痰液性狀和保存條件對(duì)結(jié)核菌培養(yǎng)陽(yáng)性率的影響

于 杰

(吉林省吉林市龍?zhí)秴^(qū)結(jié)核病防治所 吉林 吉林 132000)

近年來(lái)隨著結(jié)核病治療投入不斷強(qiáng)化，使結(jié)核病發(fā)病率呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，但是在數(shù)量上依然具有較高的發(fā)病率，而早期對(duì)結(jié)核病實(shí)施診斷較為重要，能利于結(jié)核病患者后期治療，目前臨床對(duì)于結(jié)核病一般以結(jié)核菌培養(yǎng)作為診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”[1]，該種診斷方式的診斷準(zhǔn)確性較高，能夠?yàn)楹罄m(xù)的診斷和治療工作提供重要的參考依據(jù)；通過(guò)對(duì)患者開(kāi)展結(jié)核菌培養(yǎng)，能夠明確診斷患者的病情，尤其對(duì)于通過(guò)涂片檢查，結(jié)果提示陰性患者的肺結(jié)核患者來(lái)說(shuō)，通過(guò)開(kāi)展結(jié)核菌分離培養(yǎng)試驗(yàn)，能夠明確疾病，并且能夠滿(mǎn)足患者診斷需求，為疾病的治療和診斷均提供重要信息，還能夠利于早期發(fā)現(xiàn)疾病、早期清除傳染源。但在臨床實(shí)際工作中，多數(shù)患者的檢驗(yàn)結(jié)果仍呈現(xiàn)陰性，而研究認(rèn)為，主要和患者的痰液性狀、保存條件等方面存在一定關(guān)聯(lián)[2-3]。本文探究痰液性狀和保存條件對(duì)結(jié)核菌培養(yǎng)陽(yáng)性率的影響，見(jiàn)下文。

1 資料與方法

1.1基線資料

將痰液檢驗(yàn)患者400例作為此次研究的主要對(duì)象，抽取患者痰液樣本400份，根據(jù)不同性狀分為黏液痰、干酪痰、唾液、血性痰四種性狀，每個(gè)性狀100份，采用不同的溫度進(jìn)行保存，例如-18攝氏度、4攝氏度、25攝氏度、30攝氏度，研究均在2020年1月至2020年12月期間完成。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者簽署知情同意書(shū)；(2)臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：臨床資料不完整。

黏液痰患者中男性60例、女性40例，年齡21～60歲，平均值(40.52±2.56)歲；干酪痰患者中男性61例、女性39例，年齡21～61歲，平均值(40.82±2.71)歲；唾液患者中男性62例、女性38例，年齡21～62歲，平均值(40.75±2.01)歲；血性痰患者中男性63例、女性37例，年齡21～63歲，平均值(40.96±2.45)歲。以上四組在上述基線資料的比較中，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，(P>0.05)。

1.2方法

患者的痰液性狀一共包括四種，即①黏液痰、②干酪痰、③唾液、④血性痰，每種性狀各100份樣本，而患者的保存條件也包括四種，即分為-18攝氏度、4攝氏度、25攝氏度、30攝氏度四種，保存時(shí)間分別為0d、3d、7d、14d、21d，對(duì)上述痰液樣本的細(xì)菌涂片結(jié)果進(jìn)行分析和比較，以明確痰液性狀和保存條件對(duì)于標(biāo)本的影響。

痰結(jié)核菌培養(yǎng)方法：痰結(jié)核菌分離培養(yǎng)采用氫氧化鈉堿進(jìn)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行，濃度為4%，樣本的培養(yǎng)需在接種酸性羅氏培養(yǎng)基之前，于37℃溫度下孵育，時(shí)間為8周，再得出相關(guān)結(jié)果。而對(duì)于不同保存條件的標(biāo)本，其實(shí)驗(yàn)方法包括：不同樣本需要在不同環(huán)境下進(jìn)行培養(yǎng)，再選擇痰結(jié)核菌進(jìn)行分離培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，從而得出結(jié)果。

1.3觀察指標(biāo)

