溫度和pH對中華絨螯蟹幼蟹耗氧率、排氨率和窒息點(diǎn)的影響

陳 雪，馮文榮，周立水，丁秀芳，梁 猛，唐永凱，3*

（1上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院，上海 201306；2中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部淡水漁業(yè)與種質(zhì)資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇無錫 214081；3南京農(nóng)業(yè)大學(xué)無錫漁業(yè)學(xué)院，江蘇無錫 214081）

0 引言

【研究意義】呼吸和排泄是動(dòng)物能量代謝的主要組成部分，其變化能反映動(dòng)物機(jī)體的生理狀態(tài)及其對環(huán)境變化的響應(yīng)。耗氧率和排氨率是評價(jià)水產(chǎn)動(dòng)物呼吸和排泄的最常見指標(biāo)，可間接反映呼吸代謝規(guī)律和生理狀態(tài)，對水產(chǎn)動(dòng)物能量代謝研究及養(yǎng)殖環(huán)境調(diào)控具有重要指導(dǎo)作用（馮雪等，2012）。溫度和pH是影響水生動(dòng)物生存、生長和生理狀態(tài)的主要環(huán)境因子（葉樂等，2015；徐連偉等，2018；韓慶等，2021）。因此，探究中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）幼蟹在不同環(huán)境條件下的呼吸代謝規(guī)律，對提高幼蟹養(yǎng)殖存活率具有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】環(huán)境溫度可顯著影響水產(chǎn)動(dòng)物呼吸代謝水平和生理調(diào)節(jié)機(jī)制，過高或過低的溫度均會抑制其生長發(fā)育，降低存活率（李青和陳永祥，2019）。已有研究表明，溫度變化會影響太平洋牡蠣（Crassostrea gigasThun‐berg）（Bougrier et al.，1995）、巴拿馬珠母貝（Pincta‐da mazatlanica）（Saucedo et al.，2004）、蝦夷扇貝（Datinopecten yessoensis）（徐東等，2010）、三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）（戴超等，2014）、中華原鉤蝦（Eogammarus sinensis）（曹善茂等，2015）、菲律賓蛤仔（Ruditapes philippinarum）（Nie et al.，2017）及九孔鮑（Haliotis diversicolor supertexta）（王崇懿等，2020）等水產(chǎn)動(dòng)物的耗氧率和排氨率，在適宜溫度范圍內(nèi)，溫度越高，水產(chǎn)動(dòng)物的代謝水平越高，耗氧率和排氨率也隨之升高；當(dāng)超過或低于一定溫度后，其生理代謝水平紊亂，機(jī)體進(jìn)入麻痹甚至停止的狀態(tài)，耗氧率和排氨率隨之下降。此外，不同水平的pH可影響水產(chǎn)動(dòng)物的呼吸代謝和能量供給方式。水產(chǎn)動(dòng)物對水體pH也有一定的適應(yīng)范圍，當(dāng)水體pH超過或低于適宜范圍時(shí)，則影響水產(chǎn)動(dòng)物的新陳代謝、生長發(fā)育及呼吸等一系列生理過程，甚至引起病變或死亡，如pH變化會導(dǎo)致中國龍蝦（Panulirus stimpsoni）（梁華芳等，2011）、波紋龍蝦（P.homarusLinnaeus）（梁華芳等，2012）、中華原鉤蝦（曹善茂等，2015）、中華小長臂蝦（Palaemonetes sinensis）（姜宏波等，2017）及大竹蟶（Solen grandis）（張雨等，2021）等水產(chǎn)動(dòng)物的耗氧率和排氨率發(fā)生變化。針對中華絨螯蟹的研究，鄭曙明和李代金（1989）對其幼蟹耗氧率進(jìn)行測定，鄒恩民等（1995）觀察了中華絨螯蟹在不同溫度下的呼吸率變化。不適宜的溫度同樣會抑制中華絨螯蟹的生長、攝食和蛻皮（洪美玲等，2007；Yuan et al.，2017）；在過酸或過堿的pH脅迫下，中華絨螯蟹的生長收到顯著抑制（黃志鵬，2018），尤其是高pH脅迫易引起中華絨螯蟹氧化應(yīng)激反應(yīng)（龔志等，2015）。【本研究切入點(diǎn)】中華絨螯蟹俗稱河蟹、大閘蟹等，隸屬于節(jié)肢動(dòng)物門（Arthropo‐da）十足目（Decapoda）方蟹科（Grapsidae）弓腿亞科（Varuninae）絨螯蟹屬（Eriocheir），是我國重要的淡水養(yǎng)殖品種（張本銘等，2000），其生長發(fā)育、能量代謝和生理狀態(tài)等極易受環(huán)境因子（溫度、鹽度和pH等）的影響。雖然已有研究聚焦于溫度和pH對中華絨螯蟹的影響，但關(guān)于不同規(guī)格中華絨螯蟹在不同溫度和pH下的呼吸代謝變化規(guī)律尚不清楚?！緮M解決的關(guān)鍵問題】探討溫度和pH對中華絨螯蟹幼蟹耗氧率、排氨率及窒息點(diǎn)的影響，明確中華絨螯蟹在不同環(huán)境條件下的呼吸代謝規(guī)律，為其幼蟹養(yǎng)殖條件的優(yōu)化和種苗繁育提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

