孕酮微囊包被液態(tài)制劑對肉羊同期發(fā)情人工授精效果分析

董志岷，王韻斐，張瑞琴，杜金娥，張 健，陳秋菊，楊成虎，候 琴，王 貴＊

（1.河套學(xué)院，內(nèi)蒙古 巴彥淖爾 015000；2.內(nèi)蒙古巴彥淖爾市農(nóng)牧科學(xué)研究所，內(nèi)蒙古巴彥淖爾 015000；3.內(nèi)蒙古巴彥淖爾市畜牧業(yè)服務(wù)中心，內(nèi)蒙古巴彥淖爾 015000；4.內(nèi)蒙古包頭市達茂旗巴音敖包蘇木應(yīng)急管理和科技推廣中心，內(nèi)蒙古包頭 014500；5.內(nèi)蒙古五原縣動物疫病預(yù)防控制中心，內(nèi)蒙古巴彥淖爾 015100）

隨著養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展，集約化、規(guī)模化的養(yǎng)殖已成為必然趨勢，直接關(guān)系到養(yǎng)羊業(yè)的經(jīng)濟效益。綿羊同期發(fā)情技術(shù)就是利用某些激素制劑，人為地控制一群母羊的發(fā)情周期，使其在特定時間內(nèi)集中發(fā)情的技術(shù)。通過同期發(fā)情技術(shù)使母羊按預(yù)定時間發(fā)情、配種，達到同時發(fā)情、同時配種、同時妊娠、同時產(chǎn)羔、同時哺乳、同時斷奶、同時育肥和同時出欄，實現(xiàn)肉羊養(yǎng)殖的標準化、規(guī)?；彤a(chǎn)品規(guī)格統(tǒng)一化的目的，從而提高養(yǎng)羊業(yè)的經(jīng)濟效益（盧守亮等，2022）。同期發(fā)情的關(guān)鍵是控制母畜黃體的消長。一般繁殖母羊的同期化處理有兩種方法：一種是使用孕激素及其類似物，人為地延長其黃體期，使母羊推遲發(fā)情，為下一個發(fā)情周期創(chuàng)造一個共同的起點；另一種方法是利用前列腺素及其類似物縮短母羊的發(fā)情周期，使母畜的發(fā)情期統(tǒng)一提前（余小亮等，2021）。其中，使用孕酮及其類似物處理母羊同期發(fā)情效果較好（Matsumoto等，2021）。

本試驗利用孕酮微囊包被技術(shù)形成液態(tài)制劑噴灑于全混日糧（TMR）實施孕酮投放，通過對比其與陰道孕酮釋放裝置調(diào)節(jié)體內(nèi)孕酮水平同期發(fā)情方法的差異，探討孕酮微囊包被液態(tài)制劑的效果，為推動其在生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考。

1 材料

1.1 試驗動物試驗羊由內(nèi)蒙古富川養(yǎng)殖科技股份有限公司提供，選擇適齡空懷繁殖母羊（杜寒高代雜交）240只、種公羊5只、試情公羊12只。將繁殖母羊隨機分成3組，每組80只，飼養(yǎng)在兩個欄內(nèi)，每欄40只。參試羊飼養(yǎng)在同一圈舍，采取統(tǒng)一飼養(yǎng)管理。

1.2 同期發(fā)情藥品孕酮微囊包被液態(tài)制劑〔（P4含量1.5 g/1L），鼎正動物藥業(yè)（天津）有限公司、河套學(xué)院動物遺傳育種與繁殖研究中心共同研發(fā)中〕；CIDR〔孕激素（含P4300 mg）陰道硅膠支架，新西蘭〕；海綿栓〔孕激素（含P450 mg）海綿柱，澳大利亞〕；PMSG（孕馬血清促性腺激素，寧波三生生物科技股份有限公司）、PGF2a（前列腺素，上海計勝生物科技有限公司）。

2 方法

2.1 試驗設(shè)計

2.1.1 試驗羊分組 將240只空懷繁殖母羊隨機分成3組，每組80只，飼養(yǎng)在兩欄個內(nèi)，每欄40只。參試羊飼養(yǎng)在同一棟羊舍，采取統(tǒng)一飼養(yǎng)管理。Ⅰ組以全混日糧（TMR）為載體投放孕酮（孕酮微囊包被液態(tài)制劑）；Ⅱ組以海綿栓（一種浸潤了孕酮的海綿柱）為載體投放孕酮；Ⅲ組以CIDR（一種含孕酮的陰道硅膠支架）為載體投放孕酮。試驗羊分組試驗方案見表1。

