抵抗素、和肽素、氧化型低密度脂蛋白在急性缺血性腦卒中患者中的表達(dá)及臨床意義

高善玉 尤年興

揚(yáng)州大學(xué)附屬常熟市第二人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，江蘇常熟 215500

目前臨床上主要通過影像學(xué)檢查等來檢測(cè)病情嚴(yán)重程度，有可能會(huì)延誤病情治療的最佳時(shí)機(jī)。早期診斷并評(píng)估患者病情，能夠制定針對(duì)性治療方案改善患者病情，提高預(yù)后。血清標(biāo)志物具有良好敏感性與特異性，所以在排除其他疾病的情況下，利用血清標(biāo)志物檢測(cè)有利于急性腦梗死患者的治療。抵抗素是一種炎癥因子，在糖尿病、缺血性心臟病等疾病中均有表達(dá)，并參與其疾病的發(fā)展，還與其預(yù)后密切相關(guān)。和肽素屬于下丘腦分泌的激素，而氧化型低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein，ox-LDL）是缺血性腦卒中發(fā)病的重要標(biāo)志物，能夠通過促進(jìn)血管壁炎癥反應(yīng)等，在急性缺血性腦卒中發(fā)生及發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用。因此推測(cè)血清抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平與急性缺血性腦卒中患者可能存在一定程度相關(guān)性。鑒于此，本研究回顧性分析江蘇省揚(yáng)州大學(xué)附屬常熟市第二人民醫(yī)院收治的85 例急性缺血性腦卒中患者臨床資料，探討血清抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平與急性缺血性腦卒中患者疾病嚴(yán)重程度、神經(jīng)損傷等的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年6月至12月?lián)P州大學(xué)附屬常熟市第二人民醫(yī)院收治的85 例急性缺血性腦卒中患者作為急性缺血性腦卒中組，選取同期在江蘇省揚(yáng)州大學(xué)附屬常熟市第二人民醫(yī)院進(jìn)行健康體檢的85 名健康人作為健康對(duì)照組。急性缺血性腦卒中組中，男45 例，女40 例；年齡55～72 歲，平均年齡（64.42±2.10）歲；根據(jù)美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院卒中量表（National Institutes of Health stroke scale，NIHSS）評(píng) 分：輕 度43 例，中度25 例，重度17 例；入院時(shí)腦梗死面積：腔隙性腦梗死34 例，中等面積腦梗死26 例，大面積腦梗死25 例。健康對(duì)照組中，男43 例，女42 例；年齡55～72 歲，平均年齡（64.53±4.33）歲。兩組的性別、年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且所有患者家屬均知情并簽署家屬知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn)：①急性起病符合《中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南2018》中對(duì)急性缺血性腦卒中患者的診斷；②本次發(fā)病前患者的改良Rankin 量表（modified Rankin scale，mRS）評(píng)分＜1 分。③健康對(duì)照組均無急性缺血性腦卒中病史，急性缺血性腦卒中家族史，變態(tài)反應(yīng)性疾病史，近期感染史。排除標(biāo)準(zhǔn)：①肝、腎功能障礙者，非急性缺血性腦卒中者；②重大器官損傷者；③患有免疫性疾病者。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集 取兩組研究對(duì)象發(fā)病24 h 內(nèi)靜脈血液，置一次性的抗凝管中保存，使用3000 r/min 轉(zhuǎn)速離心機(jī)離心，離心半徑10 cm，離心10 min 后分離上清，在-80℃環(huán)境中保存。

1.2.2 抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平檢測(cè) 采用雙抗體酶聯(lián)免疫吸附法對(duì)抵抗素、和肽素進(jìn)行檢測(cè)，采用酶聯(lián)免疫吸附法對(duì)ox-LDL 進(jìn)行檢測(cè)。取50 mmol 碳酸鹽包緩沖液（北京索萊寶科技有限公司，貨號(hào)：G0220；規(guī)格：500 ml）對(duì)ox-LDL 進(jìn)行稀釋，且加入聚苯乙烯的反應(yīng)孔中，加蓋處理后，在4℃下置留24 h，次日洗滌3 次后，拋干，在每孔中均加入稀釋液（pH 值=7.4，0.02 mol/L Tris-HCl 緩沖液）稀釋待測(cè)標(biāo)本0.1 ml，加入陽性、陰性對(duì)照標(biāo)本，在42℃下置留60 min，將液體移除并洗滌3 次后，拋干，在每孔中加入ox-LDL抗體0.1 ml，再次置留60 min，將液體移除并洗滌3次，拋干，并在每孔中加入底物液（0.1 mol/L 的NaHPO，0.05 mol/L 的枸櫞酸）混勻，且加入0.1 ml 鄰苯二胺，遮光20 min，再次加入2 mol/L HSO0.05 ml 放置各孔內(nèi)，終止反應(yīng)。使用酶標(biāo)儀檢測(cè)A450，分析ox-LDL 水平。