中華絨螯蟹幼蟹由中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)中心陽澄湖蝦蟹綠色養(yǎng)殖基地提供。幼蟹在實(shí)驗(yàn)室玻璃缸內(nèi)暫養(yǎng)1周，使其適應(yīng)小水體環(huán)境。暫養(yǎng)期間不間斷充氣增氧，溶解氧濃度保持在7.00 mg/L以上，暫養(yǎng)溫度為（15±2）℃，與蟹塘溫度相近，pH 8.0±0.2。每天上午投喂商品配合飼料，換水量為1/3。正式試驗(yàn)前1 d停止投喂，選擇處于蛻皮間期的健康個(gè)體，根據(jù)體質(zhì)量分成3組（表1），分別為：大規(guī)格組（L）21.68±3.58 g，中規(guī)格組（M）11.31±0.29 g，小規(guī)格組（S）5.84±0.33 g。

表1 供試中華絨螯蟹幼蟹的生物學(xué)指標(biāo)Table 1 Biological indexes of juvenile E.sinensis tested

1.2 試驗(yàn)方法

（1）溫度試驗(yàn)設(shè)5個(gè)不同溫度梯度（10、15、20、25和30 ℃），采用控溫棒進(jìn)行緩慢加溫或冰塊緩慢降溫的方法調(diào)節(jié)水溫，待水溫穩(wěn)定后（±0.5 ℃），使幼蟹在相應(yīng)溫度下適應(yīng)2 h后（L組4只，M組9只，S組16只）再進(jìn)行試驗(yàn)。水體pH 8.0±0.2。

（2）pH試驗(yàn)設(shè)4個(gè)不同pH梯度（pH 6.0、pH 7.0、pH 8.0和pH 9.0），分別以HCl或NaOH調(diào)節(jié)水體pH，將pH調(diào)試至相應(yīng)梯度（±0.2），使幼蟹放適應(yīng)2 h后再進(jìn)行試驗(yàn)。水體溫度（15±2）℃。

1.3 耗氧率、排氨率和窒息點(diǎn)測定

1.3.1 耗氧率測定 利用Loligo?Systems水生無脊椎動(dòng)物呼吸代謝測量系統(tǒng)，配合FireSting O2裝置，采用密閉系統(tǒng)進(jìn)行溶解氧濃度測定。呼吸室為直徑10 cm、長20 cm的透明容器，呼吸室連接循環(huán)水泵，保證呼吸室內(nèi)水充分混合。將適應(yīng)暫養(yǎng)2 h的幼蟹放入呼吸室，呼吸室放入少量人工水草，為幼蟹提供躲藏場所。試驗(yàn)期間將呼吸室密封，通過O2探頭每10 min測量并記錄溶解氧濃度。

1.3.2 排氨率測定 試驗(yàn)持續(xù)30 min。試驗(yàn)前后在呼吸室分別取50 mL水樣，采用納氏試劑分光光度法進(jìn)行氨氮含量測定。

1.3.3 窒息點(diǎn)測定 使用相同裝置，幼蟹置于密閉呼吸室，每10 min測量并記錄溶解氧濃度，直至幼蟹出現(xiàn)不再爬動(dòng)、附肢伸直僵硬、腹部向上等癥狀，且實(shí)時(shí)溶解氧濃度30 min內(nèi)變化微小，此時(shí)的溶解氧濃度即為窒息點(diǎn)。

