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    糖尿病腎病患者血清肌肉生長抑制素水平與血管鈣化的相關(guān)性分析

    2022-08-29 02:34:36曾蜀春
    國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志 2022年16期
    關(guān)鍵詞:乘積病例動脈

    馬 懿,曾蜀春

    四川綿陽四〇四醫(yī)院腎臟內(nèi)科,四川綿陽 621053

    糖尿病是常見的慢性病之一。我國糖尿病患者數(shù)量居全球第一位。在糖尿病導(dǎo)致的死亡原因中,心血管并發(fā)癥占首位,而糖尿病腎病(DN)是糖尿病常見的微血管并發(fā)癥,發(fā)生率為35%左右[1]。血管鈣化則是DN患者心血管并發(fā)癥的主要表現(xiàn)之一[2]。DN患者在糖尿病與腎病雙重促血管鈣化因素的作用下,血管鈣化的發(fā)生率及重癥率明顯高于其他糖尿病患者。有研究表明,微炎性反應(yīng)參與了DN的發(fā)病過程,這種炎性反應(yīng)是以細胞因子驅(qū)動為特征的慢性亞臨床炎癥過程[3]。肌肉生長抑制素(myostatin)也稱為生長分化因子-8(GDF-8),屬于轉(zhuǎn)化生長因子-β超家族成員,參與調(diào)節(jié)骨骼的合成和肌肉蛋白降解[4]。myostatin主要產(chǎn)生于肌肉組織,能抑制骨骼肌的生長,其表達水平降低會導(dǎo)致肌肉肥大發(fā)生,而較高的myostatin水平與腹膜透析患者較高的肌肉質(zhì)量有關(guān)。有研究顯示,myostatin水平升高與血管炎癥和動脈粥樣硬化緊密相關(guān)[5],但關(guān)于血管鈣化相關(guān)的臨床數(shù)據(jù)很少。本研究擬探討DN患者血清myostatin水平與血管鈣化的相關(guān)性。

    1 資料與方法

    1.1一般資料 選取2019年5月至2021年5月在本院住院治療的120例DN患者作為病例組,其中男68例、女52例,平均年齡(47.3±6.5)歲。納入標準:(1)年齡19~69歲;(2)診斷符合WHO糖尿病診斷和分型標準[6];(3)血GAD-Ab、IAA、ICA均陰性。排除標準:(1)糖尿病乳酸酸中毒、高糖高滲狀態(tài)、酮癥酸中毒等急性并發(fā)癥患者;(2)惡性腫瘤、感染性疾病、風(fēng)濕免疫性疾病、甲狀腺功能亢進(甲亢)、急性血管炎患者;(3)妊娠、哺乳期女性;(4)依從性差,不能配合相應(yīng)治療者;(5)尿路感染所引起尿清蛋白陽性和腎臟實質(zhì)性病變者;(6)近期內(nèi)使用過腎毒性藥物及服用免疫抑制劑及糖皮質(zhì)激素者。另選取同期本院健康體檢者30例作為對照組,男17例、女13例,平均年齡(47.0±6.2)歲。參照Mogenson分期標準[7],并根據(jù)24 h尿微量清蛋白定量、腎功能及眼底檢查,將病例組進一步分為病例A組(DN Ⅰ期/Ⅱ期,32例)、病例B組(DN Ⅲ期,34例)、病例C組(DN Ⅳ期,28例)及病例D組(DN Ⅴ期,26例)。4組年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。所有研究對象及其家屬簽署知情同意書;本研究經(jīng)本院倫理委員會審核通過。

    1.2方法

    1.2.1標本采集 于患者入院后次日早晨空腹抽取靜脈血5 mL于乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管,室溫靜置10 min,以4 000 r/min離心10 min,分離吸取上層血清放入凍存管,置于-80 ℃冰箱保存待測。

    1.2.2檢測方法 采用全自動生化分析儀(奧林巴斯 AU5440)檢測常規(guī)項目包括血鈣(Ca2+)、血磷(P3-)、C 反應(yīng)蛋白(CRP)、腎功能指標等,采用美國Bio-Tek ELX800多功能酶標儀檢測血清myostatin水平(外送金域檢驗)。由專業(yè)人員嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

