2016-2020年甘肅省奶牛結(jié)核病感染情況調(diào)查與分析

車小蛟，韓慶彥，羅莉?qū)?，?亮，于清磊，孟林明，高軍軍，薛喜娟

（甘肅省動物疫病預(yù)防控制中心，甘肅 蘭州 730046）

牛結(jié)核病（Bovine tuberculosis）是由牛分枝結(jié)核桿菌（Mycobacterium bovis）引起的一種人和多種家畜共患的慢性傳染病，組織器官多處出現(xiàn)結(jié)核結(jié)節(jié)性肉芽腫和壞死灶[1-2]。結(jié)核病牛由鼻汁、糞便、尿、乳汁、氣管分泌物等排出病菌，污染周圍環(huán)境而散布傳染動物和人[1]。牛感染后，可引起肺結(jié)核、乳房結(jié)核、淋巴結(jié)核、腸結(jié)核等臨床癥狀，牛結(jié)核病對養(yǎng)牛業(yè)，尤其是奶牛業(yè)的危害很大。本文通過對甘肅省 2016—2020年奶牛結(jié)核病感染情況進(jìn)行初步調(diào)查與分析，旨在更好地掌握甘肅省奶牛結(jié)核病的流行現(xiàn)狀，為逐步凈化和有效控制該病提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 待檢奶牛 2016-2020年5年間甘肅省14個市（州）的存欄奶牛，共計 3 303個養(yǎng)殖場點，335 714頭奶牛。30日齡以下、臨產(chǎn)前 2個月內(nèi)、正在生病的奶牛不檢測。

1.1.2 檢測試劑 提純牛型結(jié)核菌素，購自哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司。

1.1.3 主要器材 游標(biāo)卡尺、剪毛剪、一次性無菌注射器、酒精棉球、防護(hù)用品等。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法 按照GB/T 18645-2002的PPD試驗操作[3]。

1.2.2 判定結(jié)果 注射部位前后出現(xiàn)明顯的炎性反應(yīng)，皮皺厚差值大于或等于 4 mm，判為陽性；炎性反應(yīng)不明顯，且皮皺厚差值為 2～4 mm，判為疑似；無炎性反應(yīng)，皮皺厚值小于2 mm，判為陰性。判為疑似反應(yīng)的牛只，于60 d后重新采樣進(jìn)行復(fù)檢，結(jié)果仍為可疑或陽性的，判為陽性[3]。

1.2.3 數(shù)據(jù)分析 將檢測結(jié)果錄入 Excel，根據(jù)不同年份、不同養(yǎng)殖場點和不同地區(qū)，計算奶牛結(jié)核病的陽性數(shù)和陽性率，進(jìn)行統(tǒng)計分析。

1.2.4 陽性牛處理 調(diào)查陽性奶牛均按照《牛結(jié)核病防治技術(shù)規(guī)范》進(jìn)行撲殺和無害化處理；隔離陽性場/群，定期進(jìn)行跟蹤檢測，發(fā)現(xiàn)可疑病例，及時隔離復(fù)檢[4]。

2 結(jié)果與分析

2.1 2016-2020年甘肅省奶牛結(jié)核病檢測情況

由表1可知，5年間共檢測 3 303個場點，335 714頭奶牛，檢出陽性奶牛 142頭，平均陽性率為 0.04 %，從2016年的 0.05 % 和 2017年的 0.1 % 降至 2020年的 0.03 %。結(jié)果表明，近5年甘肅省奶牛結(jié)核病檢測陽性率呈下降趨勢（圖1）。

表1 2016-2020年全省奶牛結(jié)核病檢測結(jié)果

圖1 2016-2020年全省奶牛結(jié)核病陽性率曲線

2.2 2016-2020年甘肅省不同養(yǎng)殖場點奶牛結(jié)核病檢測情況

由表2可知，5年間全省檢測種奶牛場的8 679頭，陽性數(shù) 0頭，陽性率為 0；規(guī)模場的295 186頭，陽性數(shù)57頭，陽性率為0.02 %；散養(yǎng)戶的 31 213頭，陽性數(shù) 85頭，陽性率為0.27 %；其他場點的636頭，陽性數(shù)0頭，陽性率為 0。結(jié)果表明，不同養(yǎng)殖場點檢出的陽性率存在明顯差異，檢出陽性率最高的是散養(yǎng)戶，規(guī)模場陽性率很低，采集的種奶牛場及其他場戶樣品全部為陰性。5年間規(guī)模場和散養(yǎng)戶總體陽性率都呈下降趨勢，散養(yǎng)戶下降明顯（圖2）。

