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    FOXP3 基因沉默抑制肺腺癌A549 細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化和改善5-氟尿嘧啶耐藥性①

    2022-07-21 09:15:14王鶴霏何程遠(yuǎn)裴怡杰蓋曉東
    中國(guó)免疫學(xué)雜志 2022年10期
    關(guān)鍵詞:腺癌耐藥性試劑盒

    歷 春 王鶴霏 何程遠(yuǎn) 房 惠 裴怡杰 蓋曉東

    (北華大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室,吉林 132013)

    肺癌是全球發(fā)病率和病死率最高的惡性腫瘤,其五年生存率不超過(guò)17%[1-2]。目前,肺腺癌的發(fā)病率逐年上升,已超過(guò)肺鱗癌成為肺癌中最常見(jiàn)的組織學(xué)類型[3]。多數(shù)患者就診時(shí)已屬中晚期,盡管采用手術(shù)、放療和化療等綜合治療措施,腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和對(duì)化療藥物不敏感是影響臨床治療和預(yù)后的主要因素[4]。

    上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transi?tion,EMT)是上皮細(xì)胞失去極性轉(zhuǎn)變成具有遷移能力的間質(zhì)細(xì)胞,主要表現(xiàn)為上皮細(xì)胞標(biāo)志分子E-鈣黏蛋白(E-cadherin)表達(dá)下調(diào),間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志分子波形蛋白(Vimentin)和N-鈣黏蛋白(N-cadherin)表達(dá)上調(diào),也是肺腺癌發(fā)生轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵步驟[5-6]。此外,EMT 在腫瘤耐藥中也發(fā)揮重要作用,腫瘤細(xì)胞可通過(guò)獲得間質(zhì)細(xì)胞表型產(chǎn)生對(duì)化療藥物的耐藥[7]。5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)是目前臨床上廣泛應(yīng)用的化療藥物,其可通過(guò)干擾核酸的合成而抑制腫瘤細(xì)胞的增生,還可抑制腫瘤細(xì)胞EMT,多與其他化療藥物聯(lián)合應(yīng)用治療肺腺癌[8-9]。研究發(fā)現(xiàn),超過(guò)50%以上的肺腺癌細(xì)胞具有間質(zhì)表型,且與轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)呈正相關(guān)[10-11]。因此,逆轉(zhuǎn)EMT 是有效治療肺腺癌、改善預(yù)后的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

    叉頭蛋白3(forkhead box protein 3,F(xiàn)OXP3)是調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞(regulatory T cells,Tregs)的特異性標(biāo)志物,可通過(guò)發(fā)揮免疫抑制功能參與腫瘤免疫逃逸[12]。近年研究發(fā)現(xiàn),F(xiàn)OXP3 在多種腫瘤細(xì)胞高表達(dá),可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖和侵襲轉(zhuǎn)移,其表達(dá)水平與患者預(yù)后呈負(fù)相關(guān)[13-15]。課題組前期工作發(fā)現(xiàn),F(xiàn)OXP3 在肺腺癌細(xì)胞高表達(dá),具有促進(jìn)細(xì)胞增殖、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等惡性生物學(xué)行為,并可降低順鉑和阿霉素的敏感性,但其在EMT 和5-FU 耐藥性中的作用尚未闡明[16-18]。因此,本研究通過(guò)RNAi 技術(shù)抑制FOXP3 在肺腺癌A549 細(xì)胞株中的表達(dá),旨在明確FOXP3 與EMT 和5-FU 耐藥的關(guān)系,擬為肺腺癌的免疫治療提供潛在的分子靶點(diǎn),有望改善肺腺癌患者的預(yù)后。

