葡萄蒸餾酒對(duì)小鼠急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的影響

◎ 楊江東，劉建學(xué),2,3，韓四海,2,3，李佩艷,2,3，郭金英,2,3，羅登林,2,3

（1.河南科技大學(xué) 食品與生物工程學(xué)院，河南 洛陽 471023；2.河南省食品原料工程技術(shù)研究中心，河南 洛陽 4710233；3.食品加工與安全國(guó)家級(jí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心，河南 洛陽 471023）

急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎（Acute Gouty Arthritis，AGA） 是由于人體內(nèi)血尿酸含量過高導(dǎo)致尿酸鈉析出結(jié)晶在關(guān)節(jié)腔內(nèi)，在機(jī)體遠(yuǎn)端關(guān)節(jié)出現(xiàn)疼痛和炎癥反應(yīng)，發(fā)作時(shí)間較快，疼痛迅速[1]。痛風(fēng)一般與尿酸排泄減少而引發(fā)的高尿酸血癥直接相關(guān)，主要臨床表現(xiàn)為血尿酸升高，關(guān)節(jié)紅腫疼痛，皮膚溫度升高。由于尿酸過高會(huì)導(dǎo)致人體腎臟的負(fù)擔(dān)，嚴(yán)重者會(huì)發(fā)生關(guān)節(jié)破壞，并伴有其他疾病的病發(fā)，如高血壓及冠心病、糖尿病等[2-3]。目前臨床上干預(yù)AGA主要有兩種應(yīng)對(duì)措施：對(duì)于急性發(fā)作期的治療要及時(shí)用藥物干預(yù)，進(jìn)行抗炎止痛，常用藥物為吲哚美辛、雙氯芬酸[4]；對(duì)于發(fā)作間歇期要控制血尿酸水平，控制飲食，不吃高嘌呤食物（如動(dòng)物肝臟、海鮮等）、高果糖食物，多吃低嘌呤食物等[5-6]。

葡萄是葡萄科葡萄屬木質(zhì)藤本的一種植物，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值很高，多吃可以增強(qiáng)脾胃，除此之外葡萄還具有抗炎癥和抗血小板凝聚、抗癌癥等功能[7-8]。研究表明葡萄中白藜蘆醇具有顯著的降血尿酸和抗炎活性，葡萄中所含槲皮素可以明顯降低痛風(fēng)模型大鼠足趾腫脹度[9-11]。葡萄蒸餾酒是葡萄發(fā)酵后經(jīng)蒸餾而成的一種酒精濃度高于原發(fā)酵產(chǎn)物的酒精飲料，同樣具有一定的保健效果[12]。研究表明葡萄酒中所含嘌呤含量很少，極低于相同質(zhì)量黃酒及白酒中的嘌呤量[13]。研究表明飲用葡萄酒不會(huì)增加痛風(fēng)發(fā)作的風(fēng)險(xiǎn)，葡萄酒可以降低痛風(fēng)大鼠的炎癥反應(yīng)，但目前較少有人研究葡萄蒸餾酒與痛風(fēng)之間的關(guān)系[14-15]。本課題組前期對(duì)葡萄蒸餾酒的飲用人群進(jìn)行調(diào)查，部分飲用者反饋葡萄蒸餾酒適量飲用可以緩解痛風(fēng)的疼痛。因此本實(shí)驗(yàn)預(yù)計(jì)通過葡萄蒸餾酒灌胃及AGA造模來探究葡萄蒸餾酒對(duì)AGA小鼠關(guān)節(jié)腫脹度和血清生化指標(biāo)的影響，初步討論產(chǎn)生干預(yù)效果的原因，為下一步葡萄蒸餾酒中微量成分對(duì)AGA小鼠的干預(yù)研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

無特定病原體（SPF級(jí)）6～8周齡雄性昆明小鼠96只，22～38 g，購自河南科技大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證號(hào)：SYXK（豫）2020-0008，小鼠自由攝食飲水，于河南科技大學(xué)食品與生物工程學(xué)院動(dòng)物飼養(yǎng)室分籠飼養(yǎng)，飼養(yǎng)室溫度（20±2）℃，濕度50%～55%，每天12 h光照12 h黑暗飼養(yǎng)7 d。本實(shí)驗(yàn)在確保實(shí)驗(yàn)可行性的同時(shí)減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的數(shù)量，所有實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，小鼠均以頸椎脫臼法處死，動(dòng)物尸體進(jìn)行無害化處理，本實(shí)驗(yàn)遵循實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生物倫理學(xué)要求。

