大白樁菇多酚的定向液態(tài)發(fā)酵條件優(yōu)化*

李艷婷，郭 尚**，王海珍，王志偉，徐莉娜，郭霄飛，劉 欣**

（1.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 山西功能食品研究院，山西 太原 030031；2.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 園藝學(xué)院，山西 晉中 030801）

多酚類(lèi)化合物主要包括兩類(lèi)：一類(lèi)是較大分子量的單寧和鞣質(zhì)（分子量500 Da ～3 000 Da）；另一類(lèi)是小分子量的酚類(lèi)物質(zhì)，如沒(méi)食子酸、花青素、鞣花酸等[1]。馬鈴薯、葡萄、食用菌、石榴等物質(zhì)中均含有豐富的多酚類(lèi)物質(zhì)[2]。多酚化合物在抗氧化、抑菌、抗炎、抗癌細(xì)胞增殖及糖尿病、心血管疾病預(yù)防等方面均效果顯著[3-7]。因此具有開(kāi)發(fā)功能食品、特膳食品與藥物的潛能，有較高的利用價(jià)值。

大白樁菇（Leucopaxillus giganteus） 屬擔(dān)子菌門(mén)（Basidiomycota） 傘菌目（Agricales） 白蘑科（Tricholomataceae） 白樁菇屬（Leucopaxillus）[8]，又名雷蘑、大青蘑，子實(shí)體大型，味道鮮美，營(yíng)養(yǎng)豐富，還可治小兒麻疹、煩燥不安等[9-10]。此外，大白樁菇含有多糖、蛋白質(zhì)、杯傘菌素等生物活性物質(zhì)，具有清除過(guò)量自由基、提高免疫活性、抗腫瘤等生物學(xué)功能[11-14]。經(jīng)測(cè)定，大白樁菇子實(shí)體中的多酚含量為12.64 mg·g-1[15]，顯著高于羊肚菌（Morchella esculenta） 10.18 mg·g-1、茶樹(shù)菇（Cyclocybe aegerita）9.99 mg·g-1、黃牛肝菌（Suillellus luridus） 9.54 mg·g-1、猴頭菇（Hericium erinaceus） 9.08 mg·g-1、姬松茸（Agaricus blaze）i 10.70 mg·g-1、灰樹(shù)花（Grifola frondosa） 7.98 mg·g-1[16]，極具研究?jī)r(jià)值。但目前對(duì)于大白樁菇多酚化合物的進(jìn)一步研究尚處空白。

大白樁菇是臺(tái)蘑的代表菌類(lèi)之一[17]。近年來(lái)，由于當(dāng)?shù)鼐用竦倪^(guò)度采摘，其產(chǎn)量面臨著逐年縮減的威脅；另外，由于大白樁菇生長(zhǎng)周期長(zhǎng)，馴化難度大，目前尚未實(shí)現(xiàn)人工栽培。利用液體發(fā)酵獲取菌絲體是一種簡(jiǎn)便、快捷的方法，具有周期短、方法簡(jiǎn)單、易于控制、成本低等特點(diǎn)。有研究表明，液體培養(yǎng)得到的菌絲體和栽培得到的食（藥） 用菌子實(shí)體或菌核，不僅化學(xué)組成相似，且生理功能同樣相似[18]。因此，以大白樁菇為發(fā)酵菌株，以多酚含量為指標(biāo)，采用單因素（碳源、氮源、碳氮比、pH） 試驗(yàn)對(duì)大白樁菇液體發(fā)酵條件進(jìn)行研究，在此基礎(chǔ)上采用響應(yīng)面法對(duì)富集多酚的大白樁菇液體定向發(fā)酵工藝進(jìn)行優(yōu)化，以獲得高含量多酚物質(zhì)，為今后該菌的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供重要依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

大白樁菇菌株，保藏于山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西功能食品研究院。

1.2 方法

1.2.1 菌種活化與液體菌種的制備

將大白樁菇菌種接種于固體培養(yǎng)基（馬鈴薯200 g·L-1、葡萄糖20 g·L-1、瓊脂粉20 g·L-1、磷酸二氫鉀1 g·L-1、維生素B110 mg·L-）1，24 ℃暗培養(yǎng)20 d。