    1 材料與方法

    1.1 材料 人肺腺癌A549細(xì)胞株購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞庫(kù);DMEM 培養(yǎng)基購(gòu)自美國(guó)Hyclone 公司;新生牛血清購(gòu)自天杭生物科技股份有限公司;FOXP3 siRNA 序列及陰性對(duì)照序列由廣州銳博生物技術(shù)有限公司合成;LipofectaminTM2000 試劑盒購(gòu)自 賽 默 飛 世 爾;TRIzol,PrimeScriptTMRT 和SYBR Premix Ex TaqTMⅡ試劑盒購(gòu)自日本TaKaRa 公司;PCR 引物由生工生物工程有限公司合成;基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9 ELISA 試劑盒、FOXP3 抗體購(gòu)自武漢博士得生物工程有限公司;Transwell 小室購(gòu)自美國(guó)Corning公司;Matrigel 膠購(gòu)自美國(guó)BD公司;RIPA 裂解液、BCA 試劑盒、ECL 發(fā)光試劑盒、CCK-8 試劑盒以及E-cadherin、Vimentin、N-cadherin和GAPDH 抗體購(gòu)自碧云天生物技術(shù)有限公司;5-FU 購(gòu)自上海旭東海普藥業(yè)有限公司;P-糖蛋白(P-gp)抗體購(gòu)自武漢愛(ài)博泰克生物科技有限公司。

    1.2 方法

    1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng) 將人肺腺癌A549細(xì)胞株培養(yǎng)于含10%新生牛血清的高糖DMEM 培養(yǎng)基中,置于5%CO2、37 ℃、飽和濕度的孵箱中常規(guī)培養(yǎng)。

    1.2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染與5-FU 處理細(xì)胞 選取第3 代細(xì)胞以2.5×105個(gè)/孔的密度接種于6孔板,待細(xì)胞貼壁后進(jìn)行siRNA轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)分為3組:陰性對(duì)照組(si-NC)、si-FOXP3-1 和si-FOXP3-2 組。si-FOXP3-1引物序列:5'-CAUGGACUACUUCAAGUUCdTdT-3';si-FOXP3-2 引 物 序 列:5'-GAGAGAUGGUACAGU?CUCUdTdT-3'。轉(zhuǎn)染步驟參照LipofectamineTM2000說(shuō)明進(jìn)行,分別于轉(zhuǎn)染后6 h 更換為含血清的DMEM培養(yǎng)基。

    選取第3 代細(xì)胞以5×105個(gè)/孔的密度接種于6 孔板,待細(xì)胞貼壁后加入12.5 μg/ml 的5-FU 作為5-FU 處理組,0 μg/ml 的5-FU 作為未處理組,48 h 收集細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)。

    1.2.3 qRT-PCR 實(shí)驗(yàn) 收集轉(zhuǎn)染48 h及5-FU 處理48 h 的各組細(xì)胞,TRIzol 裂解法提取總RNA,用PrimeScripTMRT 試劑盒逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。使用SYBR Premix Ex TaqTMⅡ試劑盒進(jìn)行實(shí)時(shí)PCR,條件如下:95 ℃15 min,95 ℃10 s,60 ℃10 s 退火,40 個(gè)循環(huán)。FOXP3引物序列F:5′-CACAACATGCGACCCCTTTCACC-3′,R:5′-AGGTTGTGGCGGATGGCGTTCTTC-3′;GAPDH 引物序列F:5′-ATGGGGAAGGTGAAGGTCG-3′,R:5′-GGGTCATTGATGGCAACAATATC-3′。以GAPDH 為內(nèi)參,采用2-ΔΔCt法計(jì)算目的基因mRNA含量。

    1.2.4 Western blot 實(shí)驗(yàn) 收集轉(zhuǎn)染72 h 及5-FU處理48 h 的各組細(xì)胞,提取細(xì)胞總蛋白并測(cè)定蛋白濃度,每孔加入30 μg 蛋白,行10%SDS-PAGE 電泳,濕轉(zhuǎn)方式移至PVDF 膜,5%BSA 室溫下封閉1 h。分別滴加一抗FOXP3(1∶300)、E-cadherin(1∶1 000)、Vimentin(1∶1 000)、N-cadherin(1∶1 000)、P-gp(1∶1 000)、GAPDH(1∶1 000)于4 ℃過(guò)夜。TBST 沖洗后室溫孵育HRP標(biāo)記的IgG抗體(1∶2 000)1 h,加入ECL顯色底物發(fā)光并拍照。以GAPDH作為內(nèi)參,以目標(biāo)條帶與內(nèi)參照條帶的灰度值比值作為目標(biāo)蛋白的相對(duì)表達(dá)量。