1.4 考察指標(biāo)及其計(jì)算公式

耗氧率R0［mg/（g·h）］=［（DO0-DOt）×V］/（W×T）

排氨率RN［mg/（g·h）］=［（Nt-N0）×V］/（W×T）

氨商AQ=RN/R0

能量代謝率Rm（J/g）=k×R0

式中：DO0為試驗(yàn)開始時(shí)呼吸室中的溶解氧濃度（mg/L），DOt為試驗(yàn)結(jié)束時(shí)呼吸室中的溶解氧濃度（mg/L），V為呼吸室體積（L），W為試驗(yàn)開始前中華絨螯蟹幼蟹的體質(zhì)量（g）；T為試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間（h），N0為試驗(yàn)開始時(shí)呼吸室中的氨氮濃度（mg/L），Nt為試驗(yàn)結(jié)束時(shí)呼吸室中的氨氮濃度（mg/L），k為氧卡系數(shù)（13.56 J/mg）。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 23.0分別進(jìn)行單因素和雙因素方差分析，通過HSD多重比較檢驗(yàn)組間差異顯著性，并以GraphPad Prism 8制圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 溫度對中華絨螯蟹幼蟹耗氧率和排氨率的影響

2.1.1 溫度對中華絨螯蟹幼蟹耗氧率的影響 如圖1-A所示，隨著溫度的升高，L組、M組和S組的幼蟹耗氧率均呈升高趨勢，且耗氧率隨幼蟹體質(zhì)量的增加而降低。L組幼蟹的耗氧率從10 ℃到20 ℃呈顯著升高趨勢（P<0.05，下同），而20 ℃到30 ℃無顯著變化（P>0.05，下同）；M組幼蟹的耗氧率從10 ℃到20 ℃呈顯著升高趨勢，20 ℃到25 ℃無顯著變化，至30 ℃時(shí)又顯著升高；S組幼蟹的耗氧率從10 ℃到30 ℃均呈顯著升高趨勢。在10和15 ℃下，S組幼蟹的耗氧率顯著高于L組，M組與S組和L組的差異均不顯著；在30 ℃下，幼蟹耗氧率表現(xiàn)為L組

2.1.2 溫度對中華絨螯蟹幼蟹排氨率的影響 如圖1-B所示，幼蟹排氨率隨溫度的升高呈不斷上升趨勢。L組幼蟹的排氨率在10~20 ℃間無顯著差異，從25 ℃到30 ℃則呈顯著升高趨勢；S組和M組幼蟹的排氨率從10 ℃到30 ℃均呈顯著升高趨勢。在10 ℃下，幼蟹排氨率表現(xiàn)為L組>M組>S組，組間差異顯著；在15和20 ℃下，S組幼蟹的排氨率顯著高于L組和M組；在25和30 ℃下，幼蟹排氨率則表現(xiàn)為L組

圖1 溫度對不同規(guī)格中華絨螯蟹幼蟹耗氧率和排氨率的影響Fig.1 Effects of temperature on oxygen consumption rate and ammonia excretion rate of juvenile E.sinensis with different sizes

2.1.3 回歸分析結(jié)果 在10~30 ℃范圍內(nèi)，中華絨螯蟹幼蟹的耗氧率與體質(zhì)量呈負(fù)相關(guān)，其回歸方程為R0=a1Wb1（a為代謝水平，b為體質(zhì)量指數(shù)）。在10 ℃下，幼蟹的排氨率與體質(zhì)量呈正相關(guān)，在15~30 ℃下，幼蟹的排氨率與體質(zhì)量呈負(fù)相關(guān)，其回歸方程為RN=a2Wb2。其中，a1取值范圍為0.1901~1.3525，b1取值范圍為-0.470~-0.091，a2取值范圍為0.6517~31.534，b2取值范圍為-0.504~0.5232（表2）。

表2 不同溫度下體質(zhì)量對中華絨螯蟹幼蟹耗氧率和排氨率的回歸分析結(jié)果Table 2 Regression analysis results of body mass on oxygen consumption rate and ammonia excretion rate of juvenile E.si‐nensis under different temperatures