分析不同性狀痰液陽(yáng)性培養(yǎng)率、不同溫度不同時(shí)間下的陽(yáng)性培養(yǎng)率。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1陽(yáng)性培養(yǎng)率的對(duì)比

在黏液痰40例陽(yáng)性標(biāo)本、干酪痰84例陽(yáng)性標(biāo)本、唾液7例陽(yáng)性標(biāo)本、血性痰24例陽(yáng)性標(biāo)本，其中以干酪痰所占比較高，和其他三組比較，具有顯著差異(P<0.05)。如表1:

表1 陽(yáng)性培養(yǎng)率的對(duì)比(n；%)

2.2不同溫度不同時(shí)間下的陽(yáng)性培養(yǎng)率的對(duì)比

在零下18攝氏度的溫度下保存，不同時(shí)間段受檢者的不同性質(zhì)痰液(黏液痰、干酪痰、唾液、血性痰)的陽(yáng)性培養(yǎng)率進(jìn)行比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；而在4℃的溫度下，治療后14天、21天的陽(yáng)性培養(yǎng)率和其他溫度下的結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；在25攝氏度的溫度下保存，治療后第7天、第14天、第21天的陽(yáng)性培養(yǎng)率和其他溫度相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；在30℃的溫度下保存，不同時(shí)間段的陽(yáng)性培養(yǎng)率相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。如表2：

表2 比較不同溫度不同時(shí)間下的陽(yáng)性培養(yǎng)率(n；%)

3 討論

近年來(lái)，我國(guó)空氣質(zhì)量整體上呈現(xiàn)污染情況，而空氣污染和環(huán)境變化，均可增加發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，肺結(jié)核作為一種因環(huán)境改變而導(dǎo)致的常見(jiàn)病，研究認(rèn)為，對(duì)于該類(lèi)疾病進(jìn)行早期診斷十分必要，能夠早期作出診斷，從而明確治療[4]。目前臨床對(duì)于肺結(jié)核的診斷方式較多，其中對(duì)患者的結(jié)核菌進(jìn)行培養(yǎng)十分重要，能夠明確診斷。其中痰液標(biāo)本的檢查效果較好，其檢出率與涂片檢查相比較高，在對(duì)患者采取結(jié)核菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，需積極處理患者的痰液標(biāo)本，并按照流程進(jìn)行各項(xiàng)操作，選擇適宜的痰液性狀和保存條件，避免不同保存時(shí)間和患者的痰液性狀對(duì)檢查結(jié)果造成影響[5-6]。部分學(xué)者在研究過(guò)程中，在進(jìn)行結(jié)核菌培養(yǎng)時(shí)，選擇不同性狀的痰液，能夠?qū)罄m(xù)治療以及后續(xù)檢測(cè)結(jié)果造成一定影響，而相關(guān)研究表明，在不同性狀的痰液中，干酪痰的陽(yáng)性培養(yǎng)率相比其他性質(zhì)痰液更高，其中唾液的陽(yáng)性率最低。