    1.2.5 Transwell小室遷移和侵襲實(shí)驗(yàn) 取轉(zhuǎn)染48 h的各組細(xì)胞,用無(wú)血清培養(yǎng)基調(diào)整密度為5×105個(gè)/ml。遷移實(shí)驗(yàn):取100 μl 加入Transwell 上室,下室中加入500 μl 含10%血清的DMEM 培養(yǎng)基。20 h 后,用4%多聚甲醛固定30 min,蘇木素染色5 min,水洗后用棉簽輕輕拭去Transwell 小室上層未遷移的細(xì)胞,200 倍顯微鏡下隨機(jī)5 個(gè)視野觀察細(xì)胞并計(jì)數(shù)。侵襲實(shí)驗(yàn):用預(yù)冷的無(wú)血清DMEM 培養(yǎng)基以1∶8 稀釋Matrigel,各組上室加入80 μl,置37 ℃孵箱2 h。其余步驟同遷移實(shí)驗(yàn)。

    1.2.6 ELISA 實(shí)驗(yàn) 取轉(zhuǎn)染72 h 的各組細(xì)胞培養(yǎng)上清各1 ml,2 000 r/min 離心10 min,按照MMP-2 和MMP-9 ELISA 說(shuō)明書步驟嚴(yán)格操作。全自動(dòng)酶標(biāo)分析儀檢測(cè)450 nm 處的吸光度(OD)值,依標(biāo)準(zhǔn)品值制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算MMP-2和MMP-9蛋白含量。

    1.2.7 CCK-8 實(shí)驗(yàn) 取轉(zhuǎn)染24 h 的各組細(xì)胞,5×103個(gè)/孔、100 μl 培養(yǎng)基接種于96孔板,貼壁后分別加入不同濃度的5-FU(0、3.125、6.25、12.5、25和50 μg/ml),每個(gè)濃度設(shè)置6個(gè)復(fù)孔,并設(shè)置空白對(duì)照。48 h后10 μl/孔加入CCK-8溶液,37 ℃孵育2 h。酶標(biāo)分析儀在450 nm 波長(zhǎng)處測(cè)量各孔OD 值,計(jì)算細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率。細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率(%)=(對(duì)照組平均OD 值-給藥組平均OD 值)/對(duì)照組OD 值×100%,并進(jìn)一步用SPSS 統(tǒng)計(jì)軟件計(jì)算細(xì)胞生長(zhǎng)抑制50%的藥物濃度(IC50)。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS17.0 統(tǒng)計(jì)軟件分析,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示,兩組間差異比較采用配對(duì)t檢驗(yàn),多組差異比較采用單因素方差分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所有實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

    2 結(jié)果

    2.1 轉(zhuǎn)染si-FOXP3后各組細(xì)胞FOXP3表達(dá)情況為驗(yàn)證FOXP3 siRNAs 轉(zhuǎn)染A549 細(xì)胞的效果,采用qRT-PCR 和Western blot 方 法,分 別 在 轉(zhuǎn) 染48 h 和72 h 檢測(cè)各組細(xì)胞中FOXP3 的表達(dá)。結(jié)果顯示,與si-NC 組 相 比,si-FOXP3-1 和si-FOXP3-2 組FOXP3 mRNA 和蛋白表達(dá)均顯著降低(P<0.01),見(jiàn)圖1。結(jié)果提示成功沉默A549細(xì)胞中FOXP3的表達(dá)。

    圖1 轉(zhuǎn)染si-FOXP3后A549細(xì)胞FOXP3表達(dá)Fig.1 Expressions of FOXP3 in A549 cells transfected with si-FOXP3