采用打孔器挑取直徑為0.5 cm 已培養(yǎng)好的菌塊置于液體培養(yǎng)基（葡萄糖35 g·L-1、蛋白胨6 g·L-1、磷酸二氫鉀0.5 g·L-1、硫酸鎂0.25 g·L-1、維生素B110 mg·L-）1，25 ℃、150 r·min-1搖床避光培養(yǎng)15 d，作為液體菌種備用。

1.2.2 不同碳源對(duì)多酚含量的影響

利用5 種碳源（C1：葡萄糖；C2：海藻糖；C3：蔗糖；C4：麥芽糖；C5：乳糖） 代替1.2.1 液體培養(yǎng)基中的碳源（葡萄糖），添加量的質(zhì)量濃度均為35 g·L-1，配制培養(yǎng)基。按5%的接種量接入液體菌種，24 ℃、130 r·min-1震蕩培養(yǎng)10 d，終止培養(yǎng)。用尼龍布（150 目） 分離菌絲體和發(fā)酵液，蒸餾水沖洗菌絲體3 次，60 ℃烘干至恒重，稱(chēng)量，記錄。以不添加碳源的液體培養(yǎng)基為空白對(duì)照（CK1），每個(gè)配方設(shè)3 個(gè)重復(fù)。

1.2.3 不同氮源對(duì)多酚含量的影響

利用5 種氮源（N1：蛋白胨；N2：牛肉浸膏；N3：酵母粉；N4：硫酸銨；N5：麩皮） 代替1.2.1液體培養(yǎng)基中的氮源（蛋白胨），添加量的質(zhì)量濃度均為6 g·L-1，配制培養(yǎng)基。接種及培養(yǎng)方法與1.2.2相同。以不添加氮源的液體培養(yǎng)基為空白對(duì)照（CK2），每個(gè)配方設(shè)3 個(gè)重復(fù)。

1.2.4 不同碳氮比對(duì)多酚含量的影響

以葡萄糖（含碳量40%） 為碳源，以蛋白胨（含氮量16%） 為氮源，在其他成分不變的條件下，通過(guò)調(diào)整葡萄糖的添加量使培養(yǎng)基中碳氮比分別為2.5 ∶1、10 ∶1、20 ∶1、30 ∶1、40 ∶1、50 ∶1，每個(gè)配方設(shè)3 個(gè)重復(fù)。

1.2.5 不同pH 對(duì)多酚含量的影響

以葡萄糖為碳源，以蛋白胨為氮源，在其他成分不變的條件下，調(diào)整培養(yǎng)基pH 分別為4、5、6、7、8、9，每個(gè)配方設(shè)3 個(gè)重復(fù)。

1.2.6 菌絲體提取液的制備

將干燥后的菌絲體進(jìn)行研磨，過(guò)60 目篩；精確稱(chēng)取0.5 g，加入20 倍體積的水，設(shè)置溫度80 ℃，在超聲波中提取1 h；5 000 r·min-1離心10 min，取上清液，即為水提液；重復(fù)提取，合并2 次的水提液。

沉淀物加入20 倍體積的無(wú)水乙醇，設(shè)置溫度為60 ℃在超聲波中提取1 h；5 000 r·min-1離心10 min，取上清液，即為醇提液；重復(fù)提取，合并2 次的醇提液。

1.2.7 發(fā)酵液中菌絲體多酚含量

采用福林酚法對(duì)菌絲體多酚含量進(jìn)行測(cè)定[19]；根據(jù)測(cè)定結(jié)果，計(jì)算發(fā)酵液中大白樁菇菌絲體多酚的含量。發(fā)酵液中菌絲體多酚質(zhì)量濃度（ρp，mg·L-1） 的計(jì)算公式為：

式中：Ap為大白樁菇菌絲體多酚含量（mg·g-1）；ρm為干燥后大白樁菇菌絲體的質(zhì)量濃度（g·L-1）。

1.2.8 響應(yīng)面優(yōu)化液體培養(yǎng)方案

在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，分別選取碳源（葡萄糖）、氮源（蛋白胨）、pH 為考察對(duì)象，以發(fā)酵液中菌絲體總多酚的質(zhì)量濃度為響應(yīng)值，利用Design-Expert 8.0 軟件設(shè)計(jì)3 因素3 水平試驗(yàn)，每個(gè)試驗(yàn)設(shè)置3 個(gè)重復(fù)。響應(yīng)面3 因素3 水平試驗(yàn)設(shè)計(jì)見(jiàn)表1。