1.2 試劑與材料

葡萄蒸餾酒（46°、52°、60°），河南九朝雅宴酒業(yè)有限公司提供；無水乙醇、乙醚（分析純）天津市德恩化學(xué)試劑有限公司提供；吲哚美辛（99%）、尿酸鈉（98%），上海麥克林生化科技有限公司提供；4%多聚甲醛固定液，廣州賽國(guó)生物科技有限責(zé)任公司提供；丙二醛試劑盒（Malondialdehyde，MDA）（批號(hào)：20211203）、超氧化物歧化酶試劑盒（Superoxide Dismutase，SOD）（批號(hào)：20211122）、過氧化氫酶試劑盒（Catalase，CAT）（批號(hào)：20211202），南京建成生物工程研究所提供；小鼠腫瘤壞死因子-α（Tumor Necrosis Factor-α，TNF-α）試劑盒（批號(hào)：202112046）、小鼠白細(xì)胞介素-1β（interleukin-1β，IF-1β）試劑盒（批號(hào)：202112046）上海鈺博生物科技有限公司提供。

1.3 儀器與設(shè)備

BSA1245型分析天平，北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；HH-S4型電熱恒溫水浴鍋，北京科偉永興儀器有限公司產(chǎn)品；單聯(lián)萬用電爐，北京科偉永興儀器有限公司產(chǎn)品；JE502型電子天平，上海浦春計(jì)量?jī)x器有限公司產(chǎn)品；D3024R型高速冷凍離心機(jī)，長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司產(chǎn)品；752G紫外可見分光光度計(jì)，上海儀電分析儀器有限公司產(chǎn)品；XFS-280型手提式壓力蒸汽滅菌器，浙江新豐醫(yī)療器械有限公司產(chǎn)品；XW-80A型渦旋振蕩器，海門市其林貝爾儀器制造有限公司產(chǎn)品；電子數(shù)顯卡尺，桂林量具刃具有限責(zé)任公司產(chǎn)品；Multiskan型多功能酶標(biāo)儀，賽默飛世爾（上海）儀器有限公司產(chǎn)品。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 小鼠的分組與給藥

將96只雄性昆明小鼠適應(yīng)性培養(yǎng)7 d，飼養(yǎng)過程中，每日觀察小鼠形態(tài)行為，精神狀態(tài)。適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d后將小鼠隨機(jī)分為12組，每組8只，分別為空白對(duì)照組、模型組、葡萄蒸餾酒（46°、52°、60°）低中高（1 mL·kg-1、2 mL·kg-1、4 mL·kg-1）劑量組、吲哚美辛組（0.075 mg·kg-1）?？瞻讓?duì)照組及模型組灌胃蒸餾水，葡萄蒸餾酒各個(gè)劑量組分別灌胃對(duì)應(yīng)劑量的葡萄蒸餾酒，吲哚美辛組灌胃吲哚美辛溶液，每天給藥1次，灌胃體積為10 mL·kg-1，連續(xù)灌胃7 d。

1.4.2 小鼠的造模及指標(biāo)的測(cè)量

（1）模型的制備。小鼠連續(xù)灌胃7 d進(jìn)行造模。造模前用游標(biāo)卡尺記錄每只小鼠右足掌的厚度和寬度，空白對(duì)照組用20 μL無菌生理鹽水注射小鼠右側(cè)后肢踝關(guān)節(jié)。模型組和各個(gè)劑量葡萄蒸餾酒組及吲哚美辛組：用無菌注射器將20 μL尿酸鈉晶體混懸液（含1 mg尿酸鈉晶體）注射小鼠右側(cè)后肢踝關(guān)節(jié)。注射時(shí)應(yīng)注意無菌操作。