    2.2 FOXP3 沉默對(duì)EMT 的影響 為明確FOXP3與EMT 之間的聯(lián)系,采用Western blot 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)FOXP3沉默后各組細(xì)胞EMT 相關(guān)標(biāo)志物表達(dá),包括間質(zhì)標(biāo)志物Vimentin、N-cadherin 和上皮標(biāo)志物E-cadherin。結(jié)果顯示,與si-NC 組相比,si-FOXP3-1和si-FOXP3-2組Vimentin 和N-cadherin 蛋白表達(dá)均顯著降低(P<0.01),E-cadherin 蛋白表達(dá)均顯著升高(P<0.01),見(jiàn)圖2。結(jié)果表明,F(xiàn)OXP3沉默可抑制A549細(xì)胞EMT。

    圖2 FOXP3 沉 默 對(duì)Vimentin、N-cadherin 和E-cadherin蛋白表達(dá)的影響Fig.2 Effects of FOXP3 silencing on protein expressions of Vimentin,N-cadherin and E-cadherin

    2.3 FOXP3 沉默對(duì)細(xì)胞遷移和侵襲的影響 為明確FOXP3 在EMT 中的具體作用,Transwell 遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)FOXP3 沉默后各組細(xì)胞的遷移和侵襲能力。結(jié)果顯示,si-FOXP3-1 和si-FOXP3-2 組跨膜和穿過(guò)基質(zhì)膠的細(xì)胞數(shù)與si-NC 組相比均顯著減少(P<0.01),見(jiàn)圖3。結(jié)果表明,F(xiàn)OXP3沉默可顯著降低A549細(xì)胞的遷移和侵襲能力。

    圖3 FOXP3沉默對(duì)A549細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響(×400)Fig.3 Effects of FOXP3 silencing on migration and invasion abilities of A549 cells(×400)

    2.4 FOXP3 沉默對(duì)MMP-2 和MMP-9 蛋白分泌的影響 為探討FOXP3 促進(jìn)A549 細(xì)胞遷移和侵襲的相關(guān)分子機(jī)制,ELISA 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)FOXP3 沉默后各組細(xì)胞上清中MMP-2和MMP-9的表達(dá)。結(jié)果顯示:與si-NC 組相比,si-FOXP3-1和si-FOXP3-2組細(xì)胞上清中MMP-2和MMP-9蛋白含量均顯著降低(P<0.01),見(jiàn)圖4。結(jié)果表明,F(xiàn)OXP3 沉默可通過(guò)抑制MMP-2和MMP-9 表達(dá)進(jìn)而降低A549 細(xì)胞的遷移和侵襲能力。

    圖4 FOXP3沉默對(duì)MMP-2和MMP-9蛋白含量的影響Fig.4 Effects of FOXP3 silencing on protein concentra?tions of MMP-2 and MMP-9

    2.5 5-FU 作用于A549 細(xì)胞對(duì)FOXP3 表達(dá)的影響 為探討FOXP3 與5-FU 耐藥性之間的聯(lián)系,收集5-FU(12.5 μg/ml)處理48 h 的A549 細(xì)胞,qRTPCR 和Western blot 實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)FOXP3 的表達(dá)。結(jié)果顯示:5-FU處理組FOXP3 mRNA 和蛋白均顯著高于未處理組(P<0.05),見(jiàn)圖5。結(jié)果表明,5-FU作用A549 細(xì)胞可上調(diào)FOXP3 表達(dá),提示FOXP3 可能參與5-FU誘導(dǎo)的耐藥作用。