表1 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)Tab.1 The test design of response surface

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果

2.1.1 碳源對(duì)大白樁菇菌絲體及多酚的影響

液體發(fā)酵過(guò)程中，不同的碳源對(duì)干燥后大白樁菇菌絲體的質(zhì)量濃度及其多酚含量的影響見(jiàn)圖1。

由圖1A 可知，與C6（CK1） 相比，其他5 種碳源均能提高大白樁菇的菌絲體質(zhì)量濃度；其中C2海藻糖是積累菌絲體質(zhì)量的最佳碳源，此時(shí)菌絲體質(zhì)量濃度為5.17 g·L-1；其次為C1 葡萄糖和C3 蔗糖。如圖1B 所示，C1 葡萄糖有利于菌絲體多酚物質(zhì)的積累，菌絲體水提多酚含量為8.15 mg·g-1，菌絲體醇提多酚含量為0.92 mg·g-1，菌絲體總多酚含量為9.07 mg·g-1；其次為C3 蔗糖和C4 麥芽糖。綜合試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行計(jì)算，C1～C5 發(fā)酵液中大白樁菇菌絲體水提多酚質(zhì)量濃度分別為39.97 mg·L-1、9.10 mg·L-1、14.01 mg·L-1、9.25 mg·L-1、3.25 mg·L-1，C6（CK1） 為0.69 mg·L-1；菌絲體總多酚質(zhì)量濃度分別為44.49 mg·L-1、11.28 mg·L-1、18.55 mg·L-1、11.89 mg·L-1、4.89 mg·L-1，C6（CK1） 為0.73 mg·L-1。綜上所述，最適合水提多酚及總多酚積累的碳源為葡萄糖，顯著高于其他4 種碳源及對(duì)照，多酚積累從高到低的碳源排序?yàn)槠咸烟牵菊崽牵钧溠刻牵竞Ｔ逄牵救樘恰?/p>

圖1 不同碳源培養(yǎng)條件下大白樁菇干燥菌絲體的質(zhì)量濃度（A） 及其多酚含量（B）Fig.1 Mass concentration (A) and polyphenol content (B)of dried mycelia of Leucopaxillus giganteus under different carbon source culture conditions

2.1.2 氮源對(duì)大白樁菇菌絲體及多酚的影響

液體發(fā)酵過(guò)程中，不同氮源對(duì)干燥后大白樁菇菌絲體的質(zhì)量濃度及其多酚含量的影響見(jiàn)圖2。

由圖2A 可知，與N6（CK2） 相比，5 種氮源均能提高大白樁菇的菌絲體質(zhì)量濃度；其中N2 牛肉浸膏和N4 硫酸銨能顯著提高大白樁菇菌絲體質(zhì)量，二者無(wú)顯著性差異；其次為N1 蛋白胨。如圖2B 所示，N1 蛋白胨有利于菌絲體多酚物質(zhì)的積累，菌絲體水提多酚含量為9.23 mg·g-1，菌絲體醇提多酚含量為2.21 mg·g-1，其次為N4 硫酸銨。綜合試驗(yàn)結(jié)果，經(jīng)計(jì)算N1～N5 發(fā)酵液中大白樁菇菌絲體水提多酚的質(zhì)量濃度分別為38.23 mg·L-1、19.22 mg·L-1、18.54 mg·L-1、40.75 mg·L-1、7.90 mg·L-1，N6（CK2） 為0.96 mg·L-1；總多酚的質(zhì)量濃度分別為47.41 mg·L-1、27.53 mg·L-1、21.51 mg·L-1、46.33 mg·L-1、9.29 mg·L-1，N6（CK2） 為3.23 mg·L-1。綜上所述，最適合水提多酚積累的氮源為硫酸銨，其次為蛋白胨，二者之間差異不顯著，但顯著高于其他3 種氮源及對(duì)照；最適合總多酚積累的氮源為蛋白胨，其次為硫酸銨，二者之間差異不顯著，但極顯著高于其他3 種氮源及對(duì)照，總多酚積累從高到低的氮源排序?yàn)榈鞍纂耍玖蛩徜@＞牛肉浸膏＞酵母粉＞麩皮。

