胸腺肽穴位注射對(duì)膿毒癥患者T淋巴細(xì)胞亞群的影響研究

魏清蘭 劉凌凌 朱滿桂 鐘 建 陳德珠

廣州中醫(yī)藥大學(xué)順德醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，廣東佛山 528300

膿毒癥是指因感染引起宿主反應(yīng)失調(diào)導(dǎo)致的危及生命安全的器官功能障礙，是ICU常見的急危重癥，盡管如今醫(yī)療技術(shù)逐步提升，膿毒癥病死率仍居高不下[1-2]。研究表明，免疫反應(yīng)在膿毒癥的發(fā)病過程中有著重要的作用[3]，膿毒癥患者T淋巴細(xì)胞增殖明顯受到抑制[4]。隨著膿毒癥病理生理的深入研究，免疫治療已成為臨床日益關(guān)注的研究領(lǐng)域[5]。胸腺肽α1是胸腺組織分泌的具有生理活性的一組多肽，能促進(jìn)T淋巴細(xì)胞成熟，增強(qiáng)淋巴細(xì)胞功能，逆轉(zhuǎn)T細(xì)胞耗竭，治療免疫損害性疾病[6]，目前已被廣泛應(yīng)用于膿毒癥。胸腺肽常規(guī)給藥方法為皮下或肌肉注射，本研究將胸腺肽進(jìn)行足三里穴位注射，探究其對(duì)膿毒癥患者免疫功能的影響。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。選取2019年11月至2021年9月廣州中醫(yī)藥大學(xué)順德醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科收治的72例膿毒癥患者作為研究對(duì)象，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為三組，即觀察組、對(duì)照組A、對(duì)照組B，每組各24例，研究過程中每組脫落4例，最終完成觀察者60例，每組各20例。三組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05），具有可比性。見表1。

表1 三組患者一般資料比較

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)《中國膿毒癥/膿毒性休克急診治療指南（2018）》[7]中的診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷。對(duì)于感染或疑似感染的患者，當(dāng)膿毒癥相關(guān)序貫器官衰竭[Sequential（Sepsis-related）Organ Failure Assessment，SOFA]評(píng)分較基線上升≥2分即可診斷為膿毒癥。

1.3 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合上述膿毒癥診斷標(biāo)準(zhǔn)；②年齡18～80歲；③已簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有血液系統(tǒng)疾病或自身免疫性疾病患者；②艾滋病等免疫缺陷綜合征患者；③近1個(gè)月有腫瘤放化療史者；④近1個(gè)月有使用大劑量腎上腺皮質(zhì)激素或有應(yīng)用免疫抑制劑或其他免疫刺激劑的患者；⑤妊娠期或哺乳期女性；⑥易過敏體質(zhì)者；⑦下肢高度水腫者；⑧足三里穴位處皮膚有病變（皮疹、潰瘍、局部感染等）者。

1.4 剔除和脫落標(biāo)準(zhǔn)

研究期間病情加重家屬放棄治療或死亡者；研究期間出現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)不宜繼續(xù)參加研究者；受試者中途提出退出。

1.5 方法

三組除常規(guī)治療外，再分別給予以下處理：①觀察組選用胸腺肽（西安迪賽生物藥業(yè)，國藥準(zhǔn)字H20003483，規(guī)格：10 mg/支），1支 /次，將藥物溶于2 ml生理鹽水中，用2 ml注射器吸取后，選取一側(cè)足三里穴，常規(guī)消毒后進(jìn)針，深度為3 cm，得氣后回抽無血，將藥物注入，1次/d，左右足三里交替注射，觀察7 d；②對(duì)照組A使用2 ml注射器，吸取2 ml生理鹽水，選取一側(cè)足三里常規(guī)消毒后進(jìn)針，深度為3 cm，得氣后回抽無血，將藥物注入，1次/d，左右足三里交替注射，觀察7 d；③對(duì)照組B將胸腺肽1支溶于2 ml注射用生理鹽水中，皮下注射，1次/d，觀察7 d。

1.6 觀察指標(biāo)

