茯苓砂仁保健食品對胃黏膜損傷保護功能作用的研究

◎ 徐 君

（山東中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院藥學部，山東 濟南 250014）

胃黏膜損傷是臨床上常見的一種消化系統(tǒng)疾病，目前常用的保護胃黏膜方法，除了藥物控制，保健食品防未病，寓醫(yī)于食，藥食兼用理念日漸深入人心[1]。我國傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論中，素有“藥食同源，藥食同功”的概念，藥食兩用的資源具有營養(yǎng)功能，同時兼有不同的保健作用。茯苓砂仁保健食品原料為茯苓、砂仁、丹參、白術、木香[2]，是從防治胃黏膜損傷文獻應用頻率較高的50味藥食同源中藥材中選出，本研究主要探究其對胃黏膜的保護作用。

1 材料與方法

1.1 受試物預處理

茯苓砂仁保健食品是以茯苓、砂仁、丹參、白術和木香為主要原料，以糊精為輔料制成的保健食品，4 g/袋，每日1袋，其基本工藝為茯苓、砂仁、丹參、白術和木香經(jīng)水煎煮后，濃縮，加入輔料制粒而成，每袋相當于原料8 g（茯苓∶白術∶丹參∶砂仁∶木香為3∶3∶2∶1∶1）。使用前將茯苓砂仁保健食品用蒸餾水配制成相應濃度，設置3個給藥劑量組，即0.4 g·kg-1、0.6 g·kg-1、0.8 g·kg-1。

1.2 試驗動物

健康成年SD大鼠60只，清潔級，雄性，體重在200 g左右，購自上海西普爾-必凱實驗動物有限公司。

1.3 試劑與儀器

生理鹽水（實驗室配制），無水乙醇（天津風船化學試劑科技有限公司）；PGE2、表皮細胞生長因子（Epidermal Growth Factor，EGF）放免試劑盒（北京華英生物技術研究所）；NO、丙二醛（Malondialdehyde，MDA）試劑盒（南京建成生物工程研究所）；RE3000B旋轉蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）；FSH-2勻漿機（江蘇省金壇市環(huán)宇科技儀器廠）；KDC-2044低速冷凍離心機（武漢華科達實驗設備有限公司）；微型勻漿器（北京東方大林科技有限公司）；722分光光度計（上海分析儀器總廠）。

1.4 試驗方法

1.4.1 胃黏膜損傷模型大鼠造模試驗及分組

60只SD大鼠適應性飼養(yǎng)5～7 d后，按體重隨機分為5組，每組12只，即空白對照造組、模型對照組和茯苓砂仁保健食品低、中、高劑量組（0.4 g·kg-1、 0.6 g·kg-1、0.8 g·kg-1，以總生藥量計）。茯苓砂仁保健食品給予不同劑量的受試藥液，空白對照組和模型對照組分別給予等體積的蒸餾水，每日1次，連續(xù)30 d。末次給藥后，所有實驗大鼠禁食不禁水24 h后，模型對照組和茯苓砂仁保健食品3個劑量組的大鼠灌胃無水乙醇（1.0 mL/只），2 h后處死所有大鼠，腹主動脈取血，低溫保存待測。

1.4.2 大鼠胃黏膜損傷指數(shù)和損傷抑制率的測定

結扎大鼠幽門和賁門，取出大鼠整胃，沿胃大彎處剪開，用冰生理鹽水小心清洗干凈，按Guth法[1]進行計分：損傷≤1 mm（包括糜爛點）記為1分； 1 mm＜損傷≤2 mm記為2分；2 mm＜損傷≤3 mm記為3分；3 mm＜損傷≤4 mm記為4分；損傷＞4 mm記為5分；損傷寬度＞2 mm時分值翻倍，分數(shù)總和即為大鼠胃黏膜損傷指數(shù)，按公式（1）計算：

1.4.3 大鼠胃黏膜組織中PGE2和EGF含量的測定

取胃黏膜損傷附近的活組織，稱取5 mg放于勻漿器中，加入0.4 mL無水乙醇，輕度研磨，加入1.6 mL生理鹽水進行勻漿。勻漿液置于3 000 r·min-1離心機中離心10 min，取上清液放冰箱冷凍保存。PGE2和EGF含量測定按試劑盒說明書步驟進行，均采用放射免疫法。

1.4.4 大鼠血清中MDA和NO含量的測定

將低溫保存的血液置于3 500 r·min-1離心機中離心10 min，取上層血清，按試劑盒操作步驟檢測血清中MDA和NO含量。

1.5 統(tǒng)計學處理

試驗數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差（±s）表示，采用SPSS 20.0統(tǒng)計分析軟件處理，組間數(shù)據(jù)采用方差分析，P＜0.05即為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果與分析