圖2 不同氮源培養(yǎng)條件下大白樁菇干燥菌絲體的質(zhì)量濃度（A） 及其多酚含量（B）Fig.2 Mass concentration (A) and polyphenol content (B)of dried mycelia of Leucopaxillus giganteus under different nitrogen source culture conditions

2.1.3 碳氮比對(duì)大白樁菇菌絲體及多酚的影響

液體發(fā)酵過(guò)程中，不同的碳氮比對(duì)干燥后大白樁菇菌絲體的質(zhì)量濃度及其多酚含量的影響見(jiàn)圖3。

圖3 不同碳氮比培養(yǎng)條件下大白樁菇干燥菌絲體的質(zhì)量濃度（A） 及其多酚含量（B）Fig.3 Mass concentration (A) and polyphenol content (B)of dried mycelia of Leucopaxillus giganteus under different carbon-nitrogen ratio culture conditions

由圖3A 可知，碳氮比為10 ∶1 時(shí)菌絲體質(zhì)量達(dá)到最大，隨著碳氮比的增大，菌絲體質(zhì)量整體呈下降的趨勢(shì)；這可能是因?yàn)樘荚春窟^(guò)高，造成了富營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)，抑制了菌絲體的生長(zhǎng)。如圖3B 所示，隨著碳氮比的增大，多酚含量呈先上升后下降的趨勢(shì)；碳氮比為20∶1 時(shí)菌絲體多酚的積累達(dá)最大，此時(shí)菌絲體水提多酚含量為8.37 mg·g-1，菌絲體醇提多酚含量為3.35 mg·g-1。綜合試驗(yàn)結(jié)果，經(jīng)計(jì)算碳氮比從2.5 ∶1 到50 ∶1 的發(fā)酵液中大白樁菇菌絲體水提多酚的質(zhì)量濃度分別為16.80 mg·L-1、22.20 mg·L-1、19.00 mg·L-1、21.24 mg·L-1、14.80 mg·L-1和8.93 mg·L-1；總多酚的質(zhì)量濃度分別為25.72 mg·L-1、38.32 mg·L-1、27.08 mg·L-1、34.62 mg·L-1、20.24 mg·L-1和15.21 mg·L-1。綜上所述，最適合水提多酚積累的碳氮比為10 ∶1，其次為30 ∶1 和20 ∶1，三者之間差異不顯著，但極顯著高于其他3 種碳氮比；最適合總多酚積累的碳氮比為10 ∶1，其次為30 ∶1，極顯著高于其他4 種碳氮比，總多酚積累從高到低的碳氮比排序?yàn)?0 ∶1 ＞30 ∶1 ＞20 ∶1 ＞2.5 ∶1 ＞40 ∶1 ＞50 ∶1。葡萄糖的含碳量為40%，蛋白胨的含氮量為16%，總多酚積累最多的葡萄糖與蛋白胨的質(zhì)量比值為4 ∶1。

2.1.4 pH 對(duì)大白樁菇菌絲體及多酚的影響

液體發(fā)酵過(guò)程中，不同pH 對(duì)干燥后大白樁菇菌絲體的質(zhì)量濃度及其多酚含量的影響見(jiàn)圖4。

圖4 不同pH 培養(yǎng)條件下大白樁菇干燥菌絲體的質(zhì)量濃度（A） 及其多酚含量（B）Fig.4 Mass concentration (A) and polyphenol content (B)of dried mycelia of Leucopaxillus giganteus under different pH culture conditions