三組患者均在干預(yù)措施前及治療3、5 d后及治療結(jié)束后的第一天（治療7 d后）早晨空腹抽取靜脈血送檢。采用邁瑞全自動(dòng)血液分析儀檢測(cè)血常規(guī)，記錄淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)（lymphocyte count，LY），采用流式細(xì)胞技術(shù)（流式細(xì)胞儀，美國BD公司，F(xiàn)ACS CantoⅡ TM）檢測(cè) CD3+、CD4+，計(jì)算 CD4+/CD8+，并觀察三組治療過程中有無不良反應(yīng)。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)使用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理。計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，三組間比較用單因素方差分析，組內(nèi)前后比較用配對(duì)樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用[n（%）]表示，行χ2檢驗(yàn)，P＜ 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組患者治療前后LY比較

三組患者治療前、治療3 d后組間LY比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05）；觀察組治療 5、7 d后LY高于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）；對(duì)照組B治療7 d后LY高于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）；對(duì)照組 A 治療 3、5、7 d后 LY與治療前比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05）；且觀察組治療5、7 d后LY高于兩個(gè)對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05），兩對(duì)照組之間比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05）。見表2。

表2 三組患者治療前后LY比較（×109/L，）

表2 三組患者治療前后LY比較（×109/L，）

注 組內(nèi)與治療前比較，aP ＜ 0.05；同時(shí)段觀察組與對(duì)照組A比較，bP ＜ 0.05；同時(shí)段觀察組與對(duì)照組B比較，cP ＜ 0.05；LY：淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)

組別 n 治療前 治療3 d后 治療5 d后 治療7 d后 t治療前與治療7 d后值 P治療前與治療7 d后值觀察組 20 1.04±0.48 0.96±0.29 1.40±0.36abc 1.76±0.42abc -14.169 0.000對(duì)照組A 20 1.13±0.49 1.03±0.31 1.05±0.31 1.20±0.32 -1.237 0.231對(duì)照組B 20 1.08±0.48 1.00±0.34 1.14±0.36 1.14±0.36a -7.622 0.000 F值 0.165 0.278 5.737 10.368 P值 0.848 0.758 0.005 0.000

2.2 三組患者治療前后T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比較

三組患者治療前、治療3 d后組間CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05）；觀察組治療5、7 d后三項(xiàng)指標(biāo)均高于治療前，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）；兩對(duì)照組治療7 d后三項(xiàng)指標(biāo)高于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）；觀察組治療5、7 d后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均高于兩對(duì)照組，除治療7 d后CD3+指標(biāo)與對(duì)照組B比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05），其余指標(biāo)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）；兩對(duì)照組比較，對(duì)照組B 治療 7 d后 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+高于對(duì)照組 A，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）。見表3～5。

表3 三組患者治療前后CD3+比較（%，）

表3 三組患者治療前后CD3+比較（%，）

注 組內(nèi)與治療前比較，aP ＜ 0.05；同時(shí)段觀察組與對(duì)照組A比較，bP ＜ 0.05；同時(shí)段觀察組與對(duì)照組B比較，cP ＜ 0.05；同時(shí)段對(duì)照組A與對(duì)照組B比較，dP ＜ 0.05

組別 n 治療前 治療3 d后 治療5 d后 治療7 d后 t治療前與治療7 d后值 P治療前與治療7 d后值觀察組 20 55.60±5.27 55.44±3.77 60.07±3.59abc 66.03±4.55ab -12.776 0.000對(duì)照組A 20 55.68±4.97 54.71±3.46 54.75±3.04 60.73±4.36a -8.851 0.000對(duì)照組B 20 55.76±5.69 54.64±4.55 56.50±4.32 64.58±4.32ad -11.681 0.000 F值 0.004 0.249 10.796 7.729 P值 0.996 0.781 0.000 0.001

表4 三組患者治療前后CD4+比較（%，）

表4 三組患者治療前后CD4+比較（%，）

注 組內(nèi)與治療前比較，aP ＜ 0.05；同時(shí)段觀察組與對(duì)照組A比較，bP ＜ 0.05；同時(shí)段觀察組與對(duì)照組B比較，cP ＜ 0.05；同時(shí)段對(duì)照組A與對(duì)照組B比較，dP ＜ 0.05

組別 n 治療前 治療3 d后 治療5 d后 治療7 d后 t治療前與治療7 d后值 P治療前與治療7 d后值觀察組 20 27.64±3.06 27.64±2.25 30.88±3.02abc 36.16±2.89abc -13.691 0.000對(duì)照組A 20 27.94±1.92 27.84±2.75 27.43±1.50 32.08±2.37a -13.435 0.000對(duì)照組B 20 27.89±3.04 27.46±2.45 28.29±2.51 34.25±2.55ad -11.170 0.000 F值 0.067 0.117 10.956 12.282 P值 0.935 0.890 0.000 0.000