1.3 觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

對(duì)急性缺血性腦卒中組患者進(jìn)行抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平、腦梗死面積、神經(jīng)功能缺損程度、預(yù)測(cè)值及ROC 曲線進(jìn)行分析。①比較不同梗死面積患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平。①采用MRI 檢測(cè)腦梗死灶最大層面直徑＜1.5 cm，為腔隙性腦梗死；梗死灶最大層面直徑1.5～5 cm，為中等面積腦梗死；梗死灶最大層面直徑＞5 cm，為大面積腦梗死。②神經(jīng)功能損傷程度檢測(cè)：采用NIHSS 對(duì)急性缺血性腦卒中患者神經(jīng)功能評(píng)估，0～1 分表示正常，2～4 分表示輕度卒中，5～15分表示中度卒中，＞15 分表示重度卒中。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對(duì)象抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平的比較

急性缺血性腦卒中組患者抵抗素、和肽素、ox-LDL水平高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表1）。

表1 兩組研究對(duì)象抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平的比較（±s）

2.2 不同梗死面積患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平的比較

不同梗死面積患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。中等、大面積腦梗死患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于腔隙性腦梗死患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。大面積腦梗死患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于中等面積腦梗死患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表2）。

表2 不同梗死面積患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平的比較（±s）

2.3 不同神經(jīng)功能損傷程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平的比較

不同神經(jīng)功能損傷程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。中度、重度神經(jīng)功能損傷程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于輕度神經(jīng)功能損傷程度患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。重度神經(jīng)功能損傷程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于中度神經(jīng)功能損傷程度患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表3）。

表3 不同神經(jīng)功能損傷程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平的比較（±s）

2.4 抵抗素、和肽素、ox-LDL 及三指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)急性缺血性腦卒中的預(yù)測(cè)價(jià)值

ROC 分析抵抗素、和肽素、ox-LDL 及三指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)預(yù)測(cè)急性缺血性腦卒中的曲線下面積分別為0.850、0.949、0.921、0.986，見表4、圖1（封三）。

表4 抵抗素、和肽素、ox-LDL 及三指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)急性缺血性腦卒中的預(yù)測(cè)價(jià)值

圖1 抵抗素、和肽素、ox-LDL 及三指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)診斷急性缺血性腦卒中的ROC 曲線（見內(nèi)文第87頁）

3 討論

急性缺血性腦卒中是一種急性腦血管疾病，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，其主要是由于由血液循環(huán)障礙和腦缺血缺氧引起的缺血性壞死或腦組織軟化。急性缺血性腦卒中又稱為急性腦梗死，具有發(fā)病急、起病快、預(yù)后差等特點(diǎn)，是臨床上嚴(yán)重威脅人類健康的常見疾病。

抵抗素屬于半胱氨酸分泌蛋白家族，是由脂肪細(xì)胞分泌的一種炎癥因子，能夠參與糖尿病、缺血性心臟病等疾病的發(fā)展。抵抗素在缺血性腦血管疾病中也發(fā)揮著重要作用，有研究表明，抵抗素是一種炎癥因子，在動(dòng)脈粥樣硬化患者機(jī)體中其水平的變化與炎癥標(biāo)志物超敏C-反應(yīng)蛋白呈正相關(guān)。抵抗素能夠通過激活三磷酸肌醇使血管外平滑肌加速增殖，進(jìn)而使動(dòng)脈粥樣硬化過程加快。其能夠通過巨嗜細(xì)胞分泌，不僅能夠誘導(dǎo)平滑肌細(xì)胞的遷移，加速動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展，還能夠促使纖維細(xì)胞因子的表達(dá)，致使纖維帽變薄，導(dǎo)致不穩(wěn)定斑塊風(fēng)險(xiǎn)。本研究結(jié)果顯示，急性缺血性腦卒中組患者抵抗素、和肽素、ox-LDL水平高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。中等、大面積腦梗死患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于腔隙性腦梗死，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；大面積腦梗死患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于中等面積腦梗死，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。中度、重度神經(jīng)功能損傷程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL水平高于輕度神經(jīng)功能損傷程度患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；重度神經(jīng)功能損傷程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于中度神經(jīng)功能損傷程度患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。提示急性缺血性腦卒中組患者抵抗素水平參與急性缺血性腦卒中的發(fā)生，與患者梗死面積、神經(jīng)功能損傷有關(guān)。ROC 分析抵抗素、和肽素、ox-LDL 及三指標(biāo)聯(lián)合預(yù)測(cè)急性缺血性腦卒中的曲線下面積分別為0.850、0.949、0.921、0.986，提示3 種指標(biāo)聯(lián)合預(yù)測(cè)急性缺血性腦卒中價(jià)值高。