由圖4A 可知，pH 為5 時(shí)菌絲體質(zhì)量達(dá)到最大，其質(zhì)量濃度為4.82 g·L-1；隨著pH 的增大或是減小，菌絲體質(zhì)量均呈下降趨勢(shì)；因此，pH 5 最有利于菌絲體質(zhì)量的積累。如圖4B 所示，pH 為5 時(shí)也有利于菌絲體多酚的積累，菌絲體水提多酚含量為8.62 mg·g-1，菌絲體醇提多酚含量為0.88 mg·g-1，其次是pH 6。綜合試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行計(jì)算，當(dāng)pH 為4～9 時(shí)，發(fā)酵液中大白樁菇菌絲體水提多酚的質(zhì)量濃度分別為16.56 mg·L-1、41.54 mg·L-1、28.86 mg·L-1、16.19 mg·L-1、7.54 mg·L-1和3.51 mg·L-1、；總多酚的 質(zhì) 量 濃 度 分 別 為18.19 mg·L-1、45.77 mg·L-1、37.32 mg·L-1、19.98 mg·L-1、8.34 mg·L-1和3.91 mg·L-1。綜上所述，pH 為5 時(shí)最適合水提多酚及總多酚的積累，且顯著高于其他5 個(gè)pH 培養(yǎng)條件；總多酚積累從高到低的排序?yàn)閜H 5 ＞pH 6 ＞pH 7 ＞pH 4 ＞pH 8 ＞pH 9。

2.2 響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化

2.2.1 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果

在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以發(fā)酵液中總多酚質(zhì)量濃度作為響應(yīng)值，對(duì)葡萄糖（A）、蛋白胨（B）、pH（C） 3 個(gè)因素進(jìn)行3 因素3 水平的Box-Behnken試驗(yàn)，試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)因素水平及結(jié)果Tab.2 Response surface test design and factor level

如表2 所示，根據(jù)各因素水平的結(jié)果，使用Design-expert 8.0 軟件進(jìn)行擬合，發(fā)酵液中總多酚質(zhì)量濃度（Y，mg·L-1） 的回歸方程為：

將各因素使用Design-expert 8.0 軟件對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，見(jiàn)表3。

表3 二次回歸方程方差分析Tab.3 ANOVA of quadratic regression equation

由表3 可知，模型P 值＜0.01，說(shuō)明該模型有意義且達(dá)到了極顯著水平；失擬項(xiàng)P=0.620 5（P＞0.05），不顯著，表明該方程合理可靠。一次項(xiàng)A 對(duì)結(jié)果影響極顯著（P＜0.01），B 對(duì)結(jié)果影響顯著（P＜0.05），C 對(duì)結(jié)果影響不顯著（P＞0.05）；交互項(xiàng)AB、AC、AB 對(duì)結(jié)果影響均極顯著（P＜0.01）；二次項(xiàng)A2、B2、C2對(duì)結(jié)果影響極顯著（P＜0.01）。3 個(gè)單因素對(duì)發(fā)酵液中菌絲體總多酚質(zhì)量濃度的影響主次順序?yàn)锳＞C＞B，即葡萄糖＞pH＞蛋白胨。

2.2.2 響應(yīng)面分析

根據(jù)分析結(jié)果及方程建立響應(yīng)面，可直觀反映影響多酚質(zhì)量濃度的3 個(gè)因素兩兩之間的交互作用，見(jiàn)圖5。

如圖5 所示，隨著葡萄糖、蛋白胨、pH 的增加，多酚質(zhì)量濃度均出現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，且均出現(xiàn)極值，與方差分析結(jié)果一致。

圖5 葡萄糖、蛋白胨和pH 兩兩交互的響應(yīng)面曲線(xiàn)Fig.5 Response surface curve of glucose, peptone and pH interacting in pairs

由響應(yīng)面法分析得出的最佳培養(yǎng)方案中各組分的質(zhì)量濃度分別為：葡萄糖22.40 g·L-1、蛋白胨6.12 g·L-1、磷酸二氫鉀0.5 g·L-1、硫酸鎂0.25 g·L-1、維生素B110 mg·L-1，pH 4.95。在此配方下進(jìn)行5次驗(yàn)證試驗(yàn)，得出大白樁菇菌絲體發(fā)酵培養(yǎng)后總多酚的質(zhì)量濃度為59.98 mg·L-1，與預(yù)測(cè)值（65.57 mg·L-1）接近，證明該培養(yǎng)方案是有效可行的。