2.2 pH對中華絨螯蟹幼蟹耗氧率和排氨率的影響

2.2.1 pH對中華絨螯蟹幼蟹耗氧率的影響 如圖2-A所示，在pH 6.0~9.0范圍內(nèi)，隨著pH的升高，不同規(guī)格中華絨螯蟹幼蟹的耗氧率均呈先降低后升高的變化趨勢。在pH 7.0和pH 8.0處理下，L組和M組幼蟹的耗氧率無顯著差異，但經(jīng)pH 9.0處理后顯著升高。S組幼蟹的耗氧率在pH 7.0和pH 8.0處理下顯著低于pH 6.0和pH 9.0處理。此外，在pH 6.0處理下，S組幼蟹的耗氧率顯著高于M組和L組；在其他pH處理下，S組和M組間無顯著差異。

2.2.2 pH對中華絨螯蟹幼蟹排氨率的影響 如圖2-B所示，在pH 6.0~9.0范圍內(nèi)，S組幼蟹的排氨率顯著高于L組和M組，且在pH 8.0和pH 9.0處理下的排氨率較在pH 6.0和pH 7.0處理下顯著降低。L組和M組幼蟹的排氨率在pH 6.0~9.0范圍內(nèi)變化較小，M組在pH 8.0處理下的排氨率有所下降。在pH 9.0處理下，不同規(guī)格中華絨螯蟹幼蟹的排氨率存在顯著差異，表現(xiàn)為L組

圖2 pH對不同規(guī)格中華絨螯蟹幼蟹耗氧率和排氨率的影響Fig.2 Effects of pH on oxygen consumption rate and ammonia excretion rate of juvenile E.sinensis with different sizes

2.2.3 回歸分析結(jié)果 在pH 6.0~9.0范圍內(nèi)，中華絨螯蟹幼蟹的耗氧率和排氨率與體質(zhì)量均呈負(fù)相關(guān)，對應(yīng)的回歸方程分別為R0=a3Wb3和RN=a4Wb4。其中，a3取值范圍為0.3125~0.7483，b3取值范圍為-0.352~-0.004，a4取值范圍為6.6507~8.5568，b4取值范圍為-0.324~-0.266（表3）。

表3 不同pH下體質(zhì)量對中華絨螯蟹幼蟹耗氧率和排氨率的回歸分析結(jié)果Table 3 Regression results of body mass on oxygen consump‐tion rate and ammonia excretion rate of juvenile E.sinensis un‐der different pH

2.3 溫度和pH對中華絨螯蟹幼蟹窒息點(diǎn)的影響

2.3.1 溫度對中華絨螯蟹幼蟹窒息點(diǎn)的影響 如圖3-A所示，不同規(guī)格中華絨螯蟹幼蟹的窒息點(diǎn)均以10 ℃時(shí)最高，且顯著高于15~30 ℃下的窒息點(diǎn)。L組幼蟹的窒息點(diǎn)在15 ℃和20 ℃、20 ℃和30 ℃時(shí)無顯著差異，以25 ℃時(shí)的窒息點(diǎn)最低，顯著低于其他溫度處理；M組幼蟹的窒息點(diǎn)在15 ℃和30 ℃間也無顯著差異，也是以25 ℃時(shí)的窒息點(diǎn)顯著低于其他溫度處理；S組幼蟹的窒息點(diǎn)隨溫度的升高呈逐漸下降趨勢，除了在25 ℃和30 ℃間無顯著差異外，其他溫度處理間均存在顯著差異。

2.3.2 pH對中華絨螯蟹幼蟹窒息點(diǎn)的影響 如圖3-B所示，不同規(guī)格中華絨螯蟹幼蟹的窒息點(diǎn)均隨pH的升高呈先降低后升高的變化趨勢。在L組和M組中，其幼蟹窒息點(diǎn)在任意2個(gè)pH處理間均存在顯著差異；S組幼蟹的窒息點(diǎn)在pH 6.0和pH 9.0處理間無顯著差異，但二者顯著高于其他pH處理。此外，S組幼蟹的窒息點(diǎn)在不同pH處理下均顯著高于L組和M組，在pH 9.0處理下表現(xiàn)為L組

圖3 溫度和pH對不同規(guī)格中華絨螯蟹幼蟹窒息點(diǎn)的影響Fig.3 Effects of temperature and pH on asphyxiation point of juvenile E.sinensis with different sizes