表1 試驗?zāi)秆蚍纸M及同期發(fā)情處理方案

2.1.2 試驗羊同期發(fā)情人工授精處理方案投藥或放栓日設(shè)為“0”天，第12天Ⅰ組停止投藥同時肌注PGF2a（1 mL/0.1 mg）和PMSG（每只250 IU）；Ⅱ組撤栓、清洗陰道（生理鹽水）同 時 肌 注 PGF2a（1 mL/0.1 mg）和 PMSG（每只250 IU）；Ⅲ組撤栓同時肌注PGF2a（1 mL/0.1 mg）和PMSG（每只250 IU）。12 h后各組分別試情，統(tǒng)計各組發(fā)情母羊數(shù)。母羊發(fā)情后12 h輸精，間隔12 h復(fù)配一次。發(fā)情母羊人工授精后40 d利用B超進行妊娠檢測，分別統(tǒng)計發(fā)情母羊妊娠數(shù)量及比例。

表2 試驗?zāi)秆蛲诎l(fā)情人工授精實施方案

2.2 統(tǒng)計分析記錄各組母羊發(fā)情情況、處理后母羊生殖道情況、妊娠情況等數(shù)據(jù)，用SPSS軟件單因素方差分析模型進行數(shù)據(jù)分析，P＞0.05表示組間差異不顯著，P＜0.05表示組間差異顯著，P＜0.01表示組間差異極顯著。

3 結(jié)果與分析

3.1 不同孕酮投放方式對母羊發(fā)情時間和同期發(fā)情效果的影響由表3可知，Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組總發(fā)情率分別為88.8%、90.0%和93.8%，差異不顯著（P＞0.05）。從母羊發(fā)情時間可知，Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組12 h發(fā)情率分別為6.3%、16.3%、18.8%，Ⅰ組對Ⅱ組和Ⅲ組極顯著偏低（P＜0.01）、Ⅱ組對Ⅲ組差異不顯著（P＞0.05），24、36 h發(fā)情率各組之間無顯著差異（P＞0.05）。

表3 母羊發(fā)情情況統(tǒng)計（續(xù)）

表3 母羊發(fā)情情況統(tǒng)計

3.2 不同孕酮投放方式對母羊生殖道內(nèi)環(huán)境的影響由表4可知，Ⅱ組母羊撤栓時生殖道異常率極顯著高于Ⅲ組（P＜0.01）（Ⅰ組無撤栓環(huán)節(jié)），同時Ⅱ組的丟栓現(xiàn)象也顯著高于Ⅲ組（P＜0.05），輸精時，Ⅰ組母羊生殖道異常率極顯著低于Ⅱ組（P＜0.01），顯著低于Ⅲ組（P＜0.05），Ⅲ組極顯著低于Ⅱ組（P＜0.01）。

表4 母羊生殖道異常統(tǒng)計表

3.3 不同孕酮投放方式對母羊人工授精妊娠率的影響由表5可知，Ⅰ組發(fā)情母羊人工授精妊娠率極顯著高于Ⅱ組（P＜0.01），顯著高于Ⅲ組（P＜0.05）；參試羊受胎率Ⅰ組、Ⅲ組無顯著差異（P＞0.05），但均顯著高于Ⅱ組（P＜0.05）。