（2）模型具體制備過程。小鼠在密閉的容器內(nèi)用乙醚進(jìn)行麻醉，時(shí)刻關(guān)注小鼠的狀態(tài)，防止小鼠乙醚麻醉過量導(dǎo)致小鼠死亡，小鼠麻醉后進(jìn)行固定，選擇小鼠的右后肢進(jìn)行操作，用碘伏浸潤(rùn)的脫脂棉簽對(duì)小鼠足趾部進(jìn)行消毒，用注射器吸取20 μL尿酸鈉溶液在右后足足側(cè)遠(yuǎn)端進(jìn)行注射，防止因注射部位太近導(dǎo)致注射液的漏出，注射時(shí)以對(duì)側(cè)關(guān)節(jié)囊鼓起為注入成功標(biāo)準(zhǔn)[16]，注射完成后對(duì)小鼠注射部位按壓止血，用碘伏進(jìn)行消毒，防止傷口感染發(fā)炎，觀察造模后小鼠右后足趾部有無出現(xiàn)明顯腫脹，有無液體溢出[17]。

1.4.3 小鼠血清指標(biāo)的測(cè)量

小鼠處死前12 h禁食不禁水，小鼠采用眼球采血，采血前將小鼠胡子剪去并對(duì)小鼠眼眶周圍皮膚進(jìn)行消毒，防止采集的血液溶血，采血后小鼠脊椎脫臼處死，尸體無害化處理。采集后的血液室溫靜置1 h，在高速冷凍離心機(jī)中以4 ℃，3 000 r·min-1條件下離心15 min，分離上層血清，采用試劑盒檢測(cè)方法用紫外可見分光光度計(jì)及多功能酶標(biāo)儀檢測(cè)各組小鼠血清CAT、SOD活性以及MDA、TNF-α、IF-1β含量[18]。操作過程嚴(yán)格按照相應(yīng)試劑盒說明書操作。

1.4.4 小鼠關(guān)節(jié)腫脹度的測(cè)量及關(guān)節(jié)滑膜切片的制備

尿酸鈉晶體混懸液注射于小鼠右側(cè)后肢踝關(guān)節(jié)后，用游標(biāo)卡尺測(cè)量小鼠注射尿酸鈉溶液后2 h、4 h、6 h、8 h和12 h的雙側(cè)后肢足掌厚度及寬度并記錄，按公式（1）計(jì)算足趾腫脹度。在注射后24 h處死小鼠，取下小鼠右側(cè)后肢踝關(guān)節(jié)，以踝關(guān)節(jié)為中心取長(zhǎng)度為0.5 cm的組織為測(cè)定樣本，用無菌生理鹽水沖洗后，用4%多聚甲醛溶液固定，于室溫下固定24 h，選擇脫鈣液乙二胺四乙酸（Ethylene Diamine Tetraacetic Acid，EDTA）于室溫下進(jìn)行脫鈣處理，脫鈣2周后，石蠟包埋，沿矢狀面進(jìn)行切片，之后對(duì)切片進(jìn)行蘇木精-伊紅（Hematoxylin-eosin，HE）染色，光學(xué)顯微鏡下觀察各組小鼠踝關(guān)節(jié)滑膜組織病變及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)情況。

式中：X為足趾腫脹度；mm；A1為給藥后足趾厚度，mm；A2為給藥后足趾寬度，mm；B1為給藥前足趾厚度，mm；B2為給藥前足趾寬度，mm。

1.5 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 25.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用GraphPad Prism 8.0軟件繪圖，各組結(jié)果以±s的形式表示，多組間比較首先采用單因素方差分析，再采用LSD-t檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 葡萄蒸餾酒對(duì)AGA小鼠關(guān)節(jié)腫脹度的影響

各組別小鼠注射尿酸鈉后不同時(shí)間足趾腫脹度如表1所示，造模后12 h小鼠足趾腫脹度如圖1所示，小鼠在構(gòu)造AGA模型后，關(guān)節(jié)處會(huì)出現(xiàn)明顯腫脹，關(guān)節(jié)腫脹度會(huì)顯著增加[19]。由于空白對(duì)照組注射的為生理鹽水，因此由于空白對(duì)照組小鼠關(guān)節(jié)的吸收作用小鼠足趾腫脹度會(huì)迅速下降，空白對(duì)照組4 h、6 h、 8 h、12 h的腫脹度相較2 h明顯下降，而模型組下降幅度沒有空白對(duì)照組大，且模型組12 h的腫脹度相較空白對(duì)照組12 h極顯著升高（P＜0.001），這證明小鼠AGA模型構(gòu)造成功。圖1為各小鼠造模后12 h的腫脹度，圖中可以發(fā)現(xiàn)吲哚美辛組及46°低劑量組小鼠足趾腫脹度相較模型組顯著下降（P＜0.05），說明46°低劑量葡萄蒸餾酒可以顯著降低模型小鼠足趾腫脹度，但效果不如吲哚美辛。46°中劑量也有下降的趨勢(shì)但不顯著（P＞0.05），而52°中劑量組和60°低劑量組則會(huì)使小鼠足趾腫脹度顯著或極顯著升高（P＜0.05）或（P＜0.01），說明52°中劑量和60°低劑量葡萄蒸餾酒可以升高模型小鼠足趾腫脹度，剩余的組別與模型組相比雖也有上升或下降的趨勢(shì)但是無顯著差異（P＞0.05）。