    圖5 5-FU作用的A549細(xì)胞FOXP3表達(dá)Fig.5 FOXP3 expression in 5-FU treated A549 cells

    2.6 FOXP3 沉默對(duì)5-FU 敏感性的影響 為明確FOXP3 在5-FU 耐藥中的作用,選用不同濃度的5-FU 作用于各組細(xì)胞,CCK-8 法檢測(cè)各組細(xì)胞活性,計(jì)算細(xì)胞增殖抑制率和IC50值。與si-NC 組比較,si-FOXP3-1 和si-FOXP3-2 組細(xì)胞增殖抑制率均顯著增加,在6.25、12.5、25 和50 μg/ml 濃度時(shí)差異顯著(P<0.05),IC50值也明顯降低。結(jié)果表明,F(xiàn)OXP3 沉默可顯著增加A549 細(xì)胞對(duì)5-FU 的敏感性,見(jiàn)表1。

    表1 FOXP3沉默對(duì)A549細(xì)胞5-FU耐藥性的影響(±s,n=3)Tab.1 Effects of FOXP3 silencing on 5-FU resistance of A549 cells(±s,n=3)

    表1 FOXP3沉默對(duì)A549細(xì)胞5-FU耐藥性的影響(±s,n=3)Tab.1 Effects of FOXP3 silencing on 5-FU resistance of A549 cells(±s,n=3)

    Note:Compared with si-NC group,1)P<0.05.

    IC50/(μg·ml-1)13.90 8.52 9.09 Groups si-NC si-FOXP3-1 si-FOXP3-2 Inhibition rate of various concentrations of 5-FU/%3.125/(μg·ml-1)27.7±1.76 32.6±2.08 31.7±1.51 6.250/(μg·ml-1)33.9±2.12 43.4±1.621)41.5±2.051)12.500/(μg·ml-1)45.1±1.45 54.5±1.571)53.7±2.201)25.000/(μg·ml-1)61.7±3.61 72.8±2.561)71.7±2.511)50.000/(μg·ml-1)72.5±2.50 79.1±3.121)78.5±3.551)

    2.7 FOXP3 沉默對(duì)P-gp 表達(dá)的影響 為探討FOXP3 促進(jìn)5-FU 耐藥的分子機(jī)制,Western blot 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)FOXP3 沉默后各組細(xì)胞中P-gp 的表達(dá)。結(jié)果顯示,與si-NC 組相比,si-FOXP3-1 和si-FOXP3-2組P-gp 表達(dá)水平均顯著降低(P<0.01),見(jiàn)圖6。結(jié)果提示,F(xiàn)OXP3 沉默可通過(guò)抑制A549 細(xì)胞P-gp 表達(dá)進(jìn)而影響5-FU的耐藥性。

    圖6 FOXP3沉默對(duì)P-gp表達(dá)的影響Fig.6 Effects of FOXP3 silencing on P-gp expression in A549 cells

    3 討論

    研究報(bào)道,F(xiàn)OXP3 可促進(jìn)肺腺癌細(xì)胞的增殖,可通過(guò)上調(diào)細(xì)胞周期蛋白表達(dá)誘導(dǎo)細(xì)胞從G1期向S 期轉(zhuǎn)化從而調(diào)控細(xì)胞的生長(zhǎng)[19]。本課題組前期報(bào)道,F(xiàn)OXP3 在肺腺癌細(xì)胞的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM 分期呈正相關(guān),還可通過(guò)抑制免疫抑制因子IL-10 和TGF-β 的分泌抑制T 淋巴細(xì)胞增殖,表明FOXP3 與肺腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移關(guān)系密切,但其作用的相關(guān)機(jī)制尚未完全闡明[16-17,20]。