2.1 茯苓砂仁保健食品對大鼠胃黏膜損傷指數(shù)的影響

由表1可知，與空白對照組相比，模型對照組大鼠胃黏膜損傷指數(shù)明顯增高（P＜0.01），說明無水乙醇灌胃能致大鼠急性胃黏膜損傷且損傷嚴重。與模型對照組比，茯苓砂仁保健食品低、中、高劑量組損傷指數(shù)降低，損傷抑制率上升，與模型對照組比有明顯差異（P＜0.05或P＜0.01），表明受試物能降低胃黏膜損傷程度，對胃黏膜有一定的保護作用。

2.2 茯苓砂仁保健食品對大鼠胃黏膜組織中PGE2和EGF含量的影響

由表2可知，與空白對照組比，模型對照組大鼠胃組織中PGE2和EGF含量均明顯降低，具有極顯著性差異（P＜0.01），說明胃黏膜受損大鼠防御作用已被削弱。與模型對照組比，受試物低、中、高劑量組大鼠胃組織中PGE2和EGF含量上升且具有顯著差異（P＜0.05或P＜0.01）。表明受試物能夠促進胃組織中保護因子的分泌，強化胃黏膜防御機制。

表1 茯苓砂仁保健食品對大鼠胃黏膜損傷指數(shù)的影響表

表2 茯苓砂仁保健食品對大鼠胃黏膜組織中PGE2和EGF的影響表

2.3 茯苓砂仁保健食品對大鼠血清中MDA和NO含量的影響

由表3可知，與空白對照組相比，模型對照組大鼠血清中MDA含量增加，NO含量減少，具有顯著性差異（P＜0.05或P＜0.01），說明胃黏膜損傷大鼠體內(nèi)脂質過氧化嚴重，胃黏膜修復能力減弱。與模型對照組相比，受試物低、中、高劑量組MDA含量減少，NO含量上升，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05或P＜0.01）。表明受試物能清除脂質過氧化產(chǎn)物，增加血氧含量供給，促進胃黏膜修復。

表3 茯苓砂仁保健食品對大鼠血清中MDA和NO含量的影響表

3 結論與討論

茯苓、砂仁、丹參、白術和木香是我國傳統(tǒng)中藥材，按照《衛(wèi)生部關于進一步規(guī)范保健食品原料管理的通知》（衛(wèi)法監(jiān)發(fā)〔2002〕51號），茯苓、砂仁為藥食同源，丹參、白術、木香為可用于保健食品原料。茯苓在我國已有2 000多年的食用歷史，載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品[3]?！端幤坊x》稱之“茯苓，主治脾胃不和，泄滯脾脹，胸脅逆氣，膈間痰氣”。砂仁從古至今，被視為“醫(yī)林珍品”，具有化濕開胃、溫脾止瀉、理氣安胎之效，主要用于脘痞不饑、脾胃虛寒、濕濁中阻及嘔吐泄瀉等癥，能通過對抗胃黏膜上的攻擊因子和增強胃黏膜的防御因子兩方面對胃黏膜進行保護[4]。丹參具有活血通絡、通經(jīng)止痛、清心除煩、涼血消癰的功能，在心腦血管疾病及消炎止痛等方面應用廣泛?，F(xiàn)代研究表明，丹參有清除氧自由基，改善胃部微循環(huán)，增加胃黏膜血流量、加快胃黏膜快速愈合等作用[5]。白術具有益氣健脾，燥濕利水等功效，主要用于脾虛食少、腹脹泄滯等癥?！夺t(yī)學啟源》記載“除濕益燥，和中益氣，溫中，去脾胃中濕，除胃熱，強脾胃”；《長沙藥解》曰“味甘、微苦，入足陽明胃、足太陰脾經(jīng)。補中燥濕，止渴生津，最益脾精，大養(yǎng)胃氣”[6]。由此看來，白術主要作用集中在胃腸道系統(tǒng)。木香具有行氣止痛、健脾消食的功效，能減少胃液分泌量，從而降低胃液總酸度，并降低胃蛋白酶活性，提高NO和生長抑素含量[7]。我國傳統(tǒng)醫(yī)學將胃黏膜損傷歸類于“胃脘痛”，最早見于《內(nèi)經(jīng)》，病因病機為食積、脾虛、瘀血及脾胃蟲邪[8]，上述5種原料正對病機。

本實驗選擇胃黏膜損傷指數(shù)，黏膜組織PGE2和EGF及血清MDA和NO作為觀察指標，結果表明，茯苓砂仁保健食品的3個劑量組均能降低大鼠胃黏膜損傷指數(shù)，增加防御因子含量，及時清除體內(nèi)自由基，增強胃黏膜修復能力，表明茯苓砂仁保健食品具有預防保護胃黏膜的作用，這為后續(xù)開發(fā)保護胃黏膜損傷功能食品提供了依據(jù)。