酒泉市肅州區(qū)生豬屠宰場(chǎng)沙門氏菌污染情況調(diào)查與分析

夏冰芝，王志龍

（1.酒泉職業(yè)技術(shù)學(xué)院，甘肅 酒泉 735000；2.酒泉市畜牧獸醫(yī)總站，甘肅 酒泉 735000）

沙門氏菌屬革蘭氏陰性菌，在自然界廣泛分布且種類眾多，目前已知的2 600多種血清型中有部分血清型沙門氏菌（如腸炎沙門氏菌）可感染人，嚴(yán)重時(shí)可危及患者生命[1]。人類接觸被沙門氏菌污染的水源、食物和糞便等可感染該病，主要臨床癥狀包括急性胃腸炎（如嘔吐、腹瀉等）、敗血癥及副傷寒等[2]。誠(chéng)然，沙門氏菌病是重要的食源性細(xì)菌病，對(duì)消費(fèi)者健康造成巨大的威脅。

消費(fèi)者接觸該病原主要是與食用或接觸被該病原污染的肉類相關(guān)[3-4]。豬肉產(chǎn)品進(jìn)入市場(chǎng)的第一步是屠宰與加工，而生豬在屠宰和加工過(guò)程中容易受食源性病原菌污染。邱燕等調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)，貴州地區(qū)屠宰場(chǎng)新鮮豬肉樣品沙門氏菌污染率達(dá)14.0%（7/50）[5]；韓依辛等調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)，廣東10個(gè)屠宰場(chǎng)來(lái)源豬肉樣品沙門氏菌檢出率為14.06%（70/498）[6]；周政對(duì)湘潭市部分屠宰場(chǎng)來(lái)源豬肉和環(huán)境樣品的檢測(cè)結(jié)果表明，90份豬肉或環(huán)境樣品沙門氏菌檢出率為10.0%，其中環(huán)境樣品的檢出率（15.6%）較豬肉樣品的檢出率（6.9%）更高[7]。以上文獻(xiàn)數(shù)據(jù)表明當(dāng)前部分地區(qū)屠宰場(chǎng)來(lái)源豬肉樣品沙門氏菌污染情況較為嚴(yán)重，同時(shí)環(huán)境樣品中細(xì)菌污染也不能被忽視。為了解酒泉肅州區(qū)部分屠宰場(chǎng)沙門氏菌污染情況，從肅州區(qū)2個(gè)屠宰場(chǎng)采集屠宰豬肉組織、屠宰器具和環(huán)境樣品共210份進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)分離菌血清型和耐藥情況進(jìn)行試驗(yàn)與分析。

1 材料與方法

1.1 樣品來(lái)源與采集方法

2021年4—9月從酒泉市肅州區(qū)2個(gè)生豬屠宰場(chǎng)采集豬肉組織樣品（105份）、器具樣品（42份）和環(huán)境樣品（63份）共210份。其中豬肉樣品包括肺臟、淋巴結(jié)和扁桃體等，分別切取少量以上組織樣品共約50 g，標(biāo)記后保存于無(wú)菌封口袋；器具主要包括殺豬刀、刮毛刀、運(yùn)輸豬肉或生豬移動(dòng)車等；環(huán)境樣品主要包括生豬剖殺臺(tái)和豬肉分割臺(tái)。用蘸取少量PBS或生理鹽水溶液的棉球在環(huán)境或器具樣品表面反復(fù)涂抹，標(biāo)記后置于封口袋內(nèi)。所有樣品低溫送至酒泉職業(yè)技術(shù)學(xué)院，保存于4 ℃，待檢。

1.2 沙門氏菌分離與鑒定

取少量組織樣品（肺臟、淋巴結(jié)和扁桃體混合物）勻漿；將環(huán)境或器具樣品所用棉簽與少量PBS混勻。使用滅菌接種環(huán)蘸取少量勻漿液或混合液后在鮮血瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行平板劃線，在適宜環(huán)境（37 ℃恒溫箱）下培養(yǎng)。其后挑選疑似沙門氏菌菌落在麥康凱培養(yǎng)基表面進(jìn)行劃線，37 ℃恒溫箱培養(yǎng)24 h，挑取疑似沙門氏菌進(jìn)行革蘭氏染色和16S rRNA基因序列擴(kuò)增、測(cè)序與分子鑒定[7]。

1.3 沙門氏菌分離株血清型鑒定

將獲得的沙門氏菌分離株接種于LB固體和半固體培養(yǎng)基，參照相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB 4789.4—2016）和White-Kauffmann抗原表使用玻板凝集試驗(yàn)對(duì)分離株血清型進(jìn)行鑒定。

1.4 藥敏試驗(yàn)

選擇15種臨床常用抗生素藥物（阿莫西林、氨芐西林、氨曲南、頭孢他啶、頭孢唑林、頭孢噻肟、慶大霉素、鏈霉素、大觀霉素、四環(huán)素、磺胺甲氧嘧啶、環(huán)丙沙星、氯霉素、呋喃唑酮和呋喃妥因），使用藥敏紙片瓊脂擴(kuò)散法對(duì)本試驗(yàn)獲得沙門氏菌分離株進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)[4]。