    1.2.3頸部B超檢查 患者取平臥頭仰位,肩背部墊一薄枕,充分暴露頸部,頭略偏向?qū)?cè),由同一醫(yī)師進行彩超(武漢邁瑞醫(yī)療技術(shù)研究院有限公司,型號R7)檢查。分別依次檢查兩側(cè)頸總動脈(CCA)主干、分叉部及頸內(nèi)動脈(ICA)起始部,測量內(nèi)膜面到中膜與外膜交界面之間的垂直距離即為內(nèi)膜中層厚度(IMT),并探查是否有較強回聲或伴有聲影的斑塊。頸總動脈斑塊陽性定義:位于血管內(nèi)膜中層厚度超過1 mm且與鄰近血管壁對比增厚至少100%。血管鈣化分組[8]:血管鈣化組,頸動脈 IMT局部增厚>115 mm,且有強回聲或伴有聲影的斑塊者;血管非鈣化組,頸動脈IMT局部增厚<115 mm,或頸動脈IMT局部增厚>115 mm但無強回聲或伴有聲影的斑塊。

    2 結(jié) 果

    2.1各組血清myostatin水平及血管鈣化情況比較 病例A組血清myostatin與對照組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),而病例B、C、D組血清myostatin明顯低于對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。病例A、B、C、D組頸總動脈鈣化率明顯高于對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。病例D組頸總動脈鈣化率高于病例A組、病例B組,而其余各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

    表1 各組血清myostatin水平及血管鈣化情況比較

    2.2血管鈣化組與血管非鈣化組臨床指標比較 血管鈣化組鈣磷乘積、CRP水平明顯高于血管非鈣化組,而myostatin水平明顯低于血管非鈣化組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

    表2 血管鈣化組與血管非鈣化組臨床指標比較

    2.3myostatin水平與各臨床指標的相關(guān)性 Pearson相關(guān)性分析顯示,myostatin與鈣磷乘積、CRP呈負相關(guān)(r=-0.293、-0.361,P=0.015、0.019)。

    2.4血清myostatin、CRP、鈣磷乘積對DN患者發(fā)生血管鈣化預(yù)測價值 ROC曲線分析顯示,血清myostatin、CRP、鈣磷乘積用于預(yù)測DN患者發(fā)生血管鈣化的ROC曲線下面積(AUC)分別為0.734、0.683、0.698。myostatin預(yù)測血管鈣化發(fā)生的AUC最大,對應(yīng)靈敏度為78.4%,特異度為78.3%。見表3和圖1。

    表3 血清myostatin、CRP、鈣磷乘積對DN患者發(fā)生血管鈣化的預(yù)測價值

    圖1 血清myostatin、CRP、鈣磷乘積預(yù)測DN患者血管鈣化的ROC曲線

    2.5DN患者發(fā)生血管鈣化的多因素Logistic回歸分析 以患者是否出現(xiàn)血管鈣化為因變量(1=是,0=否),以myostatin、CRP、鈣磷乘積為自變量,多因素Logistic 回歸分析結(jié)果顯示,高水平myostatin是DN患者發(fā)生血管鈣化保護因素,高CRP、高鈣磷乘積是DN患者發(fā)生血管鈣化獨立危險因素(P<0.05),其OR及95%CI分別為0.334(0.155~0.581)、1.532(1.051~2.551)、2.134(1.325~3.803)。見表4。

