不同亞型高危型HPV感染與宮頸病變嚴(yán)重程度的相關(guān)性分析

王秀靈，孫虹，周瓊?cè)A，陳燕娥，符劍花，李春梅，周愛梅

570102 ?？?，海南省海口市婦幼保健院 感染和疾病控制科(王秀靈、孫虹、周瓊?cè)A、符劍花)，婦科(陳燕娥、李春梅)，護(hù)理部(周愛梅)

宮頸癌是全球女性第二大惡性腫瘤[1]，也是我國(guó)女性最常見的生殖道惡性腫瘤，且近年來我國(guó)女性宮頸癌的發(fā)病有呈年輕化的趨勢(shì)[2-3]。流行病學(xué)資料顯示[4-5]，90%以上的宮頸癌中存在人乳頭瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染，而高危型HPV(high risk-human papilloma virus,HR-HPV)的持續(xù)感染在宮頸癌前病變及宮頸癌的發(fā)生發(fā)展過程中起著關(guān)鍵作用[6]，這其中HR-HPV16、18分別占了宮頸癌發(fā)病的55%～60%和10%～15%[7-8]，其他亞型HR-HPV感染率及型別分布在不同地域存在差異，而不同疾病嚴(yán)重程度的宮頸病變患者的HPV感染率及高危型別分布上也存在明顯差異[9]。有研究顯示[10]，在宮頸癌發(fā)生之前有長(zhǎng)達(dá)10余年的時(shí)間是處于癌前病變狀態(tài)，而針對(duì)癌前病變進(jìn)行積極的早診早治是可以有效降低其發(fā)病率和死亡率的。因此，本研究通過分析我院近5年診治的宮頸病變病例，分析本地區(qū)不同級(jí)別程度宮頸病變HR-HPV的感染率及亞型分布，為宮頸癌前病變及宮頸癌的防治提供參考依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

回顧性收集2016年1月至2020年12月在海南省?？谑袐D幼保健院行陰道鏡檢查及鏡下活檢的591例宮頸病變患者作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：1)行陰道鏡檢查及宮頸活檢，并進(jìn)行HPV基因分型檢測(cè)；2)病理診斷為慢性宮頸炎(chronic cervicitis,CC)、低級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)、高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)和鱗狀細(xì)胞癌(squamous of cervical carcinoma,SCC)；3)臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：1)妊娠期或哺乳期患者；2)宮頸手術(shù)、宮頸錐切、子宮切除及盆腔放療史患者。

1.2 研究方法

1.2.1 標(biāo)本采集 患者標(biāo)本采集均由我院婦科醫(yī)生負(fù)責(zé)，使用宮頸細(xì)胞專用取樣刷采集宮頸外口及宮頸管脫落細(xì)胞，用棉拭子拭去宮頸口多余分泌物，用宮頸取樣刷在宮頸口順時(shí)針旋轉(zhuǎn)3～5圈，將刷頭置于含有細(xì)胞保存液的專用樣本收集管中，做好標(biāo)記，及時(shí)送檢。

1.2.2 HR-HPV檢測(cè) 使用廣州和實(shí)生物技術(shù)有限公司(批號(hào)：0RD01001)生產(chǎn)的HR-HPV分型核酸測(cè)定試劑盒，采用PCR-反向斑點(diǎn)雜交技術(shù)檢測(cè)患者宮頸細(xì)胞中的18種HR-HPV基因亞型，包括HPV16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82 型。操作方法參考試劑盒說明書。將同時(shí)感染2種及以上基因亞型定義為多重感染。

1.2.3 病理學(xué)檢查 鏡下活檢標(biāo)本經(jīng)由4%中性甲醛固定、包埋、切片、常規(guī)HE染色。由病理科醫(yī)生閱片后進(jìn)行病理診斷，并由高年資醫(yī)生復(fù)核。病理診斷包括：CC、LSIL、HSIL和SCC。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用Excel 2007軟件錄入數(shù)據(jù)，再將數(shù)據(jù)導(dǎo)入SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。對(duì)計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用率或百分比(%)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，HR-HPV感染率隨病變程度之間的關(guān)系采用χ2趨勢(shì)檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α為0.05。

2 結(jié) 果

2.1 一般資料

納入研究的591例宮頸病變患者的年齡18～79歲，平均年齡(44.9±13.4)歲，其中<20歲組11例(1.9%)、20～29歲組112例(19.0%)、30～39歲組185例(31.3%)、40～49歲212例(35.9%)、50～59歲組48例(8.1%)、≥60歲組23例(3.9%)；不同宮頸病變程度患者構(gòu)成：CC組195例(33.0%)、LSIL組236例(39.9%)、HSIL組150例(25.4%)、SCC組10例(1.7%)。

2.2 不同級(jí)別宮頸病變患者HR-HPV感染率

表1 不同級(jí)別宮頸病變組HR-HPV感染率

2.3 不同級(jí)別宮頸病變患者HR-HPV單一感染與多重感染情況

CC組患者的HR-HPV單一感染率為28.2%、多重感染率為0.0%，LSIL組HR-HPV單一感染率為61.0%、多重感染率為18.6%，HSIL組HR-HPV單一感染率為68.0%、多重感染率為25.3%，SCC組HR-HPV單一感染率為80.0%、多重感染率為20.0%；在4個(gè)不同宮頸病變程度組內(nèi)HR-HPV的單一感染率均高于多重感染率，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。不同級(jí)別宮頸病變組，隨著宮頸病變嚴(yán)重程度的增加，HR-HPV單一感染率也隨之增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);HR-HPV多重感染率之間隨病變嚴(yán)重程度的增加亦呈升高趨勢(shì)，但在SCC組的感染率稍有回落(P<0.05)(表2)。