    EMT 是腫瘤細(xì)胞發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移的重要環(huán)節(jié),是腫瘤細(xì)胞擺脫細(xì)胞間黏附和突破細(xì)胞外基質(zhì)(extra?cellar matrix,ECM)獲得遷移和侵襲能力的動(dòng)態(tài)過(guò)程[21]。臨床研究發(fā)現(xiàn),具有EMT 表型的肺腺癌細(xì)胞,其侵襲性和轉(zhuǎn)移能力更強(qiáng)[10-11]。因此,本研究通過(guò)RNA 干擾(RNAi)技術(shù)沉默人肺腺癌細(xì)胞FOXP3基因的表達(dá),探究其在EMT 過(guò)程中的作用。本課題組發(fā)現(xiàn),F(xiàn)OXP3 表達(dá)下調(diào)可顯著增強(qiáng)上皮細(xì)胞標(biāo)志E-cadherin 表達(dá),抑制間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志Vimentin 和N-cadherin 表達(dá),表明FOXP3 基因沉默可逆轉(zhuǎn)肺腺癌細(xì)胞EMT 表型。Transwell 小室遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)FOXP3 在促進(jìn)肺腺癌細(xì)胞遷移和侵襲過(guò)程中的重要作用。LIU等[22]探究FOXP3在宮頸癌侵襲的作用中發(fā)現(xiàn),F(xiàn)OXP3 沉默可顯著抑制宮頸癌細(xì)胞的侵襲能力、并上調(diào)E-cadherin和下調(diào)Vimentin的表達(dá),表明FOXP3可通過(guò)EMT促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞的侵襲,與本研究中的結(jié)果一致。ECM 和基底膜的降解是EMT 過(guò)程的關(guān)鍵步驟,MMP-2 和MMP-9 是降解ECM 和基底膜最主要的基質(zhì)金屬蛋白酶,在腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用[23]。本研究發(fā)現(xiàn)肺腺癌細(xì)胞FOXP3 基因沉默后MMP-2 和MMP-9 表達(dá)顯著降低,表明FOXP3可能通過(guò)調(diào)控MMP-2和MMP-9的表達(dá)促進(jìn)ECM 降解,進(jìn)而增強(qiáng)肺腺癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力,參與EMT過(guò)程。

    臨床上,5-FU 多與阿霉素等化療藥物聯(lián)合應(yīng)用治療肺腺癌[9]。本課題組前期工作發(fā)現(xiàn),F(xiàn)OXP3 可降低阿霉素和順鉑的敏感性[17-18]。另有研究報(bào)道5-FU 可通過(guò)抑制腫瘤細(xì)胞EMT 發(fā)揮抗腫瘤作用[8]。結(jié)合本研究結(jié)果FOXP3可促進(jìn)肺腺癌細(xì)胞EMT,推測(cè)FOXP3 可能與5-FU 耐藥有關(guān)聯(lián)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)了本研究的推測(cè),F(xiàn)OXP3的表達(dá)在5-FU處理肺腺癌細(xì)胞后顯著上調(diào),表明5-FU 的耐藥作用可能與FOXP3 的表達(dá)水平有關(guān)。為明確FOXP3 在5-FU 耐藥中的具體作用,本研究通過(guò)細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)檢測(cè)FOXP3基因沉默后5-FU對(duì)肺腺癌細(xì)胞的殺傷效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)FOXP3表達(dá)下調(diào)后,5-FU作用下的細(xì)胞抑制率顯著增加,IC50也明顯降低,提示抑制FOXP3 表達(dá)可改善肺腺癌細(xì)胞對(duì)5-FU 的耐藥性。化療耐藥的主導(dǎo)機(jī)制之一是細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)增加從而導(dǎo)致化療藥物的外排[24-25]。P-gp 具有ATP 依賴的藥物外排泵功能,能將進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的藥物泵出細(xì)胞外,從而降低細(xì)胞內(nèi)的藥物濃度[26]。本研究發(fā)現(xiàn)FOXP3 基因沉默可顯著抑制P-gp 表達(dá),提示FOXP3可能通過(guò)調(diào)控P-gp表達(dá)增加5-FU外排導(dǎo)致耐藥。

    綜上所述,F(xiàn)OXP3 基因沉默可以抑制肺腺癌細(xì)胞EMT,改善肺腺癌細(xì)胞對(duì)5-FU的耐藥性。本研究結(jié)果為阻斷肺腺癌的侵襲、轉(zhuǎn)移以及改善肺腺癌的耐藥提供新的研究思路。

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