完全性骶髓損傷后大鼠神經(jīng)源性膀胱模型的制備與觀察

脊髓損傷(spinal cord injury, SCI)是指由于外界直接或間接因素導(dǎo)致脊髓損傷。流行病學(xué)研究表明，近年來隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，SCI的發(fā)生率在世界范圍內(nèi)呈逐年上升的趨勢(shì)，其中，亞洲人脊髓損傷發(fā)病率近些年已從每百萬人12.06人的發(fā)生率上升到61.6人

。神經(jīng)源性膀胱(neurogenic bladder, NB)是SCI后最常見的并發(fā)癥，以骶髓損傷為例，NB功能障礙表現(xiàn)為逼尿肌收縮強(qiáng)度或持續(xù)時(shí)間降低即逼尿肌無反射或低反射，膀胱排空時(shí)間延長或排空不能，殘余尿量增多，臨床表現(xiàn)為尿潴留。這種排尿困難和高壓儲(chǔ)尿狀態(tài)是并發(fā)膀胱-輸尿管反流、腎功能損傷等上尿路疾病的主要原因，嚴(yán)重降低了患者的生存質(zhì)量

。SCI所致的NB是臨床與實(shí)驗(yàn)研究的重點(diǎn)和熱點(diǎn)內(nèi)容之一，然而，目前絕大多數(shù)的實(shí)驗(yàn)及動(dòng)物模型研究主要集中在骶上水平，選擇骶髓水平損傷的實(shí)驗(yàn)及動(dòng)物模型研究較少，且現(xiàn)有的研究造模方法不統(tǒng)一、缺少脊髓損傷術(shù)后的系統(tǒng)護(hù)理說明以及模型穩(wěn)定性的判定

。因此，對(duì)脊髓骶髓水平損傷的動(dòng)物模型進(jìn)行系統(tǒng)研究就顯得十分必要。本實(shí)驗(yàn)選取大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，采用脊髓完全橫斷術(shù)成功復(fù)制骶髓損傷后大鼠神經(jīng)源性膀胱模型，匯報(bào)如下。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物與分組 SPF級(jí)健康SD雌性大鼠42只，體質(zhì)量250～280g，湖南中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供(動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK(湘)2016-0002；實(shí)驗(yàn)設(shè)施實(shí)驗(yàn)許可證號(hào)：SYXK(湘)2013-0005)，24～26℃的安靜環(huán)境中適應(yīng)性喂養(yǎng)3周。適應(yīng)性喂養(yǎng)后采用隨機(jī)數(shù)字表法編號(hào)，隨機(jī)抽取12只設(shè)為空白組，剩余30只大鼠采用改良Hassan Shaker脊髓橫斷法制作成完全性骶髓損傷后神經(jīng)源性膀胱模型。實(shí)驗(yàn)過程對(duì)大鼠的處置方式嚴(yán)格按照中華人民共和國科技部2006年發(fā)布的《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見》。

我國企業(yè)雖然建立了股東會(huì)、董事會(huì)、監(jiān)事會(huì)三權(quán)制衡的內(nèi)部治理結(jié)構(gòu)，但企業(yè)的產(chǎn)權(quán)歸國家所有，所有者地位的缺失造成企業(yè)管理當(dāng)局權(quán)利的高度集中。同時(shí)，國有企業(yè)的股權(quán)比較集中，國有股一股獨(dú)大，股權(quán)過于集中容易損害非控股股東的利益，控股大股東經(jīng)常操縱股東大會(huì)、董事會(huì)、監(jiān)事會(huì)，且集控制權(quán)、執(zhí)行權(quán)、監(jiān)督權(quán)于一身，權(quán)利較大，其他股東沒有辦法來約束它。他們這些人為了少數(shù)人的利益，極有可能向外界提供虛假的會(huì)計(jì)報(bào)告。