3 討論與結(jié)論

食用菌屬于異養(yǎng)生物，主要由培養(yǎng)基提供生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子等[20-21]。此外，液體發(fā)酵過(guò)程中培養(yǎng)基的pH、搖床轉(zhuǎn)速、培養(yǎng)溫度、接種量等都會(huì)影響食用菌菌絲體的生長(zhǎng)與發(fā)育。

碳源是食用菌最重要的營(yíng)養(yǎng)源之一，為食用菌的生長(zhǎng)發(fā)育提供能量[22]，大白樁菇液體發(fā)酵過(guò)程中均能利用供試的5 種碳源，對(duì)菌絲體多酚質(zhì)量濃度的影響從大到小的順序依次為葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、海藻糖、乳糖。葡萄糖有利于菌絲體多酚物質(zhì)的積累，這與Barros 等[23]研究結(jié)果一致。氮源是菌絲生長(zhǎng)過(guò)程中必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[24]，大白樁菇液體發(fā)酵過(guò)程中均能利用供試的5 種氮源，對(duì)菌絲體多酚質(zhì)量濃度的影響從大到小的順序依次為蛋白胨、硫酸銨、牛肉浸膏、酵母粉、麩皮。這與王謙等[25]的研究結(jié)果不一致，可能是由于采用的計(jì)算方法、培養(yǎng)方式不同以及培養(yǎng)基中的微量元素存在差異。液體發(fā)酵培養(yǎng)基可提供菌絲生長(zhǎng)所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，且適宜的營(yíng)養(yǎng)比例可促進(jìn)菌絲生長(zhǎng)及次生代謝產(chǎn)物的積累。大白樁菇在液態(tài)發(fā)酵過(guò)程中，當(dāng)碳氮比為10 ∶1 時(shí)，菌絲體質(zhì)量、密度均能達(dá)到最大值。另外，由于培養(yǎng)液的pH 會(huì)隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加發(fā)生變化，試驗(yàn)中的pH 均為滅菌前所調(diào)試的初始pH，在初始pH 為5 時(shí)菌絲體質(zhì)量可達(dá)最大，所含總多酚含最也高，因此大白樁菇液態(tài)發(fā)酵菌絲體多酚積累的最適pH 為5。

食用菌在液體發(fā)酵過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生多種生物活性物質(zhì)，主要來(lái)自于其胞內(nèi)、胞外浸出液和發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物，某些活性物質(zhì)的含量可能遠(yuǎn)高出子實(shí)體中的含量[26]。多酚類(lèi)是食用菌代謝產(chǎn)物中最重要的組分之一，具有顯著的抗炎效果[27]。大白樁菇在液體發(fā)酵過(guò)程中，獲得最高菌絲體產(chǎn)量的培養(yǎng)基配方并不一定能積累到最大含量的多酚物質(zhì)，表明了同一個(gè)培養(yǎng)基配方不能同時(shí)兼顧發(fā)酵產(chǎn)物中高菌絲體產(chǎn)量與高活性物質(zhì)含量的獲得，這與林群英等[28]研究結(jié)果相一致。

試驗(yàn)結(jié)果表明，葡萄糖、蛋白胨、pH 為5、碳氮比為10 ∶1（即葡萄糖和蛋白胨的質(zhì)量比為4 ∶1）有利于菌絲體多酚物質(zhì)的積累。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，結(jié)合響應(yīng)面分析法優(yōu)化大白樁菇液體發(fā)酵工藝以獲得其更高多酚含量的菌絲體，其最佳配方為：葡萄糖22.40 g·L-1、蛋白胨6.12 g·L-1、磷酸二氫鉀0.5 g·L-1、硫酸鎂0.25 g·L-1、維生素B110 mg·L-1，pH 4.95。

試驗(yàn)尚未對(duì)發(fā)酵周期進(jìn)行研究，許多研究表明不同發(fā)酵時(shí)長(zhǎng)對(duì)菌絲體質(zhì)量及次級(jí)代謝產(chǎn)物的積累存在著顯著的影響，今后可在該方面進(jìn)行深入研究，為大白樁菇及其多酚的開(kāi)發(fā)利用提供更詳盡的參考依據(jù)。