抗Ro-52抗體對(duì)抗黑色素瘤分化相關(guān)基因5抗體陽(yáng)性皮肌炎患者發(fā)生快速進(jìn)展型間質(zhì)性肺疾病及其預(yù)后的影響

康悅，劉紅，張國(guó)瑞，余亞麗

皮肌炎（dermatomyositis，DM）是以累及皮膚、橫紋肌為特征的自身免疫性結(jié)締組織病，DM患者容易合并多種并發(fā)癥，其中以間質(zhì)性肺病最為常見(jiàn)且該類患者預(yù)后最差［1］。研究顯示，在DM患者中抗黑色素瘤分化相關(guān)基因5（melanoma differentiation associated gene 5，MDA5）抗體的出現(xiàn)常伴隨著快速進(jìn)展型間質(zhì)性肺疾?。╮apidly progressive interstitial lung disease，RP-ILD）［1-2］。研究指出，肌炎相關(guān)性抗體（myositis associated antibodies，MAA）與DM患者疾病進(jìn)展及預(yù)后明顯相關(guān)，抗Ro-52抗體即是一種常見(jiàn)的MAA，其與抗MDA5抗體常共同出現(xiàn)［3-4］。雖然抗Ro-52抗體獨(dú)自出現(xiàn)在DM患者中的臨床意義仍存在爭(zhēng)議，但有研究者認(rèn)為若其與抗MDA5抗體同時(shí)出現(xiàn)，可能提示DM患者預(yù)后不良［5-6］。同時(shí)，抗Ro-52抗體的出現(xiàn)也提示DM患者對(duì)傳統(tǒng)免疫抑制劑抵抗，應(yīng)盡早采取生物治療或者分子靶向治療［5-8］。目前，關(guān)于抗Ro-52抗體對(duì)抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者發(fā)生RP-ILD的早期診斷價(jià)值及預(yù)后影響的報(bào)道較少。本研究旨在分析抗Ro-52抗體對(duì)抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者發(fā)生RP-ILD及其預(yù)后的影響，以期為這類患者的診療提供幫助。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 回顧性選取2019年10月至2021年12月于鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院確診為抗MDA5抗體陽(yáng)性的DM患者142例為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）滿足1975年BOHAN等［9］提出的DM診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）抗MDA5抗體檢測(cè)為陽(yáng)性（抗MDA5抗體滴度≥32 U/ml）。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）藥物、感染或其他疾病引起的間質(zhì)性肺??；（2）合并其他結(jié)締組織??；（3）合并惡性腫瘤。本研究經(jīng)鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)審核通過(guò)（2022-KY-0326）。

1.2 分組方法 根據(jù)RP-ILD發(fā)生情況，將患者分為RP-ILD組（發(fā)生RP-ILD，53例）和非RP-ILD組（未發(fā)生RP-ILD，89例）。RP-ILD診斷標(biāo)準(zhǔn)為：影像學(xué)表現(xiàn)、肺部癥狀在3個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)加重或肺功能急劇惡化如用力肺活量（forced vital capacity，F(xiàn)VC）較前一次檢測(cè)結(jié)果下降＞10%或動(dòng)脈氧分壓較前一次檢測(cè)結(jié)果下降＞10 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）［10］。根據(jù)抗MDA5抗體滴度，將患者分為弱陽(yáng)性組（抗MDA5抗體滴度為32～89 U/ml，22例）、中陽(yáng)性組（抗MDA5抗體滴度為90～149 U/ml，32例）和強(qiáng)陽(yáng)性組（抗MDA5抗體滴度≥150 U/ml，88例）。

1.3 臨床資料收集 收集患者臨床資料，包括一般資料（年齡、性別）、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果〔淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、肌酸激酶、乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）、鐵蛋白、紅細(xì)胞沉降率、CRP、涎液化糖鏈抗原6（krebs von den lungen-6，KL-6）、抗Ro-52抗體陽(yáng)性情況〕、臨床表現(xiàn)（皮疹、Heliotrope征、Gottron征、技工手、皮膚異色征、皮膚潰瘍、發(fā)熱、關(guān)節(jié)疼痛）及生存情況（2022-02-28采用電話回訪患者生存情況）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 26.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以（±s）表示，組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，非正態(tài)分布的計(jì)量資料以Μ（Ρ25，Ρ75）表示，組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以相對(duì)數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher's確切概率法；采用多因素Logistic回歸分析探討抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者發(fā)生RP-ILD的影響因素；采用Kaplan-Meier法繪制生存曲線，生存率的比較采用Log-rank檢驗(yàn)。雙側(cè)檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 RP-ILD組和非RP-ILD組臨床資料比較 RP-ILD組和非RP-ILD組年齡、性別、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、肌酸激酶、鐵蛋白、紅細(xì)胞沉降率、CRP、KL-6及有皮疹、Heliotrope征、Gottron征、技工手、皮膚異色征、皮膚潰瘍、發(fā)熱、關(guān)節(jié)疼痛者占比比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；RP-ILD組LDH、抗Ro-52抗體陽(yáng)性率高于非RP-ILD組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 RP-ILD組和非RP-ILD組臨床資料比較Table 1 Comparison of clinical data between RP-ILD group and non-RP-ILD group

