèi)用藥乳區(qū)數(shù))× 100%；②顯效：臨床癥狀基本消失，乳房恢復(fù)正常，產(chǎn)乳量恢復(fù)，乳汁外觀正常，實驗室檢查，各種指標(biāo)接近正常，顯效率=(組內(nèi)顯效乳區(qū)數(shù)/組內(nèi)用藥乳區(qū)數(shù))× 100%；③有效：臨床癥狀減輕，乳汁外觀正常，產(chǎn)乳量恢復(fù)，乳汁體細(xì)胞數(shù)下降至50萬/mL～100萬/mL，有效率=(組內(nèi)有效乳區(qū)數(shù)/組內(nèi)用藥乳區(qū)數(shù))× 100%；④無效：各項指標(biāo)均未改善，甚至病情加重，無效率=(組內(nèi)無效乳區(qū)數(shù)/組內(nèi)用藥乳區(qū)數(shù))× 100%。

1.2.7 統(tǒng)計學(xué)處理方法 各項檢測數(shù)據(jù)均用SPSS軟件(SPSS 17.0版)進(jìn)行單因素方差分析統(tǒng)計學(xué)處理，分析各組間用藥后乳汁體細(xì)胞數(shù)的差異顯著性，用卡方檢驗對各組的治愈率、顯效率、有效率和無效率進(jìn)行差異顯著性比較。

2 結(jié)果

2.1 治療前、后患乳房炎奶牛乳區(qū)統(tǒng)計情況

治療前40頭患臨床型乳房炎的奶牛分成4組及統(tǒng)計各組奶牛的患病乳區(qū)數(shù)見表1，治療后各組臨床型奶牛乳房炎有效乳區(qū)數(shù)情況見表2。

表1 治療前奶牛乳房炎患病乳區(qū)統(tǒng)計結(jié)果

表2 治療后統(tǒng)計奶牛有效乳區(qū)數(shù)

2.2 公英翹蘆散對體細(xì)胞數(shù)的影響

本試驗在分別給予患乳房炎的奶牛不同劑量的公英翹蘆散和公英散后，對40頭患乳房炎奶牛治療前后的牛乳進(jìn)行體細(xì)胞數(shù)(SCC)檢測，連續(xù)7 d，結(jié)果見表3。治療前4組奶牛乳樣體細(xì)胞數(shù)無顯著性差異(P>0.05)。治療后(7 d)4組均與治療前有顯著性差異(P<0.01)，公英翹蘆散高、中劑量組治療效果明顯優(yōu)于公英散對照組，且差異極顯著(P<0.01)，而公英翹蘆散低劑量組則與公英散對照組之間則無顯著性差異(P>0.05)。

表3 乳房炎奶牛乳汁SCC檢測結(jié)果(萬個/mL)

2.3 臨床治療效果

經(jīng)過7 d的臨床治療，40頭乳房炎奶牛的臨床治療效果見表4。公英翹蘆散高、中劑量組治愈效果明顯，有效治愈率均達(dá)100%，低劑量組有效治愈率為88.89%，稍高于公英散對照組(83.33%)，表明公英翹蘆散對奶牛乳房炎有較好的治療效果。

表4 公英翹蘆散與公英散對奶牛乳房炎患病乳區(qū)的臨床治療效果

3 討論

奶牛乳房炎給養(yǎng)殖業(yè)帶來了極大的損失，中獸醫(yī)認(rèn)為乳房炎即乳癰，是熱、濕、氣、血郁結(jié)不散，化而為炎，應(yīng)以清熱解毒、抗菌消炎、通經(jīng)活血、活絡(luò)通乳為治療原則[4]。公英翹蘆散是由蒲公英、黃芩、連翹、當(dāng)歸等12味中藥組成，其中，蒲公英具有消癰散結(jié)、抗菌消炎的作用，能夠疏通阻塞的乳腺管，起到散結(jié)化瘀、利尿催乳的作用[8]。導(dǎo)致奶牛乳房炎的病原菌主要包括無乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌[2,9]，蒲公英提取物與多種抗生素聯(lián)合使用，對金黃色葡萄球菌的體外抑菌具有良好的協(xié)同作用，可顯著降低抗生素的用量[10]。黃芩對大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌等多種細(xì)菌均有一定的抑制作用[11]。王不留行性苦、平，歸肝、胃經(jīng)，有活血通經(jīng)，下乳消腫的功效，其中主要含有三萜皂苷、環(huán)肽、黃酮類化合物等成分，具有催乳、抗氧化等作用[12]。當(dāng)歸味甘，溫，長期以來被用作活血潤腸，調(diào)經(jīng)止痛，其主要成分當(dāng)歸多糖具有重要的體內(nèi)外藥理作用，如增強免疫、抗氧化、保肝等[13]。以黃芪、當(dāng)歸及王不留行為主藥的芪王催乳散可有效治療奶牛隱性乳腺炎，且可有效改善奶牛乳樣品質(zhì)[14]。

公英散是我國獸醫(yī)臨床治療奶牛乳房炎的經(jīng)典中藥方劑，具有清熱解毒，散結(jié)消腫的功效[15]，本試驗中，公英翹蘆散對奶牛乳房炎的治療效果明顯優(yōu)于公英散，通過灌胃給藥，公英翹蘆散高、中劑量組的患乳房炎奶牛臨床癥狀基本消失，乳汁正常，體細(xì)胞數(shù)也降至正常范圍，有效治愈率均達(dá)到100%，低劑量組患病奶牛的臨床癥狀也普遍消失，乳汁體細(xì)胞數(shù)較治療前顯著減少(P<0.01)。高、中劑量組對患病奶牛乳樣體細(xì)胞的治療效果顯著優(yōu)于公英散組(P<0.01)，有效治愈率也均高于公英散組，表明公英翹蘆散對奶牛乳房炎具有良好的治療效果。