表2 不同級(jí)別宮頸病變組HR-HPV單一感染與多重感染率分析

2.4 HR-HPV各亞型在不同級(jí)別宮頸病變患者中的分布情況

因存在多重感染，在分析HR-HPV基因亞型分布時(shí)，統(tǒng)計(jì)人次數(shù)。在LSIL患者中，HR-HPV感染率前5位的基因亞型依次為：HPV16(17.6%)、52(11.4%)、58(10.4%)、59(7.8%)、18(7.3%)；在HSIL患者中，HR-HPV感染率前5位的基因亞型依次為：HPV16(31.8%)、58(11.5%)、52(10.8%)、51(6.1%)、31(4.7%)、66(4.7%)；SCC患者中，HR-HPV感染率前4位的基因亞型依次為：HPV16(58.3%)、18(16.7%)、51(16.7%)、31(8.3%)；全部患者中，HR-HPV感染率前5位的基因亞型依次為：HPV16(23.8%)、52(10.8%)、58(10.0%)、18(6.6%)、51(6.6%)(表3)。

表3 HR-HPV各亞型在不同級(jí)別宮頸病變患者的分布情況[N (%)]

3 討 論

流行病學(xué)和生物學(xué)研究顯示[11-12]，HPV感染，尤其是HR-HPV持續(xù)感染是導(dǎo)致宮頸病變的最主要致病因素，與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，這就奠定了HR-HPV檢測(cè)用于宮頸癌篩查的理論基礎(chǔ)。2015年美國(guó)癌癥協(xié)會(huì)和美國(guó)陰道鏡和宮頸病理協(xié)會(huì)也將HR-HPV檢測(cè)作為宮頸癌的有效初篩手段寫入宮頸癌篩查指南中[13]。陰道鏡下宮頸組織活檢是目前宮頸癌確診的最可靠方法，宮頸癌前病變按照活檢病理的嚴(yán)重程度分為L(zhǎng)SIL、HSIL。由宮頸癌前病變發(fā)展為宮頸癌是一個(gè)漫長(zhǎng)的生理過程，多數(shù)長(zhǎng)達(dá)10年以上，目前通過HR-HPV檢測(cè)早期發(fā)現(xiàn)宮頸癌前病變患者，并進(jìn)行早診早治可以有效降低宮頸癌的發(fā)病率及死亡率[14-15]。由于HPV感染的流行病學(xué)在不同地區(qū)間存在地域性差異，因此，各地區(qū)宮頸病變患者進(jìn)行HPV分型檢測(cè)及流行病學(xué)調(diào)查分析對(duì)宮頸癌的早期防治具有重要意義。

本研究對(duì)陰道鏡下宮頸組織活檢的宮頸病變患者進(jìn)行HR-HPV檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)CC、LSIL、HSIL和SCC組患者的HR-HPV感染率分別為28.2%、79.7%、93.3%和100.0%，即隨著宮頸病變嚴(yán)重程度的加重HR-HPV的感染率明顯增加。這與Ying等[16]對(duì)上海地區(qū)宮頸癌及癌前病變患者HR-HPV感染率的分布特征結(jié)果一致，也與Jin等[17]對(duì)臺(tái)州市宮頸病變患者HR-HPV感染率分布趨勢(shì)一致。因此提示進(jìn)行HR-HPV檢測(cè)對(duì)于宮頸癌及癌前病變的篩查非常必要。

本研究還對(duì)不同宮頸病變嚴(yán)重程度組患者HR-HPV單一感染和多重感染率進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)各組患者的單一感染率均明顯大于多重感染率，且在單一感染和多重感染率在不同宮頸病變嚴(yán)重程度組間均存在隨病變嚴(yán)重程度的增加而升高的趨勢(shì)。研究結(jié)果提示，宮頸癌及癌前病變的發(fā)生與HR-HPV感染亞型的種類數(shù)不相關(guān)，HR-HPV的多重感染并不能增加宮頸癌的致病性，這可能與HPV高危亞型自身的侵襲性及致病能力有關(guān)[18-19]。

本研究進(jìn)一步對(duì)HR-HPV各亞型在不同級(jí)別宮頸病變患者的分布進(jìn)行分析，HR-HPV感染率在全部患者中的前5位基因亞型依次為：HPV16、52、58、18、51，各基因亞型在各級(jí)病變中所占的比例并不相同，但在LSIL患者及HSIL患者中均以HPV16、52、58為主。在不同級(jí)別宮頸病變患者及全部宮頸病變患者中，感染率最高的亞型均為HPV16，且HPV16的感染率隨著病變嚴(yán)重程度的增加而升高。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)HPV16 在各級(jí)別宮頸病變中(CC、LSIL、HSIL、SCC)均為感染率最高的亞型，且HPV16的感染率隨著病變嚴(yán)重程度的增加而升高。研究結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道的中國(guó)大陸其他地區(qū)女性HR-HPV型別分布基本相似[20]。HPV分型分布有明顯的地域性特征，本研究所入選的研究對(duì)象均來自于?？谑袇^(qū)及周邊的縣區(qū)，該結(jié)果數(shù)據(jù)能夠在一定程度上反映?？诘貐^(qū)HR-HPV分型的分布。

綜上所述，HR-HPV感染率與宮頸病變的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)關(guān)系，不同宮頸病變嚴(yán)重程度組患者HR-HPV的單一感染均明顯大于多重感染率，本地區(qū)導(dǎo)致宮頸癌及癌前病變感染率最高的5種亞型依次為：HPV16、52、58、18、51。

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