2.2 抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者發(fā)生RP-ILD影響因素的多因素Logistic回歸分析 以LDH、抗Ro-52抗體陽(yáng)性情況為自變量，抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者RP-ILD發(fā)生情況為因變量（賦值：發(fā)生=1，未發(fā)生=0），進(jìn)行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，抗Ro-52抗體陽(yáng)性是抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者發(fā)生RP-ILD的危險(xiǎn)因素（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者發(fā)生RP-ILD影響因素的多因素Logistic回歸分析Table 2 Multivariate Logistic regression analysis of influencing factors of RP-ILD in anti-MDA5 antibody positive DM patients

2.3 弱陽(yáng)性組、中陽(yáng)性組、強(qiáng)陽(yáng)性組中抗Ro-52抗體陽(yáng)性患者與抗Ro-52抗體陰性患者RP-ILD發(fā)生率比較 弱陽(yáng)性組、中陽(yáng)性組、強(qiáng)陽(yáng)性組中，抗Ro-52抗體陽(yáng)性率依次為50.0%（11/22）、56.3%（18/32）、63.6%（56/88）；三組抗Ro-52抗體陽(yáng)性率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=1.586，P=0.452）。弱陽(yáng)性組中，抗Ro-52抗體陽(yáng)性患者RP-ILD發(fā)生率為5/11，與抗Ro-52抗體陰性患者的4/11比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=1.000）；中陽(yáng)性組中，抗Ro-52陽(yáng)性組RP-ILD發(fā)生率為12/18，高于抗Ro-52抗體陰性患者的3/14，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.016）；強(qiáng)陽(yáng)性組中，抗Ro-52抗體陽(yáng)性患者RP-ILD發(fā)生率為41.1%（23/56），高于抗Ro-52抗體陰性患者的18.8%（6/32），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.592，P=0.032）。

2.4 生存分析 弱陽(yáng)性組6、12個(gè)月生存率分別為86.1%、81.3%，中陽(yáng)性組6、12個(gè)月生存率分別為83.9%、65.7%，強(qiáng)陽(yáng)性組6、12個(gè)月生存率分別為75.4%、46.0%。弱陽(yáng)性組、中陽(yáng)性組、強(qiáng)陽(yáng)性組生存率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=8.538，P=0.014），見(jiàn)圖1。

圖1 弱陽(yáng)性組、中陽(yáng)性組、強(qiáng)陽(yáng)性組的生存曲線Figure 1 Survival curve of weak positive group，moderate positive group and strong positive group

抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者中，抗Ro-52抗體陽(yáng)性患者6、12個(gè)月生存率分別為70.7%、46.3%，抗Ro-52抗體陰性患者6、12個(gè)月生存率分別為98.2%、92.3%?？筂DA5抗體陽(yáng)性DM患者中，抗Ro-52抗體陽(yáng)性患者生存率低于抗Ro-52抗體陰性患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=10.938，P=0.001），見(jiàn)圖2A。

弱陽(yáng)性組中，抗Ro-52抗體陽(yáng)性患者6、12個(gè)月生存率分別為80.8%、70.7%，抗Ro-52抗體陰性患者6、12個(gè)月生存率均為90.9%。弱陽(yáng)性組中，抗Ro-52抗體陽(yáng)性患者與抗Ro-52抗體陰性患者生存率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=1.228，P=0.268），見(jiàn)圖2B。

中陽(yáng)性組中，抗Ro-52抗體陽(yáng)性患者6、12個(gè)月生存率分別為72.2%、42.3%，抗Ro-52抗體陰性患者6、12個(gè)月生存率分別為90.0%、75.0%。中陽(yáng)性組中，抗Ro-52抗體陽(yáng)性患者生存率低于抗Ro-52抗體陰性患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.758，P=0.016），見(jiàn)圖2C。

強(qiáng)陽(yáng)性組中，抗Ro-52抗體陽(yáng)性患者6、12個(gè)月生存率分別為68.0%、39.4%，抗Ro-52抗體陰性患者6、12個(gè)月生存率分別為89.3%、57.9%。強(qiáng)陽(yáng)性組中，抗Ro-52抗體陽(yáng)性患者與抗Ro-52抗體陰性患者生存率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=2.983，P=0.084），見(jiàn)圖2D。

