Rh表型同型紅細胞輸注效果評價

劉麗娟 杜肖剛 潘慧芳 李 偉 馬登峰 郭曉玲

紅細胞輸注前需常規(guī)進行血型鑒定、不規(guī)則抗體篩查和交叉配血?！杜R床輸血技術(shù)規(guī)范》[1]規(guī)定交叉配血前常規(guī)檢測ABO、RhD血型。近來不少學者提出除ABO-RhD同型外，檢測Rh血型系統(tǒng)抗原，進行Rh表型同型輸注，可提高輸注效果[2-4]。Rh血型系統(tǒng)的重要性僅次于ABO血型系統(tǒng)，且是最復(fù)雜的血型系統(tǒng)，共有50余個抗原，其中最主要的抗原為D、C、E、c、e，抗原免疫原性強，可引起溶血性輸血反應(yīng)。本研究對我院進行ABO-Rh(DCcEe)同型輸注患者臨床資料進行回顧性分析，探討輸血前進行Rh血型系統(tǒng)抗原檢測對輸血效果的影響。

1 資料與方法

1.1 研究對象

回顧分析我院2020年6月1日至2020年12月31日161例輸注紅細胞患者的臨床資料。納入標準：(1)輸注紅細胞患者符合《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》[1]輸注指征；(2)輸血前后24 h內(nèi)均有血紅蛋白(Hb)檢測結(jié)果。排除標準：(1)紅細胞輸注后發(fā)生繼續(xù)丟失或體外循環(huán)丟失；(2)紅細胞輸注前后發(fā)生血液稀釋；(3)紅細胞輸注后發(fā)生急性溶血。

1.2 方法

1.2.1獻血者、受血者血型鑒定 配合型輸注組獻血者、受血者樣本進行ABO正反定型、RhD抗原鑒定，同型輸注組獻血者、受血者樣本進行ABO正反定型、Rh(CcDEe)抗原鑒定。ABO正反定型RhD、C、E抗原鑒定使用微柱凝膠血型鑒定卡(戴安娜DG Gel ABO-CDE)。Rh c、e抗原鑒定采用試管法進行檢測，使用抗-c、抗-e(IgM)試劑(長春博德生物技術(shù)公司)，嚴格按照說明書操作，雙人操作，核對結(jié)果。

1.2.2不規(guī)則抗體篩查及鑒定 受血者樣本進行微柱凝膠抗體篩查試驗(戴安娜DG Gel Coombs)?？贵w篩查陽性樣本進行抗體鑒定試驗，確定抗體特異性，篩選細胞、鑒定細胞均由江蘇力博醫(yī)藥生物技術(shù)股份有限公司提供。

1.2.3交叉配血試驗 2組配血均為獻血者、受血者ABO、RhD同型，在輸血前進行交叉配血試驗，采用微柱凝膠抗人球蛋白卡(戴安娜DG Gel Coombs)。同型輸注組交叉配血前，對照獻血者、受血者Rh血型，采用同型輸注。同型輸注原則為：獻血者Rh表型與受血者完全一致(如：CcEe患者選擇CcEe血液)，或受血者某種Rh抗原陽性，獻血者相應(yīng)抗原陰性(如：CcEe患者選擇CcEE血液)

1.2.4直接抗人球蛋白試驗(DAT) 交叉配血次側(cè)出現(xiàn)凝集時，對受血者樣本進行DAT。將受血者紅細胞使用生理鹽水洗滌3次，稀釋后加入微柱凝膠卡(戴安娜DG Gel Coombs)，離心觀察結(jié)果。

1.3 觀察指標

紅細胞輸注效果分析：收集2組受血者紅細胞輸注前后24 h內(nèi)血紅蛋白值，判斷輸注效果。輸注無效標準[5]：輸血后Hb升高值未達到預(yù)期值的為輸注無效，Hb升高值達到或超過了預(yù)期值的為輸注有效。Hb升高預(yù)期值(g·L-1)=供者Hb(g·L-1)×輸入量(L)/患者體質(zhì)量(kg)×0.085(L·kg-1)×90%(輸入量以全血量為標準，各種RBC制劑折算為對應(yīng)全血量；供者體質(zhì)量為兒童按0.09 L·kg-1計；90%為檢驗誤差)。

1.4 統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

2.1 受血者一般情況

同型輸注組76例中有血液病患者20例(白血病10例、多發(fā)性骨髓瘤4例、骨髓增生異常綜合征3例、再生障礙性貧血2例、淋巴瘤1例)，惡性腫瘤患者16例(胃癌7例，結(jié)直腸癌3例、肝癌2例、卵巢癌1例、膀胱癌1例、腎癌1例、食管癌1例)，其他疾病40例。配合型輸注組85例中有血液病患者27例(白血病14例、骨髓增生異常綜合征5例、多發(fā)性骨髓瘤3例、再生障礙性貧血3例、淋巴瘤2例)，惡性腫瘤患者10例(胃癌4例、食管癌2例、肝癌1例、肺癌1例、乳腺癌1例、胰腺癌1例)，其他疾病48例。同型輸注組與配合型輸注組性別、年齡、疾病分布差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 2組患者一般情況比較

2.2 2組輸血情況

同型輸注組76例輸血患者，共輸注184次(第1次輸注76人次、第2次輸注54人次、第3次輸注28人次、第4次及以上輸注26人次),配合型輸注組85例患者，共輸注紅細胞207次(第1次輸注85人次、第2次輸注51人次、第3次輸注29人次、第4次輸注及以上42人次)。2組不同輸注次數(shù)人次差異無統(tǒng)計學意義(χ2=3.029,P=0.387)。

