血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF對早發(fā)型重度子癇前期的預(yù)測價(jià)值*

羅 敏，徐曉都，王 維，周 雋

1.成都市龍泉驛區(qū)第一人民醫(yī)院/四川大學(xué)華西醫(yī)院龍泉醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川成都 610100；2.成都市龍泉驛區(qū)婦幼保健院檢驗(yàn)科，四川成都 610100；3.成都市龍泉驛區(qū)第一人民醫(yī)院/四川大學(xué)華西醫(yī)院龍泉醫(yī)院產(chǎn)科，四川成都 610100

早發(fā)型重度子癇前期(EOSP)可反映孕周與妊娠結(jié)局的關(guān)系，以及胎盤存在的分子水平的差異，EOSP發(fā)病越早，病情越嚴(yán)重，母嬰并發(fā)癥越多，預(yù)后越差[1]。既往研究顯示，孕早期胎盤功能受損會引起子癇前期，而EOSP作為嚴(yán)重的表型之一，多因胎盤源性的大量損傷因子進(jìn)入血液而導(dǎo)致[2]。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性的肝素結(jié)合生長因子，可誘導(dǎo)新生血管的生成，在胎盤血管生成、分化等方面起著重要作用。血小板反應(yīng)蛋白(TSP-1)可作用于胚胎發(fā)育及血管形成。目前研究表明，子癇前期孕婦的TSP-1及VEGF水平均存在異常變化，即TSP-1水平升高[3-4]，VEGF水平降低[5-6]；但也有部分研究顯示，TSP-1水平降低，VEGF水平升高，且與缺氧刺激有關(guān)[7-8]。本研究通過分析TSP-1、VEGF水平及TSP-1/VEGF對EOSP的預(yù)測價(jià)值，以期為EOSP的臨床診斷提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年8月至2020年8月成都市龍泉驛區(qū)第一人民醫(yī)院/四川大學(xué)華西醫(yī)院龍泉醫(yī)院(下稱本院)收治的38例EOSP孕婦作為病例組，同期門診產(chǎn)檢的40例孕28～33+6周健康孕婦為對照組，收集病例組不良妊娠結(jié)局相關(guān)指標(biāo)(新生兒出生體重、Apgar 1 min評分等)。另選取同期在本院行孕中期唐氏篩查并最終在本院分娩的90例孕婦為驗(yàn)證組，其中妊娠結(jié)局為EOSP的30例孕婦為EOSP組，正常分娩的60例孕婦為非EOSP組。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)年齡20～45歲；(2)孕28～33+6周；(3)單活胎妊娠；(3)病例組符合謝幸等主編的《婦產(chǎn)科學(xué)》第9版EOSP的診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)雙胎或多胎妊娠；(2)有糖尿病、高血壓、腎病、冠心病等并發(fā)癥，以及研究外其他產(chǎn)科并發(fā)癥；(3)孕期曾服用阿司匹林、鈣離子拮抗劑、抗菌藥物。病例組與對照組年齡、孕周、孕次等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；病例組體質(zhì)量指數(shù)(BMI)高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 病例組和對照組一般資料比較

1.2方法 病例組在入院當(dāng)天抽取空腹肘靜脈血5 mL，室溫靜置1 h后3 000 r/min離心10 min，分離血清，標(biāo)記后放入-80 ℃冰箱保存。對照組在門診采血中心收集當(dāng)天離心后的空腹靜脈血血清500 μL放入-80 ℃冰箱低溫保存。驗(yàn)證組為本院產(chǎn)前診斷中心實(shí)驗(yàn)室保存的行孕中期唐氏篩查孕婦的血清。用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測各組VEGF及TSP-1水平。試劑盒購自Bio-Swamp公司(貨號：HM10057、HM100868)。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清TSP-1、VEGF水平及TSP-1/VEGF比較 病例組血清TSP-1水平、TSP-1/VEGF高于對照組，病例組血清VEGF水平低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。見表2。

表2 病例組和對照組血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF水平比較

2.2血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF對EOSP的預(yù)測價(jià)值 ROC曲線分析結(jié)果顯示，血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF均對ESOP有一定預(yù)測價(jià)值，對應(yīng)截?cái)嘀捣謩e為2.44 ng/mL、319.21 pg/mL、9.13，且TSP-1/VEGF比VEGF、TSP-1單獨(dú)檢測預(yù)測價(jià)值稍高。見表3和圖1。

表3 血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF對EOSP的診斷價(jià)值

圖1 血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF診斷EOSP的ROC曲線

2.3血清TSP-1、VEGF、TSP-1/VEGF與不良妊娠結(jié)局的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析顯示，血清TSP-1與VEGF呈負(fù)相關(guān)(r=-0.265，P<0.001)，與新生兒出生體重、Apgar 1 min評分、Apgar 5 min評分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.588、-0.621、-0.593，均P<0.001)，血清VEGF與新生兒出生體重、Apgar 1 min評分、Apgar 5 min評分呈正相關(guān)(r=0.728、0.700、0.712，均P<0.001)，血清TSP-1/VEGF與新生兒出生體重、Apgar 1 min評分、Apgar 5 min評分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.817、-0.834、-0.823，均P<0.001)。

2.4EOSP組與非EOSP組血清TSP-1、VEGF、TSP-1/VEGF比較 驗(yàn)證組中，EOSP組TSP-1水平高于非EOSP組，VEGF水平低于非EOSP組，TSP-1/VEGF高于非EOSP組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。見表4。

