夏培仁,武傳芝,滕金玲,譚善杰
(1.山東省莒南縣畜牧發(fā)展促進(jìn)中心,山東 莒南 276600;2.山東省沂水縣龍家圈畜牧獸醫(yī)站,山東 沂水;3.山東省莒南縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,山東 莒南;4.山東省臨沂市畜牧發(fā)展促進(jìn)中心,山東 臨沂)
豬呼吸系統(tǒng)疾病是養(yǎng)豬生產(chǎn)中最常見的疾病,其病因復(fù)雜,臨床診斷困難,誤診或治療不當(dāng)都會(huì)引起很大損失。近年來,豬呼吸系統(tǒng)疾病的發(fā)病率呈上升趨勢,即使在炎熱的季節(jié),咳嗽、氣喘的病例較往年同期增多,投藥經(jīng)費(fèi)加大,養(yǎng)殖成本提高。
臨沂市某豬場存欄經(jīng)產(chǎn)母豬56頭,種公豬5頭。近一個(gè)月時(shí)間內(nèi),部分懷孕母豬出現(xiàn)體溫升高,食欲降低或不食、流產(chǎn)癥狀,母豬流產(chǎn)后無需治療,即能自行恢復(fù)飲食,無異常。肥豬早期咳嗽,隨著病程延長體溫升高,達(dá)到 40 ℃ 左右,出現(xiàn)氣喘,采食減少,重者食欲廢絕,經(jīng)氟苯尼考、多西環(huán)素等藥物對(duì)癥治療后效果不理想,無死亡病例。。
母豬采取跟胎免疫,3~4頭份/頭;公豬 2~3次/年,2~3 頭份/次;肥豬 2~3 次/年,2~3 頭份/頭;仔豬25~28日齡首免,1頭份/頭,60日齡二免,2頭份/頭。
2020年,該場豬群曾出現(xiàn)咳嗽、氣喘、發(fā)燒癥狀,且有死亡病例,豬群很不穩(wěn)定,畜主認(rèn)為是感染藍(lán)耳病所致,便取消了全場豬群藍(lán)耳病疫苗的免疫,之后通過調(diào)養(yǎng)等綜合措施,豬群生產(chǎn)狀況逐漸轉(zhuǎn)好,基本趨于穩(wěn)定,至本次發(fā)病已有14個(gè)月的時(shí)間。
全場采用Barthar k61株gE基因缺失苗,種豬采取普免,3~4次/年,免疫接種劑量3~4頭份/頭;肥豬2~3次/年,2~3頭份/頭;仔豬出生3日齡滴鼻,1頭份/頭,21~30日齡肌注1頭份/頭,60~70日齡2頭份/頭。
使用5 ml一次性無菌采血器,從前腔靜脈采血,2~3 ml/頭,編號(hào)為1-32,以3 000 r/5 min轉(zhuǎn)速離心,分離血清備用,確保整個(gè)過程無菌操作。
檢測前,所有試劑和微量包被反應(yīng)板一律恢復(fù)至室溫(18~26 ℃),試劑通過輕輕渦旋、旋轉(zhuǎn)或顛倒混勻。整個(gè)檢測過程嚴(yán)格遵守操作規(guī)程,且不同的樣本和試劑使用不同的吸頭。檢測步驟按試劑盒說明操作。
3.2.1 豬瘟病毒抗體檢測 采用美國愛德士(IDEXX)豬瘟病毒抗體血清學(xué)(ELISA)檢測試劑盒,對(duì)32份血清進(jìn)行豬瘟病毒抗體檢測。
(1)檢測結(jié)果:陰性對(duì)照 N(OD450)的平均值(1.163)>0.500,陽性對(duì)照 P(OD450)的平均值的阻斷率(92.9 %)>50,結(jié)果成立。
(2)計(jì)算阻斷率(%):陰性對(duì)照 N(OD450)平均值與樣品 S(OD650)之差,除以陰性對(duì)照N(OD450)的平均值,再乘以100。
(3)結(jié)果判定:被檢樣本阻斷率(%)≤30的,該樣本判為抗體陰性;被檢樣本阻斷率(%)≥40,該樣本判為抗體陽性,30<阻斷率(%)<40,判為可疑。
(4)檢測數(shù)值見圖1。
圖1 豬瘟抗體阻斷率及其臨界值
通過檢測,豬瘟抗體(阻斷率 %)最小值56,最大值 95,32份樣品豬瘟抗體阻斷率全部大于 40 ,根據(jù)其判定標(biāo)準(zhǔn),32份樣品豬瘟抗體全部陽性。
3.2.2 豬藍(lán)耳病(豬繁殖與呼吸綜合征)抗體檢測 采用美國愛德士(IDEXX)豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體(ELISA)檢測試劑盒,對(duì)32份血清進(jìn)行豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測。
(1)檢測結(jié)果:陽性對(duì)照 P(OD650)的平均值(0.4055)減去陰性對(duì)照N(OD650)的平均值(0.0455)等于 0.361>0.150,陰性對(duì)照 N(OD650)的平均值(0.0445)<0.150,結(jié)果成立。
(2)計(jì)算 S/P值:即樣品 S(OD650)與陰性對(duì)照 N(OD650)的平均值之差,再除以陽性對(duì)照 P(OD650)的平均值與陰性對(duì)照 N(OD650)的平均值之差。
(3)結(jié)果判定:被檢樣本S/P值<0.40,該樣本判為抗體陰性;被檢樣本 S/P值≥0.40,該樣本判為抗體陽性。
(4)檢測數(shù)值見圖2。
圖2 藍(lán)耳病抗體(S/P值)及其臨界值