2.4 溫度和pH對中華絨螯蟹幼蟹氨商的影響

2.4.1 溫度對中華絨螯蟹幼蟹氨商的影響 如圖4-A所示，不同規(guī)格中華絨螯蟹幼蟹的氨商在10~30 ℃范圍內(nèi)均呈先降低后升高的變化趨勢。L組幼蟹的氨商在15 ℃和25 ℃間無顯著差異，在其他溫度處理下則存在顯著差異；M組幼蟹的氨商在15 ℃和20 ℃、25 ℃和30 ℃間均無顯著差異，以20 ℃下的氨商最低；S組幼蟹以在30 ℃下的氨商最高，顯著高于其他溫度處理，而在其他溫度處理下的氨商差異均不顯著。此外，在10 ℃下幼蟹的氨商排序?yàn)镾組

2.4.2 pH對中華絨螯蟹幼蟹氨商的影響 如圖4-B所示，隨pH的升高，不同規(guī)格中華絨螯蟹幼蟹的氨商均呈先升高后降低的變化趨勢。L組幼蟹的氨商在pH 6.0~8.0間無顯著差異，在pH 9.0下顯著低于其他pH處理組。M組和S組幼蟹的氨商在pH 7.0和pH 8.0處理下均呈升高趨勢，且二者間無顯著差異，在pH 9.0處理下則顯著降低。此外，在pH 7.0和pH 8.0處理下S組幼蟹的氨商顯著高于M組和L組。

圖4 溫度和pH對不同規(guī)格中華絨螯蟹幼蟹氨商的影響Fig.4 Effects of temperature and pH on ammonia quotient of juvenile E.sinensis with different sizes

2.5 溫度和pH對中華絨螯蟹幼蟹能量代謝率的影響

2.5.1 溫度對中華絨螯蟹幼蟹能量代謝率的影響如圖5-A所示，隨著溫度的升高，不同規(guī)格中華絨螯蟹幼蟹的能量代謝率均呈上升趨勢。幼蟹在10 ℃下的能量代謝率最低，而30 ℃下的能量代謝率最高。在10、15、20和25 ℃下，M組和L組幼蟹的能量代謝率無顯著差異，而S組幼蟹的能量代謝率顯著高于M組和L組。在30 ℃下，L組、M組和S組幼蟹的能量代謝率排序?yàn)镾組>M組>L組，且組間存在顯著差異。

圖5 溫度和pH對不同規(guī)格中華絨螯蟹幼蟹能量代謝率的影響Fig.5 Effects of temperature and pH on energy metabolic rate of juvenile E.sinensis with different sizes

2.5.2 pH對中華絨螯蟹幼蟹能量代謝率的影響如圖5-B所示，隨著pH的升高，不同規(guī)格中華絨螯蟹幼蟹的能量代謝率呈先降低后升高的變化趨勢，均在pH 9.0處理下達(dá)最高值。在pH 6.0處理下，幼蟹的能量代謝率排序?yàn)镾組>M組>L組，組間差異顯著；在pH 8.0和pH 9.0處理下，不同規(guī)格中華絨螯蟹幼蟹間的能量代謝率均無顯著差異。

