小檗胺在嚴(yán)重?zé)齻笫笮募p傷中的保護(hù)作用

張 彬，翟蒙恩，段維勛，劉金成，金振曉，俞世強(qiáng)

臨床研究表明，燒傷面積占全身表面積30%以上的嚴(yán)重?zé)齻涑跏茧A段即會(huì)發(fā)生心肌損害［1－2］。如果在嚴(yán)重?zé)齻鬀](méi)有立即進(jìn)行醫(yī)療干預(yù)，心肌損傷會(huì)導(dǎo)致心臟功能障礙，在這種情況下可能發(fā)生潛在的燒傷休克，導(dǎo)致循環(huán)功能受損和可能的死亡事件的發(fā)生［3］。 雖然嚴(yán)重?zé)齻鹦募p傷的確切機(jī)制尚未完全闡明，但越來(lái)越多的證據(jù)表明，心肌損傷涉及多個(gè)病理生理過(guò)程，包括缺氧、炎癥、鈣信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞凋亡、敗血癥和氧化應(yīng)激等［4－5］。 因此，尋找一種能有效減輕燒傷所致心臟并發(fā)癥的治療措施成為降低嚴(yán)重?zé)齻颊呓K末危險(xiǎn)事件發(fā)生的關(guān)鍵途徑之一。

小檗胺（berbamine，BBM）是一種從中草藥黃蘆木中分離而來(lái)的雙芐基異喹啉類天然產(chǎn)物［6］。 以往其多被應(yīng)用于放、化療或慢性苯中毒所導(dǎo)致的白細(xì)胞減少癥［7］。 但近年來(lái)越來(lái)越多的研究驗(yàn)證了BBM 在心血管疾病當(dāng)中的治療作用［8－10］，然而 BBM對(duì)嚴(yán)重?zé)齻鸬男募p傷的保護(hù)作用尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。 因此，在本研究中通過(guò)建立Ⅲ度燒傷動(dòng)物模型，以明確BBM 對(duì)嚴(yán)重?zé)齻鸬男募p傷的潛在保護(hù)作用，并進(jìn)一步探究其可能的分子機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及主要試劑 6 ～8 周齡無(wú)特定病原體級(jí)雄性SD 大鼠40 只，體重200～250 g，飼養(yǎng)于清潔級(jí)環(huán)境中，購(gòu)自空軍軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，使用許可證號(hào)：SYXK（軍）2012－0022。 BBM（美國(guó) sigma公司）；白細(xì)胞介素（interleukin，IL）－1β、IL－6、腫瘤壞死因子－α（tumor necrosis factor－α，TNF－α）酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme－linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒（美國(guó)Abcam 公司）；原位末端標(biāo)記法（ terminal － deoxynucleoitidyl transferase mediated nick end， TUNEL）凋亡檢測(cè)試劑盒（瑞士 Roche 公司）；二氫乙錠（dihydroethidium，DHE）活性氧（reactive oxygen species， ROS）檢測(cè)試劑盒（美國(guó) Invitrogen 公司）；髓過(guò)氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）試劑盒（中國(guó)南京建成生物工程研究所）；沉默信息調(diào)控因子3（silent information regulation－3，SIRT3）去乙?；钚詸z測(cè)試劑盒（美國(guó) Enzo Life Sciences 公司）；SIRT3、SOD2、Ac－SOD2、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（cleaved caspase－3）和甘油醛－3－磷酸脫氫酶（ glyceraldehyde－3－phosphate dehydrogenase， GAPDH）抗體（美國(guó) Abcam 公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 動(dòng)物分組及模型建立 雄性 SD 大鼠 40 只隨機(jī)均分為以下4 組：假燒傷組（Sham）、單純BBM處理組（BBM）、燒傷組（Burn）、燒傷＋BBM 處理組（Burn＋BBM），每組 10 只。 燒傷模型法建立如下，大鼠經(jīng)腹腔注射戊巴比妥（40 mg／kg）麻醉后，脫去背部毛發(fā)。 仰臥位固定于模板設(shè)備上，將其背部浸于100℃水下12 s，以產(chǎn)生30%的總體表面積（total body surface area，TBSA）全層真皮Ⅲ度燒傷。 Sham組和BBM 組大鼠則背部脫毛后浸于37℃溫水中12 s。 所有大鼠燙傷后迅速晾干并行液體復(fù)蘇，Sham 組和Burn 組大鼠在燙傷后0 h 和6 h 腹腔注射乳酸林格氏液［4 ml／（kg·TBSA）］，BBM 組和Burn＋BBM 組大鼠在燙傷后0 h 和6 h 腹腔注射溶解于乳酸林格氏液中的 BBM［100 mg／（kg·TBSA）］。在燒傷處理12 h 后對(duì)大鼠實(shí)施安樂(lè)死，然后通過(guò)開(kāi)胸獲得心臟樣本及眶后放血收集血樣。