1.2主要材料、試劑與儀器 主要材料、試劑：水合氯醛(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)，青霉素鈉(哈藥集團(tuán)制藥總廠)，4%多聚甲醛(上海威奧生物科技有限公司)，乳酸鹽林格溶液(哈藥集團(tuán)制藥總廠)，橡皮生肌膏(湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院自制藥)，其余常規(guī)試劑(上海國藥生物)。主要儀器：微量注射泵(浙江史密斯醫(yī)學(xué)儀器有限公司/WZ-50C6)，F(xiàn)3導(dǎo)尿管(上?？跌?，16通道生理記錄儀(美國BIOPAC公司/MP150-WSW)，YP10002小動(dòng)物電子秤(上海佑科儀表有限公司)，顯微鏡(廈門麥克奧迪)，搖床(其林貝爾)，恒溫箱(北京六一)，切片機(jī)(浙江金華益迪試驗(yàn)器材)，包埋機(jī)(常州中威電子儀器)。

1.3 方法

1.3.1 手術(shù)方法 采用改良Hassan Shaker脊髓全斷法進(jìn)行模型制備

，大鼠術(shù)前24h禁食不禁水，術(shù)前2h腹腔注射20U單位抗生素預(yù)防感染；隨即以10%水合氯醛腹腔注射麻醉后(300mg/kg)，俯臥位捆綁固定、備皮、消毒；于L

～L

椎間隙處完全橫斷脊髓，損傷大鼠脊髓S

節(jié)段

；具體為：于鼠背部皮膚相應(yīng)位置以手術(shù)刀沿后正中線作3cm的縱向切口；逐層鈍性分離筋膜、肌肉暴露L

椎體棘突及椎板，去除L

棘突和椎弓根以充分暴露脊髓，注意避免鄰近神經(jīng)等組織損傷。選用5號(hào)牙科鉤平口探頭端沿椎管一側(cè)下緣穿過脊髓底部，用手術(shù)刀完全切斷脊髓，確保無神經(jīng)纖維殘留。手術(shù)過程嚴(yán)格無菌操作，確認(rèn)止血充分后由內(nèi)而外逐層嚴(yán)密縫合創(chuàng)面。成模標(biāo)準(zhǔn)

：①大鼠脊髓休克期后，后肢運(yùn)動(dòng)功能障礙且膀胱功能障礙表現(xiàn)為尿潴留；②尿流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)：漏尿點(diǎn)壓力(leak pointpressure, LPP)降低、膀胱最大容量(maximum cystometric capacity, MCC)增加，膀胱順應(yīng)性(bladder compliance，BC)增加，滿足以上即可判斷成模。剔除標(biāo)準(zhǔn)：術(shù)后存在自主排尿、尿失禁，或出現(xiàn)嚴(yán)重尿血、尿路感染、自噬、腹脹等并發(fā)癥的大鼠予以剔除。

圖1所示為楊莊東街4個(gè)信號(hào)交叉口路段的道路結(jié)構(gòu)、道路渠化和周邊交通需求產(chǎn)生情況等. 從圖1中可以看出，該道路周邊聚集有大量生活社區(qū)，交通需求非常大.

1.3.2 術(shù)后護(hù)理 ①術(shù)后大籠單籠飼養(yǎng)大鼠，保證大鼠充分的活動(dòng)空間；②予抗生素預(yù)防感染(術(shù)后1～3d，20U單位青霉素酸鈉2次/只/d；術(shù)后4～7d給予20U單位1次/只/d)；③預(yù)防電解質(zhì)失衡(手術(shù)當(dāng)天及第2天予大鼠乳酸鹽林格溶液皮下注射，20ml/kg，2次/d)。④予苦味酸皮膚噴噴灑預(yù)防自噬，出現(xiàn)自噬者及時(shí)采取創(chuàng)面消毒包扎處理，并予青霉素鈉預(yù)防感染。⑤腸道并發(fā)癥預(yù)防：手術(shù)當(dāng)天僅予葡萄糖喂養(yǎng)；術(shù)后2～7d，葡萄糖加少量飼料喂養(yǎng)(約10g/d/只)，7d后常規(guī)喂養(yǎng)，出現(xiàn)腹脹者，減少飼料喂養(yǎng)并適當(dāng)補(bǔ)充葡萄糖，溫和按揉腹部，更換大籠飼養(yǎng)，保證其活動(dòng)范圍。⑥膀胱護(hù)理：以crede手法排尿，3次/d，避免膀胱尿液長期大量潴留膀胱造成腎、膀胱的功能損傷，若出現(xiàn)血尿及尿路感染等，予腹腔注射青霉素鈉(20萬u/只/d)持續(xù)治療。