表4 EOSP組與非EOSP組血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF水平比較

3 討 論

EOSP通常在孕34周前發(fā)病，易引起嚴(yán)重的并發(fā)癥，如胎盤早剝、肺水腫及心力衰竭等，從而造成胎兒宮內(nèi)窘迫、死亡和低出生體重兒等情況，嚴(yán)重威脅母嬰生命安全。為了改善母嬰結(jié)局，在整個妊娠期對患者進(jìn)行有效識別、管理及干預(yù)等尤為重要[9-10]。因抗血管生成因子與促血管生成因子比值失衡會導(dǎo)致子癇前期的發(fā)生，其中TSP-1可發(fā)揮抗血管新生、調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞功能的作用[11]，VEGF可參與血管重構(gòu)、滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤等過程，有助于刺激內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移[12]。本研究中，孕婦血清TSP-1水平與VEGF水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.265,P<0.001)。REDMAN[13]研究提出，孕8～18周是胎盤形成的關(guān)鍵時(shí)期，HOFFMAN等[14]研究表明，在孕早中期給予小劑量阿司匹林，可有效改善孕婦胎盤病理、生理情況，預(yù)防EOSP的發(fā)生。

TSP-1是TSPs家族的5個成員之一，可調(diào)節(jié)VEGF生物活性，通過CD36和Fyn誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移和增殖，通過CD36和CD47抑制一氧化氮(NO)通路[15]，起到抗血管新生作用。本研究結(jié)果顯示，病例組血清TSP-1水平高于對照組，提示EOSP患者血清TSP-1升高可加重EOSP的發(fā)生和發(fā)展，與范徐妃等[4]研究中早發(fā)型子癇前期(EOPE)患者血清及胎盤組織TSP-1水平升高一致。而ULU等[7]研究顯示，PE患者血清TSP-1水平明顯降低。本研究認(rèn)為，EOSP組和非EOSP組血清TSP-1水平存在差異的可能原因有：(1)TSP-1的相對分子質(zhì)量較大，結(jié)構(gòu)功能復(fù)雜，其受體多樣化，使之在不同狀態(tài)及結(jié)構(gòu)下與不同受體結(jié)合，發(fā)揮不同的作用；(2)妊娠發(fā)病機(jī)制的內(nèi)在差異較大。VEGF有助于發(fā)揮誘導(dǎo)抗凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)、抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡、上調(diào)促衰變因子表達(dá)及保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞的作用[16]。本研究中，EOSP組患者血清VEGF水平明顯低于非EOSP組(P<0.001)，這與ADU-BONSAFFOH等[5]研究結(jié)果類似，提示血清VEGF水平的降低可能會促進(jìn)EOSP的發(fā)生、發(fā)展。但劉曉丹[17]的研究結(jié)果顯示，在缺氧的情況下VEGF水平也會升高。此種差異的原因可能在于：(1)游離VEGF能更準(zhǔn)確地反映有效循環(huán)VEGF，因檢測方法的差異導(dǎo)致了結(jié)果的不同；(2)不同研究中妊娠病理發(fā)生機(jī)制的差異性導(dǎo)致了研究結(jié)果的差異；(3)機(jī)體在缺氧狀態(tài)下會引起代償性VEGF水平的升高。

本研究結(jié)果顯示，TSP-1/VEGF對EOSP的預(yù)測價(jià)值比VEGF或TSP-1單獨(dú)檢測稍高，分析作用機(jī)制可能是：TSP-1-CD47信號軸抑制VEGF和VEGF受體2(VEGFR2)的活化，抑制VEGF介導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，以及VEGFR2下游的AKT或Src蛋白激酶，從而抑制了新生血管的形成。

目前關(guān)于TSP-1水平與妊娠不良結(jié)局的相關(guān)性的研究較少。SOUZA等[18]研究表明，通過改善循環(huán)中NO和VEGF水平可減輕對低出生體重新生兒內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量和功能的不利影響。本研究結(jié)果顯示，TSP-1與新生兒出生體重、Apgar 1 min和Apgar 5 min評分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.588、-0.621、-0.593，均P<0.001)，而血清VEGF與新生兒出生體重、Apgar 1 min和Apgar 5 min評分則呈正相關(guān)(r=0.728、0.700、0.712，均P<0.001)，血清TSP-1/VEGF與新生兒出生體重、Apgar 1 min評分、Apgar 5 min評分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.817、-0.834、-0.823，均P<0.001)，提示血管生成因子與抗血管生成因子的失衡可造成嚴(yán)重的圍生結(jié)局，TSP-1水平升高可能是胎兒生長發(fā)育的危險(xiǎn)因子，VEGF水平升高可能是胎兒生長發(fā)育的促進(jìn)因子。同時(shí)，本研究還發(fā)現(xiàn)，隨著BMI增加，孕婦患EOSP的風(fēng)險(xiǎn)可能升高。

有研究顯示，妊娠期高血壓孕婦的血清TSP-1水平高于健康孕婦，且TSP-1水平越高，不良妊娠結(jié)局風(fēng)險(xiǎn)越大[19]。胡建文等[20]結(jié)果發(fā)現(xiàn)，子癇前期與健康產(chǎn)婦孕早期、孕中期的血清TSP-1水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在驗(yàn)證組中，EOSP組血清TSP-1水平高于非EOSP組(P<0.05)，提示血清TSP-1水平在孕中期可用于預(yù)測EOSP的發(fā)生。本研究結(jié)論與胡建文等[20]研究的結(jié)論存在差異，因此，TSP-1在EOSP孕婦與同孕周健康孕婦的表達(dá)情況是否存在差異仍需進(jìn)行大樣本、前瞻性研究證實(shí)。

綜上所述，TSP-1/VEGF對預(yù)測EOSP具有較高的診斷價(jià)值，在孕中期可能對預(yù)測EOSP有一定的意義，但此結(jié)論仍需大數(shù)據(jù)、多中心、前瞻性研究進(jìn)一步驗(yàn)證。