圖2 抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者、弱陽(yáng)性組、中陽(yáng)性組、強(qiáng)陽(yáng)性組中抗Ro-52抗體陽(yáng)性患者與抗Ro-52抗體陰性患者的生存曲線Figure 2 Survival curve of anti-Ro-52 antibody positive patients and anti-Ro-52 antibody negative patients in anti-MDA5 antibody positive DM patients，weak positive group，moderate positive group and strong positive group

3 討論

抗MDA5抗體陽(yáng)性DM是一種預(yù)后不良的特殊類型DM，多見(jiàn)于東亞人群，其易合并RP-ILD且傳統(tǒng)免疫抑制劑對(duì)其治療效果差，導(dǎo)致患者死亡率較高［11-12］。目前關(guān)于抗Ro-52抗體對(duì)抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者發(fā)生RP-ILD及預(yù)后影響的相關(guān)研究較少，本研究旨在分析抗Ro-52抗體對(duì)抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者發(fā)生RP-ILD及其預(yù)后的影響。

本研究結(jié)果顯示，RP-ILD組LDH、抗Ro-52抗體陽(yáng)性率高于非RP-ILD組，提示LDH和抗Ro-52抗體可能對(duì)提前識(shí)別抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者發(fā)生RP-ILD有影響。LDH作為一種常見(jiàn)的激酶，與DM疾病活動(dòng)有關(guān)，有文獻(xiàn)報(bào)道，DM患者LDH升高率為72.7%［13］?？筊o-52抗體作為肌炎相關(guān)性抗體也常在DM患者中呈陽(yáng)性［14］。RP-ILD作為抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者常見(jiàn)的并發(fā)癥，與患者預(yù)后不良有關(guān)［15-16］。SABBAGH等［17］關(guān)于北美青少年肌炎患者的一項(xiàng)隊(duì)列研究發(fā)現(xiàn)，抗Ro-52抗體陽(yáng)性患者更易出現(xiàn)間質(zhì)性肺病，且其病情較重、預(yù)后較差；該研究提出抗Ro-52抗體是青少年肌炎患者發(fā)生間質(zhì)性肺病的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子。當(dāng)抗Jo-1抗體綜合征患者出現(xiàn)抗Ro-52抗體陽(yáng)性時(shí)，其會(huì)出現(xiàn)更重的肌炎、關(guān)節(jié)損傷和間質(zhì)性肺病癥狀，從而導(dǎo)致患者預(yù)后不良、生存率下降［6，18］。加拿大硬皮病研究小組（Canadian Scleroderma Research Group，CSRG）［19］開(kāi)展的一項(xiàng)三國(guó)（加拿大、澳大利亞、美國(guó)）多中心、大型隊(duì)列研究顯示，抗Ro-52抗體陽(yáng)性與硬皮病相關(guān)間質(zhì)性肺病密切相關(guān)，其可能使患者死亡風(fēng)險(xiǎn)明顯增加。本研究多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，抗Ro-52抗體陽(yáng)性是抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者發(fā)生RP-ILD的危險(xiǎn)因素，與上述研究結(jié)果一致。WU等［20］研究發(fā)現(xiàn)，鐵蛋白、LDH、KL-6、抗MDA5抗體滴度、抗Ro-52抗體滴度等多種血清學(xué)標(biāo)志物對(duì)抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者預(yù)后有預(yù)測(cè)價(jià)值。但本研究結(jié)果顯示，RP-ILD組和非RP-ILD組鐵蛋白、KL-6比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，分析原因可能與本研究樣本量較小有關(guān)。

本研究結(jié)果顯示，抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者的抗Ro-52抗體陽(yáng)性率較高，為59.9%（85/142）。有文獻(xiàn)報(bào)道，抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者抗Ro-52抗體陽(yáng)性率高達(dá)74%［14］。本研究結(jié)果還顯示，弱陽(yáng)性組、中陽(yáng)性組、強(qiáng)陽(yáng)性組中，抗Ro-52抗體陽(yáng)性率依次為50.0%（11/22）、56.3%（18/32）、63.6%（56/88）；三組抗Ro-52抗體陽(yáng)性率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；究其原因可能與本研究樣本量較小有關(guān)，研究結(jié)果有待進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量后進(jìn)行證實(shí)。XU等［14］研究顯示，抗Ro-52抗體陽(yáng)性與RP-ILD的發(fā)生密切相關(guān)，雙抗體陽(yáng)性組RP-ILD發(fā)生率是單純抗MDA5抗體陽(yáng)性組的2倍。本研究結(jié)果顯示，中陽(yáng)性組、強(qiáng)陽(yáng)性組中，抗Ro-52陽(yáng)性患者RP-ILD發(fā)生率高于抗Ro-52抗體陰性患者，提示抗MDA5抗體滴度≥90 U/ml的DM患者出現(xiàn)抗Ro-52抗體陽(yáng)性時(shí)，其RP-ILD發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)升高。而弱陽(yáng)性組中，抗Ro-52抗體陽(yáng)性患者RP-ILD發(fā)生率與抗Ro-52抗體陰性患者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示在抗MDA5抗體滴度為32～89 U/ml的DM患者中，抗Ro-52抗體對(duì)其是否發(fā)生RP-ILD可能無(wú)影響。