表5 母羊妊娠情況統(tǒng)計

4 討論與結(jié)論

4.1 不同孕酮投放方式對母羊發(fā)情時間和同期發(fā)情效果的影響一般肉羊發(fā)情同期化處理有兩種方法（Romano，2015），一種是使用孕激素及其類似物，人為地延長其黃體期，推遲母羊發(fā)情，為下一個發(fā)情周期創(chuàng)造一個共同的起點；另一種方法是利用前列腺素及其類似物（謝周勛，2021），縮短母羊的發(fā)情周期，使母羊發(fā)情期統(tǒng)一提早出現(xiàn)。孕激素的投藥方法目前主要以CIDR（一種陰道硅膠支架）和陰道海綿栓為載體在陰道中被陰道黏膜緩慢吸收（Habeeb，2021）。此方法雖然同期發(fā)情效果較好，但處理過程較繁瑣，放栓、撤栓、陰道清洗等技術(shù)環(huán)節(jié)較難掌握，同時人力消耗較多，而且CIDR成本較高，不適合用于普通繁殖母羊的同期發(fā)情（Arrais，2021）。因此，一種簡單、安全、人力投入較少的不影響母羊生殖道內(nèi)環(huán)境，同時能得到較高同期發(fā)情效果的孕激素投藥方法是本課題研究目的所在。試驗結(jié)果表明，3種孕酮投放方法均能使母羊達到較高的同期發(fā)情效果，停藥或撤栓后60 h總發(fā)情率分別是88.8%、90.0%和93.8%，差異不顯著（P＞0.05）。只是發(fā)情起始時間有一定差異，12 h發(fā)情率Ⅰ組對Ⅱ組和Ⅲ組極顯著偏低（P＜0.01）、Ⅱ組對Ⅲ組差異不顯著（P＞ 0.05），24、36 h發(fā)情率各組之間無顯著差異（P＞0.05）。

4.2 不同孕酮投放方式對母羊生殖道內(nèi)環(huán)境的影響試驗結(jié)果可知，母羊撤栓時生殖道異常率Ⅱ組極顯著高于Ⅲ組（P＜0.01）（Ⅰ組無撤栓環(huán)節(jié)），同時Ⅱ組的丟栓現(xiàn)象也顯著高于Ⅲ組（P＜0.05），輸精時母羊生殖道異常率Ⅰ組極顯著低于Ⅱ組（P＜0.01），顯著低于Ⅲ組（P＜0.05），Ⅲ組極顯著低于Ⅱ組（P＜0.01）。表明通過飼料完成孕激素投藥不影響生殖道內(nèi)環(huán)境（趙興緒，2008）。雖然CIDR的孕酮投藥方式對生殖道影響較小，但也會因操作不當而引起一定的生殖道異常。

4.3 不同孕酮投放方式對發(fā)情母羊人工授精妊娠率的影響同期發(fā)情處理后，母羊人工授精受胎率不但與母羊發(fā)情率、輸精時間、操作人員的技術(shù)水平有關(guān)，還與同期發(fā)情處理過程中對母羊生殖道內(nèi)環(huán)境的影響程度有關(guān)，特別是在放栓、撤栓過程中對母羊生殖道的損傷程度和污染程度。同時放入生殖道內(nèi)的孕酮釋放裝置對生殖道內(nèi)環(huán)境的影響也不可忽視（Martinez-Ros，2021）。由試驗結(jié)果可知，發(fā)情母羊人工授精妊娠率Ⅰ組極顯著高于Ⅱ組（P＜0.01），顯著高于Ⅲ組（P＜0.05），Ⅲ組顯著高于Ⅱ組（P＜0.05）。說明通過日常投料過程投放孕激素不影響生殖道內(nèi)環(huán)境，不會對進入母羊生殖道的精子有影響，同時也表明CIDR對母羊生殖道的影響也較小。另外，參試羊總體受胎率Ⅰ組、Ⅲ組無顯著差異（P＞0.05），但均顯著高于Ⅱ組（P＜0.05），說明CIDR處理的母羊同期發(fā)情率較高，同時對母羊生殖道內(nèi)環(huán)境的影響也較小，其總體受胎率也會較高，但其成本偏高，不適宜大面積推廣使用。

綜上所述，通過孕酮微囊包被技術(shù)和日常飼料完成孕激素投放，通過胃黏膜等消化器官上皮吸收作用調(diào)節(jié)體內(nèi)孕酮水平與通過陰道孕酮釋放裝置通過生殖道上皮吸收調(diào)節(jié)體內(nèi)孕酮水平的同期發(fā)情方法效果差異不顯著。孕酮微囊包被液態(tài)制劑相對其他同期發(fā)情產(chǎn)品價格便宜，操作簡單、節(jié)省大量的人力投入、同時不影響生殖道內(nèi)環(huán)境，通過自然交配或人工授精會達到較高的受胎率，方法簡單易行，便于推廣，從而收到較好的經(jīng)濟效益。