1.2.2 心臟功能監(jiān)測(cè) 分離并暴露大鼠右側(cè)頸總動(dòng)脈，將聚乙烯醫(yī)用塑料導(dǎo)管和壓力換能器內(nèi)充滿0.3%肝素生理鹽水注射液，排走氣泡。 將頸總動(dòng)脈遠(yuǎn)心端結(jié)扎，近心端用動(dòng)脈夾夾住，用眼科剪刀以45°角剪口，將準(zhǔn)備好的頸總動(dòng)脈導(dǎo)管向近心端一直插入到左心室。 導(dǎo)管的末端依次連接到RM6240B生理信號(hào)采集系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)據(jù)采集。 穩(wěn)定5 min 后，測(cè)量左室收縮壓（left ventricular systolic pressure，LVSP）和左室壓最大增減速率（±dp／dtmax）以評(píng)定心功能。

1.2.3 心肌組織染色

1.2.3.1 伊紅染色（hematoxylin－eosin，HE） 取適量大鼠左心室心肌組織標(biāo)本，經(jīng)4%多聚甲醛固定后制成5 μm 厚的石蠟組織切片，用蘇木素和伊紅染料分別染色細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)，封片后置于顯微鏡下觀察。

1.2.3.2 TUNEL 染色 將 5 μm 厚的心臟石蠟切片用1%的蛋白酶 K 室溫孵育 20 min。 避光滴加TUNEL 染液后繼續(xù)在室溫中孵育30 min 以標(biāo)記凋亡細(xì)胞核，反應(yīng)終止后用DAPI 工作液室溫孵育15 min 以染色細(xì)胞核。 在激光共聚焦顯微鏡下隨機(jī)選擇5 個(gè)無(wú)重疊圖像觀察并拍照，計(jì)算心肌細(xì)胞總數(shù)和凋亡心肌細(xì)胞的數(shù)量。 心肌細(xì)胞凋亡百分比計(jì)算公式為：凋亡心肌細(xì)胞百分比＝凋亡心肌細(xì)胞數(shù)／心肌細(xì)胞總數(shù)×100%。

1.2.3.3 DHE 染色 取適量大鼠左心室心肌組織標(biāo)本，制備成5 μm 厚的心臟冰凍切片。 避光滴加DHE 染液后室溫孵育30 min，在激光共聚焦顯微鏡下隨機(jī)選擇5 個(gè)無(wú)重疊圖像觀察并拍照。 使用Image－Pro Plus 軟件分析切片中的二氫乙錠熒光強(qiáng)度代表各組心肌組織ROS 生成量。

1.2.4 心肌損傷標(biāo)志物測(cè)定 將收集到的血樣在4℃下2 000 g 離心15 min，收集上清液。 使用化學(xué)自動(dòng)分析儀測(cè)定血清肌鈣蛋白T（cardiac troponin T， cTnT） 和 肌 酸 激 酶 同 工 酶 （ creatine kinase isoenzyme， CKMB）水平來(lái)評(píng)估心肌損傷。

1.2.5 心肌炎性因子水平測(cè)定

1.2.5.1 將收集到的血樣在 4℃ 下 2 000 g 離心 15 min，收集上清液。 使用 ELISA 試劑盒測(cè)量血清IL－1β、TNF－α 和 IL－6 以評(píng)估心肌炎性因子水平。