和肽素是由神經(jīng)垂體分泌的一種糖基化肽，由30 多個(gè)氨基酸組成。和肽素屬于精氨酸加壓素末端的一部分，是一種生物活性肽，是由多個(gè)氨基酸殘基組成，具有調(diào)節(jié)滲透壓和維持血流動(dòng)力的生物學(xué)功能。和肽素能夠參與機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)，屬于應(yīng)激反應(yīng)標(biāo)志物，當(dāng)機(jī)體發(fā)生急性缺血性腦卒中時(shí)，其機(jī)體內(nèi)精氨酸加壓素水平急劇上升，導(dǎo)致血容量大幅度升高，且直接導(dǎo)致細(xì)胞水腫。有研究表明，其在急性腦梗死、腦出血等重癥疾病的早期診斷及預(yù)后判斷中發(fā)揮著重要作用，是檢測(cè)臨床疾病指標(biāo)的重要因子。本研究顯示血清和肽素在預(yù)測(cè)急性缺血性腦卒中風(fēng)險(xiǎn)方面表現(xiàn)出較高的效能，提示和肽素水平升高是急性缺血性腦卒中風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)因子。

ox-LDL 是動(dòng)脈粥樣硬化斑塊特有的成分，腦動(dòng)脈粥樣硬化及血栓形成是缺血性腦卒中的主要發(fā)生原因。腦梗死早期是由于腦組織內(nèi)大量缺血和缺氧，使免疫系統(tǒng)滋生大量炎癥細(xì)胞導(dǎo)致LDL-C 轉(zhuǎn)換形成ox-LDL。有研究發(fā)現(xiàn)，在急性缺血性腦卒中患者機(jī)體內(nèi)，其水平明顯升高。王春陽等研究發(fā)現(xiàn)，血漿ox-LDL 是急性缺血性腦卒中合并頸動(dòng)脈斑塊患者預(yù)后的影響因素，尤其對(duì)大動(dòng)脈粥樣硬化型、小動(dòng)脈閉塞型腦卒中患者預(yù)后有影響；血漿ox-LDL 水平越高，患者預(yù)后越差。當(dāng)急性缺血性腦卒中發(fā)生時(shí)，其氧化反應(yīng)急劇加重，并導(dǎo)致神經(jīng)功能進(jìn)一步損傷。ox-LDL屬于缺血性腦卒中的預(yù)后不良重要的檢測(cè)指標(biāo)。較多的ox-LDL 會(huì)對(duì)動(dòng)脈壁內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞造成嚴(yán)重的毒副作用，使血管內(nèi)皮細(xì)胞大量受損，同時(shí)還能夠促進(jìn)血小板的聚集增加內(nèi)皮細(xì)胞的粘附作用，進(jìn)一步加快血管壁的損傷。趙連江等研究表明，血清CAM、GDF-15、ox-LDL 水平在急性缺血性腦卒中患者中明顯增高，且與NIHSS 評(píng)分均呈正相關(guān)，可作為判定病情嚴(yán)重程度的重要指標(biāo)，且3 種指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于急性缺血性腦卒中更具有重要意義。

綜上所述，抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平在急性缺血性腦卒中患者中高表達(dá)，且與患者腦梗死面積大小、神經(jīng)功能損傷嚴(yán)重程度有關(guān)，高水平的抵抗素、和肽素、ox-LDL 是急性缺血性腦卒中的風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)因子，3 種指標(biāo)聯(lián)合預(yù)測(cè)急性缺血性腦卒中具有一定的價(jià)值。