表2 2016-2020年不同養(yǎng)殖場點全省奶牛結(jié)核病檢測結(jié)果

圖2 2016-2020年不同養(yǎng)殖場點奶牛結(jié)核病陽性率變化曲線

2.3 2016-2020年甘肅省不同地區(qū)奶牛結(jié)核病檢測情況

由表3可知，全省14個市（州）2016-2020年的總陽性率分布范圍為 0 %～1.9 %，平均陽性率為 0.04 %。高于平均陽性率的有 4個市（州），低于平均陽性率的有 10個市（州）。結(jié)果表明，甘肅省不同地區(qū)奶牛結(jié)核病檢測陽性率呈明顯差異，防控效果也存在差異。張掖、平?jīng)?、隴南、臨夏 4個市（州）陽性率均高于農(nóng)業(yè)部凈化標(biāo)準(zhǔn)（0.05 %），防控工作形勢依然嚴(yán)峻。

表3 2016-2020年甘肅省不同地區(qū)奶牛結(jié)核病檢測結(jié)果

2.4 奶牛結(jié)核病與人肺結(jié)核相關(guān)性

甘肅省奶牛結(jié)核病疫情形勢與甘肅省衛(wèi)生部門公布的肺結(jié)核疫情整體趨勢吻合，2016-2020年甘肅省奶牛結(jié)核病和人肺結(jié)核發(fā)病具有正相關(guān)性，總體上奶牛結(jié)核病陽性數(shù)與人肺結(jié)核發(fā)病數(shù)呈逐年下降趨勢（圖3、圖4）。

圖3 2016-2020年奶牛結(jié)核病陽性數(shù)

圖4 2016-2020年人肺結(jié)核病例數(shù)

3 討論與結(jié)論

本次調(diào)查按照GB/T 18645-2002的PPD試驗進(jìn)行操作和判定，該標(biāo)準(zhǔn)已重新進(jìn)行了修訂，現(xiàn)在執(zhí)行的是 GB/T 18645-2020，于 2020年12月14日發(fā)布，新標(biāo)準(zhǔn)中增加了臨床診斷方法、PCR檢測、γ-干擾素體外檢測法等，診斷結(jié)果判定也會發(fā)生一定變化[5]。本次調(diào)查主要目的是通過PPD試驗進(jìn)行大規(guī)模初篩，從而對省內(nèi)結(jié)核病發(fā)病情況進(jìn)行初步調(diào)查。值得注意的是，牛結(jié)核PPD皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)存在誤差，有一定的非特異性，受外界環(huán)境及人為因素的影響較為明顯，在大規(guī)模檢測中，易出現(xiàn)陽性漏檢情況[6]，有時造成不必要的經(jīng)濟(jì)損失，實際工作中還要結(jié)合臨床癥狀或 PCR試驗、γ-干擾素 ELISA 檢測法，從而確保陽性病例的準(zhǔn)確性。操作中必須做好個人安全防護(hù)工作，佩戴眼罩、口罩、橡膠鞋套、防護(hù)服等，并對做過的樣品和污染過的環(huán)境進(jìn)行消毒處理。

1957年蘭州市奶牛結(jié)核病變態(tài)反應(yīng)陽性率為19.44 %。1965-1980年蘭州等5市（州）奶牛結(jié)核病調(diào)查，平均陽性率 3.33 %[7]。1981-1989年全省奶牛結(jié)核病調(diào)查，平均陽性率為 0.53 %。1990-2014年全省共檢測奶牛 878 324頭，檢出了陽性奶牛 1177頭，平均陽性率為 0.13 %[8]。2011-2016年全省共檢測奶牛 326 651頭，檢出了陽性奶牛 183頭，平均陽性率 0.06 %[9]。本次調(diào)查平均陽性率為 0.04 %，與歷史數(shù)據(jù)相比，60年來全省奶牛結(jié)核病陽性率不斷下降，奶牛結(jié)核病感染情況趨向好轉(zhuǎn)。近年來，甘肅省獸醫(yī)主管部門高度重視，加大了項目支持和經(jīng)費投入，采取行政手段，強(qiáng)制撲殺和無害化處理，通過實施監(jiān)測、撲殺、凈化為主的綜合措施，使得甘肅省奶牛結(jié)核病防控工作取得階段性成效，奶牛結(jié)核病陽性率呈逐年下降態(tài)勢。