1.3.3 分組處理 空白組大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)后常規(guī)飼養(yǎng)18 d，于第19天行尿流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)，斷頸處死后剪取膀胱組織，以備HE染色后光鏡下進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察。模型組大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)后予以手術(shù)造模，造模術(shù)后每日采取規(guī)范化的術(shù)后護(hù)理，觀察并記錄大鼠膀胱殘余尿量、并發(fā)癥等情況，待第19天大鼠生命體征穩(wěn)定、并發(fā)癥良好控制，將大鼠隨機(jī)分為3組，每組10只，分別于造模術(shù)后第19天、23天、28天行尿流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)，比較成模后不同階段模型大鼠的膀胱功能狀況。

1.4 評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)

2.2.2 大鼠尿流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)結(jié)果 尿流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示：與空白組相比較，模型組大鼠膀胱LPP降低，膀胱MCC、BC增加(

<0.01)。見表2。

1.4.2 尿流動(dòng)力學(xué)檢查方法 采用膀胱造瘺法行膀胱尿流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)

：測(cè)試前將16通道生理記錄儀、F3導(dǎo)尿管及微量注射泵以三通管相連，確保系統(tǒng)密閉相通，充盈導(dǎo)尿管、確保管道中無氣泡影響，測(cè)試系統(tǒng)調(diào)零后備用。大鼠充分麻醉后固定于仰臥位，手法排除膀胱內(nèi)殘余尿液后下腹部消毒備皮。于下腹正中做長約2cm的縱行切口，暴露膀胱頂，將備好的F3導(dǎo)管經(jīng)膀胱頂造瘺處插入后以外科縫合線嚴(yán)密縫合，確?？p合嚴(yán)密后逐層縫合腹部肌肉皮膚以恢復(fù)腹腔密閉環(huán)境。打開檢測(cè)系統(tǒng)持續(xù)觀察，得到的穩(wěn)定壓力即為膀胱的基礎(chǔ)內(nèi)壓，之后打開微量注射泵，灌注溫生理鹽水(水溫25～35℃，速度6ml/h)

。持續(xù)記錄膀胱壓力變化曲線，并觀察膀胱最大容量、漏尿點(diǎn)壓力、膀胱順應(yīng)性等數(shù)值：①LPP為出現(xiàn)首次漏尿時(shí)膀胱內(nèi)壓力；②MCC為出現(xiàn)首次漏尿時(shí)的時(shí)灌注容積，即灌注速度(mL/min)×灌注時(shí)間(min)；③BC為膀胱容量變化值與膀胱壓力變化值相比求出大鼠膀胱順應(yīng)性。

對(duì)韓城區(qū)塊3層主力煤層排采井網(wǎng)進(jìn)行規(guī)劃，已經(jīng)實(shí)施的開發(fā)井主流井距為280～350 m，南北向排距大于東西向井距的菱形井網(wǎng)。壓裂時(shí)通過微地震監(jiān)測(cè)及穩(wěn)定電場(chǎng)井間監(jiān)測(cè)表明，壓裂縫呈橢圓狀分布，主裂縫延北東方向延伸，裂縫半長為80～175 m，在短軸方向的裂縫半長為50～85 m。壓裂井與鄰井井間距300 m以上，2口井方位垂直于最大主應(yīng)力方向，壓裂基本不能波及鄰井。壓裂井、鄰井方位與主應(yīng)力方向呈60°～180°，波及鄰井的幾率比較大。

2.3 造模術(shù)后第19、23、28天模型A、B、C組尿流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)結(jié)果比較 模型組大鼠行造模手術(shù)后第19天、23天、28天尿流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示：3組間大鼠膀胱LPP、MCC及BC比較其差無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表3。

2 結(jié)果

空白組大鼠第19天尿流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)過程中死亡1只，模型組大鼠護(hù)理期間死亡3只，并于第23天、28天行尿流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)過程中各死亡1只，最終共計(jì)36只大鼠納入統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2.1 實(shí)驗(yàn)大鼠基本情況