1.2.5.2 取適量心肌組織在 MPO 試劑盒試劑Ⅱ中進(jìn)行勻漿，其重量／體積比為1 ∶19。 嚴(yán)格按照MPO試劑盒說(shuō)明書(shū)對(duì)組織中的MPO 活性進(jìn)行檢測(cè)。 一個(gè)單位的 MPO（U／g）定義為在37℃下降解1 μmol／L 過(guò)氧化物／1 g 心臟組織所需的MPO 量。

1.2.6 心肌 SOD 活性及 MDA 含量測(cè)定 按照重量體積比為1 ∶9 對(duì)心肌組織進(jìn)行勻漿，將組織勻漿在4℃下700 g 離心30 min，收集上清液，使用 SOD 和MDA 檢測(cè)試劑盒進(jìn)行分析以評(píng)估心肌組織氧化應(yīng)激水平。

1.2.7 Western Blot 檢測(cè)蛋白表達(dá) 將制備好的心肌組織蛋白樣本按照每孔30 μg 進(jìn)行上樣，用SDS－PAGE 試劑盒配置的分離膠進(jìn)行電泳。 隨后將分離的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到聚偏二氟乙烯膜上，在室溫下用5%脫脂牛奶封閉2 h。 依次將切好的條帶放入 SIRT3 （1 ∶1 000）、Ac－SOD2（1 ∶1 000）、SOD2（1 ∶1 000）、cleaved caspase－3（1 ∶1 000）和GAPDH（1 ∶5 000）的一抗管中 4℃過(guò)夜孵育，TBST緩沖液洗滌三次后，用辣根過(guò)氧化物酶偶聯(lián)的二抗（1 ∶4 000）孵育條帶 2 h。 使用電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑并通過(guò)凝膠成像系統(tǒng)觀察蛋白條帶，采用Image J軟件進(jìn)行密度分析。

2 結(jié) 果

2.1 BBM 改善嚴(yán)重?zé)齻笫笮呐K功能障礙 心導(dǎo)管監(jiān)測(cè)記錄發(fā)現(xiàn)，與Sham 組比較，Burn 組大鼠心臟功能顯著受損，表現(xiàn)為反映心臟收縮功能指標(biāo)的LVSP 與±dp／dtmax值均顯著降低（P＜0.01）；給予BBM 處理后，與 Burn 組比較，BBM＋Burn 組大鼠的心臟功能顯著改善，其 LVSP 與±dp／dtmax值均得到顯著上升（P＜0.01）。 與 Sham 組比較，BBM 組LVSP 與±dp／dtmax值無(wú)明顯變化（P＞0.05，見(jiàn)圖 1）。可見(jiàn)，BBM 處理可顯著改善嚴(yán)重?zé)齻笫笮呐K功能障礙。

圖1 小檗胺對(duì)嚴(yán)重?zé)齻笫笮呐K功能的影響

2.2 BBM 減輕嚴(yán)重?zé)齻笫笮募〗M織損傷 心肌組織微觀結(jié)果顯示，與Sham 組比較，Burn 組大鼠心肌細(xì)胞水腫，部分發(fā)生灶性溶解，心肌纖維出現(xiàn)肌束分離和斷裂；給予BBM 處理后，BBM＋Burn 組大鼠心肌組織病變程度顯著減輕，心肌細(xì)胞水腫及肌束分離斷裂現(xiàn)象明顯改善。 與Sham 組比較，BBM 組心肌微觀組織結(jié)構(gòu)無(wú)明顯影響（圖2 A）。 血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示，與Sham 組比較，Burn 組大鼠心肌損傷標(biāo)志物 CKMB 和 cTnT 均顯著升高（P＜0.01）；給予BBM 處理后，與 Burn 組比較，BBM＋Burn 組大鼠的CKMB 和 cTnT 水平顯著下降（P＜0.01）。 與 Sham組比較，BBM 組血清CKMB 和cTnT 水平無(wú)明顯變化（P＞0.05，圖 2 B、C）。 可見(jiàn)，BBM 處理可顯著減輕嚴(yán)重?zé)齻笫笮募〗M織損傷。