表5 三組患者治療前后CD4+/CD8+比較（%，）

表5 三組患者治療前后CD4+/CD8+比較（%，）

注 組內(nèi)與治療前比較，aP ＜ 0.05；同時(shí)段觀察組與對(duì)照組A比較，bP ＜ 0.05；同時(shí)段觀察組與對(duì)照組B比較，cP ＜ 0.05；同時(shí)段對(duì)照組A與對(duì)照組B比較，dP ＜ 0.05

組別 n 治療前 治療3 d后 治療5 d后 治療7 d后 t治療前與治療7 d后值 P治療前與治療7 d后值觀察組 20 1.01±0.09 0.96±0.09 1.12±0.08abc 1.31±0.10abc -11.624 0.000對(duì)照組A 20 1.05±0.10 1.01±0.13 1.02±0.13 1.17±0.10a -9.180 0.000對(duì)照組B 20 1.01±0.13 1.00±0.13 1.02±0.16 1.25±0.11ad -7.081 0.000 F值 1.061 0.984 4.116 10.002 P值 0.353 0.380 0.021 0.000

2.3 不良反應(yīng)發(fā)生情況

三組患者治療期間均未見不良反應(yīng)發(fā)生。

3 討論

膿毒癥發(fā)生發(fā)展過程中，大量炎癥遞質(zhì)的釋放可引起“細(xì)胞因子風(fēng)暴”，導(dǎo)致免疫功能損傷和抑制，表現(xiàn)為CD4+和CD8+T細(xì)胞消耗和凋亡[8-9]。對(duì)膿毒癥進(jìn)行免疫功能的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)與評(píng)價(jià)對(duì)患者預(yù)后有重要意義[10]。本研究選用的胸腺肽主要成分為胸腺肽α1，它是一種免疫調(diào)節(jié)劑，用于膿毒癥患者，在激活和恢復(fù)免疫方面有著重要的生物學(xué)作用，可降低膿毒癥患者的病死率，并減少再次感染的發(fā)生率[11]。

本研究結(jié)果顯示，胸腺肽皮下注射可改善膿毒癥患者T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)，但需要用藥7 d方見有顯著療效，與周立新等[12]的研究一致。本研究結(jié)果顯示，將胸腺肽進(jìn)行足三里穴位注射較常規(guī)皮下注射及生理鹽水足三里穴位注射能更早提高膿毒癥患者 LY、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+免疫指標(biāo)，觀察組在治療5 d后各指標(biāo)即可見顯著升高。另外，對(duì)照組A治療7 d后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+等指標(biāo)較治療前也有明顯提高，生理鹽水本無增強(qiáng)免疫作用，提示足三里穴位的刺激可能也有一定調(diào)節(jié)免疫的功能，這與本課題組前期研究結(jié)論一致[13]。

足三里是足陽明胃經(jīng)的合穴，有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力、增強(qiáng)抗病能力、調(diào)理脾胃、補(bǔ)中益氣、扶正祛邪的作用。穴位注射將藥物直接注射到腧穴上，延長了穴位刺激的時(shí)間，可增強(qiáng)腧穴和經(jīng)絡(luò)的治療作用，從而起到腧穴、針刺、藥物三者結(jié)合的協(xié)同作用，可大大提高療效。既往有學(xué)者采用足三里穴位注射胸腺肽治療成人反復(fù)呼吸道感染，結(jié)果顯示其療效遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于普通肌肉注射[14]。也有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)電針刺激足三里穴，可使膿毒癥患者體內(nèi)的CD4+及CD8+含量明顯上升，電針足三里不僅能調(diào)節(jié)膿毒癥患者的免疫功能，還能降低多器官功能障礙綜合征（MODS）的發(fā)生率和病死率，改善膿毒癥患者的預(yù)后[15]。

本研究采用胸腺肽足三里穴位注射，較常規(guī)療法更能快速提高膿毒癥患者的細(xì)胞免疫功能，且治療方法簡單易掌握，無不良反應(yīng)。本研究不足之處在于樣本量偏少，研究中心單一，病例的感染部位、感染病原體等未能納入觀察，且未能對(duì)患者病死率及其他預(yù)后指標(biāo)進(jìn)行分析，尚需進(jìn)一步深入研究。