2.3 紅細胞輸注效果分析

同型輸注組有效率88.04%(162/184)高于配合型輸注組79.23%(164/207)，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=5.463,P=0.019)。同型輸注組不同輸注次數(shù)間輸注有效率差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，配合型輸注組不同輸注次數(shù)間輸注有效率不同，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

比較2組不同輸注次數(shù)紅細胞的輸注有效率，第1次、第2次、第3次輸注時，2組的輸注效果差異無統(tǒng)計學意義，4次及以上的輸注，同型輸注組輸注有效率高于配合型輸注組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 2組紅細胞不同輸注次數(shù)與效果分析 例(%)

2.4 不規(guī)則抗體、DAT產(chǎn)生情況分析

161例受血者，輸血前不規(guī)則抗體陽性5例，分別為抗-E 3例，抗-cE 1例和抗-M 1例;DAT陽性8例。2組受血者輸血后均無新增不規(guī)則抗體產(chǎn)生，DAT陰性轉(zhuǎn)為陽性1例，為配合型輸注組受血者。

3 討論

紅細胞輸注在臨床上主要應(yīng)用于急慢性貧血患者，紅細胞輸注目的是提高患者Hb含量，改善缺氧狀態(tài)。對于血容量正常的成年人，在無失血、血液稀釋或溶血的情況下，輸注紅細胞后，Hb未達到預(yù)期值稱為紅細胞輸注無效。目前我國輸血前常規(guī)檢測ABO、Rh(D)抗原，未對Rh(CcEe)抗原進行普遍檢測，對于反復(fù)輸血患者，增加了產(chǎn)生同種抗體的幾率，導致配血困難，輸注無效率增加。本研究通過比較Rh表型同型輸注患者輸注與配合性輸注患者輸注有效率的差異，分析Rh表型同型輸注的重要意義。

近來有文獻報道，臨床紅細胞輸注無效率可達18.2%。紅細胞輸注無效與患者疾病種類、輸血次數(shù)、年齡、性別關(guān)系密切，女性高于男性、老年患者高于兒童和成年人，血液病、惡性腫瘤患者的紅細胞輸注無效率更是高達37%和42.8%[6-7]。本研究分析2組患者的性別、年齡、疾病分布、不同輸注次數(shù)患者等相關(guān)因素，差異無統(tǒng)計學意義，可排除其對結(jié)果的干擾。

本研究比較2組患者輸注無效發(fā)生情況，配合型輸注組無效率明顯高于同型輸注組，配合型輸注組輸注無效率隨輸注次數(shù)增加明顯增高，且通過比較不同輸注次數(shù)輸注有效率，在紅細胞輸注第4次及以上時，配合型輸注組輸注無效率明顯高于同型輸注組，提示2組輸注無效率的差異主要在輸注次數(shù)較多時，輸注無效的發(fā)生與輸注次數(shù)有密切關(guān)系，隨輸血次數(shù)的增加，無效率呈上升趨勢。輸注無效原因復(fù)雜，包括免疫因素和非免疫因素，反復(fù)輸血患者輸注無效發(fā)生率高，可能與體內(nèi)存在不同血型的不規(guī)則抗體有關(guān)[8]。不規(guī)則抗體的發(fā)生與輸血史、妊娠史有關(guān)，且隨著輸血次數(shù)增加，患者產(chǎn)生不規(guī)則抗體的概率也隨之增高[9-10]。根據(jù)文獻報道，同種抗體分布于Rh、MNS、Kidd、及Lewis等血型系統(tǒng)，Rh血型系統(tǒng)抗體最多見，占52.38%～70.76%[11-12]。本研究中同型輸注組不同輸注次數(shù)間輸注有效率差異無統(tǒng)計學意義，提示通過Rh表型同型輸注避免Rh血型抗體的產(chǎn)生，可使輸注效果明顯好于隨機輸注。此結(jié)果與多篇文獻報道一致[2-4]。

本次回顧性分析中，161例患者在輸血前檢測出5例不規(guī)則抗體陽性，陽性率2.84%，其中4例發(fā)生在Rh血型系統(tǒng)(查閱病史，這5名患者到我院就診前均有外院輸血史)。配合型輸注組第4次及以上輸注有效率顯著降低，但未檢測到新增不規(guī)則抗體，分析原因一方面與研究例數(shù)偏少有關(guān)，另一方面因臨床工作中檢測方法的局限性和紅細胞血型抗原的多樣性，當抗體效價較低時存在漏檢可能[13-14]。效價較低的抗體未被檢出，致使患者輸血后發(fā)生無法解釋的Hb不升或下降的現(xiàn)象。

本次分析中，配合型輸血組1例患者初次檢測DAT陰性，在后續(xù)的血液輸注時發(fā)生交叉配血次側(cè)凝集，DAT陽性。紅細胞表面被不完全抗體或補體致敏時DAT陽性，常用于自身免疫性溶血性貧血(AIHA)、藥物性溶血性貧血、新生兒溶血性貧血及輸注不相合血液所致溶血性輸血反應(yīng)等檢測。輸血前DAT陰性，輸血后DAT陽性提示紅細胞發(fā)生溶血，對于反復(fù)輸血患者，選擇與患者抗原高度匹配的紅細胞，可有效避免溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生[15-16]。

綜上所述，臨床輸血前除進行ABO-RhD抗原檢測外，還應(yīng)把Rh(CcEe)抗原檢測列為常規(guī)，并進行ABO-Rh血型系統(tǒng)同型輸血，可以避免患者因反復(fù)輸血的免疫刺激，而增加不規(guī)則抗體產(chǎn)生幾率，減少患者輸血不良反應(yīng)和風險，提高輸注效果。