圖2 小檗胺對(duì)嚴(yán)重?zé)齻笫笮募〗M織結(jié)構(gòu)及血清CKMB 和cTnT 水平的影響

2.3 BBM 抑制嚴(yán)重?zé)齻笫笮募〗M織炎癥反應(yīng)與Sham 組比較，Burn 組大鼠血清中炎性因子IL－1β、IL－6 及 TNF－α 水平均顯著增加（P＜0.01）；給予 BBM 處理后，與 Burn 組比較，BBM＋Burn 組大鼠血清中 IL－1β、IL－6 及 TNF－α 的水平均顯著降低（P＜0.01，圖 3A～C）。 測(cè)定 MPO 活性以評(píng)估中性粒細(xì)胞在心肌組織中的聚集情況，與Sham 組比較，Burn 組大鼠心肌組織 MPO 活性顯著升高；（P＜0.01）；給予 BBM 處理后，與 Burn 組比較，BBM ＋Burn 組大鼠心肌組織 MPO 活性顯著降低（P＜0.01，圖3D）。 與 Sham 組比較，BBM 組大鼠血清炎性因子的表達(dá)及心肌組織MPO 活性均無(wú)明顯變化（P＞0.05）。 可見(jiàn)，BBM 處理可顯著抑制嚴(yán)重?zé)齻笫笮募〗M織炎癥反應(yīng)。

圖3 小檗胺對(duì)嚴(yán)重?zé)齻笫笮募〗M織炎癥水平的影響

2.4 BBM 減輕嚴(yán)重?zé)齻笫笮募〗M織氧化應(yīng)激水平 與Sham 組比較，Burn 組大鼠心肌組織中MDA含量顯著上升，SOD 活性顯著下降（P＜0.01）；給予BBM 處理后，與 Burn 組比較，BBM＋Burn 組大鼠心肌組織中MDA 生成明顯被抑制，SOD 活性得到明顯升高（P＜0.01，圖 4A、B）。 DHE 染色以評(píng)估心肌組織ROS 生成情況，與 Sham 組比較，Burn 組大鼠心肌組織 ROS 產(chǎn)量顯著增加（P＜0.01）；給予 BBM處理后，與Burn 組比較，BBM＋Burn 組大鼠心肌組織 ROS 生成量明顯下降（P＜0.01，圖 4C、D）。 與Sham 組比較，BBM 組上述氧化應(yīng)激指標(biāo)均無(wú)明顯變化（P＞0.05）。 可見(jiàn)，BBM 處理可顯著減輕嚴(yán)重?zé)齻笫笮募〗M織氧化應(yīng)激損傷。

圖4 小檗胺對(duì)嚴(yán)重?zé)齻笫笮募〗M織氧化應(yīng)激水平的影響

2.5 BBM 抑制嚴(yán)重?zé)齻笫笮募〖?xì)胞凋亡 心肌組織TUNEL 染色結(jié)果顯示，與 Sham 組比較，Burn組大鼠心肌組織細(xì)胞凋亡明顯增多（P＜0.01）；給予 BBM 處理后，與 Burn 組比較，BBM＋Burn 組大鼠心肌組織細(xì)胞凋亡明顯減少（P＜0.01，圖 5A、B）。與Sham 組比較，Burn 組大鼠心肌組織凋亡蛋白cleaved caspase－3 的表達(dá)明顯上升（P＜0.01）；給予BBM 處理后，與 Burn 組比較，BBM＋Burn 組大鼠心肌組織cleaved caspase－3 蛋白表達(dá)被顯著抑制（P＜0.01，圖 5C）。 與 Sham 組比較，BBM 組心肌細(xì)胞凋亡率及cleaved caspase－3 的蛋白表達(dá)均無(wú)明顯變化（P＞0.05）。 可見(jiàn)，BBM 處理可顯著抑制嚴(yán)重?zé)齻笫笮募〖?xì)胞凋亡。