2.2.1 逼尿肌組織鏡下觀察 HE染色后結(jié)果顯示，空白組大鼠膀胱逼尿肌呈正常形態(tài)結(jié)構(gòu)，肌束排列緊致、肌纖維飽滿、排列整齊，間質(zhì)填充少；造模術(shù)后第19天，模型組大鼠逼尿肌肌束排列紊亂、肌纖維嚴(yán)重萎縮、間質(zhì)結(jié)構(gòu)填充多。見圖1。結(jié)果提示：大鼠骶髓損傷后逼尿肌失神經(jīng)支配，適應(yīng)性地出現(xiàn)病理性改變。

2.1.1 一般情況 空白組大鼠一般情況良好。模型組大鼠造模術(shù)后出現(xiàn)雙側(cè)后肢運(yùn)動(dòng)功能障礙，體重減輕；術(shù)后模型組大鼠膀胱功能障礙持續(xù)表現(xiàn)為尿潴留，觸診下腹部可見膀胱充盈脹大，刺激腹壁(術(shù)后早期)/提尾懸空(術(shù)后晚期損傷愈合)無自主排尿。模型組大鼠行造模術(shù)后每日予3次手法排尿，4周護(hù)理期間，模型組大鼠平均單次手法排尿量、每日手法排尿總量分別為3ml及9ml左右。

新年的鐘聲已經(jīng)敲響。此時(shí)此刻，我謹(jǐn)向全國水利系統(tǒng)廣大干部職工致以誠摯的問候和新年的祝福！向關(guān)心支持水利改革發(fā)展的社會(huì)各界人士表示衷心的感謝和美好的祝愿！

2.1.2 模型組大鼠并發(fā)癥發(fā)生情況 模型組大鼠死亡3只(10.00%)，血尿8只(26.67%)，自噬2只(6.67%)，腹脹2只(10.00%)，尿路感染3只(10.00%)。通過4周的系統(tǒng)觀察和護(hù)理，模型組大鼠18d后生命體征保持穩(wěn)定，且并發(fā)癥得到良好控制。術(shù)后8d內(nèi)出現(xiàn)并發(fā)癥的高峰期，術(shù)后13～18d出現(xiàn)第2個(gè)并發(fā)癥的高峰期，第2個(gè)高峰期并發(fā)癥發(fā)生較第1個(gè)高峰期減少，隨后大鼠無新增并發(fā)癥，情況穩(wěn)定。見表1。

2.2 造模術(shù)后第19天模型A組大鼠逼尿肌組織與尿流動(dòng)力學(xué)觀察

在這四層閱讀層次的介紹中，作者重點(diǎn)介紹了分析閱讀與主題閱讀的方法，這兩種層級(jí)的閱讀更具技巧性，也更讓我們獲益，我們具體來回顧一下這兩個(gè)層級(jí)的閱讀的方法和收獲。

①統(tǒng)計(jì)兩組患者的血糖控制效果，包括護(hù)理前和護(hù)理后的空腹血糖（FBG）、餐后2 h血糖（2 hPG）和糖化血紅蛋白（HbAlc）；②統(tǒng)計(jì)兩組患者的并發(fā)癥發(fā)生情況，以甲亢危象、酮癥酸中毒、低血糖等并發(fā)癥發(fā)生率進(jìn)行評(píng)估。

1.4.1 一般情況觀察 一般行為學(xué)觀察：記錄大鼠飲食飲水等一般情況。記錄大鼠血尿、自噬、腹脹、死亡等情況。大鼠尿量觀察、記錄：空白組、模型組大鼠提尾，觀察是否存在自主排尿的情況，觸診大鼠下腹部膀胱位置是否膨隆，存在尿潴留的表現(xiàn)。

1.4.3 光鏡標(biāo)本制作 病理形態(tài)學(xué)觀察：蘇木精-伊紅染色法(hematoxylin-eosin staining，HE)染色后，光鏡下觀察各組病理切片膀胱逼尿肌形態(tài)變化。具體操作步驟：大鼠膀胱逼尿肌標(biāo)本于4%多聚甲醛中固定48h，石蠟包埋后切片于60℃下烤片1～2h，經(jīng)二甲苯中脫蠟2次(10min/次)，乙醇洗蠟(100%/95%/85%/75%乙醇每級(jí)放置5min)，蒸餾水洗5min后蘇木素染5～10min，蒸餾水復(fù)洗，經(jīng)PBS返藍(lán)、伊紅染3～5min、蒸餾水洗后予酒精梯度脫水(95%～100%每級(jí)5min)，二甲苯透明2次(10min/次)后中性樹膠封片，最后光鏡下觀察膀胱逼尿肌的組織形態(tài)學(xué)改變。