表1 12 h內(nèi)葡萄蒸餾酒對(duì)AGA小鼠足趾腫脹度的影響表（單位：mm，n=8）

圖1 造模后12 h小鼠足趾腫脹度圖

2.2 葡萄蒸餾酒對(duì)AGA小鼠體重的影響

各組別小鼠不同時(shí)間體重如表2所示，小鼠體重是表達(dá)小鼠健康程度的重要指標(biāo)[18]。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，實(shí)驗(yàn)后一周小鼠體重相較實(shí)驗(yàn)前小鼠體重出現(xiàn)了明顯增加，但各組增加的量沒有顯著差異（P＞0.05）， 而在后續(xù)AGA造模過程中，各組的實(shí)驗(yàn)小鼠體重均減少，各組之間體重變化不顯著（P＞0.05），這表示葡萄蒸餾酒在灌胃小鼠的過程中對(duì)小鼠體重?zé)o顯著性影響。但小鼠在實(shí)驗(yàn)后一周造模時(shí)，各組小鼠體重均下降，這說明小鼠在構(gòu)造AGA模型的過程中會(huì)導(dǎo)致小鼠食欲減退，體重下降，但各個(gè)組別之間無顯著差異（P＞0.05）。

表2 實(shí)驗(yàn)小鼠體重變化表（單位：g，n=8）

2.3 葡萄蒸餾酒對(duì)AGA小鼠血清SOD、CAT活性的影響

各組別小鼠血清中SOD和CAT活性水平如表3所示，SOD和CAT是參與痛風(fēng)的兩種關(guān)鍵酶，研究發(fā)現(xiàn)部分藥物可以通過提高這兩種酶的活性從而提高抗氧化活性發(fā)揮治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的功效[20-21]。由 表3可知，52°中劑量組與60°高劑量組，兩組別相較于模型組超氧化物歧化酶活性顯著下降（P＜0.05），證明高酒精度的葡萄蒸餾酒可能會(huì)使AGA小鼠炎癥反應(yīng)加劇，葡萄蒸餾酒由低劑量到高劑量，SOD水平依次降低，這說明隨著葡萄蒸餾酒劑量的升高，會(huì)降低AGA小鼠血清SOD的活性。表3中各個(gè)劑量組葡萄蒸餾酒小鼠血清CAT活性均較模型組升高，其中52°低劑量組顯著升高（P＜0.05）和60°低、高劑量組及吲哚美辛組極顯著升高（P＜0.01），表3中可以明顯看到隨著葡萄蒸餾酒度數(shù)和劑量的升高，CAT活性顯著升高，這表明該葡萄蒸餾酒中含有能升高小鼠血清CAT活性的微量成分。