圖5 小檗胺對(duì)嚴(yán)重?zé)齻笫笮募〖?xì)胞凋亡水平的影響

2.6 BBM 激活嚴(yán)重?zé)齻笫笮募IRT3 信號(hào)通路與Sham 組比較，Burn 組大鼠心肌組織 SIRT3 蛋白的活性及表達(dá)均顯著減低，SIRT3 下游調(diào)控分子SOD2 乙酰化程度顯著升高（P＜0.01）；給予 BBM處理后，與Burn 組比較，BBM＋Burn 組大鼠心肌組織SIRT3 蛋白的活性及表達(dá)均顯著上升，SOD2 乙?；潭蕊@著下降（P＜0.01）。 與 Sham 組比較，BBM 組心肌組織SIRT3 蛋白的活性及表達(dá)和SOD2 乙?；潭染鶡o(wú)明顯變化（P＞0.05，圖 6）。 可見(jiàn)，BBM 處理可顯著激活嚴(yán)重?zé)齻笫笮募IRT3 信號(hào)通路。

圖6 BBM 對(duì)嚴(yán)重?zé)齻笫笮募〗M織SIRT3 通路的影響

3 討 論

心肌損害常常發(fā)生在嚴(yán)重?zé)齻脑缙陔A段，心肌損傷不僅會(huì)導(dǎo)致心功能不全，也會(huì)加重其他組織器官缺血缺氧損害［1，11］。 因此，早期的醫(yī)療干預(yù)以預(yù)防燒傷引起的心肌損傷成為臨床研究的重點(diǎn)。BBM 是從天然植物中提取的多酚類化合物，在心血管保護(hù)方面具有多種生物學(xué)功能［8－10］。 然而，BBM對(duì)嚴(yán)重?zé)齻鸬男募p傷是否具有治療效果尚未完全闡明。 本實(shí)驗(yàn)采用背部燙傷法建立嚴(yán)重?zé)齻麆?dòng)物模型，觀察到BBM 可明顯減輕心肌組織炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激損傷，進(jìn)而改善嚴(yán)重?zé)齻碌男募p傷，并證明這種作用與BBM 激活SIRT3 信號(hào)有關(guān)。

導(dǎo)致嚴(yán)重?zé)齻颊咝墓δ懿蝗闹匾蛑皇瞧湓缙诘男募〗M織損傷［12－13］。 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果同樣發(fā)現(xiàn)，嚴(yán)重?zé)齻?12 h 后，與 Sham 組比較，Burn 組大鼠血清中CKMB 和cTnT 顯著升高，心肌組織細(xì)胞水腫，部分發(fā)生灶性溶解，心肌纖維出現(xiàn)肌束分離和斷裂。 繼而心功能檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，Burn 組大鼠LVSP 與±dp／dtmax值均顯著降低，心臟收縮功能顯著受損。給予 BBM 處理后，與 Burn 組比較，BBM＋Burn 組大鼠的心肌損傷標(biāo)志物水平顯著下降，心肌組織病變程度顯著減輕，并且心臟收縮功能得到顯著改善。以上結(jié)果表明，BBM 對(duì)大鼠嚴(yán)重?zé)齻鸬募毙孕募p傷具有潛在的治療作用。

前期研究已證實(shí)嚴(yán)重?zé)齻娠@著增加促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生［14－15］。 IL－1β、IL－6 和 TNF－α 是心肌損傷過(guò)程中重要的炎性因子，可通過(guò)抑制cAMP 等信號(hào)抑制心肌細(xì)胞收縮［16］。 此外，IL－1β、IL－6 和TNF－α 還可通過(guò)誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附而在微血管和心臟損傷中發(fā)揮關(guān)鍵作用［17］。MPO 是一種血紅素輔基的血紅素蛋白酶，富含于中性粒細(xì)胞中，其活性直接反映了心肌組織中中性粒細(xì)胞的富集情況［18］。 本研究顯示，與 Sham 組比較，Burn 組大鼠血清中 IL－1β、IL－6 和 TNF－α 的水平均顯著增加，且心肌組織MPO 活性顯著升高。 給予BBM 處理后，與 Burn 組比較，BBM＋Burn 組大鼠血清炎性因子的表達(dá)及心肌組織MPO 活性均顯著下降。 以上結(jié)果表明，BBM 在嚴(yán)重?zé)齻蟮男呐K保護(hù)作用與抑制炎性因子的產(chǎn)生和中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)有關(guān)。