3 討論

3.1 溫度對中華絨螯蟹幼蟹呼吸代謝的影響

溫度是影響蝦蟹呼吸代謝最重要的環(huán)境因子（林小濤等，2000）。在適宜的溫度范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，蝦蟹體內(nèi)代謝相關(guān)酶的活性增強(qiáng)，代謝速率加快，導(dǎo)致耗氧率和排氨率升高。高于或低于適宜溫度時(shí)，均會抑制機(jī)體代謝相關(guān)酶活性，影響機(jī)體的生理功能，致使能量代謝率降低，即耗氧率和排氨率降低（羅嘉俊等，2020）。已有研究表明，羅氏沼蝦（Mucrobrachium rosenbergii）幼蝦的耗氧率和氨氮、尿素氮、有機(jī)氮和總氮排泄在17~32 ℃范圍內(nèi)隨溫度的升高而升高（Chen and Kou，1996）；三疣梭子蟹的耗氧率和排氨率隨溫度的升高而升高，在27 ℃時(shí)達(dá)最大值（戴超等，2014）；中華原鉤蝦的耗氧率和排氨率隨溫度的升高整體上呈上升趨勢（曹善茂等，2015）。本研究結(jié)果表明，隨著溫度的上升，中華絨螯蟹幼蟹的耗氧率、排氨率和能量代謝率均呈上升趨勢，說明溫度升高加快其呼吸代謝；此外，耗氧率在20~25 ℃間的升幅與其他溫度相比較小，排氨率在15~20 ℃間的升幅較其他溫度變化相比較小，而能量代謝率20~25 ℃間的升幅較其他溫度相對較小，表明中華絨螯蟹在適宜的溫度范圍內(nèi)其呼吸代謝相對穩(wěn)定。在10 ℃或30 ℃下，中華絨螯蟹幼蟹的耗氧率和排氨率與20 ℃下的存在顯著差異，表明10 ℃或30 ℃不適合中華絨螯蟹幼蟹生長發(fā)育，與李青和陳永祥（2019）的研究結(jié)果一致，即環(huán)境溫度過高或過低均會影響蝦蟹的代謝、生長、蛻殼和存活。綜合考慮溫度、氨商和能量代謝率對中華絨螯蟹幼蟹耗氧率和排氨率的影響，可確定20~25 ℃更加適宜幼蟹生長，與幼蟹在生產(chǎn)養(yǎng)殖中得到的最適溫度吻合。

3.2 pH對中華絨螯蟹幼蟹呼吸代謝的影響

甲殼類動(dòng)物對環(huán)境pH較敏感。環(huán)境pH變化會影響甲殼類動(dòng)物的存活率、離子平衡、蛻皮頻率、性成熟、繁殖及體質(zhì)量增長等（Allan and Maguire，1992；Chen and Chen，2003）。當(dāng)環(huán)境pH高于或低于某一范圍時(shí)，會改變甲殼類生物的呼吸活動(dòng)，影響其從外界吸取氧的能力，進(jìn)而影響到耗氧率和排氨率（馮雪等，2012）。不同水產(chǎn)動(dòng)物在不同pH下的呼吸代謝規(guī)律各不相同。朱愛意等（2007）研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)pH適合時(shí)褐菖鲉耗氧率較低，超出pH適合范圍后褐菖鲉通過改變機(jī)體代謝狀況以適應(yīng)環(huán)境pH，其耗氧率升高；梁華芳等（2012）研究表明，波紋龍蝦的耗氧率隨著pH的升高而降低；曹善茂等（2015）研究發(fā)現(xiàn)中華原鉤蝦耗氧率和排氨率均隨pH的升高呈先升高后下降的變化趨勢；姜宏波等（2017）研究證實(shí)中華小長臂蝦在pH 6.0~9.0處理下的耗氧率和排氨率隨pH升高呈先下降后升高的變化趨勢。本研究結(jié)果表明，中華絨螯蟹幼蟹在pH 8.0處理下的耗氧率、排氨率和能量代謝率均最低，而在pH 6.0和pH 9.0處理下幼蟹的耗氧率、排氨率和能量代謝率明顯升高，即不適宜的pH能提高中華絨螯蟹的呼吸代謝。呼吸代謝提高可能是機(jī)體的保護(hù)性響應(yīng)機(jī)制，有助于機(jī)體應(yīng)對不利環(huán)境的刺激，與朱愛意等（2007）、章龍珍等（2009）的研究結(jié)果一致，即過高或過低pH均致使幼蟹發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)，影響鰓組織進(jìn)行離子交換，進(jìn)而引起呼吸代謝異常?？梢姡琾H 8.0更加適宜中華絨螯蟹幼蟹的生長，與劉金生等（2016）研究發(fā)現(xiàn)的中華絨螯蟹幼蟹最適生長pH相符。

