紫錐菊不同生長(zhǎng)期菊苣酸含量變化及干燥方式對(duì)其含量的影響

王傲迪，李濤，張良明，潘朝，穆佳豪

（西安天一生物技術(shù)股份有限公司，陜西西安 710000）

紫錐菊（Echinacea purpurea（Linn.） Moench）為菊科松果菊屬植物，是多年生草本植物，又稱(chēng)松果菊，因頭狀花序很像松果而得名，全國(guó)各地均有栽植。紫錐菊具有非常高的藥用價(jià)值，研究發(fā)現(xiàn)其含有咖啡酸衍生物、烷基酰胺類(lèi)、多糖、生物堿、揮發(fā)油等有效成分，咖啡酸衍生物菊苣酸是其中極為重要的免疫活性成分之一，具有增強(qiáng)免疫功能和抗炎的作用，并能通過(guò)抑制透明質(zhì)酸酶發(fā)揮抗衰老效果[1-2]。研究發(fā)現(xiàn)，紫錐菊原料中的菊苣酸受氣候及干燥方式影響較大[3-4]。為了確定陜西省紫錐菊最佳采收季節(jié)及最佳干燥方式，研究菊苣酸與季節(jié)氣候的關(guān)系，為適時(shí)采收、合理開(kāi)發(fā)利用紫錐菊提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)[5-7]。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

SQP型電子天平，賽多利斯科學(xué)儀器有限公司；LC2000液相色譜儀，上海天美科學(xué)儀器有限公司；ODS C18柱（250 mm×4.0 mm，10 μm），上海天美科學(xué)儀器有限公司；0.45 μm微孔濾膜，天津市科億隆實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司。

乙腈，色譜純，賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司；甲醇、磷酸，分析純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；菊苣酸對(duì)照品，99%，長(zhǎng)沙中譜分析技術(shù)事務(wù)所。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 紫錐菊不同生長(zhǎng)期樣品處理

于2020年7—10月，每15 d采摘一次自種一年生紫錐菊根部以上整棵植株（種植地為陜西西安），曬干后粉碎。

1.2.2 紫錐菊干燥處理

采摘果熟期地上全株，分別采用陰干、曬干、烘干（60 ℃，6 h）對(duì)藥材進(jìn)行干燥。

1.2.3 溶液的制備

（1）對(duì)照品：精密稱(chēng)取菊苣酸對(duì)照品約3 mg于25 mL容量瓶中，加入70%乙醇溶解定容至刻度。（2）供試品：依據(jù)估計(jì)含量精密稱(chēng)取紫錐菊樣品適量于25 mL容量瓶中，加入70%乙醇超聲（功率200 W，20 min）輔助提取，冷卻至室溫，用70%乙醇定容至刻度，用0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾即得。

1.2.4 色譜條件

流動(dòng)相：乙腈∶0.4%磷酸水溶液=25∶75（V∶V）；流速：1 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：330 nm；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣量：10 μL；運(yùn)行時(shí)間：20 min。

1.2.5 方法驗(yàn)證

（1）線性關(guān)系與范圍

精密吸取紫錐菊對(duì)照品溶液5 μL、10 μL、15 μL、20 μL、25 μL和30 μL，按1.2.4色譜條件測(cè)定。

（2）精密度試驗(yàn)

吸取同一紫錐菊對(duì)照溶液20 μL，按1.2.4色譜條件重復(fù)測(cè)定6次，統(tǒng)計(jì)菊苣酸含量數(shù)據(jù)。

（3）重復(fù)性試驗(yàn)

取8月采摘的紫錐菊原料，按1.2.3項(xiàng)下方法制備5份供試品溶液，按1.2.4項(xiàng)下色譜條件測(cè)定菊苣酸含量。

（4）穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密吸取紫錐菊對(duì)照品溶液，在12 h內(nèi)每2 h進(jìn)樣一次，每次10 μL，統(tǒng)計(jì)菊苣酸含量數(shù)據(jù)。

（5）加樣回收試驗(yàn)

精密稱(chēng)取已知菊苣酸含量的紫錐菊粉末0.6 g，精密加入一定量的菊苣酸對(duì)照品（加入量為樣品含量的80%、100%、120%）。按1.2.4方法測(cè)定，計(jì)算加樣回收率。

2 結(jié)果與分析

2.1 方法驗(yàn)證

以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積值為縱坐標(biāo)，回歸方程Y=6 124X-194 065，R=0.999 8，表明方法線性關(guān)系良好；精密度和重復(fù)性實(shí)驗(yàn)的RSD值分別為1.90%和1.65%，表明方法精密度和重復(fù)性良好；菊苣酸峰面積在12 h內(nèi)基本無(wú)變化，RSD為0.54%，表明實(shí)驗(yàn)條件下樣品穩(wěn)定性良好；樣品平均回收率100.03%，RSD為0.04%，表明方法回收率良好。

2.2 不同生長(zhǎng)期紫錐菊菊苣酸含量

不同生長(zhǎng)期紫錐菊菊苣酸含量結(jié)果見(jiàn)圖1。由圖1可以看出，6月28日—8月14日，紫錐菊菊苣酸含量持續(xù)增高，在8月14日后菊苣酸含量持續(xù)降低。一年生紫錐菊，4月中旬到5月中旬為蕾期，5月中旬到6月中旬為始花期，6月中旬到7月中旬為盛花期，7月中旬到8月初為果期，8月初到8月下旬為果熟期，8月下旬到9月份為落果期。因此，要獲得高菊苣酸含量的原料，應(yīng)在果熟期進(jìn)行采收。

圖1 不同生長(zhǎng)期紫錐菊菊苣酸含量結(jié)果

2.3 干燥方式對(duì)菊苣酸含量的影響

不同干燥方式對(duì)紫錐菊菊苣酸含量的影響結(jié)果見(jiàn)表1。從表1可知，采摘果熟期紫錐菊地上部分后，不同干燥方法保留菊苣酸的能力依次為曬干＞陰干＞烘干。

表1 不同干燥方式對(duì)紫錐菊菊苣酸含量的影響（單位：mg/g）

3 結(jié)論

研究發(fā)現(xiàn)，不同生長(zhǎng)期紫錐菊中的菊苣酸含量不同，一年生紫錐菊中菊苣酸含量為先升高后降低的過(guò)程，其中果熟期菊苣酸含量最高，其次為果期。為了保證采收到最高含量的紫錐菊原料，可以在8月中旬對(duì)其進(jìn)行采收。地上部分采用不同干燥方法的菊苣酸含量依次為曬干＞陰干＞烘干。因此，在選擇合適的采摘時(shí)間的同時(shí)，應(yīng)選擇合適的干燥方式對(duì)其進(jìn)行炮制。