研究顯示，抗MDA5抗體滴度對(duì)DM患者的預(yù)后有很大影響，抗MDA5抗體滴度高的患者對(duì)激素及免疫抑制劑治療反應(yīng)差，6個(gè)月死亡率可達(dá)50%以上［1，12-13，21］。本研究結(jié)果顯示，弱陽(yáng)性組、中陽(yáng)性組、強(qiáng)陽(yáng)性組生存率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示不同抗MDA5抗體滴度患者的生存率不同，與既往研究結(jié)果［19］一致。本研究結(jié)果還顯示，抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者中，抗Ro-52抗體陽(yáng)性患者生存率低于抗Ro-52抗體陰性患者，提示合并抗Ro-52抗體陽(yáng)性的抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者的生存率低。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，中陽(yáng)性組中，抗Ro-52抗體陽(yáng)性患者生存率低于抗Ro-52抗體陰性患者；而弱陽(yáng)性組、強(qiáng)陽(yáng)性組中，抗Ro-52抗體陽(yáng)性患者與抗Ro-52抗體陰性患者生存率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；提示對(duì)于抗MDA5抗體弱陽(yáng)性及強(qiáng)陽(yáng)性患者來(lái)說(shuō)，抗Ro-52抗體陽(yáng)性對(duì)其生存率的影響不明顯，但其可能降低抗MDA5抗體中陽(yáng)性患者的生存率。臨床醫(yī)生應(yīng)重視對(duì)抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者進(jìn)行血清抗Ro-52抗體的檢測(cè)，尤其是對(duì)抗MDA5抗體呈中陽(yáng)性的患者。上述研究結(jié)果表明，根據(jù)抗MDA5抗體滴度和抗Ro-52抗體陽(yáng)性情況，對(duì)DM患者進(jìn)一步進(jìn)行分類，有助于提前識(shí)別高?；颊?，以便采用更積極的初始治療方案來(lái)控制病情進(jìn)展，也有助于避免對(duì)抗MDA5抗體弱陽(yáng)性DM患者的過(guò)度治療。

綜上所述，在抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者中，抗Ro-52抗體陽(yáng)性發(fā)生率較高，且其是患者發(fā)生RP-ILD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，與抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者尤其是抗MDA5抗體滴度為90～149 U/ml的DM患者預(yù)后不良有關(guān)。提示臨床醫(yī)生應(yīng)對(duì)抗MDA5陽(yáng)性DM患者完善抗Ro-52抗體的檢測(cè)，對(duì)于抗MDA5抗體和抗Ro-52抗體雙陽(yáng)性的患者，尤其是抗MDA5抗體為中陽(yáng)性的患者，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行胸部CT、肺功能檢查以盡早發(fā)現(xiàn)RP-ILD，同時(shí)對(duì)患者進(jìn)行精確的風(fēng)險(xiǎn)分層，從而進(jìn)行早期強(qiáng)化免疫抑制劑治療或分子靶向治療，以改善高?；颊叩拈L(zhǎng)期預(yù)后。但本研究為單中心回顧性研究，且樣本量較小，并未分析患者治療方案以及肺功能檢查數(shù)據(jù)對(duì)抗MDA5抗體陽(yáng)性DM患者發(fā)生RP-ILD的影響，期待將來(lái)進(jìn)行多中心的前瞻性研究以進(jìn)一步驗(yàn)證本研究結(jié)果。

作者貢獻(xiàn)：康悅、劉紅進(jìn)行文章的構(gòu)思與設(shè)計(jì)，負(fù)責(zé)文章的質(zhì)量控制及審校；康悅、劉紅、張國(guó)瑞進(jìn)行研究的實(shí)施與可行性分析；康悅、劉紅、張國(guó)瑞、余亞麗進(jìn)行數(shù)據(jù)收集、整理、分析；康悅進(jìn)行結(jié)果分析與解釋，負(fù)責(zé)撰寫、修訂論文；劉紅對(duì)文章整體負(fù)責(zé)，監(jiān)督管理。

本文無(wú)利益沖突。