通過檢測,藍(lán)耳病抗體(S/P值)最小值0.474,最大值 4.460,根據(jù)其判定標(biāo)準(zhǔn),32份樣品藍(lán)耳病毒抗體全部為陽性。
3.2.3 豬偽狂犬病 gE抗體檢測 采用美國(IDEXX)公司生產(chǎn)的豬偽狂犬病病毒 gE抗體ELISA檢測試劑盒。
(1)檢測結(jié)果:陰性對(duì)照 N(OD650)的平均值(0.985)減去陽性對(duì)照 P(OD650)的平均值(0.0775)等于0.9075>0.300,結(jié)果成立。
(2)計(jì)算 S/N 值:即樣品 S(OD650)與陰性對(duì)照N(OD650)的平均值之比。
(3)結(jié)果判定:被檢樣本S/N值≤0.60,該樣本判為陽性,即被偽狂犬野毒感染;被檢樣本S/N值>0.70,該樣本判為陰性;被檢樣本 0.60<S/N值≤0.70,判為可疑。
(4)檢測數(shù)值見圖3。
圖3 豬偽狂犬病gE抗體(S/N值)及其臨界值
通過檢測,豬偽狂犬病 gE抗體 S/N值最小值 0.700,最大值 1.048,根據(jù)其判定標(biāo)準(zhǔn),其中23號(hào)樣品S/N值= 0.700,判為可疑,其余31份樣品豬偽狂犬病gE抗體均陰性。
該組數(shù)據(jù) 32份樣品的豬瘟抗體阻斷率在56 % ~ 95 % 之間,豬瘟抗體水平均在有效保護(hù)范圍之內(nèi),其中 12份樣品豬瘟抗體阻斷率達(dá)到90 % 以上。根據(jù)多年來對(duì)本區(qū)域范圍內(nèi)豬場的豬瘟抗體大量檢測數(shù)據(jù)分析,經(jīng)產(chǎn)母豬在經(jīng)過豬瘟疫苗的反復(fù)免疫之后,豬瘟抗體均能達(dá)到有效保護(hù),且豬瘟抗體阻斷率普遍較高,最高值可達(dá)96 %。本次檢測的母豬豬瘟抗體阻斷率最高值是95 %,處于正常范圍,并非豬瘟病毒感染所致。
本案例采用血清學(xué)ELISA方法檢測豬藍(lán)耳病病毒抗體,在 32份樣品中,2.00>S/P值>0.40的有16份樣品,2.50>S/P值>2.00的有4份樣品,3.00>S/P值>2.50的有 3份樣品,4.00>S/P值>3.00的有7份樣品,S/P值>4.00的有2份樣品。
該方法不能區(qū)分野毒感染抗體或者疫苗免疫抗體,但是由于該場已有一年多的時(shí)間(14個(gè)月)未實(shí)施藍(lán)耳病疫苗的免疫,而藍(lán)耳病毒抗體的陽性率依然達(dá)到 100 %,且藍(lán)耳病毒陽性抗體(S/P值)最高值達(dá)到 4.460,最小值 0.474,離散度極大。由以上幾點(diǎn)推斷,該場已遭受豬藍(lán)耳病野毒的侵襲,且病毒正處于活躍期。
該場豬群采用的是豬偽狂犬病毒 Bartha-K61株 gE基因缺失疫苗免疫,檢測結(jié)果顯示,32頭豬 gE抗體 S/N值≥7.00,僅 1份樣品豬偽狂犬病毒gE抗體可疑,其它31份樣品豬偽狂犬病毒gE抗體呈均呈陰性,因此該場可以排除豬偽狂犬病毒感染。
通過上述結(jié)果分析,該病例是由藍(lán)耳病病毒所引起的。
加強(qiáng)豬場內(nèi)外環(huán)境消毒,選擇 2種消毒劑交替使用。舍內(nèi)按照從內(nèi)到外,從上到下的順序進(jìn)行嚴(yán)格噴霧消毒,發(fā)病初期消毒次數(shù) 1次/d,一周后3次/d,之后逐漸調(diào)整為1次/周。
科學(xué)檢測,掌握整個(gè)豬群的藍(lán)耳病抗體水平及離散度,研判藍(lán)耳病毒的活躍度,及時(shí)淘汰重癥母豬。
加強(qiáng)人、車、物、料管理,病死豬及廢棄物進(jìn)行嚴(yán)格的無害化處理,母豬舍、保育舍、育肥舍各棟舍之間人員定崗,用具定點(diǎn),避免交叉混用,減少接觸機(jī)會(huì),降低傳播風(fēng)險(xiǎn)。
全群使用20 % 替米考星1 kg/t飼料+雙黃連可溶性粉 1 kg/t 飼料+紫錐菊顆粒 2 kg/t飼料,飲水中添加電解多維、維生素C,連用2周。
通過采取以上措施,病情逐漸穩(wěn)定。
豬藍(lán)耳病又名豬繁殖與呼吸綜合征,是由動(dòng)脈炎病毒科的豬繁殖與呼吸綜合征病毒引起的高度接觸性傳染病。主要引起母豬流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎、木乃伊胎、不發(fā)情、假發(fā)情、不孕;公豬性欲差,精液質(zhì)量下降,精液帶毒;哺乳仔豬、保育豬、育肥豬高燒,皮膚充血或發(fā)紺,咳嗽氣喘,腹式呼吸、共濟(jì)失調(diào)、死亡率高等癥狀[2]。
養(yǎng)豬生產(chǎn)中,引起呼吸系統(tǒng)疾病的原因眾多而復(fù)雜,出現(xiàn)病例后要密切結(jié)合飼養(yǎng)管理、免疫狀況、流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀、剖檢變化、實(shí)驗(yàn)室診斷等方面綜合分析,做出結(jié)論,及時(shí)妥善控制,以免延誤病情。