3 討論

SCI后的NB是脊髓損傷患者嚴(yán)重的并發(fā)癥，圍繞脊髓損傷后NB的康復(fù)研究是近年來臨床和實(shí)驗(yàn)研究的熱點(diǎn)

。脊髓圓錐作為排尿反射的低位中樞，其受損可導(dǎo)致排尿反射弧中斷，逼尿肌反射消失，繼發(fā)逼尿肌的收縮能力下降，臨床表現(xiàn)為尿液充盈膀胱后不能正常排出，引起膀胱容積增大、順應(yīng)性降低，最終表現(xiàn)為排尿困難、尿潴留為主要特點(diǎn)的神經(jīng)源性膀胱功能障礙。此類膀胱儲(chǔ)尿和排尿功能均受到嚴(yán)重?fù)p害，殘余尿量多，尿路感染率高達(dá)83%，極易引起腎臟損害

。目前，對(duì)于脊髓損傷后NB的絕大多數(shù)的動(dòng)物模型研究都集中在骶上水平，對(duì)于骶髓水平損傷的臨床及實(shí)驗(yàn)研究較少。

選擇橫斷大鼠脊髓骶髓水平需要考慮到其神經(jīng)控制系統(tǒng)及其脊髓骶段解剖位置與人體的差異性。膀胱的低級(jí)神經(jīng)中樞主要為交感神經(jīng)、副交感神經(jīng)。其中交感神經(jīng)支配膀胱頂部、頸部以及尿道，松弛逼尿肌和緊張尿道括約肌以達(dá)到貯尿目的。副交感神經(jīng)興奮則膀胱逼尿肌緊張尿道括約肌放松，使尿液排出。副交感神經(jīng)低級(jí)中樞位于骶段S

水平，對(duì)應(yīng)大鼠椎體L

的任意部位。建立骶段完全性損傷可選擇橫斷大鼠L

椎體下的脊髓，該段受損后即可造成骶副交感神經(jīng)骶-膀胱叢抑制，繼而出現(xiàn)逼尿肌收縮無力從而產(chǎn)生尿潴留

。本實(shí)驗(yàn)參考相關(guān)研究選取大鼠L

椎間隙下的脊髓進(jìn)行橫斷

，結(jié)果顯示：術(shù)后第18天模型組大鼠光鏡下逼尿肌肌纖維萎縮、兼間質(zhì)結(jié)構(gòu)填充增多、排列紊亂；尿流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)結(jié)果可見模型組大鼠膀胱漏尿點(diǎn)壓力顯著降低，膀胱容量、膀胱順應(yīng)性增加，逼尿肌收縮無力，漏尿點(diǎn)壓力降低，尿液潴留，膀胱容量增大。形態(tài)學(xué)改變及尿流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)結(jié)果與相關(guān)研究結(jié)果一致，證實(shí)模型復(fù)制成功

。

脊髓損傷后的各種并發(fā)癥的發(fā)生率高，良好地控制并發(fā)癥對(duì)于保證動(dòng)物模型質(zhì)量十分重要。本實(shí)驗(yàn)中我們觀察到大鼠后1～8d、13～18d分別出現(xiàn)了并發(fā)癥的高峰期，因脊髓橫斷術(shù)本身的創(chuàng)傷及術(shù)后脊髓休克期所致的運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)及各內(nèi)臟功能的障礙導(dǎo)致了第一期并發(fā)癥的高峰，之后大鼠術(shù)后創(chuàng)傷基本修復(fù)，部分大鼠脫離脊髓休克期，神經(jīng)功能得到一定程度的恢復(fù)，并發(fā)癥發(fā)生率隨之降低。從并發(fā)癥的發(fā)生率來看，血尿和尿路感染的綜合發(fā)生率高達(dá)36.67%，占并發(fā)癥總發(fā)生率53.34%的一半以上，早期的護(hù)理方案主要采用Crede手法排尿，避免膀胱過度充盈后出現(xiàn)血管的破裂，本實(shí)驗(yàn)中，除了規(guī)律的手法排尿之外，同時(shí)規(guī)律地控制大鼠的飲水，將二者結(jié)合起來(分三次排尿、飲水，給水約10ml/次/只)，與前期研究相比較，進(jìn)一步降低了并發(fā)癥的發(fā)生率