不同養(yǎng)殖場點奶牛結(jié)核病檢出陽性率存在明顯差異，不同場點檢出陽性率分別為：散養(yǎng)戶0.27 %、規(guī)模場 0.02 %、種奶牛場 0、其他場0，散養(yǎng)戶陽性率高于規(guī)模場，徐小艷等[10]、趙勝杰等[11]、陳利霞[12]的研究結(jié)果與本研究結(jié)論基本一致。造成這種情況的原因可能是散養(yǎng)戶對奶牛結(jié)核病防控意識較差，牛舍及周圍環(huán)境衛(wèi)生差，飼養(yǎng)密度大，奶牛舍通風(fēng)不暢、潮濕、陽光不足、缺乏運動等易造成奶牛結(jié)核病傳播。相比而言，規(guī)?；膛鲲曫B(yǎng)管理水平較高，養(yǎng)殖設(shè)施與設(shè)備齊全，飼料營養(yǎng)配比科學(xué)合理，落實有效的生物安全防護(hù)措施等，能防止疫病傳播，因而檢出陽性率較低。甘肅省奶牛養(yǎng)殖規(guī)模多以中小型為主，散養(yǎng)戶居多，這也是今后奶牛結(jié)核病防控工作存在的薄弱環(huán)節(jié)。

奶牛結(jié)核病為人畜共患病，可與人結(jié)核病交叉感染，要引起畜主的重視，增強(qiáng)防范意識，避免造成交叉感染[13]。根據(jù)國家疾病預(yù)防控制局發(fā)布的《2020年全國法定傳染病疫情概況》數(shù)據(jù)顯示，2020年全國共報告肺結(jié)核發(fā)病670 538例，死亡 1 919人，發(fā)病總數(shù)和病死總數(shù)都很高。甘肅省衛(wèi)生健康委員會發(fā)布的《2020年甘肅省法定傳染病疫情公布》數(shù)據(jù)顯示，2020年全省共報告肺結(jié)核發(fā)病 8 119例，死亡 13人，僅次于艾滋病。肺結(jié)核仍然是長期嚴(yán)重危害人民健康的慢性傳染病，奶牛結(jié)核病和人肺結(jié)核發(fā)病具有高度的相關(guān)性，這也給奶牛結(jié)核病的防控增加了難度，本省奶牛結(jié)核病防控形勢依然嚴(yán)峻。

調(diào)查發(fā)現(xiàn)甘肅省奶牛中存在牛結(jié)核病感染情況，各地的防控效果存在差異，其中隴南市、平?jīng)鍪心膛＝Y(jié)核病流行最為嚴(yán)重，散養(yǎng)戶感染牛結(jié)核病的風(fēng)險明顯高于規(guī)模戶。針對不同的區(qū)域、不同的場點，有關(guān)部門需要制定相應(yīng)的牛結(jié)核病防控和凈化措施，重點加強(qiáng)對監(jiān)測陽性牛和陽性牛群的管理，強(qiáng)化調(diào)運奶牛的產(chǎn)地檢疫和流通監(jiān)管，引導(dǎo)奶牛養(yǎng)殖模式由散養(yǎng)逐步向規(guī)?；^渡，加強(qiáng)對養(yǎng)殖場（戶）防疫和養(yǎng)殖技術(shù)交流培訓(xùn)，提高養(yǎng)殖場（戶）的科學(xué)防疫和科學(xué)養(yǎng)殖水平，建立健全科學(xué)防疫制度，加強(qiáng)監(jiān)督，落實生物安全防護(hù)措施，定期開展奶牛結(jié)核病的檢測和監(jiān)測，及時淘汰陽性奶牛，積極培育和壯大奶牛結(jié)核病陰性群體，逐步實現(xiàn)場群凈化和區(qū)域凈化。