表3 葡萄蒸餾酒對(duì)AGA小鼠血清SOD、CAT的影響表（單位：U·mL-1，n=8）

2.4 葡萄蒸餾酒對(duì)AGA小鼠IL-1β及TNF-α含量的影響

各組別小鼠血清中IL-1β、TNF-α水平如圖2、圖3所示，當(dāng)小鼠機(jī)體發(fā)生AGA時(shí)，小鼠體內(nèi)的IL-1β含量以及TNF-α含量會(huì)顯著上升[22]，IL-1β是炎癥反應(yīng)中非常重要的炎癥因子，經(jīng)常分布在血液或者組織液中，它可以刺激巨噬細(xì)胞分泌炎癥因子，從而調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)[23]。TNF-α同樣是痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎中常見的炎癥因子，當(dāng)機(jī)體發(fā)生感染、炎癥時(shí)，TNF-α水平會(huì)增高。研究也發(fā)現(xiàn)小鼠構(gòu)造AGA模型成功后，會(huì)使小鼠血清中IL-1β和TNF-α水平增高[24]。由圖2、圖3可知，模型組小鼠血清TNF-α和IL-1β水平均顯著升高（P＜0.05），這證明AGA小鼠模型構(gòu)造成功。研究發(fā)現(xiàn)吲哚美辛可以抑制小鼠血清中TNF-α和IL-1β的生成從而降低小鼠的足趾腫脹度[25]，圖2、圖3中吲哚美辛組TNF-α和IL-1β水平降低或顯著降低（P＜0.05），結(jié)果符合文獻(xiàn)的報(bào)道，TNF-α和IL-1β參與慢性疼痛的發(fā)生和發(fā)展，這表明吲哚美辛可以降低關(guān)節(jié)炎的疼痛，這與常識(shí)一致，也與文獻(xiàn)報(bào)道的一致[26]。此外，圖2中除了60°高劑量組除外，其余各劑量組均可以不同程度的降低小鼠血清中的IL-1β含量，其中46°中劑量組可以顯著降低血清中IL-1β含量（P＜0.05），但隨著酒精度和劑量的升高，降低效果越來越差，這表明酒精濃度和劑量越低，降低效果越好。由圖3知，46°低、高劑量組、60°低、中劑量組都可以降低模型小鼠血清中的TNF-α含量，結(jié)合圖2的葡萄蒸餾酒對(duì)AGA模型小鼠血清IL-1β含量的影響，可以得出低劑量葡萄蒸餾酒可能通過降低模型小鼠血清中的IL-1β和TNF-α水平從而降低AGA小鼠足趾炎癥及疼痛。

圖2 葡萄蒸餾酒對(duì)AGA小鼠IL-1β含量的影響圖

2.5 葡萄蒸餾酒對(duì)AGA小鼠血清MDA含量的影響

各組別小鼠血清中丙二醇（Malondialdehyde，MDA）含量如圖4所示，MDA的含量可以衡量機(jī)體細(xì)胞受氧化脅迫的程度[18]。在痛風(fēng)患者中，MDA的含量顯著高于健康人群[27]。由圖4可知，模型組相較空白對(duì)照組，血清中MDA含量極顯著升高（P＜0.01），這可以側(cè)面證明小鼠AGA模型構(gòu)造成功。在構(gòu)造小鼠AGA模型過程中，除了空白組注射生理鹽水外，剩余組別均在小鼠關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射了尿酸鈉晶體。由 圖4可知，模型組、葡萄蒸餾酒各組別及吲哚美辛組相較空白對(duì)照組血清MDA含量升高（P＜0.05），除60°中劑量組外其余各組別MDA含量與模型組無顯著差異（P＞0.05），這說明葡萄蒸餾酒干預(yù)AGA的過程并非通過血清中MDA來實(shí)現(xiàn)的。

圖3 葡萄蒸餾酒對(duì)AGA小鼠血清中TNF-α含量的影響圖

圖4 葡萄蒸餾酒對(duì)AGA小鼠血清MDA含量的影響圖

2.6 小鼠關(guān)節(jié)滑膜組織染色觀察

各組別小鼠關(guān)節(jié)滑膜切片如圖5所示，由圖5可知正常組小鼠關(guān)節(jié)組織完整，關(guān)節(jié)腔內(nèi)干凈，關(guān)節(jié)表面光滑，關(guān)節(jié)間組織無充血水腫，滑膜細(xì)胞無增生，沒有炎癥發(fā)生。模型組關(guān)節(jié)腔內(nèi)組織炎癥明顯，組織表面由滑膜增生，關(guān)節(jié)腔內(nèi)有炎性滲出物，周圍軟組織有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。46°低、中劑量組及吲哚美辛組對(duì)比模型組滑膜細(xì)胞增生明顯減輕，充血情況也同樣減少，52°低、中劑量組及60°低劑量組關(guān)節(jié)腔內(nèi)充血嚴(yán)重，可見滑膜充血腫脹至關(guān)節(jié)腔內(nèi)，這表明52°低中劑量組及60°低劑量組小鼠關(guān)節(jié)腫脹嚴(yán)重，結(jié)果與圖1小鼠造模后12 h小鼠足趾腫脹度吻合，各組小鼠關(guān)節(jié)滑膜切片表明46°低中劑量組葡萄蒸餾酒可以緩解AGA小鼠炎癥反應(yīng)。高劑量組的葡萄蒸餾酒會(huì)使小鼠關(guān)節(jié)滑膜損傷加重，所示結(jié)果與圖1所示一致。