。在脊髓休克期期間，采用常規(guī)飲食的方法，大鼠不能自主控制進(jìn)食量，常因過量進(jìn)食導(dǎo)致腹瀉、腹脹等較為嚴(yán)重的腸道并發(fā)癥，故本實(shí)驗(yàn)在早期減少大鼠常規(guī)進(jìn)食量，適當(dāng)補(bǔ)充葡萄糖水以減小胃腸消化負(fù)荷，待大鼠脊髓休克期結(jié)束、運(yùn)動(dòng)功能提高后，逐漸恢復(fù)其常規(guī)飲食。本研究中，腸道并發(fā)癥的發(fā)生率僅為10%。

2.2.2 大小比數(shù) 大小比數(shù)被定義為胸徑大于參照樹的相鄰木占n株最近相鄰木的株數(shù)比例，用以描述林木個(gè)體大小分化程度，或樹種的生長優(yōu)勢(shì)程度(描述非均一性)，其表達(dá)式 式中：Ui為參照樹i的大小比數(shù)；n為最近相鄰木的株數(shù)；kij為離散性變量，其值定義為，當(dāng)參照樹i比相鄰木j大時(shí)，kij=0，否則kij=1。大小比數(shù)量化了參照樹與其相鄰木的關(guān)系，其值Ui越低，說明比參照樹大的相鄰木越少式中：U為樹種或林分平均大小比數(shù)；N為樹種或林分的林木總株數(shù)。

目前對(duì)于骶髓損傷后NB膀胱大鼠模型成功的判定并無確切的標(biāo)準(zhǔn)，骶段脊髓損傷后大鼠在脊髓休克期以及脊髓休克期后，膀胱功能障礙均表現(xiàn)為尿潴留狀態(tài)，客觀上為模型成功與否的判定帶來了一定的困難。采用形態(tài)學(xué)、尿流動(dòng)力學(xué)等客觀的檢測(cè)方法，結(jié)合大鼠膀胱功能的表現(xiàn)(如：尿液潴留觸診可見膀胱脹大、大鼠提尾懸空不能自主排尿)可以準(zhǔn)確地判斷模型成功與否。然而在實(shí)際的實(shí)驗(yàn)研究中，采用尿流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)的方法需要特定的儀器，且對(duì)膀胱功能造成一定的影響，如本實(shí)驗(yàn)中選用造瘺的方法行尿流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)則存在創(chuàng)傷較大、操作難度高、難以重復(fù)進(jìn)行等局限。對(duì)此，本實(shí)驗(yàn)對(duì)完全性骶髓損傷所致的大鼠NB模型進(jìn)行了長達(dá)4周的系統(tǒng)觀察，結(jié)合膀胱功能臨床觀察、尿流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)，并總結(jié)出判斷模型成功的簡便參考標(biāo)準(zhǔn)，即：大鼠骶髓損傷術(shù)后18天度過脊髓休克期，此時(shí)觸診大鼠下腹部，若連續(xù)2天出現(xiàn)膀胱脹大，大鼠提尾懸空后若不能自主排尿，可以確定模型制備成功。

總之，本研究采用改良的脊髓橫斷法于大鼠第L

腰椎間隙進(jìn)行橫斷，術(shù)后進(jìn)行規(guī)范化的護(hù)理，較好地控制并發(fā)癥，并采用膀胱尿流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)及膀胱逼尿肌形態(tài)學(xué)觀察的方法進(jìn)行驗(yàn)證，成功地復(fù)制了骶髓損傷后神經(jīng)源性膀胱大鼠模型，為后續(xù)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究提供了有益的參考。

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