    表4 DN患者出現(xiàn)血管鈣化的多因素Logistic回歸分析

    3 討 論

    血管鈣化是DN患者終末期主要并發(fā)癥,也是DN患者心血管死亡的主要危險因素。有研究發(fā)現(xiàn),一些標志物如OPG、RANKL、Fetuin A和FGF-23可以作為血管鈣化的抑制劑或誘導(dǎo)劑,但myostatin作為血管鈣化抑制劑或誘導(dǎo)劑的作用前景尚不清楚[9-11]。有研究表明,血管鈣化的形成過程是一個主動的、高度可調(diào)控的生物學(xué)過程,有可能是因為在鈣化促進因素作用下血管平滑肌細胞向成骨細胞轉(zhuǎn)化,最后成為中膜鈣化細胞[12]。血管鈣化是一個活性抑制因子與誘導(dǎo)因子相互作用的過程。脂蛋白代謝紊亂、高磷血癥、高鈣血癥、骨調(diào)節(jié)蛋白表達異常、氧化應(yīng)激、炎癥、細胞凋亡等都參與血管鈣化的發(fā)生、發(fā)展[13]。有研究表明,myostatin水平與腰椎側(cè)位片的腹主動脈鈣化評分呈負相關(guān),myostatin對透析患者的血管鈣化有潛在的有利影響[14]。一般而言,myostatin的表達與血管損傷嚴重程度的發(fā)生率呈正相關(guān)。動物實驗提示,缺乏myostatin的小鼠間充質(zhì)干細胞通過調(diào)節(jié)成骨因子,肌肉量和脂肪量的增加與較高的血管鈣化患病率相關(guān)[15]。當(dāng)肌肉質(zhì)量減少時,血管鈣化可能經(jīng)常發(fā)生,骨骼肌質(zhì)量對透析患者血管鈣化發(fā)生率或進展與myostatin水平存在一定關(guān)聯(lián)。

    本研究結(jié)果顯示,與對照組比較,DN患者Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ期血清myostatin水平明顯降低,且隨DN患者病情的進展而下降,而Ⅰ、Ⅱ期的myostatin水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義,提示DN患者myostatin水平與病情嚴重程度有關(guān)。當(dāng)透析患者病情加重時,myostatin產(chǎn)生會減少,而myostatin與病情的確切作用機制尚不清楚,需要進一步的前瞻性研究來驗證,有必要監(jiān)測患者透析前及長期透析期間的myostatin水平。有研究顯示,myostatin是體內(nèi)強大的異位鈣化抑制物,在血清鈣磷動態(tài)平衡中發(fā)揮重要作用[16]。在血液循環(huán)中與基質(zhì)G1a蛋白(MGP)和鈣、磷形成復(fù)合體,抑制磷灰石前體礦物質(zhì)的形成和沉積,使血清鈣磷乘積下降50%。本研究結(jié)果顯示,myostatin與鈣磷乘積、CRP呈負相關(guān),提示DN患者血管鈣化可能與營養(yǎng)狀況及微炎癥狀態(tài)有關(guān)。炎癥和營養(yǎng)不良發(fā)生率在DN患者中較為常見,且其與動脈粥樣硬化密切相關(guān)。研究表明,DN患者常長期伴隨慢性炎癥,后者是人群心血管事件的重要危險因素,可加速動脈粥樣和營養(yǎng)不良的發(fā)展,形成營養(yǎng)不良-炎癥-動脈粥樣硬化綜合征,三者互相影響導(dǎo)致DN高病死率[17]。CRP是一種非特異性炎癥標志物,是判斷慢性感染常用的指標[18]。本研究結(jié)果顯示,血管鈣化組DN患者myostatin水平明顯低于血管非鈣化組,且與CRP、鈣磷乘積呈負相關(guān),表明除高血鈣、血磷外,低myostatin水平和炎癥亦可能是引起血管鈣化的重要原因。

    據(jù)報道,終末期腎病患者一半以上會死于心血管疾病,且與血管鈣化密切相關(guān)[19-20]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),DN患者血清myostatin水平低于健康人群,伴有血管鈣化的患者血清myostatin水平降低更加明顯,提示血清myostatin可能早期預(yù)測透析患者發(fā)生血管鈣化。ROC曲線顯示,myostatin預(yù)測血管鈣化的截斷值為5.25 ng/mL,此時靈敏度為78.4%,特異度為78.3%,均高于CRP、鈣磷乘積對血管鈣化預(yù)測的靈敏度和特異度,多因素Logistic回歸模型中調(diào)整了年齡和性別數(shù)據(jù)后發(fā)現(xiàn),myostatin水平是DN患者發(fā)生血管鈣化的重要危險因素,提示myostatin對DN患者發(fā)生血管鈣化的預(yù)測價值更高。

    綜上所述,DN Ⅲ期以上患者血清myostatin水平下降,后者可作為DN的診斷參考指標之一。血清myostatin在DN合并血管鈣化發(fā)生過程中發(fā)揮一定作用。同時,本研究有一定局限性,一是參與對象相對較少,二是本研究為橫斷面研究,尚不能佐證前后的因果關(guān)聯(lián)。

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