痰液性狀對(duì)結(jié)核菌培養(yǎng)陽(yáng)性率的影響對(duì)結(jié)核菌分離培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)來(lái)十分重要，而研究發(fā)現(xiàn)，痰液樣本質(zhì)量對(duì)培養(yǎng)結(jié)果準(zhǔn)確性具有影響[7]，在進(jìn)行研究過(guò)程中，痰液樣本的數(shù)量為400份，結(jié)果提示干酪痰的陽(yáng)性率最高、唾液的陽(yáng)性率最低，故此應(yīng)以干酪痰作為首選的實(shí)驗(yàn)標(biāo)本，從而顯著提高痰液培養(yǎng)陽(yáng)性檢出率。而在進(jìn)行痰液取樣過(guò)程中，需要對(duì)相關(guān)規(guī)范嚴(yán)格遵守，預(yù)防培養(yǎng)失敗情況發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn)，不同條件下對(duì)于痰液標(biāo)本進(jìn)行保存，其對(duì)于陽(yáng)性率能夠造成較大的影響，而在不同溫度下進(jìn)行樣本培養(yǎng)，能夠獲得不同的檢驗(yàn)結(jié)果[8]。影響因素如下：(1)溫度固定時(shí)對(duì)比：如果溫度在-18攝氏度左右，當(dāng)樣本保存時(shí)間不同，容易影響標(biāo)本檢測(cè)的陽(yáng)性率，兩者之間結(jié)構(gòu)物顯著差異，若溫度在4攝氏度、25攝氏度及30攝氏度時(shí)，溫度作為固定值實(shí)施對(duì)比，不同保存時(shí)間的結(jié)果顯示，在保存時(shí)間為0天、3天以及7天的樣本中，其不同溫度的陽(yáng)性率進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，無(wú)顯著差異之外，21d和28d時(shí)，并且隨著保存溫度的升高，使得患者樣本的陽(yáng)性率也隨之下降，而在28d，30攝氏度的樣本陽(yáng)性率也顯著降低[9]；(2)保存時(shí)間為固定值的對(duì)比：固定量作為時(shí)間，對(duì)不同溫度下對(duì)于樣本的保存陽(yáng)性率的比較，結(jié)果提示，若標(biāo)本的保存時(shí)間相同，隨著保存溫度不斷增加，患者陽(yáng)性率呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，尤其是在28天和21天時(shí)。本研究結(jié)果顯示，黏液痰40例陽(yáng)性標(biāo)本、干酪痰84例陽(yáng)性標(biāo)本、唾液7例陽(yáng)性標(biāo)本、血性痰24例陽(yáng)性標(biāo)本，其中以干酪痰所占比較高，和其他三組比較，具有顯著差異(P<0.05)。在零下18攝氏度的溫度下保存，不同時(shí)間段受檢者的不同性質(zhì)痰液(黏液痰、干酪痰、唾液、血性痰)的陽(yáng)性培養(yǎng)率進(jìn)行比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；而在4℃的溫度下，治療后14天、21天的陽(yáng)性培養(yǎng)率和其他溫度下的結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；在25攝氏度的溫度下保存，治療后第7天、第14天、第21天的陽(yáng)性培養(yǎng)率和其他溫度相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；在30℃的溫度下保存，不同時(shí)間段的陽(yáng)性培養(yǎng)率相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，由上述可見(jiàn)，其中干酪痰的培養(yǎng)陽(yáng)性率和其他性質(zhì)的痰液進(jìn)行比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，是由于研究過(guò)程中，在低溫環(huán)境下，患者的痰液性狀能良好進(jìn)行保存，能夠避免因外界環(huán)境因素的影響使得結(jié)果呈陽(yáng)性，而在痰液標(biāo)本實(shí)施培養(yǎng)過(guò)程中，需要及時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)，預(yù)防由于長(zhǎng)時(shí)間而導(dǎo)致的異常[10]。在-18攝氏度保存溫度下，各個(gè)痰液標(biāo)本檢出情況無(wú)顯著差異，說(shuō)明，在不同時(shí)間段內(nèi)，其結(jié)核菌的陽(yáng)性結(jié)果存在差異性，而保存溫度越高，則表示結(jié)核菌的陽(yáng)性率存在的差異越明顯，因此在選擇過(guò)程中，需要選擇低溫進(jìn)行保存，早期實(shí)施結(jié)核菌陽(yáng)性培養(yǎng)，在進(jìn)行培養(yǎng)過(guò)程中需要以干酪痰為主,盡量避免選擇唾液；同時(shí)，痰液標(biāo)本需要保持在-18攝氏度的溫度下，從而提高培養(yǎng)結(jié)果準(zhǔn)確率，為患者后期治療提供有利依據(jù)，改善預(yù)后。

綜上所述，結(jié)核菌的陽(yáng)性培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)當(dāng)優(yōu)先選擇干酪痰，同時(shí)痰液標(biāo)本盡可能保存在-18攝氏度的低溫環(huán)境下，對(duì)于標(biāo)本需要早期進(jìn)行培養(yǎng)。