3 結(jié)論

本文中所用的AGA模型構(gòu)造方法較為經(jīng)典，采取對(duì)小鼠關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射尿酸鈉溶液的方式，使小鼠關(guān)節(jié)腔因?yàn)橥鈦懋愇锏膿p傷作用及尿酸鈉的破壞作用出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎癥，構(gòu)造時(shí)間短，構(gòu)造方便，并且根據(jù)需要可以選擇預(yù)防性給藥或治療型給藥，此方法經(jīng)常被用于抗痛風(fēng)物質(zhì)的篩選上[28]。文中采用預(yù)防性給藥的方法，先用葡萄蒸餾酒及相應(yīng)藥物對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃，而后對(duì)小鼠進(jìn)行AGA模型造模，通過測(cè)量注射尿酸鈉溶液后小鼠關(guān)節(jié)腫脹度以及血清內(nèi)相應(yīng)酶活性判斷葡萄蒸餾酒對(duì)AGA小鼠的干預(yù)效果。

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，46°低劑量的葡萄蒸餾酒可以顯著抑制小鼠AGA足趾腫脹度（P＜0.05），原因可能是葡萄蒸餾酒中微量成分降低小鼠血清中IL-1β及TNF-α水平實(shí)現(xiàn)的，但是隨著酒精度和劑量的提高，52°中劑量組和60°低劑量組則會(huì)使小鼠足趾腫脹度顯著或極顯著升高，原因可能是酒中乙醇含量的升高，乙醇代謝產(chǎn)生乙酸競(jìng)爭(zhēng)性抑制尿酸的排泄，乙醇代謝過程中會(huì)快速消耗三磷酸腺苷（Adenosine Triphosphate，ATP），也會(huì)使尿酸產(chǎn)生增加，最終導(dǎo)致小鼠體內(nèi)的尿酸升高；當(dāng)外部注射尿酸鈉溶液時(shí)，小鼠體內(nèi)的尿酸含量水平較高，尿酸鈉不能及時(shí)溶解，故52°中劑量組和60°低劑量組使得AGA模型小鼠關(guān)節(jié)腫脹度顯著升高。

通過對(duì)小鼠體內(nèi)酶活性水平的統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，52°中劑量組和60°高劑量組小鼠SOD水平顯著降低，說明這兩組小鼠的關(guān)節(jié)腫脹度可能會(huì)因?yàn)槊富钚缘慕档投鴮?dǎo)致炎癥加劇，觀察圖1小鼠足趾腫脹度發(fā)現(xiàn)這兩組小鼠足趾腫脹度相較模型組顯著增加，而CAT活性水平與葡萄蒸餾酒存在劑量相關(guān)性，這說明該葡萄蒸餾酒中含有提高小鼠血清CAT活性的微量成分。通過對(duì)小鼠關(guān)節(jié)滑膜切片可以看出，46°低、中劑量的葡萄蒸餾酒可以明顯減少關(guān)節(jié)滑膜的充血面積，減輕炎癥反應(yīng)。其抗炎機(jī)制可能是與葡萄蒸餾酒升高小鼠體內(nèi)CAT活性以及降低小鼠血清中IL-1β及TNF-α水平相關(guān)。52°各個(gè)劑量組關(guān)節(jié)滑膜充血嚴(yán)重，故52°各個(gè)劑量組關(guān)節(jié)腫脹度相較其他組別明顯偏高。60°各劑量組可能由于乙醇升高尿酸作用和小鼠體內(nèi)酶活性以及炎癥因子的多重作用下導(dǎo)致60°高劑量組小鼠腫脹度反而相較52°各劑量組下降，但仍與模型組無顯著性差異（P＞0.05），且大于空白組。具體機(jī)理有待更深層次的實(shí)驗(yàn)的進(jìn)一步研究。

綜上所述，適量飲用46°葡萄蒸餾酒可以升高AGA模型小鼠血清中CAT活性，降低AGA模型小鼠血清中TNF-α和IL-1β含量，減輕關(guān)節(jié)滑膜損傷，從而降低AGA模型小鼠關(guān)節(jié)腫脹度及減輕疼痛。但由于葡萄蒸餾酒中成分復(fù)雜，機(jī)體代謝過程具有多種途徑，因此葡萄蒸餾酒中具體功效成分及相關(guān)代謝機(jī)理還需要進(jìn)一步研究及分析。