2 結(jié)果

2.1 肅州區(qū)屠宰場(chǎng)來(lái)源樣品沙門氏菌污染情況調(diào)查結(jié)果

由表1可知，小型屠宰場(chǎng)來(lái)源樣品沙門氏菌檢出率超過(guò)大型屠宰場(chǎng)檢出率近1倍，分別為12.05%（10/83）和6.30%（8/127）；不同來(lái)源樣品檢出率差異較大，其中環(huán)境樣品檢出率最高，為14.28%（9/63），器具樣品和豬肉樣品檢出率稍低，分別為4.76%（2/42）和6.67%（7/105）。

表1 肅州區(qū)屠宰場(chǎng)來(lái)源樣品沙門氏菌污染情況調(diào)查結(jié)果

2.2 沙門氏菌分離株血清型鑒定結(jié)果

對(duì)獲得的18個(gè)沙門氏菌分離株進(jìn)行血清型鑒定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，18個(gè)分離株中共鑒定到5種血清型，其中鼠傷寒沙門氏菌最常見(jiàn)，其所占比例為33.33%（6/18）；其次為羅森沙門氏菌和倫敦型沙門氏菌，所占比例均為22.22%（4/18），而腸炎沙門氏菌和德比型沙門氏菌分離菌數(shù)量分別為3株和1株，所占比例分別為16.67%（3/18）和5.55%（1/18）。

2.3 沙門氏菌藥敏試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)結(jié)果

對(duì)分離的18個(gè)菌株進(jìn)行耐藥性試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)不同菌株耐藥譜存在差異。如表2所示，超過(guò)50%菌株對(duì)阿莫西林、氨芐西林、大觀霉素、氯霉素、磺胺甲氧嘧啶和四環(huán)素具有耐藥性；大部分菌株對(duì)氨曲南（94.45%）、頭孢他啶（94.45%）、呋喃妥因（94.45%）、頭孢唑林（83.33%）、呋喃唑酮（83.33%）和頭孢噻肟（77.78%）敏感。

表2 沙門氏菌分離株耐藥性檢測(cè)結(jié)果

3 討論

生豬在飼養(yǎng)、屠宰和運(yùn)輸?shù)冗^(guò)程中容易受到病原菌污染，部分病原菌甚至可感染人，如沙門氏菌和大腸桿菌等，這對(duì)消費(fèi)者和生豬養(yǎng)殖、屠宰和銷售等相關(guān)人員健康造成巨大的威脅。沙門氏菌屬于重要食源性致病菌，該病原在豬場(chǎng)環(huán)境中廣泛分布。肥育豬感染沙門氏菌可處于隱性感染階段（不發(fā)病但可帶毒），在此類肥豬屠宰和售賣過(guò)程中，消費(fèi)者和相關(guān)工作人員食用或接觸被沙門氏菌污染的肉類可能感染該病。

已有文獻(xiàn)表明，屠宰場(chǎng)來(lái)源豬肉沙門氏菌污染較為嚴(yán)重，甚至屠宰場(chǎng)環(huán)境樣品中也分布著沙門氏菌，這對(duì)食品衛(wèi)生威脅較大[5-7]。為初步調(diào)查酒泉市肅州區(qū)屠宰場(chǎng)沙門氏菌污染情況，筆者從該地區(qū)2個(gè)屠宰場(chǎng)采集豬肉組織、環(huán)境樣品和器具樣品共210份進(jìn)行沙門氏菌的分離與鑒定，并分析其血清型和耐藥性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)該地區(qū)屠宰場(chǎng)來(lái)源樣品沙門氏菌檢出率為8.57%（18/210），其中小型屠宰場(chǎng)來(lái)源樣品檢出率（12.05%）較大型屠宰場(chǎng)檢出率（6.30%）高，這可能與小型屠宰場(chǎng)衛(wèi)生環(huán)境較差、生豬收購(gòu)來(lái)源不穩(wěn)定和屠宰場(chǎng)工作人員疏于對(duì)食源性細(xì)菌疾病的防控等有關(guān)；進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，屠宰場(chǎng)環(huán)境、器具和豬肉組織樣品沙門氏菌檢出率分別為14.28%（9/63）、4.76%（2/42）和6.67%（7/105），可見(jiàn)屠宰場(chǎng)應(yīng)提高衛(wèi)生管理水平，如定期對(duì)環(huán)境進(jìn)行消殺，將屠宰器具反復(fù)清洗和消毒等。

在分離的18個(gè)沙門氏菌分離株中共檢測(cè)到5種血清型，其中鼠傷寒沙門氏菌（6株）、羅森沙門氏菌（4株）和倫敦型沙門氏菌（4株）較為常見(jiàn)，而鼠傷寒沙門氏菌屬于重要的人畜共患性病原，這也說(shuō)明該地區(qū)屠宰場(chǎng)分布的部分沙門氏菌的確會(huì)對(duì)公共衛(wèi)生造成威脅。耐藥性試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，大部分菌株對(duì)阿莫西林、氨芐西林、大觀霉素和磺胺甲氧嘧啶等具有耐藥性，但對(duì)頭孢類藥物相對(duì)敏感，如頭孢他啶和頭孢唑林等，提示豬場(chǎng)對(duì)于該病的防治應(yīng)提前對(duì)分離株進(jìn)行耐藥性抗生素篩選，避免藥物濫用。