3.3 體質(zhì)量對中華絨螯蟹幼蟹呼吸代謝的影響

甲殼類生物的代謝率受體質(zhì)量影響顯著，代謝率與體質(zhì)量間的關(guān)系可用R=aWb表示。式中，a為代謝水平，b為體質(zhì)量指數(shù)（李俊輝等，2010）。a的大小受生物種類和環(huán)境因子的影響，b則與生物所處發(fā)育階段、攝食及溫度和鹽度等條件有關(guān)系（王崇懿等，2020）。本研究結(jié)果表明，在不同溫度和pH下，除10 ℃時(shí)的幼蟹排氨率隨體質(zhì)量的增加而升高外，中華絨螯蟹幼蟹的耗氧率和排氨率均隨體質(zhì)量的增加而降低。代謝率隨體質(zhì)量的增加而降低，與皺肋文蛤（Meretrix lyrata）（栗志民等，2011）、彈涂魚（Boleophthalmus pectinirostris）（Cao and Wang，

2014）、虎斑烏賊（Sepia pharaonis）幼體（王鵬帥等，2017）及三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）（李朝華等，2017）等水產(chǎn)動(dòng)物的研究結(jié)果相似。這可能與甲殼類生物在生長過程中各組織的比重有關(guān)，肝臟和腎臟等組織的代謝率高于肌肉、脂肪等其他組織（鄧超準(zhǔn)等，2015）。幼蟹在生長過程中會累積肌肉和脂肪含量，導(dǎo)致肝臟等比值相對減少，從而導(dǎo)致耗氧率降低（李朝華等，2017）。

3.4 溫度、pH和體質(zhì)量對中華絨螯蟹幼蟹窒息點(diǎn)的影響

窒息點(diǎn)是水生生物對溶解氧需求和耐低氧能力的重要參數(shù)（李育森等，2019）。窒息點(diǎn)與物種、溫度、體質(zhì)量、pH和氧張力等因素有關(guān)。通過對比相似條件下不同種類甲殼動(dòng)物的窒息點(diǎn)（表4），結(jié)果發(fā)現(xiàn)中華絨螯蟹幼蟹的窒息點(diǎn)與其他甲殼類動(dòng)物的窒息點(diǎn)范圍存在一定差異，說明不同物種具有不同的窒息點(diǎn)。大部分水產(chǎn)生物的窒息點(diǎn)隨環(huán)境溫度的升高而升高，如紅鰲鰲蝦（Chearx quadricarinatusvon Martens）（陳孝煊等，1996）、中華胭脂魚（Myxocyp‐rinus asiaticus）（金華等，2016）及羅氏沼蝦（陳琴等，2002a）等。但本研究并未發(fā)現(xiàn)溫度對中華絨螯蟹幼蟹的窒息點(diǎn)產(chǎn)生規(guī)律性影響，在25 ℃下其窒息點(diǎn)最低，表明中華絨螯蟹在適宜溫度下具有更好的低氧耐受性。

表4 不同種類甲殼類動(dòng)物的窒息點(diǎn)比較Table 4 Asphyxiation point comparison of different crustaceans

體質(zhì)量對窒息點(diǎn)的影響有2種類型：一類是窒息點(diǎn)隨體質(zhì)量的增加而增加，呈正相關(guān)；另一類是窒息點(diǎn)隨著體質(zhì)量的增加而減小，呈負(fù)相關(guān)（李朝華等，2017）。本研究中，中華絨螯蟹幼蟹在10~25 ℃下的窒息點(diǎn)均隨體質(zhì)量的增加而減小，與陳琴等（2002c）在對合浦絨螯蟹豆蟹研究中得到的結(jié)果相似；而在30 ℃下幼蟹的窒息點(diǎn)隨體質(zhì)量的增加而增大，與陳琴等（2002b）在對南美白對蝦仔蝦研究中得到的結(jié)果相似。水體pH過高或過低均會影響幼蟹攝取氧的能力，王輝等（2011）研究發(fā)現(xiàn)尼羅羅非魚幼魚在pH 8.06處理下的窒息點(diǎn)最低，增加或降低pH能有效提高幼魚的窒息點(diǎn)。同樣，本研究發(fā)現(xiàn)在pH 8.0處理下中華絨螯蟹幼蟹的窒息點(diǎn)最低，增加或降低pH均會提高幼蟹的窒息點(diǎn)。

4 結(jié)論

溫度和pH變化對不同規(guī)格中華絨螯蟹幼蟹呼吸代謝指標(biāo)均有顯著影響，其適宜生長溫度為20~25 ℃，適宜生長pH為8.0，過高或過低均會對中華絨螯蟹幼蟹機(jī)體造成應(yīng)激反應(yīng)，進(jìn)而影響其正常生長及存活。