大量證據(jù)表明，嚴(yán)重?zé)齻部娠@著上調(diào)機(jī)體氧化應(yīng)激水平［19－20］。 當(dāng)體內(nèi)高活性分子如 ROS 和活性氮自由基（reactive nitrogen species， RNS）產(chǎn)生超出了機(jī)體的清除能力，氧化系統(tǒng)與抗氧化系統(tǒng)失衡，繼而導(dǎo)致心肌組織損傷［21］。 此外，循環(huán)中 MPO 水平升高也可進(jìn)一步促進(jìn)ROS 的生成，而ROS 又可通過(guò)氧化低密度脂蛋白導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞和心肌細(xì)胞功能障礙［22］。 本研究顯示，與 Sham 組比較，Burn組大鼠心肌組織中MDA 含量及ROS 產(chǎn)量顯著增加，抗氧化物SOD 活性顯著下降。 給予BBM 處理后，與 Burn 組比較，BBM＋Burn 組大鼠 MDA 含量及ROS 產(chǎn)量明顯降低，SOD 活性明顯升高。 以上結(jié)果表明，BBM 在嚴(yán)重?zé)齻蟮男呐K保護(hù)作用與抑制心肌組織氧化應(yīng)激水平有關(guān)。

嚴(yán)重?zé)齻鸬难装Y與氧化應(yīng)激損傷均可導(dǎo)致心肌細(xì)胞線粒體功能障礙，并誘發(fā)凋亡相關(guān)因子的釋放［23－24］，這與心肌損傷的發(fā)生發(fā)展緊密相關(guān)。caspase－3 的裂解是調(diào)控凋亡DNA 片段化的關(guān)鍵步驟［25］。 本研究顯示，與 Sham 組比較，Burn 組大鼠心肌組織cleaved caspase－3 的表達(dá)明顯上升，心肌細(xì)胞凋亡顯著增多。 給予BBM 處理后，與Burn 組比較，BBM＋Burn 組大鼠心肌組織 caspase－3 裂解明顯被抑制，心肌細(xì)胞凋亡率顯著下降。 以上結(jié)果表明，BBM 可通過(guò)抑制炎癥反應(yīng)與氧化應(yīng)激損傷抑制心肌細(xì)胞凋亡，進(jìn)而減輕大鼠嚴(yán)重?zé)齻鸬募毙孕募p傷。

一種依賴于煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的去乙酰化酶SIRT3 在調(diào)控細(xì)胞周期、代謝及細(xì)胞壽命方面起著非常重要的作用。 其主要定位于線粒體，且廣泛存在于心臟等富含線粒體的組織器官中［26］。 近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，SIRT3 在多種心血管疾病中都起到了保護(hù)性作用，其機(jī)制與抵抗炎癥與氧化應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)［27］。 Zhai 等［28］發(fā)現(xiàn)，褪黑激素可通過(guò) SIRT3 依賴性調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡改善心肌缺血再灌注損傷。 Chen 等［29］報(bào)道，三甲胺－N－氧化物可通過(guò)激活 SIRT3－SOD2－mtROS 信號(hào)通路抑制 NLRP3 炎癥小體誘導(dǎo)的血管炎癥反應(yīng)。 然而，SIRT3 信號(hào)是否介導(dǎo)了BBM 在嚴(yán)重?zé)齻录毙孕募p傷中的保護(hù)性作用有待進(jìn)一步探究。 本研究顯示，與Sham組比較，Burn 組大鼠心肌SIRT3 蛋白的活性及表達(dá)均顯著減低，SIRT3 下游調(diào)控分子SOD2 乙?；潭蕊@著升高。 給予 BBM 處理后，與 Burn 組比較，BBM＋Burn 組大鼠心肌組織SIRT3 信號(hào)被顯著激活。以上結(jié)果表明，BBM 發(fā)揮抗嚴(yán)重?zé)齻录毙孕募p傷的作用可能與其激活心肌SIRT3 信號(hào)有關(guān)。

綜上所述，BBM 通過(guò)激活心肌SIRT3 信號(hào)，增強(qiáng)心肌組織抗氧化應(yīng)激損傷和抗炎癥反應(yīng)的能力，進(jìn)而減輕嚴(yán)重?zé)齻笫笮募p傷。